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86 篇 禽流感
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23 篇 h5n1
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18 篇 猪流感
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14 篇 免疫原性
14 篇 基因芯片
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机构

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91 篇 中国农业科学院哈...
77 篇 中国农业科学院哈...
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54 篇 中国农业科学院哈...
33 篇 中国农业科学院哈...
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27 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 农业部畜牧兽医总...
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21 篇 全国畜牧兽医总站
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16 篇 中国农业科学院哈...
16 篇 中国农业科学院哈...
13 篇 新疆农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
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作者

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138 篇 邓国华
91 篇 李雁冰
91 篇 乔传玲
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85 篇 田国彬
84 篇 姜永萍
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79 篇 施建忠
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47 篇 李呈军
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571 篇 中文

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五株H5N1亚型禽流感病毒对小鼠致病性的研究

五株H5N1亚型禽流感病毒对小鼠致病性的研究

引用

第六次人畜共患病学术交流会

作者：朱启运魏建忠李雁冰姜永萍邓国华田国斌陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室(哈尔滨) 安徽农业大学畜牧水产学院(合肥) 安徽农业大学畜牧水产学院(合肥) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室(哈尔滨)

本研究从安徽省的不同地方分离了五株不同宿主来源的禽流感病毒,在农业部动物流感重点开放实验室进行血清学鉴定为H5N1亚型.为了全面了解五株安徽分离株对哺乳动物的潜在危害,进行五株禽流感病毒人工感染BALB/c小鼠的试验,旨在通过本试... 详细信息

本研究从安徽省的不同地方分离了五株不同宿主来源的禽流感病毒,在农业部动物流感重点开放实验室进行血清学鉴定为H5N1亚型.为了全面了解五株安徽分离株对哺乳动物的潜在危害,进行五株禽流感病毒人工感染BALB/c小鼠的试验,旨在通过本试验为进一步研究H5N1亚型禽流感病毒的致病的分子机制和分子生物学特性,以及为新型疫苗的研究提供实验数据.

关键词：禽流感禽流感病毒血清学鉴定分子生物学特性

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用鸡体偏嗜性密码子对H5亚型禽流感病毒HA基因的优化与构建及其DNA疫苗体外表达研究

用鸡体偏嗜性密码子对H5亚型禽流感病毒HA基因的优化与构建及其DN...

引用

中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：姜永萍李呈军张洪波步志高张芳芳于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室农业部畜牧兽医总站中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异。为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD... 详细信息

不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异。为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD,1/96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA,将含有GD/1/96(H5N1)野生型HA基因的质粒pCIHA和pCIoptiHA分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24-48小时293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白;Western-blot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果表明密码子优化的基因optiHA体外瞬时表达水平显著高于野生型HA基因。这一结果为进一步开展SPF鸡免疫保护效果的比较研究奠定了基础。

关键词： HA基因密码子优化重叠延伸PCR 间接免疫荧光 Western blot检测

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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株神经氨酸酶基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株神经氨酸酶基因分子演化的研究

引用

家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕陈化兰杨焕良李泽君于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室华南农业大学动物科学学院

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树。研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸。15株H1N1亚型SIV的N... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树。研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸。15株H1N1亚型SIV的NA蛋白在58、63、68、88、146位都存在糖基化位点;但是,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01在50位存在一糖基化位点,为“-NQS-,其余13株H1N1亚型SIV在50位无糖基化位点,却在44位存在“-NHS-”的糖基化位点;而且,SW/GD/714/01、SW/GD/771/01和其余13株H1N1亚型SIV的NA蛋白头部抗原位点,在328、332、334、339、340位的氨基酸不同;但是,15株H1N1亚型SIV在366位的氨基酸均为N,与所有参考毒株在此位的S不同。经同源性比较结果和进化树分析可见,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01的NA基因明显属于类禽型H1N1猪谱系,其余13株H1N1亚型SIV的NA基因皆属于古典型H1N1猪谱系。

关键词：猪流感病毒神经氨酸酶 H1N1亚型序列分析分子演化

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抗原基因密码子的优化增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果

抗原基因密码子的优化增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果

引用

第六次人畜共患病学术交流会

作者：姜永萍张洪波李呈军张芳芳朱启运邓国华包红梅于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略.鸡与哺乳动物细胞在蛋白翻译过程中具有相同的密码子编嗜性,但与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR... 详细信息

免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略.鸡与哺乳动物细胞在蛋白翻译过程中具有相同的密码子编嗜性,但与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR法及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒***疫苗质粒pCIHA和pCIoptiHA分别围染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24-48小时293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白,结果密码子优化的HA基因表达水平显著高于野生型HA基因.为进一步评估HA基因密码子优化对H5亚型禽流感DNA疫苗免疫效果的影响,表达野生型HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA及pCIoptiHA分析以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后分别用100LD<,50>的HPAIV A/Chicken/LN/45/01(H5N1)[LN/45/01(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化.结果,100μg pCIoptiHA可形成75﹪的免疫保护,100μg pCIHA可形成50﹪的免疫保护;10μg pCIoptiHA可形成对免疫鸡75﹪的部分免疫保护,而10μg pCIHA则基本不能形成免疫保护;pCIoptiHA诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA.试验结果表明,HA基因密码子的优化可显著提高H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果.

关键词：禽流感 DNA疫苗免疫保护免疫原基因免疫反应

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鸡体偏嗜性密码子优化免疫原基因增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果

鸡体偏嗜性密码子优化免疫原基因增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保...

引用

中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：姜永萍张洪波李呈军步志高张芳芳于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室农业部畜牧兽医总站中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR法及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1,96(H5N1)[GD/1,96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动予表达栽体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA。将pCIopfiHA和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白;随之将pCIoptiHA及pCIHA分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果,间接免疫荧光法和Western-blot分析表明密码子优化的HA基因表达水平显著高于野生型HA基因;免疫SPF鸡后,100μg pCIoptiHA可形成75%的免疫保护,100μg pCIHA可形成50%的免疫保护;10μg pCIoptiHA可形成对免疫鸡75%的部分免疫保护,而10μg pCIHA则基本不能形成免疫保护;pCIoptiHA诱导的m抗体水平远远高于pCIHA。试验结果表明,HA基因密码子的优化可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗免疫保护

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一种含氯消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究

一种含氯消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：施建忠田国彬李雁冰冯菊艳陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室国家禽流感参考实验室(黑龙江哈尔滨)

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法,研究新型含氯消毒剂在不同浓度下,分别与禽流感H5N1和H9N2亚型病毒作用5分钟、10分钟对禽流感病毒的杀灭作用.结果显示,该含氯消毒剂在1:8000以下的浓度范围内,对病毒的杀灭率可达到99.9﹪以上... 详细信息

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法,研究新型含氯消毒剂在不同浓度下,分别与禽流感H5N1和H9N2亚型病毒作用5分钟、10分钟对禽流感病毒的杀灭作用.结果显示,该含氯消毒剂在1:8000以下的浓度范围内,对病毒的杀灭率可达到99.9﹪以上.虽然该消毒剂有较好的杀毒效果,但在应用中应考虑其影响因素的影响,因此,我们推荐该消毒剂的使用工作浓度为100﹪杀灭病毒的稀释度,即1:6000.这将为其临床应用提供依据,对环境消毒和防止禽流感暴发具有参考价值.

关键词：消毒剂悬浮杀灭试验禽流感病毒含氯消毒剂环境消毒

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遗传重组高繁殖力疫苗株H5N2(H5/PR8)病毒的构建和鉴定

遗传重组高繁殖力疫苗株H5N2(H5/PR8)病毒的构建和鉴定

引用

中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：施建忠田国彬李雁冰陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室国家禽流感参考实验室(黑龙江哈尔滨)

作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现用的A/pheasant/NewJersey/1355/98(H5N2)疫苗株,血凝价2,生长滴度较差.本研究利用自然重组法,预制备一株高繁殖力的预备疫苗株,使它的表面基因... 详细信息

作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现用的A/pheasant/NewJersey/1355/98(H5N2)疫苗株,血凝价2<'8>,生长滴度较差.本研究利用自然重组法,预制备一株高繁殖力的预备疫苗株,使它的表面基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)来源于A/pheasant/NewJersey/1355/98(H5N2)毒株,并使其保持原有的良好的免疫原性,内部基因来源于流感病毒PR8,A/Puerto Rico/8/34(H1N1)毒株,并使其重组病毒赋有了流感病毒PR8高繁殖力的特性.实验结果表明,已获得一株高繁殖力的重组流感病毒H5/PR8,血凝价达到2<'11>,生长繁殖特性明显增强.抗原性分析显示,H5/PR8重组病毒与亲本毒株H5N2抗原性无明显差异;致病性分析发现,H5/PR8重组病毒的致病能力较亲本毒株H5N2有明显下降.这为疫苗株的改良奠定了坚实的基础,对禽流感灭活疫苗的生产具有重大意义.

关键词：禽流感病毒 H5N2亚型疫苗株抗原性致病性重组病毒

来源：评论

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一种含碘消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究

一种含碘消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：施建忠田国彬李雁冰陈化兰冯菊艳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室国家禽流感参考实验室(黑龙江哈尔滨)

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法,研究新型含碘消毒剂在不同浓度下,分别与禽流感H5N1和H9N2亚型病毒作用5分钟、10分钟对禽流感病毒的杀灭作用.结果显示,该含碘消毒剂在1:1600以下的浓度范围内,对病毒的杀灭率可达到99.9﹪以上... 详细信息

采用Klein-Defors悬浮杀灭与感染试验方法,研究新型含碘消毒剂在不同浓度下,分别与禽流感H5N1和H9N2亚型病毒作用5分钟、10分钟对禽流感病毒的杀灭作用.结果显示,该含碘消毒剂在1:1600以下的浓度范围内,对病毒的杀灭率可达到99.9﹪以上.虽然该消毒剂有较好的杀毒效果,但在应用中应考虑其影响因素的影响,因此,我们推荐该消毒剂的使用工作浓度为100﹪杀灭病毒的稀释度,即1:1200.这将为其临床应用提供依据,对环境消毒和防止禽流感暴发具有参考价值.

关键词：消毒剂悬浮杀灭试验禽流感病毒杀毒效果环境消毒

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重组高繁殖力疫苗株H7N2(H7/PR8)病毒的制备和鉴定

重组高繁殖力疫苗株H7N2(H7/PR8)病毒的制备和鉴定

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：施建忠田国彬李雁冰辛颖陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室国家禽流感参考实验室(黑龙江哈尔滨)

作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现有的HB7疫苗株,血凝价2,生长滴度较差.本研究利用自然重组法,制造一株高繁殖力的预备疫苗株,它的表面基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)来源于HB7毒... 详细信息

作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现有的HB7疫苗株,血凝价2<'8>,生长滴度较差.本研究利用自然重组法,制造一株高繁殖力的预备疫苗株,它的表面基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)来源于HB7毒株,使其保持原有的良好的免疫原性,内部基因来源于流感病毒PR8,A/Puerto Rico/8/34(H1N1)毒株,使其重组病毒赋有了流感病毒PR8高繁殖力的特性.试验结果表明,已获得两株高繁殖力的重组流感病毒H7/PR8,血凝价达到2<'11>和2<'11>,生长繁殖特性明显增强.抗原性分析显示,两株H7/PR8重组病毒与亲本毒株HB7抗原性无明显差异;致病性分析发现,两株H7/PR8重组病毒的致病能力都较亲本毒株HB7有明显下降;用两株H7/PR8重组病毒制备的灭活疫苗诱导的免疫抗体能完全抵抗H7亚型FPV强毒的攻击,并使感染鸡不向体外排毒.这为疫苗株的改良奠定了坚实的基础,对禽流感灭活疫苗的生产具有重大意义.

关键词：流感病毒 H7N2亚型 PR8 禽流感疫苗株免疫原性自然重组法神经氨酸酶禽流感灭活疫苗

来源：评论

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猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01分离株神经氨酸酶基因的克隆及真核表达

猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01分离株神经氨酸酶基因...

引用

家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：赵朴李海燕杨焕良陈化兰于康震卢中华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放实验室河南农业大学牧医工程学院

根据GenBank中登录的猪流感病毒参照序列设计了扩增神经氨酸酶(NA)基因的特异性引物。从猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01(H3N2)株感染的鸡胚液中直接提取病毒RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T载体上,进行序列测定和拼接。... 详细信息

根据GenBank中登录的猪流感病毒参照序列设计了扩增神经氨酸酶(NA)基因的特异性引物。从猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01(H3N2)株感染的鸡胚液中直接提取病毒RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T载体上,进行序列测定和拼接。用HindⅢ酶切后,亚克隆到杆状病毒转移载体pMclBacB上,得到重组转移载体pMelBacNA,然后与线性化杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染于sf9昆虫细胞。经3轮噬斑纯化,提取其DNA经PCR鉴定,获得重组杆状病毒株。SDS-PAGE结果显示,目的基因已获得表达,Western blot和神经氨酸酶活性检测结果显示表达产物具有良好的免疫原性和神经氨酸酶活性,为SIV亚单位疫苗和NA基因的深入研究奠定了基础。

关键词：猪流感病毒神经氨酸酶基因克隆重组杆状病毒表达

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