检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2013年第12期45卷 6-10页

作者：黄建龙邓国华谭丹王昌建朱春霞范仲鑫何世成汪洪冰张菁邱立新鲁杏华刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410007 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物卫生监督所湖南长沙410007

采用RT—PCR技术对近年来洞庭湖区分离的H3亚型禽流感毒株的HA基因进行扩增、克隆和测序，并对所得全序列进行同源性和遗传演化分析。结果显示：本试验分离到的7株H3亚型禽流感病毒的HA裂解位点均没有多个连续的碱性氨基酸插入，属于低... 详细信息

采用RT—PCR技术对近年来洞庭湖区分离的H3亚型禽流感毒株的HA基因进行扩增、克隆和测序，并对所得全序列进行同源性和遗传演化分析。结果显示：本试验分离到的7株H3亚型禽流感病毒的HA裂解位点均没有多个连续的碱性氨基酸插入，属于低致病性病毒；7株H3亚型毒株之间HA基因核苷酸同源性在87．6％～98．4％之间，推导氨基酸序列的同源性在93．7％～99．1％之间；从HA基因遗传演化关系来看，7株病毒毒可分为三大分支，与以往从蒙古、韩国、越南、西伯利亚及我国香港、广西、三江等地分离的H3亚型毒株关系密切，提示其HA基因来源非常复杂。

关键词： H3亚型禽流感 HA基因同源性遗传演化

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表达羧基端融合HA表位N蛋白的重组小反刍兽疫病毒的拯救及鉴定

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中国预防兽医学报 2013年第6期35卷 456-459页

作者：殷倩倩陈伟业胡倩倩温志远葛金英王喜军步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 安徽科技学院动物科学学院安徽凤阳233100 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为构建小反刍兽疫(PPR)标记疫苗,本研究以PPR病毒(PPRV)反向遗传操作系统为基础,将编码H A表位(YPYD VPDYA)的序列融合连接于PPRV感染性全长cD N A N基因的3'末端构建感染性克隆质粒pN g75/1-GFP/NHA,将其与辅助质粒pCAGGS-N、pCAGG... 详细信息

为构建小反刍兽疫(PPR)标记疫苗,本研究以PPR病毒(PPRV)反向遗传操作系统为基础,将编码H A表位(YPYD VPDYA)的序列融合连接于PPRV感染性全长cD N A N基因的3'末端构建感染性克隆质粒pN g75/1-GFP/NHA,将其与辅助质粒pCAGGS-N、pCAGGS-P、pCAGGS-L共转染V ero细胞救获表达融合H A表位N蛋白的重组病毒rPPRV/GFP/NHA。W estern blot和间接免疫荧光试验表明融合H A表位的N蛋白获得正确表达;体外生长动力学试验分析表明rPPRV/G FP/N H A的生长最高滴度可达106.2TCID50/m L,能够满足标记疫苗的使用要求。本研究结果为进一步研制PPRV标记疫苗奠定基础。

关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白 HA表位标记疫苗

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环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感监测分析

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中国家禽 2013年第17期35卷 58-60页

作者：黄建龙王昌建王卫国邓国华谭丹范仲鑫朱春霞何世成汪洪冰刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

为了解环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况,2011~2012年先后3次对东洞庭湖、南洞庭湖和西洞庭湖区的149个鸭场进行监测,在40个鸭场检测到低致病性禽流感病毒,场间阳性率为26.8%,其中有2个鸭场混合感染多种低致病性禽流感病毒。... 详细信息

为了解环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况,2011~2012年先后3次对东洞庭湖、南洞庭湖和西洞庭湖区的149个鸭场进行监测,在40个鸭场检测到低致病性禽流感病毒,场间阳性率为26.8%,其中有2个鸭场混合感染多种低致病性禽流感病毒。在鸭拭子和环境拭子中共分离到有H3、H4、H6、H9、H10、H11和H12等7种亚型的低致病性禽流感病毒,其中H3和H4亚型的分离率较高,拭子的病毒分离率为3.88%,表明在洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况较为严重。

关键词：环洞庭湖区低致病性禽流感场间阳性率分离率监测

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鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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畜牧与兽医 2013年第10期45卷 6-9页

作者：林源柳金雄陈普成姜永萍华荣虹邬丽李奇蒙丁蕾蕾刘毅刘道新陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 湖南省动物疫病预防与控制中心湖南长沙410007

用原核表达并纯化的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,筛选到1株分泌针对DTMUV的E蛋白的单抗融合细胞,并命名为LY12。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明,所获得细... 详细信息

用原核表达并纯化的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,筛选到1株分泌针对DTMUV的E蛋白的单抗融合细胞,并命名为LY12。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明,所获得细胞分泌的抗体只与DTMUV的E蛋白发生特异性反应,与日本脑炎病毒(JEV)和西尼罗病毒(WNV)无交叉反应。进一步鉴定该单抗的抗体亚类为IgG1,轻链为κ链。抗E蛋白单克隆抗体的制备为DTMUV的诊断和相关基础研究奠定了基础。

关键词：鸭坦布苏病毒 E蛋白单克隆抗体鉴定

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长沙市活禽批发市场鸡鸭禽流感病毒H5抗体监测

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动物医学进展 2013年第5期34卷 131-133页

作者：黄建龙范仲鑫邓国华王辉王昌建何世成汪洪冰邱立新鲁杏华刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410007 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 长沙市畜禽产品质量检测中心湖南长沙410013

为了解批发市场活禽禽流感病毒H5抗体水平,对长沙市2家批发市场活禽禽流感病毒H5抗体进行了监测。结果显示,2008年-2011年从长沙市活禽批发市场所采集的禽血清禽流感病毒H5抗体水平比较低,鸭血清抗体合格率为50.4%,鸡血清抗体合格率为58... 详细信息

为了解批发市场活禽禽流感病毒H5抗体水平,对长沙市2家批发市场活禽禽流感病毒H5抗体进行了监测。结果显示,2008年-2011年从长沙市活禽批发市场所采集的禽血清禽流感病毒H5抗体水平比较低,鸭血清抗体合格率为50.4%,鸡血清抗体合格率为58.1%。12月～3月份家禽血清禽流感病毒H5抗体平均水平比较低,这与禽流感易发于冬春季节这一流行病学特征一致,表明家禽的抗体水平与发病有一定的相关性。

关键词：活禽市场禽流感病毒 H5抗体

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猪传染性胃肠炎病毒致病机制的研究进展

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世界华人消化杂志 2013年第1期21卷 39-43页

作者：殷相平任晓峰柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃省兰州市730046 东北农业大学兽医学院预防兽医学系黑龙江省哈尔滨市150030

猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起仔猪严重腹泻的一种动物冠状病毒.本文就TGEV的基因组结构、主要结构蛋白及功能、病毒繁殖与复制、病毒受体、病毒变异以及病毒致病机制等方面的国内外研... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起仔猪严重腹泻的一种动物冠状病毒.本文就TGEV的基因组结构、主要结构蛋白及功能、病毒繁殖与复制、病毒受体、病毒变异以及病毒致病机制等方面的国内外研究进展和现状进行综述.这些资料有助于理解TGEV的分子生物学特性、遗传与变异规律,对新型疫苗的研发及抗病毒药物的筛选具有重要的理论价值.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒致病机制

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禽流感病毒M2e多表位疫苗的构建和免疫原性检测

禽流感病毒M2e多表位疫苗的构建和免疫原性检测

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2013新型疫苗、重组蛋白及多肽药物研发注册与质量评价研讨会

作者：刘明张新涛刘春国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感参考实验室

为进行禽流感病毒M2蛋白胞外功能区M2e表位疫苗的免疫效果,通过PCR技术构建了M2e表位多拷贝串联基因片断,将其克隆到原核表达载体,经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确后,获得重组表达质粒pMAL-3M2e。重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱... 详细信息

为进行禽流感病毒M2蛋白胞外功能区M2e表位疫苗的免疫效果,通过PCR技术构建了M2e表位多拷贝串联基因片断,将其克隆到原核表达载体,经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确后,获得重组表达质粒pMAL-3M2e。重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导后经SDS-PAGE和Western blot鉴定得到与预期值相符的重组融合蛋白。融合蛋白得到高效可溶性表达,表达量约占菌体表达量的60%。间接ELISA表明,通过MBP树脂柱分离纯化的重组蛋白具有较好的免疫原性,该试验为M2e亚单位疫苗研究的进一步开展奠定了基础。

关键词：禽流感病毒 M2e表位疫苗免疫原性

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我国2009-2013年H3亚型禽流感病毒表面基因分子特征

我国2009-2013年H3亚型禽流感病毒表面基因分子特征

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：关立峥邓国华李文辉谭丹崔鹏飞张曦朱占松王晶张芳陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001

不同亚型间的禽流感病毒的多基因重组增加了我国南方家鸭中循环存在着的流感病毒的遗传多样性,有研究表明,H3 亚型禽流感病毒是家鸭中普遍存在着的流感亚型,而家鸭作为天然基因库与家禽之间的重要桥梁,其存在促进了流感病毒的传播与新... 详细信息

不同亚型间的禽流感病毒的多基因重组增加了我国南方家鸭中循环存在着的流感病毒的遗传多样性,有研究表明,H3 亚型禽流感病毒是家鸭中普遍存在着的流感亚型,而家鸭作为天然基因库与家禽之间的重要桥梁,其存在促进了流感病毒的传播与新型流感病毒的产生。

关键词：禽流感家鸭生物学特性

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蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：席娜王文世冯瑜菲李俊平吴东来孙恩成孙亮魏天杨涛徐青元刘二战孙晶魏鹏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体... 详细信息

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体质粒分别经BamHI和HindⅢ酶切后连接转化将其克隆到pFast-BacHTA供体质粒中构建重组pFast-VP2质粒,双酶切和测序鉴定后将pFast-VP2转化DH10Bac感受态细胞制备提取重组杆粒BAC-VP2,经PCR鉴定后在脂质体Cellfectin Reagent作用下将重组杆粒BAC-VP2转染Sf21细胞,转染后的Sf21细胞经蛋白质印迹检测VP2蛋白及其生物活性。结果:经双酶切以及测序鉴定成功构建了真核表达载体pFast-VP2,利用杆状病毒表达系统成功表达出BTV8重组蛋白VP2.通过包涵体纯化方法对其进行了纯化,Western blot结果显示该蛋白可以与抗BTV8绵羊阳性血清产生反应,显示出良好的抗原性。结论:昆虫杆状病毒表达载体具有高效性和灵活性,能高效地表达大片段基因也能同时表达多个基因,而且表达的重组蛋白经糖基化、磷酸化、二硫键的形成等翻译加工后在结构和功能上更接近天然蛋白,使得重组蛋白具有较好的生物活性。本研究构建的BTV8 VP2蛋白的真核表达载体,为后期建立稳定表达VP2蛋白的细胞模型和VP2蛋白功能研究奠定了基础。

关键词：动物医学蓝舌病病毒重组蛋白真核表达抗原性检测

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蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定

蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：魏天徐青元耿宏伟冯瑜菲杨涛孙恩成席娜钱爱东吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000

VP7蛋白作为蓝舌病病毒群特异性抗原，在BTV各个血清型中高度保守，而针对VP7蛋白的血清学检测方法也是当前检测BT的主要方法之一。本研究通过鉴定BTV VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，初步阐明了BTV VP7蛋白竞争抑制特异性的分... 详细信息

VP7蛋白作为蓝舌病病毒群特异性抗原，在BTV各个血清型中高度保守，而针对VP7蛋白的血清学检测方法也是当前检测BT的主要方法之一。本研究通过鉴定BTV VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，初步阐明了BTV VP7蛋白竞争抑制特异性的分子基础，这一结果对BT血清学检测方法的建立和改进具有重要的参考价值。

关键词：动物医学蓝舌病病毒蛋白表达群特异性抗原表位

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