检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2014年第11期45卷 1844-1850页

作者：谭丹崔鹏飞黄建龙王昌建李文辉范仲鑫张芳何世成唐小明刘道新邓国华湖南省动物疫病预防控制中心长沙410014 长沙市动物疫病预防控制中心长沙410013 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

2011年冬对湖南环洞庭湖地区散养鸭群进行禽流感病毒(AIV)感染情况调查时从一鸭场环境粪便拭子中分离一株H12N7亚型AIV,命名为A/Environment/Hunan/S4484/2011(H12N7),对其进行全基因序列测定及分析。结果显示该毒株HA基因裂解位点无多... 详细信息

2011年冬对湖南环洞庭湖地区散养鸭群进行禽流感病毒(AIV)感染情况调查时从一鸭场环境粪便拭子中分离一株H12N7亚型AIV,命名为A/Environment/Hunan/S4484/2011(H12N7),对其进行全基因序列测定及分析。结果显示该毒株HA基因裂解位点无多个连续的碱性氨基酸(PQAQDR↓GLF),具有低致病性AIV的特征,对其全基因进行遗传进化分析表明8个基因片段来源非常复杂,与周边国家野禽中分离的毒株相似性很高,可能有共同的祖先来源,同时提示该毒株可能是不同亚型禽流感毒株之间基因交换所形成的重组体。

关键词：禽流感病毒 H12N7亚型序列测定与分析

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蓝舌病病毒一步RT-PCR检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2014年第9期36卷 712-714页

作者：冯瑜菲赵国辉徐青元杨涛孙恩成李俊平吴东来东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为建立蓝舌病病毒（BTV）群特异性核酸检测方法,本研究针对BTV S10基因保守区域设计并合成1对特异性引物,建立了一步RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测.实验结果表明：该方法对BTV1～24型均有特异... 详细信息

为建立蓝舌病病毒（BTV）群特异性核酸检测方法,本研究针对BTV S10基因保守区域设计并合成1对特异性引物,建立了一步RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测.实验结果表明：该方法对BTV1～24型均有特异性反应,而对茨城病毒（IBAV）、中山病毒（CV）和赤羽病病毒（AKAV）无交叉反应,具有良好的特异性;最低检出量为102 TCID50/mL.此外,该方法能有效的从羊的抗凝血样品中检测出BTV核酸.本研究所建立的一步RT-PCR检测方法可以用于BTV的快速检测及流行病学调查.

关键词：蓝舌病病毒分子诊断 bluetongue virus (BTV)

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2株H9N2亚型禽流感病毒的致病性

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江苏农业科学 2014年第5期42卷 187-188页

作者：谭丹黄建龙王昌建刘道新邓国华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129

为了解从我国洞庭湖地区鸡和鸭中分离的H9N2亚型禽流感病毒的生物学特性,本研究选用具有代表性的2株病毒对SPF鸡及BALB/c小鼠进行致病性试验。结果显示：2株毒株均能使鸡感染并排毒,并且使同居鸡感染排毒,但不引起鸡明显的临床症状及死... 详细信息

为了解从我国洞庭湖地区鸡和鸭中分离的H9N2亚型禽流感病毒的生物学特性,本研究选用具有代表性的2株病毒对SPF鸡及BALB/c小鼠进行致病性试验。结果显示：2株毒株均能使鸡感染并排毒,并且使同居鸡感染排毒,但不引起鸡明显的临床症状及死亡;2株毒株感染SPF鸡后能在鸡喉分离到高滴度病毒,明显高于泄殖腔,且排毒期主要集中于第1-7天;从感染鸡脏器中病毒复制情况看,供试的2株病毒均未在脑等组织脏器中复制,而2株病毒感染BALB/c小鼠后,在小鼠脏器中复制情况却不一致,A/CK/HuN/S4591/2011（H9N2）毒株在小鼠鼻甲及肺脏中均能检测到病毒,但是A/DK/HuN/S4111/2011（H9N2）毒株仅在小鼠鼻甲中检测到较高滴度的病毒。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒致病性 SPF鸡 BALB c小鼠

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环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒监测

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畜牧与兽医 2014年第8期46卷 25-27页

作者：黄建龙谭丹王昌建范仲鑫朱春霞王伟国张朝阳刘道新邓国华湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410014 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

调查2009—2013年洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒的分布和流行情况,为该地区H4亚型禽流感的防控提供依据。结果显示:各年度均在环洞庭湖区活禽批发市场上分离到H4亚型禽流感病毒,总的分离率为3.14%;水禽场H4亚型禽流... 详细信息

调查2009—2013年洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒的分布和流行情况,为该地区H4亚型禽流感的防控提供依据。结果显示:各年度均在环洞庭湖区活禽批发市场上分离到H4亚型禽流感病毒,总的分离率为3.14%;水禽场H4亚型禽流感病毒场间阳性率达到8.72%,拭子的H4亚型病毒分离率为1.12%。提示洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒带毒率比较高。

关键词：禽流感病毒 H4亚型监测洞庭湖区

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环洞庭湖区鸭场禽流感免疫调查及抗体检测情况

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中国兽医杂志 2014年第10期50卷 39-40页

作者：黄建龙王昌建朱春霞邓国华范仲鑫何世成王卫国唐小明汪洪冰刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410014 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒属A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类传染病,主要在鸡、鸭、鹅、鸽等家禽和野生禽中传播,是严重危害养禽业的重要病毒性疫病[1]。2003年以来,H5N1亚型高致病性禽流感在全球传播,导致大量家禽和野生... 详细信息

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒属A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类传染病,主要在鸡、鸭、鹅、鸽等家禽和野生禽中传播,是严重危害养禽业的重要病毒性疫病[1]。2003年以来,H5N1亚型高致病性禽流感在全球传播,导致大量家禽和野生鸟类死亡。在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制家禽禽流感发生与流行。但部分禽类（特别是水禽）疫苗接种后所诱导的免疫应答水平不高,其原因是什么尚不清楚。

关键词：免疫水平禽流感病毒环洞庭湖区抗体检测疫苗接种禽流行性感冒全球传播正黏病毒科养禽业免疫应答

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3株H3N8亚型禽流感病毒对SPF鸡和Balb/c小鼠致病性研究

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动物医学进展 2014年第4期35卷 77-80页

作者：谭丹关立铮王晶崔鹏飞施建忠黄建龙何世成王昌建刘道新邓国华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129

为了解从洞庭湖区鸭子和环境中分离的3株H3N8亚型禽流感病毒的致病性。利用这3株毒株对SPF鸡及Balb／c小鼠进行致病性试验，结果显示，3株毒株均能使鸡感染并排毒，但不引起鸡明显的临床症状及死亡，感染鸡后第3天～第7天在泄殖腔排出... 详细信息

为了解从洞庭湖区鸭子和环境中分离的3株H3N8亚型禽流感病毒的致病性。利用这3株毒株对SPF鸡及Balb／c小鼠进行致病性试验，结果显示，3株毒株均能使鸡感染并排毒，但不引起鸡明显的临床症状及死亡，感染鸡后第3天～第7天在泄殖腔排出高滴度病毒，且持续至第11天（仅观察到该天），与以往的研究相比，排毒时间更长。3株H3N8亚型毒株感染小鼠后，能在小鼠鼻甲及肺脏内高滴度复制，但小鼠的体重变化不明显。结果说明3株H3亚型AIV对家禽及哺乳动物感染能力增强，因此加强该亚型的流行病学监测及致病性的研究非常重要。

关键词： H3N8亚型禽流感病毒致病性 SPF鸡 Balb c小鼠

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蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定

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中国预防兽医学报 2014年第4期36卷 318-322页

作者：席娜赵国辉孙恩成秦永丽孙亮魏天徐青元杨涛孙晶刘二战钱爱东吴东来吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为制备蓝舌病病毒03TV）8型VP2蛋白的单克隆抗体（MAb）TL鉴定其抗原表位，本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB／c小鼠，三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，并以纯化的重组VP2蛋白为... 详细信息

为制备蓝舌病病毒03TV）8型VP2蛋白的单克隆抗体（MAb）TL鉴定其抗原表位，本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB／c小鼠，三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，并以纯化的重组VP2蛋白为包被抗原，通过间接ELISA筛选出两株能够稳定分泌抗BTV8VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株（2G4和387）。间接免疫荧光结果表明：2G4和387与BTV8均呈阳性反应，与BTV1～7、BTV9-24、茨城病毒、中山病毒以及赤羽病毒均呈阴性反应。Westernblot结果显示，2G4和387均能够识别BTV8及BTV8重组VP2蛋白。Ig亚类鉴定2G4和387均为IgG1／κ链。利用原核表达的96条覆盖VP2全长的麦芽糖结合蛋白（MBP）融合短肽对MAbs的抗原表位进行鉴定，结果表明：MAb2G4识别的抗原表位为捌LCRLLSTIGRKMCNTE^296。本研究结果为BTV8型特异性检测方法的建立及VP2蛋白结构和功能的研究奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒8型 VP2蛋白真核表达单克隆抗体抗原表位

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西尼罗病毒NS1与E基因重组腺病毒的构建及免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2014年第11期36卷 881-884页

作者：刘二战赵国辉孙恩成崔焕忠杨涛徐青元孙晶孙亮席娜魏天吴东来吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为构建串联表达西尼罗病毒(WNV)NS1和E基因的重组腺病毒,本研究利用口蹄疫病毒具有自我切割功能的2A蛋白的编码序列将NS1和E基因串联,构建穿梭载体p Shuttle-WNV-NS1-2A-E,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,经脂质体转染AD293细胞,... 详细信息

为构建串联表达西尼罗病毒(WNV)NS1和E基因的重组腺病毒,本研究利用口蹄疫病毒具有自我切割功能的2A蛋白的编码序列将NS1和E基因串联,构建穿梭载体p Shuttle-WNV-NS1-2A-E,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,经脂质体转染AD293细胞,在细胞内完成病毒粒子的组装制备重组腺病毒。通过间接免疫荧光和western blot检测表明:重组腺病毒中的外源基因表达的融合蛋白NS1-2A-E可以自我裂解为NS1和E蛋白。将构建的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明该重组病毒可以诱导机体产生良好的体液免疫应答。本实验为WNV重组腺病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。

关键词：西尼罗病毒 NS1 E 重组腺病毒体液免疫

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虎源伪狂犬病毒的鉴定及gB基因分析

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中国病原生物学杂志 2014年第12期9卷 1057-1060页

作者：李元果高晓龙桑晓宇王海军张成林王爱荣于志君任志广郑学星冯娜王铁成杨松涛黄耕高玉伟夏咸柱胡永浩甘肃农业大学甘肃兰州730070 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病重点实验室吉林长春130122 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点实验室黑龙江哈尔滨150001 北京动物园北京100081

目的对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析。方法采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察... 详细信息

目的对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析。方法采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察病毒形态结构;取研磨组织液接种家兔,观察病毒的致病力。结果 PCR扩增组织样品为gB基因、gD基因阳性,基因序列经blast比对伪狂犬病毒。将gB基因通过序列测定分析并与GenBank中近4年公布的9株伪狂犬病毒gB基因比对,同源性为99.5%-100%。进化树分析该病毒与2012年北京家猪分离株属同一进化分支。组织研磨液置电镜观察,见病毒呈圆形,直径100nm左右,有囊膜,为具有典型特征的疱疹病毒样病毒粒子。家兔接种组织研磨液后出现啃咬接种部位,抽搐,嘶叫等伪狂犬病症状。结论本研究在病死虎体内检测到伪狂犬病毒,表明濒危野生动物虎已受到伪狂犬病毒病的威胁。

关键词：虎伪狂犬病毒 PCR鉴定 gB基因进化分析

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禽流感病毒H5 HA和M基因双重荧光RT-PCR诊断方法的建立

禽流感病毒H5 HA和M基因双重荧光RT-PCR诊断方法的建立

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：王秀荣徐晓龙马勇包红梅施建忠曾显营李雁冰陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室国家禽流感参考实验室

引言H5亚型禽流感的爆发不仅给家禽养殖业带来了巨大的损失,同时也造成了人的死亡。因此,迫切需要一种快速、敏感、特异的分子检测方法来应用于H5亚型禽流感病毒（AIV）的诊断。荧光RT-PCR方法作为病毒快速诊断的有效工具,已经用于H5亚... 详细信息

引言H5亚型禽流感的爆发不仅给家禽养殖业带来了巨大的损失,同时也造成了人的死亡。因此,迫切需要一种快速、敏感、特异的分子检测方法来应用于H5亚型禽流感病毒（AIV）的诊断。荧光RT-PCR方法作为病毒快速诊断的有效工具,已经用于H5亚型和AIV的检测。但是,由于疫苗免疫大面积应用形成的高免疫压力,H5亚型禽流感病毒不断发生遗传变异,针对H5亚型引物和探针需要随着新病

关键词：禽流感病毒 AIV 双重荧光 RT-PCR H5 HA

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