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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

383 篇 期刊文献
188 篇 会议

馆藏范围

571 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

541 篇 农学
- 515 篇 兽医学
- 35 篇 作物学
- 11 篇 畜牧学
- 2 篇 植物保护
- 1 篇 农业资源与环境
- 1 篇 林学
39 篇 理学
- 38 篇 生物学
- 1 篇 生态学
37 篇 工学
- 33 篇 生物工程
- 4 篇 化学工程与技术
18 篇 医学
- 9 篇 基础医学(可授医学...
- 5 篇 公共卫生与预防医...
- 5 篇 药学(可授医学、理...
- 4 篇 临床医学
- 2 篇 中西医结合
- 2 篇 中药学(可授医学、...
1 篇 经济学
- 1 篇 应用经济学
1 篇 法学
- 1 篇 政治学
1 篇 管理学
- 1 篇 工商管理

主题

157 篇 禽流感病毒
86 篇 禽流感
66 篇 猪流感病毒
35 篇 流感病毒
34 篇 单克隆抗体
33 篇 dna疫苗
32 篇 ha基因
31 篇 致病性
29 篇 序列分析
27 篇 h5亚型
23 篇 h5n1
20 篇 原核表达
20 篇 生物学特性
18 篇 猪流感
16 篇 免疫保护
15 篇 克隆
14 篇 进化分析
14 篇 免疫原性
14 篇 基因芯片
12 篇 蓝舌病病毒

机构

95 篇 东北农业大学
91 篇 中国农业科学院哈...
77 篇 中国农业科学院哈...
63 篇 中国农业科学院哈...
54 篇 中国农业科学院哈...
33 篇 中国农业科学院哈...
30 篇 甘肃农业大学
27 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 农业部畜牧兽医总...
22 篇 湖南省动物疫病预...
21 篇 全国畜牧兽医总站
18 篇 湖南农业大学
17 篇 内蒙古农业大学
16 篇 华南农业大学
16 篇 中国农业科学院哈...
16 篇 中国农业科学院哈...
13 篇 新疆农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
11 篇 南京农业大学

作者

390 篇 陈化兰
138 篇 邓国华
91 篇 李雁冰
91 篇 乔传玲
89 篇 于康震
85 篇 田国彬
84 篇 姜永萍
80 篇 王秀荣
79 篇 施建忠
73 篇 杨焕良
56 篇 陈艳
55 篇 杨涛
51 篇 刘明
49 篇 刘春国
48 篇 辛晓光
47 篇 李呈军
44 篇 刘丽玲
38 篇 步志高
37 篇 曾显营
36 篇 崔鹏飞

语言

571 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感开放实验室"

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初步构建AIV、NDV、IBDV和IBV同步检测DNA芯片

初步构建AIV、NDV、IBDV和IBV同步检测DNA芯片

引用

第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：王秀荣石锐李冬梅刘丽玲孙凯孔宪刚包红梅陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

用AIV、NDV、IBDV和IBV质粒和引物扩增得到8个PCR产物,处理后作为捕捉DNA点在氨基包被的载玻片上,作为待检芯片。待检样品为四种病原的鸡胚培养物,提取病毒RNA后,利用一步法多重RT-PCR,在反应体系中加入8对特异性引物和荧光素Cy5-dUTP,... 详细信息

用AIV、NDV、IBDV和IBV质粒和引物扩增得到8个PCR产物,处理后作为捕捉DNA点在氨基包被的载玻片上,作为待检芯片。待检样品为四种病原的鸡胚培养物,提取病毒RNA后,利用一步法多重RT-PCR,在反应体系中加入8对特异性引物和荧光素Cy5-dUTP,获得荧光标记的混合PCR产物,处理后与制备好的检测芯片杂交,扫描待检样品与芯片上捕捉探针的结合位点,杂交信号与预期设想一致。结果显示,通过一次杂交可确定待检样品中是否含有AIV、IBDV、IBV、NDV。

关键词： AIV NDV IBDV IBV DNA芯片同步检测多重RT-PCR

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real-time RT-PCR检测禽流感病毒的初步探讨

real-time RT-PCR检测禽流感病毒的初步探讨

引用

第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

用4个不同亚型的禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6h,12h,24h,48h,72h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene3000实时定量PCR仪对AIV型特异性基因-基质蛋白(M)基因的表达进行检测,试图建立快速检测A型流... 详细信息

用4个不同亚型的禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6h,12h,24h,48h,72h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene3000实时定量PCR仪对AIV型特异性基因-基质蛋白(M)基因的表达进行检测,试图建立快速检测A型流感病毒的real-time RT-PCR方法。结果表明:病毒感染MDCK细胞后6h,12h,24h表达水平很低,而48h和72h表达水平较高;我们建立的M基因的RRT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后6h的这4种流感病毒,比常规RT-PCR方法(只能检测到24h后)更灵敏,而且更廉价。

关键词：禽流感病毒 RT-PCR检测特异性基因基质蛋白基因 MDCK细胞

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禽流感病毒HA基因DNA疫苗诱导SPF鸡 CD8+T淋巴细胞的动态变化

禽流感病毒HA基因DNA疫苗诱导SPF鸡 CD8+T淋巴细胞的动态变化

引用

中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会

作者：张洪波姜永萍王全英赵有淑张平静左青山陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

用表达禽流感血凝素HA抗原的重组质粒pCAGGoptiHA5100μg免疫SPF鸡,用流式细胞仪检测鸡体内CD8+T细胞的动态变化.在一次免疫后,免疫组外周血中CD8+T淋巴细胞的数目逐渐上升,并于第三周达到峰值,CD8+T淋巴细胞的数量在攻毒后第三天迅速上... 详细信息

用表达禽流感血凝素HA抗原的重组质粒pCAGGoptiHA5100μg免疫SPF鸡,用流式细胞仪检测鸡体内CD8+T细胞的动态变化.在一次免疫后,免疫组外周血中CD8+T淋巴细胞的数目逐渐上升,并于第三周达到峰值,CD8+T淋巴细胞的数量在攻毒后第三天迅速上升,在攻毒后的一周内维持在一个较高的水平,并于第二周下降到一个较低的水平.在两次免疫后,SPF鸡体内CD8+T细胞数量上升速率明显高于初免时上升速率并于第二次免疫后两周达到一个峰值,攻毒后,两次免疫的SPF鸡外周血中CD8+T淋巴细胞数量略有上升,但上升幅度不大,两周时检测发现其下降幅度明显低于一次免疫组.而阴性对照组SPF鸡外周血中CD8+T淋巴细胞的数目则无明显变化,但在攻毒后其外周血中CD8+T淋巴细胞数量也呈上升趋势,但未达到免疫组的水平,并且在一周内全部死亡.结果表明,pCAGGoptiHA5DNA疫苗质粒可诱导有效的细胞免疫应答.

关键词：血凝素HA抗原 DNA疫苗 T淋巴细胞禽流感病毒免疫接种动态变化

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H7亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效力研究

H7亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效力研究

引用

第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：姜永萍张洪波张平静王全英于康震田国斌陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室农业部畜牧兽医总站

将表达密码子优化的H7亚型HA基因的DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA7的免疫保护效力进行了评估。首先以100μg、50μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,然后以100μg、50μg和10μg剂量间隔3周加强免疫3周龄SPF鸡,一次免疫后4周、加强免疫后2周用1... 详细信息

将表达密码子优化的H7亚型HA基因的DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA7的免疫保护效力进行了评估。首先以100μg、50μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,然后以100μg、50μg和10μg剂量间隔3周加强免疫3周龄SPF鸡,一次免疫后4周、加强免疫后2周用100LD50的HPAIV A/FPV/Rostock/34(H7N1)[RK/34(H7N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果,pCAGGoptiHA7一次免疫后,100μg、50μg和100μg剂量均可对免疫鸡形成90%的死亡保护;pCAGGoptiHA7加强免疫后, 100μg和50μg剂量可对免疫鸡形成100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),而10μg剂量则可对免疫鸡形成100%的保护(不发病、不致死),但不能完全阻止排毒。结果表明,H7亚型DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA7具有良好的免疫保护性,有望成为预防H7亚型高致病力禽流感的物质技术储备。

关键词：禽流感 H7亚型 DNA疫苗保护效力

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H5亚型禽流感DNA疫苗的实验室研究

H5亚型禽流感DNA疫苗的实验室研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：姜永萍张洪波张平静于康震田国斌陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室农业部畜牧兽医总站

将H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对SPF鸡、商品蛋鸡、鹅和鸭的免疫效力进行了实验室研究。pCAGGoptiHA5以10μg剂量加强免疫3周龄SPF鸡和5周龄商品蛋鸡,加强免疫后2周分别用100LD50的HPAIVA/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[Gs/GD/1/96(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,pCAGGoptiHA5以100μg剂量加强免疫4周龄本地鹅和金定鸭,加强免疫后2周分别用100LD50的HPAIVA/Duck/ShanghaiNanhui/16/2004(H5N1)[DK/SHNH/1604(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,其免疫保护效力通过免疫和攻毒后的HI抗体反应水平、攻毒后的AGP抗体测定、病毒分离与滴定以及对发病率和死亡率的统计等几个方面来综合评价。结果,10μgpCAGGoptiHA5加强免疫可对SPF鸡形成100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),10μg剂量pCAGGoptiHA5加强免疫可对商品蛋鸡形成100%的保护(不发病、不致死),100μgpCAGGoptiHA5加强免疫可对鹅和鸭均形成100%的保护(不发病、不致死)。结果表明,pCAGGoptiHA5作为免疫效果良好、成本低廉的DNA疫苗,有望成为预防H5亚型高致病力禽流感的高效、安全新型基因工程疫苗。

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗免疫效力

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H7亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效力研究

H7亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效力研究

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

将表达密码子优化的H7亚型HA基因的DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA7的免疫保护效力进行了评估。首先以100μg、50μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,然后以100μg、50μg和10μg剂量间隔3周加强免疫3周龄SPF鸡,一次免疫后4周、加强免疫后2周用100LD50的HPAIVA/FPV/Rostock/34(H7N1)[RK/34(H7N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果,pCAGGoptiHA7一次免疫后,100μg、50μg和10μg剂量均可对免疫鸡形成90%的死亡保护;pCAGGoptiHA7加强免疫后,100μg和50μg剂量可对免疫鸡形成100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),而10μg剂量则可对免疫鸡形成100%的保护(不发病、不致死),但不能完全阻止排毒。结果表明,H7亚型DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA7具有良好的免疫保护性,有望成为预防H7亚型高致病力禽流感的物质技术储备。

关键词：禽流感 H7亚型 DNA疫苗保护效力

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H5亚型禽流感DNA疫苗的实验室研究

H5亚型禽流感DNA疫苗的实验室研究

引用

第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

将H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对SPF鸡、商品蛋鸡、鹅和鸭的免疫效力进行了实验室研究。pCAGGoptiHA5以10μg剂量加强免疫3周龄SPF鸡和5周龄商品蛋鸡,加强免疫后2周分别用100LD50的HPAIV A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[Gs/GD/1/96(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,pCAGGoptiHA5以100μg剂量加强免疫4周龄本地鹅和金定鸭,加强免疫后2周分别用100LD50的HPAIVA/Duck/ShanghaiNanhui/16/2004(H5N1)[DK/SHNH/1604(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,其免疫保护效力通过免疫和攻毒后的HI抗体反应水平、攻毒后的AGP抗体测定、病毒分离与滴定以及对发病率和死亡率的统计等几个方面来综合评价。结果,10μg pCAGGoptiHA5加强免疫可对SPF鸡形成100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),10μg剂量pCAGGoptiHA5加强免疫可对商品蛋鸡形成100%的保护(不发病、不致死),100μg pCAGGoptiHA5加强免疫可对鹅和鸭均形成100%的保护(不发病、不致死)。结果表明,pCAGGoptiHA5作为免疫效果良好、成本低廉的DNA疫苗,有望成为预防H5亚型高致病力禽流感的高效、安全新型基因工程疫苗。

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗免疫效力

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检测H1～15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

检测H1～15禽流感病毒亚型的DNA芯片初步研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会

作者：王秀荣于康震刘丽玲乔传玲石锐孙凯孔宪刚陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究.通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒.从重组质粒扩增大约500bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片.待检病毒样品用TrozolLS提取RNA,反转录过... 详细信息

对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究.通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒.从重组质粒扩增大约500bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片.待检病毒样品用TrozolLS提取RNA,反转录过程中用Cy5标记样品cDNAs.将标记样品与芯片杂交,扫描芯片上待检样品与芯片上捕捉探针的结合位点,杂交信号与预期设想一致.结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV血凝素亚型鉴别诊断方法。

关键词：禽流感病毒基因芯片检测血凝素亚型鉴定 RT-PCR 鉴别诊断

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禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗(H5亚型)研究与应用

禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗(H5亚型)研究与应用

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：乔传玲于康震姜永萍李呈军田国彬王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室全国畜牧兽医总站

本研究利用DNA重组技术,以我国H5N1亚型禽流感病毒早期分离株的HA和NA基因为抗原基因供体,以高度成熟安全的鸡痘病毒疫苗株S-FPV-017为载体,构建了一株可共表达HA和NA基因的重组鸡痘病毒疫苗株。经细胞连续传代确证了重组病毒良好的遗... 详细信息

本研究利用DNA重组技术,以我国H5N1亚型禽流感病毒早期分离株的HA和NA基因为抗原基因供体,以高度成熟安全的鸡痘病毒疫苗株S-FPV-017为载体,构建了一株可共表达HA和NA基因的重组鸡痘病毒疫苗株。经细胞连续传代确证了重组病毒良好的遗传稳定性,经鸡体内连续传代证实了其毒力稳定性。大量的实验室研究与现地应用结果表明,该疫苗免疫后对鸡十分安全、无任何不良反应;免疫后1周可诱导免疫效力产生,免疫持续期可达10个月。

关键词：禽流感重组鸡痘病毒疫苗

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不同致病力禽流感病毒的细胞生长特性

不同致病力禽流感病毒的细胞生长特性

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darbycaninekidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特性;同时取这2株不同浓度(10-2～10-7)AIV在MDCK上培养72h的细胞培... 详细信息

究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darbycaninekidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特性;同时取这2株不同浓度(10-2～10-7)AIV在MDCK上培养72h的细胞培养上清0.1mL接种于9～11日龄鸡胚尿囊腔,37℃孵育48h～72h,无菌收获尿囊液,再做红细胞凝集实验.结果显示:这2个亚型AIV感染MDCK细胞后,血凝价(HA)最高为27,表现为较低的红细胞凝集活性,高致病力禽流感病毒(HPAIV)红细胞凝集活性较低致病力禽流感病毒(LPAIV)出现的要早一些;上述2个亚型AIV的MDCK培养上清接种鸡胚48～72h后,HA较高,在25.5～210之间,而且HPAIV-A/Goose/Guangdong/1/96高于LPAIV-A/Turkey/England/N28/73.这2株AIV均可致MDCK细胞发生病变,但病变程度和病变出现的时间不同,A/Goose/Guangdong/1/96[H5N1]感染MDCK细胞后3d可见明显病变,A/Turkey/England/N28/73[H5N2]感染MDCK细胞后4～5d可见明显病变;2个亚型不同浓度(10-2～10-7)AIV的间接免疫荧光结果均为阳性.以上结果表明HPAIV和LPAIV可致MDCK细胞病变,但红细胞凝集活性较低,接种鸡胚后红细胞凝集活性显著提高.

关键词：禽流感病毒 MDCK细胞红细胞凝集活性间接免疫荧光

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