检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2013年第8期35卷 603-606页

作者：谭成章张艳萍李志杰郑永胜郑惠文刘长军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161

本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究... 详细信息

本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究以MDV GA强毒株感染SPF鸡,应用荧光定量PCR和westernblot检测病毒感染14 d和21 d后这3种蛋白在羽髓组织中的表达水平。检测结果表明,病毒感染14 d后,羽髓组织中这3种蛋白的mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的下调,其中LASP1 mRNA和PCBP1蛋白分别下调62%和48%(p<0.05);在21 d,除CyP蛋白表达基本不变外,其他mRNA和蛋白均不同程度下调,其中LASP1蛋白下调达到46%(p<0.05)。结果表明在两个不同的MDV感染时期,MDV均可以不同程度的抑制羽髓组织中这3种蛋白的表达,本研究为进一步阐释MDV与羽髓组织的相互作用机理提供有价值的参考。

关键词：鸡羽髓马立克氏病病毒 LASP1 CyP PCBP1

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鸭坦布苏病毒鸭胚成纤维细胞适应病毒编码基因序列测定及分析

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中国预防兽医学报 2013年第10期35卷 791-794页

作者：李云霞刘晓丽张玥韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)Du/CH/LSD/110128在鸭胚成纤维细胞(DEF)的适应性及变异情况,本研究将Du/CH/LSD/110128接种DEF,测定各代病毒的TCID50,表明DTMUV分离株已适应DEF,并在72 h产生明显的细胞病变(CPE),自F8代起病毒适应DEF,其F10... 详细信息

为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)Du/CH/LSD/110128在鸭胚成纤维细胞(DEF)的适应性及变异情况,本研究将Du/CH/LSD/110128接种DEF,测定各代病毒的TCID50,表明DTMUV分离株已适应DEF,并在72 h产生明显的细胞病变(CPE),自F8代起病毒适应DEF,其F10代病毒滴度为104.4TCID50/0.1 mL左右。对细胞适应毒F10代的DTMUV进行编码区基因测序并分析,结果表明Du/CH/LSD/110128细胞适应毒与DTMUV参考病毒株同源性在98%以上;其推导氨基酸序列与亲本病毒氨基酸序列差异不显著,仅存在10个氨基酸差异位点,主要在NS1和NS3蛋白,与鸡源、鸭源及鸽源病毒分别具有21个、14个、16个差异位点,这些差异位点主要存在于E蛋白、NS1蛋白和NS5蛋白。

关键词：鸭坦布苏病毒细胞适应序列分析氨基酸差异

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野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定

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中国畜牧兽医文摘 2014年第11期30卷 66-66页

作者：姜莉莉祁小乐高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒（REV）长末端重复序列（LTR）的特异性引物作为检测引物，对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖，进行病毒的分离，经PCR和间接免疫荧光（IFA）方法鉴定，确定分... 详细信息

利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒（REV）长末端重复序列（LTR）的特异性引物作为检测引物，对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖，进行病毒的分离，经PCR和间接免疫荧光（IFA）方法鉴定，确定分离到2株REV，分别来自于针尾鸭和绿头鸭，将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102。克隆2个病毒株的主要保护性抗原基因gp90，并进行序列分析。结果显示，2个分离株gp90基因氨基酸相似性为99．5％；DBYR1101gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95．7％、94．2％和98．2％；DBYR1102gp90基因与REV3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95．2％、93．7％和97．7％；与中国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列相似性分别为94．7％和94．2％；与中国北方分离株氨基酸序列相似性为99．2％-100％。核苷酸遗传进化分析表明，2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近，趋于形成1个北方分离群；与SNV株亲缘关系最远；与170A株亲缘关系较远；与美国和中国台湾地区的某些分离株相似性较高。该研究首次自野鸭体内分离NREV，丰富了REV流行病学资料，同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色，为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础。

关键词：禽网状内皮组织增生症病毒分离株鉴定鸭源 gp90基因序列相似性间接免疫荧光 PCR检测

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猪细小病毒BQ-C毒株VP2基因的鉴定及表达

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中国畜牧兽医 2013年第11期40卷 50-53页

作者：刘朝霞刘永刚毕可东周顺崔尚金青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为... 详细信息

本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为获得该毒株结构蛋白VP2基因的表达产物,将VP2基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+),得到表达重组质粒。经双酶切和测序鉴定,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE结果表明,获得的重组蛋白分子质量约为71.5ku,与预期大小相符。Western blotting结果显示获得的重组蛋白能与PPV阳性血清特异性结合,表明重组蛋白具有良好的反应原性。结果表明,本研究成功分离了1株PPV BQ-C株,且表达的VP2重组蛋白可用于PPV血清学诊断和疫苗的研发。

关键词：猪细小病毒重组VP2蛋白原核表达反应原性

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东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析

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中国兽医科学 2013年第2期43卷 208-212页

作者：李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性... 详细信息

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%～99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%～98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%～90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。

关键词：野生鸟类 B亚群禽白血病流行病学调查序列分析

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我国东北地区野生鸟类A亚群禽白血病病毒分子流行病学调查及env基因序列分析

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中国预防兽医学报 2013年第3期35卷 245-247页

作者：杨波高玉龙高宏雷秦立廷刘婉思李德龙高奇曾祥伟王笑梅东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271000

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV... 详细信息

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV(ALV-A)的同源性最高,为91.1%～100%,而与已发表的鸡的B、C、D、E、J亚群ALV的gp85编码序列的同源性仅在28.0%～80.3%之间。遗传进化树分析也表明这两份ALV阳性样品的gp85编码序列属于ALV-A。本实验在我国野生鸟类群体中首次分离和鉴定出ALV-A,表明目前我国野生鸟类已经存在A亚群ALV的感染。

关键词：野生鸟类 A亚群禽白血病 gp85 序列分析

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鸭肠炎病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国兽医杂志 2013年第1期49卷 9-12页

作者：李慧昕刘胜旺韩宗玺邵昱昊刘晓丽华育平刘娣孔宪刚东北林业大学博士后流动站黑龙江省农业科学院博士后工作站黑龙江哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆... 详细信息

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆抗体均能够与DEV感染CEF发生特异性反应,而不与CEF对照发生反应。Western blot检测,4株单克隆抗体均能够识别大小约为150kDa的蛋白,说明4株单抗隆抗体是特异性识别VP5蛋白的抗体。DEV VP5蛋白单克隆抗体的制备为进一步鉴定VP5蛋白B细胞抗原表位及VP5蛋白功能研究提供了有效工具。

关键词：鸭肠炎病毒 VP5蛋白单克隆抗体

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细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：唐青海李胜斌张辉危艳武黄立平吴洪丽刘建波王一平刘丹张志慧刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒...

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒的复制需要细胞内酶类分子参与.有学者推测PCV2的复制依赖宿主细胞周期S期相关酶类分子,但具体是那些酶类分子,目前尚不清楚.方法采用分子生物学方法克隆猪细胞周期S期的主要调控蛋白一一细胞周期蛋白A基因(CycA)和细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2),分别建立CycA或CDK2过表达细胞系及CycA或CDK2低表达细胞系.将PCV2a CL株或PCV2b YJ株接种这四种细胞系,免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和酶联免疫法(ELISA)检测病毒的复制水平,运用流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜分析蛋白定位.

关键词：

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猪圆环病毒病防控技术的研究进展

猪圆环病毒病防控技术的研究进展

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福建省第七届猪病学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平郭龙军吴洪丽张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,统称为猪圆环病毒病。本文介绍了引起该疫病的临床症状，流行趋势与毒株变异等问题;探讨了国内外疫苗的研制情况;分析了国产疫苗的特点，免疫程序及注意事项;解决了疫苗使用中判断猪场是否该注射疫苗，如何判断免疫接种是否成功，疫苗最佳免疫程序、保护期的时间，注射后会不会再感染病毒，发病的猪能否使用疫苗等问题。

关键词：猪圆环病毒病病理机制疾病防控疫苗研制合理使用

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猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军唐青海危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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