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中国兽医学报 2001年第1期21卷 103-106页

作者：于康震付朝阳崔尚金步志高唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式... 详细信息

行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,被国际兽疫局定为A类传染病,并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单.禽流感可表现为亚临床、轻度呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死性疾病等多种形式.世界各地历次由特定毒株引起的禽流感的暴发和流行,均招致禽只的大量死亡和生产性能急剧下降,造成了巨大的经济损失[1].1997年香港H5N1和1999年内地和香港H9N2禽流感感染人事件的发生,更突出地显示了禽流感的公共卫生意义.

关键词：禽流行性感冒流行病学诊断技术疫苗防制中国

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禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建

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中国兽医学报 2003年第2期23卷 111-114页

作者：乔传玲于康震邓国华王秀荣孟庆文田国斌唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001

采用 RT- PCR技术扩增了禽流感病毒 A/ Guangdong/ 3/ 96 (H5 N1) [GD3/ 96 ]神经氨酸酶 (NA)基因 ,并将其克隆到 p UC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为 :NA基因全长为 14 10 bp,共编码 4 6 9个氨基酸。从 p UCNA中切下 NA基因片... 详细信息

采用 RT- PCR技术扩增了禽流感病毒 A/ Guangdong/ 3/ 96 (H5 N1) [GD3/ 96 ]神经氨酸酶 (NA)基因 ,并将其克隆到 p UC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为 :NA基因全长为 14 10 bp,共编码 4 6 9个氨基酸。从 p UCNA中切下 NA基因片段 ,将其亚克隆到质粒 p SY5 38的 Eco R 位点 ,将带有痘苗病毒启动子 P11的 L ac Z基因平端克隆到该质粒的 Sm a 位点 ,然后切下同时含有 NA及 L ac Z基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体 p SY6 81的 Not 位点 ,经限制性内切酶分析、PCR鉴定等 ,证明含有禽流感病毒 NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功 ,从而为进一步筛选表达 NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性奠定了实验基础。

关键词：转移载体禽流感病毒神经氨酸酶基因重组禽痘病毒基因克隆

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禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析

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中国预防兽医学报 2000年第3期22卷 232-235页

作者：张建林于康震陈化兰唐秀英田国斌中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心哈尔滨150001

本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定... 详细信息

本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明 ,所扩增到的 8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。GD1/96株与 1997年香港禽流感事件中的 4株香港流感病毒分离株 (分别来自人、鸡、鸭和鹅 )的HA基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系 ,但NS基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。GD1/96株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低 ( 6 3.9%～ 98.1%) ,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高 ( 96 .5 %～ 10 0 %) ,且香港各流感病毒分离株的NA均缺失 5 7个核苷酸 ( 19个氨基酸 )残基。因此 ,内地H5N1分离株GD1/96与

关键词：禽流感病毒分离株全基因克隆序列分析

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禽流感病毒重组核蛋白在琼扩诊断中的应用

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中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 25-27页

作者：邓国华邓国华唐秀英田国彬于康震于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心哈尔滨150001

利用杆状病毒表达禽流感病毒型特异性抗原－核蛋白，并就重组核蛋白作为禽流感琼扩诊断抗原地特异性和敏感性及作为抗原的其它特性进行了研究，并与普通全病毒琼扩抗原进行了应用比较试验，对３５４份现地可疑血清样品进行了检测，结果... 详细信息

利用杆状病毒表达禽流感病毒型特异性抗原－核蛋白，并就重组核蛋白作为禽流感琼扩诊断抗原地特异性和敏感性及作为抗原的其它特性进行了研究，并与普通全病毒琼扩抗原进行了应用比较试验，对３５４份现地可疑血清样品进行了检测，结果表明：该抗原可以特异性地定性检测出所有１５个禽流感病毒亚型的抗血清，与普通全病毒琼扩抗原的检测结果一致，但沉淀线更细密、清晰，保存方便；与我国广泛流行的１５种禽类其它病原体的抗血清没有任何交叉反应，表明该重组核蛋白作为禽流感琼扩抗原特异、敏感、生物安全性更可靠和生产成本更低廉，有利于进一步扩大禽流感疫情调查范围和加大监测力度。

关键词：重组核蛋白琼扩抗原检测

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表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究

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中国农业科学 2003年第6期36卷 704-708页

作者：乔传玲于康震姜永萍张建林邓国华孟庆文田国斌唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感研究中心农业部动物流感研究中心农业部动物流感研究中心哈尔滨150001 农业部动物流感研究中心哈尔滨150001现在农业部畜牧兽医局工作

从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克... 详细信息

从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。

关键词：禽流感病毒重组禽痘病毒核蛋白基因免疫保护性

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禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因克隆及序列分析

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 100-103页

作者：乔传玲于康震孟庆文邓国华田国斌唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感诊断与监测中心黑龙江哈尔滨150001

采用RT_PCR技术扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/ 3/ 96 (H5N1) (GD3/ 96 )NA基因 ,并对其进行了克隆与测序 ,该苷酸序列测定结果表明 :NA基因全长为 1410bp ,共编码 46 9个氨基酸。其序列与A/Hongkong/ 15 6 / 97(H5N1)、A/Chicken/... 详细信息

采用RT_PCR技术扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/ 3/ 96 (H5N1) (GD3/ 96 )NA基因 ,并对其进行了克隆与测序 ,该苷酸序列测定结果表明 :NA基因全长为 1410bp ,共编码 46 9个氨基酸。其序列与A/Hongkong/ 15 6 / 97(H5N1)、A/Chicken/HongKong/ 2 2 0 / 97(H5N1)、A/Goose/Guangdong/ 1/ 96 (H5N1)及A/teal/Hongkong/W312 / 97(H6N1)分离株核苷酸序列的同源性在88.4%～ 99.0 %之间 ,其相应氨基酸序列的同源性在 89.8%～ 99.2 %之间。氨基酸序列与香港流感分离株氨基酸序列相比 ,在茎部没有出现 19个氨基酸残基的缺失。

关键词：禽流感病毒 A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1) NA 序列分析神经氨酸酶基因

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禽流感重组禽痘病毒rFPV-HA-NA活载体疫苗的研究

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免疫学杂志 2003年第1期19卷 46-49页

作者：乔传玲姜永萍李呈军田国斌孟庆文邓国华王秀荣于康震唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨兽医研究所动物流感中心黑龙江哈尔滨150001

目的　确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法　用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果　大约含 1... 详细信息

目的　确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法　用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果　大约含 10 0个PFU的重组病毒即能使机体获得对强毒攻击的 10 0 %保护 ;对 1日龄SPF鸡进行免疫接种 ,4周后能 10 0 %抵抗HPAIV的致死性攻击 ;2周和 3周龄的免疫鸡对免疫周 1后的强毒攻击具有 10 0 %的保护力 ;重组病毒在免疫后10个月时 ,其诱导产生的血凝抑制 (Haemagglutinininhibition ,HI)抗体仍保持在 2～ 3log2水平 ,并可以提供 10 0 %抵抗病毒的致死性感染。结论　重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗是一种安全、高效的基因工程疫苗。

关键词：禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫学

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鹅和番鸭细小病毒全基因克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2008年第6期30卷 415-419页

作者：张云耿宏伟郭东春胡奇林相文华刘明杨涛林巍中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽病室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感参考实验室黑龙江哈尔滨150001

本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因(NS)全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因(VP)全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明:鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别... 详细信息

本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因(NS)全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因(VP)全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明:鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为80.9%～82.9%和89.5%～91.2%,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为93.7%～99.8%和96.8%～99.7%,番鸭细小病毒之间的同源性为98.8%～99.8%和98.6%～99.5%;在核苷酸和氨基酸水平上,鹅和番鸭细小病毒VP1之间的同源性分别为79.7%～88.7%和85.5%～93.3%,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为88.8%～99.6%和91.5%～99.2%,番鸭细小病毒之间的同源性为98.1%～99.6%和97.1%～98.8%;番鸭和鹅细小病毒NS和vp1基因的系统进化树分析表明:番鸭和鹅呼细小病毒来自共同的祖先,但随着宿主的不同而演化为不同的分支。

关键词：鹅细小病毒番鸭细小病毒 NS基因 vp1基因序列分析

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一株鹅源H5N2亚型高致病性禽流感病毒的分离鉴定及生物学特性分析

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生物化学与生物物理进展 2009年第1期36卷 65-71页

作者：刘春国刘明张云刘大飞潘蔚绮孙恩成杜金玲李洪涛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感中心及国家禽流感参考实验室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病实验室哈尔滨150001 中国科学院广州生物医药与健康研究院广州510663 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 东北农业大学动物医学院哈尔滨150030

分离到一株鹅源H5N2亚型高致病性禽流感病毒,SPF鸡静脉接种致病指数为2.99,但鸭子对该病毒不敏感.病毒感染小鼠后不致病,但能够在肺内有效复制,表明其具有感染哺乳动物的潜在风险.血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白裂解位点上插入有多个连... 详细信息

分离到一株鹅源H5N2亚型高致病性禽流感病毒,SPF鸡静脉接种致病指数为2.99,但鸭子对该病毒不敏感.病毒感染小鼠后不致病,但能够在肺内有效复制,表明其具有感染哺乳动物的潜在风险.血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白裂解位点上插入有多个连续的碱性氨基酸(-RRRKKR-),从分子上证实这是一株高致病性禽流感病毒.核酸序列比较分析表明,分离的流感病毒HA基因与A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)同源率达到99.4%,神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因与A/chicken/Jilin/53/01(H9N2)同源率达到99.8%;氨基酸水平上,HA与2004年分离到的A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)、A/swan/Guangxi/307/2004(H5N1)、A/wildduck/Guangdong/314/2004(H5N1)和A/chicken/Henan/210/2004(H5N1)同源率均为99.3%,NA与A/chicken/Jilin/53/01(H9N2)同源率为99.6%.进化树分析结果表明,该流感病毒分离株可能是由H5N1和H9N2两个亚型病毒重排而来.

关键词：鹅禽流感病毒 H5N2亚型致病性序列分析

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猪流感的世界流行及公共卫生

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黑龙江畜牧兽医 2002年第12期 48-49页

作者：李海燕于康震辛晓光杨焕良毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心黑龙江哈尔滨150001 华南农业大学动物科学系家禽研究室广东广州510642

猪流感(Swine Influenza,SI)是由正黏病毒科猪流感病毒(SIV)引起的一种急性高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病,临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征,单纯SI的病理变化主要表现为病毒性肺炎及其他呼吸... 详细信息

猪流感(Swine Influenza,SI)是由正黏病毒科猪流感病毒(SIV)引起的一种急性高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病,临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征,单纯SI的病理变化主要表现为病毒性肺炎及其他呼吸器官的炎性变化,有其他病原继发或混合感染时,病理变化会严重而复杂.目前已发现的SIV至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N2、H3N6、H4N6、H9N2 7种不同血清亚型,广泛流行于猪群中的主要有古典型猪H1N1、类禽型H1N1和类人型H3N2毒株.

关键词：流行病学猪流感世界公共卫生

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