检索结果-内蒙古大学图书馆

聚焦猪传染性萎缩性鼻炎

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猪业科学 2009年第6期26卷 22-28页

作者：杨汉春中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪传染性萎缩性鼻炎是规模化猪场主要的呼吸系统疫病之一，也是对呼吸系统第1道防线最重要的影响因素。猪传染性萎缩性鼻炎是由支气管败血波氏杆菌和巴错杆菌2种病原及其产生的毒素共同作用引发的猪上呼吸道的慢性、渐进性的传染病。

关键词：猪传染性萎缩性鼻炎流行特点危害状况支气管败血波氏杆菌聚焦净化防治诊断

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表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒的拯救

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黑龙江畜牧兽医 2009年第5期 10-12页

作者：曹有才丁玉林解希帝张秀美胡北侠许传田步志高王凤龙内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 山东省农业科学院畜牧研究所山东济南250100

对现地分离的4株H9亚型禽流感病毒HA基因进行序列测定，选取其中1株在新城疫病毒LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统的基础上，构建了表达H9亚型禽流感病毒野生型HA基因的重组新城疫病毒基因组eDNA克隆，经间接免疫荧光和RT—PCR鉴定，... 详细信息

对现地分离的4株H9亚型禽流感病毒HA基因进行序列测定，选取其中1株在新城疫病毒LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统的基础上，构建了表达H9亚型禽流感病毒野生型HA基因的重组新城疫病毒基因组eDNA克隆，经间接免疫荧光和RT—PCR鉴定，结果表明：拯救重组病毒为rL—H9HA：重组病毒MDT≥168h，ICPI和IVPI均为0，与亲本疫苗株LaSota具有相似的生长特性；重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株对鸡胚良好的高滴度生长适应和低致病特性，具有作为同时预防H9亚型禽流感和新城疫的双价苗的应用前景。

关键词：禽流感病毒新城疫病毒反向遗传 HA基因

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猪肺炎支原体P102基因C末端序列的克隆及原核表达

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黑龙江畜牧兽医 2009年第3期 11-13页

作者：郭丹陈红漫李媛陈超曹培丽辛九庆沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

应用DNA重组技术，将猪肺炎支原体P102的C末端基因克隆到pET-28a表达载体上，并构建了重组表达载体；将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21，用终浓度为1．0mmol／L的IPTG诱导5h，然后用Bug BusterTM Ni—NTAHis·Bind纯化试剂盒... 详细信息

应用DNA重组技术，将猪肺炎支原体P102的C末端基因克隆到pET-28a表达载体上，并构建了重组表达载体；将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21，用终浓度为1．0mmol／L的IPTG诱导5h，然后用Bug BusterTM Ni—NTAHis·Bind纯化试剂盒在自然条件下对目的蛋白进行纯化。ELASE检测结果表明：该蛋白具有良好的生物学活性。利用纯化蛋白制备高免血清为检测P102蛋白在真核系统中的表达奠定基础。

关键词：猪肺炎支原体 P102基因表达

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牛β-干扰素在新城疫病毒La Sota疫苗株中的高效稳定表达及抗病毒活性检测

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黑龙江畜牧兽医 2009年第10期 1-3页

作者：葛金英解希帝丁玉林曹有才毛伟刘娣步志高东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省农业科学院畜牧研究所黑龙江哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

研究利用新城疫病毒La Sota株作为表达载体,构建表达牛β-干扰素基因的重组新城疫病毒全基因组质粒pFL-BoIFN-β,与辅助质粒共转染BHK-21细胞后获得表达BoIFN-β的重组新城疫病毒。收获的鸡胚尿囊液内的重组病毒经RT-PCR检验证实重组病... 详细信息

研究利用新城疫病毒La Sota株作为表达载体,构建表达牛β-干扰素基因的重组新城疫病毒全基因组质粒pFL-BoIFN-β,与辅助质粒共转染BHK-21细胞后获得表达BoIFN-β的重组新城疫病毒。收获的鸡胚尿囊液内的重组病毒经RT-PCR检验证实重组病毒含有相应外源基因。将重组病毒尿囊液经紫外线照射以灭活新城疫病毒,利用表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒在牛肾细胞上测定rL-BoIFNβ抗病毒活性,表达BoIFN-β的重组新城疫病毒能有效抑制重组水泡性口炎病毒在牛肾细胞上的复制,rL-BoIFNβ接种SPF鸡胚所收尿囊液抗病毒活性高达2×107IU/mL。结果表明:重组新城疫病毒rL-BoIFNβ接种的SPF鸡胚尿囊液具有高效而稳定的抗病毒活性,重组新城疫病毒可以作为外源蛋白的高效表达载体而广泛应用。

关键词：干扰素牛重组新城疫病毒抗病毒活性

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牛α干扰素在新城疫病毒La Sota疫苗株中的高效稳定表达及抗病毒活性检测

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黑龙江畜牧兽医 2009年第5期 7-9页

研究在已有的新城疫病毒LaSota株反向遗传系统的基础上，利用新城疫病毒LaSota株作为表达载体，构建表达牛仪干扰素（bovine interferon α）完整开放阅读框的全基因组质粒pFL—BoIFNα，转染BHK-21细胞获得表达牛α干扰素重组新城疫病... 详细信息

研究在已有的新城疫病毒LaSota株反向遗传系统的基础上，利用新城疫病毒LaSota株作为表达载体，构建表达牛仪干扰素（bovine interferon α）完整开放阅读框的全基因组质粒pFL—BoIFNα，转染BHK-21细胞获得表达牛α干扰素重组新城疫病毒。采用RT—PCR方法检测，证实收获的鸡胚尿囊液内的重组病毒含有相应外源基因。将重组病毒尿囊液经紫外线照射灭活新城疫病毒，利用表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒（VSV—EGFP）在牛肾细胞（MDBK）上测定rL—BoIFNα抗病毒活性，证实表达牛干扰素的重组新城疫病毒尿囊液能有效抑制VSV—EGFP在牛肾细胞上的复制，rL—BoIFNα接种SPF鸡胚所收尿囊液抗病毒活性高达2×10^7U／mL。结果表明：牛α干扰素在重组新城疫病毒rL—BolFNα接种的SPF鸡胚尿囊液中获得良好表达，并具有高效而稳定的抗病毒活性。

关键词：干扰素牛重组新城疫病毒抗病毒活性

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猪沙门氏菌病病原学、流行病学、诊断及防治进展

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猪业科学 2009年第12期26卷 24-28页

作者：刘芹防崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属成员,具有约2500多种血清型。猪沙门氏菌病又称猪副伤寒(Paratyphoidof pigs),是由沙门氏菌属细菌感染引起的仔猪的一种传染病。急性经过为败血症,慢性者为坏死性肠炎,有时可发生卡他性或干酪性肺炎。在猪... 详细信息

沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属成员,具有约2500多种血清型。猪沙门氏菌病又称猪副伤寒(Paratyphoidof pigs),是由沙门氏菌属细菌感染引起的仔猪的一种传染病。急性经过为败血症,慢性者为坏死性肠炎,有时可发生卡他性或干酪性肺炎。在猪副伤寒的病例中,各国分离的沙门氏菌的血清型也十分复杂,其中主要致病菌为猪霍乱沙门氏菌(*** suis)、猪伤寒沙门氏菌(***-suis)。另外,鼠伤寒沙门氏菌(***)、都伯林沙门氏菌(***)和肠炎沙门氏菌(***)等也常引起本病。沙门氏菌在自然界中十分普遍,是一种条件致病菌,对家养畜禽健康、人类公共安全、食品安全都具有严重的影响。由于沙门氏菌属中的许多血清型对人、各种家畜和家禽以及其它动物有致病性,而猪也可感染多个血清型,除猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌外,很少有其他血清型能引起临床发病,但这些对猪非致病性的血清型可造成猪肉产品的感染。因此,它在公共卫生上具有重要意义。近年来,随着中国养猪业的快速发展,沙门氏菌对养猪业的影响越来越严重。而且沙门氏菌本身就极易产生抗药性,加上生产中抗生素的滥用,导致了沙门氏菌耐药性不断增强,耐药谱扩大,加大了对此病原的预防与治疗的难度。本文就猪沙门氏菌病的最近的研究进展进行了综述,以期为猪沙门氏菌疾病的预防与控制提供新的思路。

关键词：猪沙门氏菌病原学流行病学诊断及防治

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口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：王海伟杨德成薛美于永忠赵磊李万于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚... 详细信息

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚洲1型FMDV一个构象型中和表位。对3E11单抗逃逸病毒进行序列比对分析发现，VP1蛋白G1y144是单抗3E11识别的一个重要氨基酸，由此将该构象型中和表位定位于VP1蛋白的G1y144周围。

关键词：口蹄疫病毒构象型中和表位病毒鉴定单克隆抗体比对分析

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一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影响

一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影...

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：杨德成于永忠于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复... 详细信息

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复突变，进而将这些拯救的突变株与一系列泛亚口蹄疫病毒的单克隆抗体反应，发现P153Q突变病毒不能与单抗1F6(不具备中和活性)结合。

关键词：非中和性表位关键氨基酸口蹄疫病毒中和活性单克隆抗体反应定点回复突变

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：刘长明危艳武张朝霞袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

临床“高热综合征”病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),随传代次数增加毒价显著提升,第45-60代毒... 详细信息

临床“高热综合征”病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),随传代次数增加毒价显著提升,第45-60代毒价测定达107.5 TCID50/mL,采用免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原分布在细胞浆中;电镜观察到的病毒粒子呈圆形,直径约50-55nm。分离株Nsp2基因序列中第483和535-563位氨基酸存在缺失,属PRRSV变异株。用该毒株第5代培养物滴鼻接种试验猪(1×104.5 TCID50),临床表现为持续高热(≥40.5℃,9d-12d)、食欲下降、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿、体表淋巴结肿大等,发病率为100％(10/10),死亡率为30％(3/10)。研究表明,PRRSV-HBR分离株对靶动物具有高致病力,培育的细胞适应毒株体外繁殖能力稳定,并产生了标志性基因突变,为该病毒致病机理、遗传变异规律、疫苗免疫等研究奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性遗传变异分离鉴定基因突变

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猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会

作者：张朝霞刘长明危艳武袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨 150001

用纯化的重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立了一种间接ELISA用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf9)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7％左... 详细信息

用纯化的重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立了一种间接ELISA用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf9)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7％左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白回收率为1.7-1.9μg/108细胞,纯度为90.1％;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3％(143/150),特异性为91.2％(31/34),敏感性为96.5％(112/116);其他几种常见猪病毒参考血清无交叉。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0％-4.8％和8.9％-9.9％;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5w抗体阳转,第8w-9w抗体水平达到高;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6％,研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型重组蛋白间接ELISA 抗体检测试剂盒纯化工艺

来源：评论

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