检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2006年第11期36卷 880-884页

作者：谭斌刘长明危艳武张超范刘永刚冉多良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院新疆乌鲁木齐830052

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比... 详细信息

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比较。结果显示，用该试剂盒检测PRRSV人工接种猪血清样品，第1周抗体阳性检出率为50％，从第2周起抗体阳性检出率均为100％，而对照组猪血清抗体检测均为阴性。该试剂盒重复性好，-20℃保存18个月稳定，与其他病毒参考血清无交叉反应，与国外IDEXX ELISA试剂盒的符合率为83．3%。用该试剂盒对采自黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场的520份正常猪血清样品进行了抗体检测，结果，4个猪场阳性率高达90％以上，仅有2个猪场为阴性，其余猪场阳性率为10％～57%。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒免疫过氧化物酶单层细胞试验

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鹅细小病毒vp基因片段的原核表达及抗血清的制备

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中国病毒学 2006年第6期21卷 581-584页

作者：卲昱昊王静王懂帅韩宗玺刘胜旺冉多良孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 甘肃省商业科技研究院甘肃兰州730020 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-... 详细信息

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-30a,阳性重组质粒经确证性序列测定,证明外源片断插入到pET-30a的预期位置。将其转入大肠杆菌BL21,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE表明外源基因获得表达,融合蛋白分子量约为34kDa。将诱导后的工程菌用6mol/L盐酸胍裂解,经超声处理后离心,利用镍离子亲和树脂对裂解产物的上清进行纯化。用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备兔抗该融合蛋白的抗血清。Westernblotting结果表明制备的兔抗血清与该融合蛋白及亲本病毒的结构蛋白都具有反应性。结合前期工作进展对GPVVP蛋白的B细胞线性抗原表位进行定位。

关键词：鹅细小病毒 vp基因片断原核表达抗血清

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利用噬菌体随机肽库筛选传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位

利用噬菌体随机肽库筛选传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位

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2006中国科协年会

作者：邓小芸高玉龙高宏雷祁小乐程宇王晓艳王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官——法氏囊为主要特征的传染病。IBDV属双RNA 病毒科,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码5... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官——法氏囊为主要特征的传染病。IBDV属双RNA 病毒科,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码5种病毒蛋白:VP1、VP2、VP3、VP4和VP5。VP1由B节段编码,具有依赖RNA的RNA聚合酶活性。其他4种病毒蛋白由A节段编码,VP4为病毒自身蛋白酶,VP5的功能尚不明确,VP2和VP3是病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳。虽然VP2是IBDV主要的毒力基因,也是构象表位的集中区,但越来越多的证据佐证了VP3也是IBDV重要的毒力

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP3 抗原表位噬菌体随机15肽库

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传染性法氏囊病病毒超强毒株Gx与致弱株Gt多聚蛋白的原核表达

传染性法氏囊病病毒超强毒株Gx与致弱株Gt多聚蛋白的原核表达

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2006中国科协年会

作者：高宏雷高玉龙李俊山张宁王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,单层衣壳,无囊膜,呈20面体立体对称,其直径55～65 nm。IBDV的基因组由A、B两个片段的双链RNA组成,基因组中小片段(B)编码VP1,大片段(A)编码两... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,单层衣壳,无囊膜,呈20面体立体对称,其直径55～65 nm。IBDV的基因组由A、B两个片段的双链RNA组成,基因组中小片段(B)编码VP1,大片段(A)编码两个开放阅读框,大阅读框编码病毒蛋白前体NH2—VPX—VP4—VP3—COOH,本文写为VP243,VPX进一步加工为VP2,VPX、VP2和VP3形成病毒衣壳。小阅读框编码非结构蛋白VP5。VP1是病毒RNA聚合酶,VP2和VP3是IB-

关键词：传染性法氏囊病病毒多聚蛋白表达

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传染性法氏囊病病毒非结构蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

传染性法氏囊病病毒非结构蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

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2006中国科协年会

作者：张宁高宏雷高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、病毒性的传染病,尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞,法氏囊是受影响最大组织。IBD能... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、病毒性的传染病,尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞,法氏囊是受影响最大组织。IBD能引起雏鸡严重的、长期的免疫抑制及多种疫苗的免疫失败,增加病原体感染的易感性,降低幸存鸡的生长率,是目前影响世界养禽业中的一种非常重要的疾病。IBDV是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Bironviridae)禽双RNA病毒属(Avibincvirus),其基因组由A、B两个节段组成,B节段(约2.8kb)编码VP1蛋白,为RNA依赖的RNA聚合酶。A节段

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP5 克隆表达多克隆抗体

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

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广西农业生物科学 2006年第B09期25卷 97-102页

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD 4+和CD 8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异。用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30%(3/10),死亡率为10%(1/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为40%(4/10)。体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白

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鸡胚成纤维细胞cDNA文库的构建

鸡胚成纤维细胞cDNA文库的构建

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2006中国科协年会

作者：刘伟高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、免疫抑制性传染病。该病由Cosgrove于1962年作为一种新的疾病首次报道,到了20世纪80年代末90年代初,病死率大大提高(80%左右)。该病以大面积流... 详细信息

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、免疫抑制性传染病。该病由Cosgrove于1962年作为一种新的疾病首次报道,到了20世纪80年代末90年代初,病死率大大提高(80%左右)。该病以大面积流行于欧洲、东南亚、非洲、南美洲等。我国的流行情况也十分复杂,变异株和超强毒株均有报道。鸡传染性法氏囊病毒属双RNA病毒科(Birnaviridaefamily), 无囊膜,基因组由A、B两个双链RNA节段组成。A节段(约3200bp)编码区含有两个开放阅读框,小ORF-2在前,编码对病毒复制费必须的结构蛋白VP5;大ORF-1在后,编码VP2-4-3。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 鸡胚成纤堆细胞 cDNA文库克隆技术

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抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

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2006中国科协年会

作者：程宇王笑梅高玉龙高宏雷付朝阳简子健中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室新疆农业大学动物医学院

鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科(Birnaviridae), 禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组包括A、B两个节段,主要结构功能蛋白为VP2和VP3,VP2是其主要的保护性抗原,VP3含群特异性的线性依赖性抗原表位,只能诱导产生微弱的中和性抗体。IBD是一种危害鸡的急性、高度接触性、高死亡率的传染病,感染IBD后能致使其他鸡病疫苗免疫失败,继发或并发细菌病或病毒病的感染,从而造成养鸡业的严重经济损失。此外,IBDV基因组还在不断变异,使得研究者们对其倍加关注,从而更有效地防控该病。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 单克隆抗体(McAb) 抗原表位

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猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展

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动物医学进展 2006年第10期27卷 11-14页

作者：孙东波冯力时洪艳陈建飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得... 详细信息

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。

关键词：猪流行性腹泻病毒分子生物学分子结构特征病原学血清学诊断技术体液免疫

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鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：祁小乐高玉龙高宏雷邓小芸张宁王晓艳王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变...

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变,其中有约37.67%的核苷酸突变发生在VP2,这些突变又主要集中在高变区,占VP2突变总数的58.18%。非编码区相对保守,5’非编码区的前44个核苷酸以及3,非编码区的后36个核苷酸均没有发生突变。Gt与Gx相比,VP2蛋白氨基酸有11处突变,有90.91%（10/11）集中在高变区,第一亲水区1个,七肽区1个,其中Q253H、D279N、A284T和S330R等突变被认为与IBDV超强毒致弱紧密相关。为了进一步研究IBDV的基因功能,本研究在IBDV Gt株全基因组中引入分子标签（A节段:EcoRV酶切位点;B节段:PstI酶切位点）。在基因组两端分别引入锤头状核酶结构（HamRz）和丁肝病毒核酶结构（HdvRz）。将带有分子标签和核酶结构的IBDV基因组插入载体pCAGGS的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtAHRT和pCAGGmGtBHRT,该感染性克隆共转染可高效感染DFⅠ细胞,RT-PCR、间接免疫荧光、电镜检查均显示拯救出了IBDV,且存在分子标签。拯救毒可在CEF上产生CPE,且TCID与Gt毒差异不显著。该感染性克隆转染Vero/E6和Vero/P12,也能成功拯救IBDV。IBDV感染性分子克隆的成功构建为从分子水平上深入研究该病毒的基因功能奠定了基础。

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