检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2011年第6期33卷 448-451页

作者：刘洋陈维宋志强孙文静李媛邹小辉辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室/国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为比较3种抗牛支原体(***)血清抗体的ELISA试剂盒检测效果,本实验应用3种检测***血清抗体ELISA诊断试剂盒对38份阳性样品(自然感染19份,人工感染18份)和37份阴性样品进行检测。结果表明:本实验室制备的HVRI试剂盒与商品化试剂盒Kit 1的... 详细信息

为比较3种抗牛支原体(***)血清抗体的ELISA试剂盒检测效果,本实验应用3种检测***血清抗体ELISA诊断试剂盒对38份阳性样品(自然感染19份,人工感染18份)和37份阴性样品进行检测。结果表明:本实验室制备的HVRI试剂盒与商品化试剂盒Kit 1的检测结果和综合检测结果符合率分别达到92%和96%;而商品化试剂盒Kit 2的检测结果与综合检测结果符合率仅为74.67%。一致性检验结果显示:HVRI试剂盒与Kit 1的一致性较高;Kit 2与HVRI试剂盒、Kit 2与Kit 1有中度的一致性。此外,3种试剂盒对牛传染性胸膜肺炎国际标准血清(PS2)的检测结果显示HVRI试剂盒和Kit 1均为为阴性,Kit 2为阳性。因此,HVRI试剂盒与Kit 1更适于***检测和开展流行病学调查。

关键词：牛支原体 ELISA试剂盒诊断

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牛支原体新基因(P18)的克隆表达及活性鉴定

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中国预防兽医学报 2012年第3期34卷 184-187页

作者：宋志强李媛孙文静刘洋邹晓辉陈维周玉梅辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室/国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150001

牛支原体(***)可以引起犊牛肺炎、关节炎、乳腺炎、角膜结膜炎等疾病,是一种牛的重要呼吸道病原体,目前***粘附宿主细胞的机制还不明确。研究表明,***表面存在的多种蛋白与致病菌在宿主体内的侵袭力与传播能力有关。我们通过分离表达多... 详细信息

牛支原体(***)可以引起犊牛肺炎、关节炎、乳腺炎、角膜结膜炎等疾病,是一种牛的重要呼吸道病原体,目前***粘附宿主细胞的机制还不明确。研究表明,***表面存在的多种蛋白与致病菌在宿主体内的侵袭力与传播能力有关。我们通过分离表达多个***基因,最终获得了一个表达纤溶酶原结合蛋白的新基因,并命名为P18。该基因表达大小约为67ku的重组蛋白。通过western blot鉴定,重组表达的P18蛋白可以被***抗体识别。进一步的试验表明,P18蛋白还具有纤溶酶原结合活性,从而推测该基因表达的蛋白可能是***的一个粘附相关因子。

关键词：牛支原体亚克隆表达粘附相关因子

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牛无浆体病的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2010年第9期 42-44页

作者：倪宏波姜海芳周玉龙辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

牛无浆体病主要是由边缘无浆体经脾传播的专性寄生于红细胞内的血液传染病,给养牛业带来较大的经济损失。文章对该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化,病原诊断与检测及疾病防治等方面做了较为详细的介绍,旨在为我国开展该病的研... 详细信息

牛无浆体病主要是由边缘无浆体经脾传播的专性寄生于红细胞内的血液传染病,给养牛业带来较大的经济损失。文章对该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化,病原诊断与检测及疾病防治等方面做了较为详细的介绍,旨在为我国开展该病的研究提供理论参考。

关键词：牛边缘无浆体病研究进展

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猪链球菌的分离鉴定及其致病性分子基础研究

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中国预防兽医学报 2018年第2期40卷 96-100页

作者：董志民杨春蕾田向学燕小翠李秀丽张万江刘思国鄢明华天津市畜牧兽医研究所天津西青300381 天津市畜禽健康养殖技术工程中心天津西青300381 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150069

为调查猪源链球菌(***)血清型的流行特点、主要毒力基因的分布及致病力情况,本研究针对来自我国部分地区800份疑似***发病猪的病料样品进行***的分离鉴定、血清型分型、致病力试验及主要毒力基因型检测。研究结果显示,在800份样品中分离... 详细信息

为调查猪源链球菌(***)血清型的流行特点、主要毒力基因的分布及致病力情况,本研究针对来自我国部分地区800份疑似***发病猪的病料样品进行***的分离鉴定、血清型分型、致病力试验及主要毒力基因型检测。研究结果显示,在800份样品中分离到41株***(5.13%);其中,血清型2型或1/2型*** 10株(24.4%),3型6株(14.6%),8型3株(7.3%),9型7株(17.1%),21型1株(2.4%),未定型14株(34.1%);致病力试验结果显示,以1×108 cfu/mL ***菌液接种昆明小鼠,41个分离株中具有致死性的菌株19株,其中6株致死性较强,13株致死性较弱;毒力基因检测结果显示gdh、fbps、orf2、gapdh、sly、ef和mrp基因的检出率分别为100%、82.9%、75.6%、41.5%、39.0%、19.5%和12.2%,以gdh+orf2+fbps+gapdh型(9株)、gdh+orf2+fbps型(8株)和sly+gdh+orf2+fbps+gapdh型(6株)为主要的毒力基因型。本研究结果揭示了我国***各血清型的流行情况,初步探明***致病力的强弱,为深入开展***防控技术研究及其致病机理奠定了基础。

关键词：猪链球菌分离鉴定致病性血清型毒力基因

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肠炎沙门菌mreB基因缺失株的构建及其体外生物学特性研究

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中国预防兽医学报 2019年第4期41卷 356-360页

作者：王曼宇王忠星曹俊许秋刘思国于申业吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150069

MreB蛋白广泛存在于原核生物中,主要生物功能是聚合形成类似于肌动蛋白微丝的纤维,参与细胞形状的维持。为研究肠炎沙门菌的mreB基因缺失对环境压力的应激变化,本研究利用Red重组方法构建肠炎沙门菌SM6株的mreB基因缺失株,同时构建其回... 详细信息

MreB蛋白广泛存在于原核生物中,主要生物功能是聚合形成类似于肌动蛋白微丝的纤维,参与细胞形状的维持。为研究肠炎沙门菌的mreB基因缺失对环境压力的应激变化,本研究利用Red重组方法构建肠炎沙门菌SM6株的mreB基因缺失株,同时构建其回补菌株,观察缺失株SM6ΔmreB的形态学变化,分析其对温度缺氧应力、渗透应力以及耐酸性的变化。结果显示,缺失株SM6ΔmreB的菌体变为球状,生长受到抑制;SM6ΔmreB对升温缺氧压力的耐受能力显著低于亲本株和回补株(p<0.05);在渗透压条件为100mmol/L和200mmol/LNaCl时缺失株的生存能力明显弱于亲本株和回补株(p<0.05);缺失株在强酸环境中的生存能力显著低于亲本株和回补株(p<0.05),而对中性和弱酸性环境的适应能力与亲本株相似。本研究为进一步探究MreB蛋白在沙门菌的致病机制以及菌蜕形成过程中的作用奠定了基础。

关键词： MreB蛋白沙门菌生物学特性环境压力

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2017年我国4个省份屠宰场猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国预防兽医学报 2019年第12期41卷 1210-1214页

作者：王长珍刘文宇祝瑶栾天于淼杨亲刘思国张万江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150069 哈尔滨市产品质量监督检验院黑龙江哈尔滨150036

为研究我国不同地区屠宰场猪链球菌的流行情况,本研究于2017年分别从河南、黑龙江、广东、宁夏4个地区大型屠宰场采集健康猪肺脏样品578份,进行猪链球菌的分离鉴定、血清型分型;通过微量肉汤稀释法测定分离株的最小抑菌浓度(MIC);PCR方... 详细信息

为研究我国不同地区屠宰场猪链球菌的流行情况,本研究于2017年分别从河南、黑龙江、广东、宁夏4个地区大型屠宰场采集健康猪肺脏样品578份,进行猪链球菌的分离鉴定、血清型分型;通过微量肉汤稀释法测定分离株的最小抑菌浓度(MIC);PCR方法检测分离菌的耐药基因和毒力基因;通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分析不同来源分离株间的亲缘关系。结果显示,从4省市共分离到猪链球菌46株,包括12种血清型和3种荚膜新型血清型,其中猪链球菌血清7型分离率最高,为30.4%,但不同地区血清型交叉密度较低。分离菌株表现出广泛耐药性,其中对红霉素、阿奇霉素、多西环素的耐药率较高,分别为91.30%、86.96%、86.96%,但分离株均对万古霉素敏感。红霉素类耐药基因erm和四环素类耐药基因tet的检出率均较高,其中erm(B)为97.83%,tet(O)为89.13%。PFGE结果显示不同地区分离菌株PFGE谱型差异明显,而同一地区分离菌株PFGE谱型相似或相同,提示同一地区猪链球菌存在克隆传播现象。本研究揭示了我国不同地区猪链球菌流行情况,为猪链球菌病的防控提供参考依据。

关键词：猪链球菌流行病学耐药 PFGE

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多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点

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中国预防兽医学报 2014年第11期36卷 859-862页

作者：牟迪王秀梅初胜波刘琪张万江刘思国东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学吉林长春130118

为调查多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点及分离株对临床常用药物的耐药情况,本研究通过对临床分离的8株携带cfr基因的肠球菌进行最小抑菌浓度(MIC)测定,脉冲凝胶电泳(PFGE)分型和southern杂交定位,确定分离株的耐药表型... 详细信息

为调查多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点及分离株对临床常用药物的耐药情况,本研究通过对临床分离的8株携带cfr基因的肠球菌进行最小抑菌浓度(MIC)测定,脉冲凝胶电泳(PFGE)分型和southern杂交定位,确定分离株的耐药表型和cfr基因在肠球菌中的传播方式。研究表明,8株菌对氟苯尼考、庆大霉素和红霉素耐药率均为100%;对四环素、环丙沙星和利福平的耐药率高达75.0%以上。PFGE结果显示在同一猪场分离的28株cfr阳性肠球菌共有8种不同的PFGE谱型,表明cfr基因在同一猪场中存在克隆传播的现象。Southern杂交结果显示,cfr基因在6株菌中定位于20 kb^50 kb的质粒。本研究为临床制定合理措施控制cfr快速传播提供实验依据。

关键词： cfr基因脉冲凝胶电泳最小抑菌浓度 Southern杂交肠球菌

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基于牛分枝杆菌新型重组蛋白的间接ELISA方法及其应用

基于牛分枝杆菌新型重组蛋白的间接ELISA方法及其应用

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2006中国科协年会

作者：郭设平刘思国王春来邵美丽宫强张秀华郭洋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室

牛结核病是一种严重危害奶牛业和人类健康的人兽共患传染病,控制和消灭牛结核病是消灭人结核病的前提和基础,而快速有效的诊断是控制牛结核病的关键。PPD皮试诊断方法作为OIE法定的方法具有无可比拟的优越性。但该方法不能有效区分其他... 详细信息

牛结核病是一种严重危害奶牛业和人类健康的人兽共患传染病,控制和消灭牛结核病是消灭人结核病的前提和基础,而快速有效的诊断是控制牛结核病的关键。PPD皮试诊断方法作为OIE法定的方法具有无可比拟的优越性。但该方法不能有效区分其他分枝杆菌致敏、卡介苗(BCG)免疫和牛分枝杆菌感染;在机体因结核病情严重或混合感染免疫抑制疾病时,PPD皮试则容易出现假阳性的结果;另外,它还必须在活体上试验,不便于大规模的流行病学调查,也不能应用于回顾性的流行病学分析。因此,它需要一种高特异性和高敏感性的血清学诊断方法来弥补这些不足。ELISA方法因其快速、简

关键词：牛结核病融合蛋白间接ELISA

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副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定

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东北农业大学学报 2014年第6期45卷 79-83页

作者：李继昌崔宁刘娇周泷张艳禾谢芳李刚牛惠王春来东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室哈尔滨150001

为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克... 详细信息

为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆后测序,经Southern Blot验证和BLAST分析,获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。

关键词：副猪嗜血杆菌抑制消减杂交种特异性基因鉴定

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胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究

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中国预防兽医学报 2014年第6期36卷 435-439页

作者：周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三... 详细信息

为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三基因缺失突变株S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur。生物学特性研究表明,该缺失株与野生株S8相比,体外生长速度未发生明显变化,但溶血能力显著下降,与亲本株相比,铁摄取利用轻微降低。致病力试验结果表明,仔猪经气管接种该缺失株毒力显著低于野生型菌株,并且1×109cfu/mL剂量对猪不产生明显的呼吸道症状和肺部病变,表明该缺失株高度安全,可以作为APP基因缺失弱毒活疫苗的候选株。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌基因缺失致弱生物学特性

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