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第十三届中国实验动物科学年会

作者：王瑞琪廉传江易诚韩凌霞杨春文陈洪岩牡丹江师范学院生命科学与技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物与比较医学团队

目的在前期高通量测序分析的基础上,本实验进一步利用荧光定量PCR验证miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病(MD)抗性(B21单倍型)与易感(B19单倍型)鸡法氏囊组织的差异表达情况,为进一步探讨它们可能与MD抗性/易感性相关的分子机制研究... 详细信息

目的在前期高通量测序分析的基础上,本实验进一步利用荧光定量PCR验证miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病(MD)抗性(B21单倍型)与易感(B19单倍型)鸡法氏囊组织的差异表达情况,为进一步探讨它们可能与MD抗性/易感性相关的分子机制研究奠定基础。方法通过经优化后确定的最佳实时荧光定量PCR反应体系和扩增条件,进行荧光定量PCR分析。结果 miR-200b-3p和miR-200b-5p荧光定量PCR结果与高通量测序结果上下调情况基本一致,但差异表达显著性分析结果却不完全相同。结论尽管差异表达显著性分析结果不完全一致,但两种方法的结果均提示来源于同一前体的miR-200b-3p和miR-200b-5p可能与MD抗性/易感性相关。

关键词： miR-200b 马立克氏病(MD) 抗性/易感性高通量测序荧光定量PCR

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SPF鸡不同生长阶段粪便菌群组成及多样性研究

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实验动物与比较医学 2017年第3期37卷 231-239页

作者：周妍刁晨曦张圆圆于海波陆涛峰赵丽丽陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室实验动物与比较医学创新团队哈尔滨150069 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 牡丹江师范学院生命科学与技术学院牡丹江157011

目的提供SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便,利用Illumina HiSeq 2500高通量测序方法,对样品16S rRNA的两个高变区(V3-V4)进行测序分析,并进行了α-多样性指数、β-多样... 详细信息

目的提供SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便,利用Illumina HiSeq 2500高通量测序方法,对样品16S rRNA的两个高变区(V3-V4)进行测序分析,并进行了α-多样性指数、β-多样性指数和粪便群落特征分析。结果四个生长阶段粪便样品菌群具有相似的较高的丰富度和良好的均匀度,物种多样性无显著差异(P>0.05);厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度占95%以上;乳杆菌属(Lactobacillus)、链球菌属(Streptococcus)、拟杆菌属(Bacteroides)、肠球菌属(Enterococcus)为优势菌属,不同时期丰度差异达显著水平(P<0.05)。结论四个生长阶段菌群组成多样,且优势菌群主要为有益菌。该实验结果能够为SPF鸡品质评定、健康监测和安全性评价提供依据。

关键词： SPF鸡不同生长阶段粪便菌群 16s rRNA Illumina HiSeq 2500高通量测序

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鸡gga-miR-21-5p靶向调控SATB1基因及其对马立克氏病肿瘤细胞增殖与迁移的影响

鸡gga-miR-21-5p靶向调控SATB1基因及其对马立克氏病肿瘤细胞增殖...

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第八届北京实验动物科学国际论坛

作者：易诚廉传江王瑞琪韩凌霞杨春文陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150069 牡丹江师范学院生命科学与技术学院牡丹江157011 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室/实验动物与比较医学团队哈尔滨150069 牡丹江师范学院生命科学与技术学院牡丹江157011

研究背景：马立克氏病（MD) 是由马立克氏病病毒（MDV) 引起的一种高度传染的病毒性肿瘤疾病，对养禽业造成巨大经济损失。不同品种（系）鸡对MD具有不同的抗性，遗传抗性较强的鸡可能会长期停留在潜伏感染阶段，经历短暂的晚期溶细胞... 详细信息

研究背景：马立克氏病（MD) 是由马立克氏病病毒（MDV) 引起的一种高度传染的病毒性肿瘤疾病，对养禽业造成巨大经济损失。不同品种（系）鸡对MD具有不同的抗性，遗传抗性较强的鸡可能会长期停留在潜伏感染阶段，经历短暂的晚期溶细胞感染后形成肿瘤，而易感鸡体内病毒不断增殖，未出现肿瘤即早期死亡，造成抗性鸡与易感鸡肿瘤形成差异的分子调控机制至今并未阐明。

关键词： gga-miR-21-5p SATB1 马立克氏病肿瘤增殖迁移

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SPF鸡不同生长阶段粪便菌群组成及多样性研究

SPF鸡不同生长阶段粪便菌群组成及多样性研究

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第八届北京实验动物科学国际论坛

作者：周妍刁晨曦张圆圆于海波陆涛峰赵丽丽陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验哈尔滨150069 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验哈尔滨150069 牡丹江师范学院生命科学与技术学院黑龙江牡丹江157011 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验哈尔滨150069

目的:提供健康SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法:采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便，利用Illumina HiSeq2500高通量测序方法，对样品16S rRNA基因的两个高变区（V3-V4)进行测序分析，并进行了α-多... 详细信息

目的:提供健康SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法:采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便，利用Illumina HiSeq2500高通量测序方法，对样品16S rRNA基因的两个高变区（V3-V4)进行测序分析，并进行了α-多样性指数、β-多样性指数和粪便群落特征分析。结果:四个生长阶段粪便样品菌群具有相似的较高的丰富度和良好的均匀度，物种多样性无显著差异（P＞0.05);厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门（Bacteroidetes)丰度占95％以上;乳杆菌属(Lactobacillus)、链球菌属（Streptococcus)、拟杆菌属(Bacteroides)、肠球菌属(Enterococcus)为优势菌属，不同时期丰度差异达显著水平（P＜0.05)。结论:四个生长阶段菌群组成多样，且优势菌群主要为有益菌。该实验结果能够为SPF鸡品质评定、健康监测和安全性评价提供依据。

关键词：实验用鸡肠道菌群物种多样性品质评定健康监测安全性

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应用PCR方法快速鉴定SPF金定鸭性别

应用PCR方法快速鉴定SPF金定鸭性别

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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会

作者：徐丽晶孙畅陆涛峰陈洪岩赵丽丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室东北农业大学生命科学学院

目的利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别。方法根据已有的报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD。采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增。通过分析PCR扩增产物... 详细信息

目的利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别。方法根据已有的报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD。采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增。通过分析PCR扩增产物凝胶电泳后的条带数判定禽类性别。结果 PCR扩增产物经琼脂糖电泳分析后,雌性鸭样品扩增出CHD1-Z和CHD1-W,而雄性鸭样品只扩增出CHD1-Z。结论这种PCR方法可作为SPF动物育种过程中有效的鉴定方法。

关键词： SPF金定鸭性别鉴定 PCR

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鸭肠炎病毒感染DEF细胞诱导干扰素γ上调表达

鸭肠炎病毒感染DEF细胞诱导干扰素γ上调表达

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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会

作者：李思琪尹海畅陈洪岩赵丽丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室牡丹江师范学院生命科学与技术学院

鸭肠炎病毒(DEV)传播速度快,发病率和死亡率均较高,严重的影响了国内水禽业的发展。干扰素(IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子。且有关感染DEV的细胞与干扰素γ的关系鲜少见报道。本研究中,分别... 详细信息

鸭肠炎病毒(DEV)传播速度快,发病率和死亡率均较高,严重的影响了国内水禽业的发展。干扰素(IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子。且有关感染DEV的细胞与干扰素γ的关系鲜少见报道。本研究中,分别提取感染DEV后24h、36h、48h、60h的DEF细胞总RNA,进行反转录后,采用荧光定量PCR的方法,检测鸭IFNγ及干扰素刺激因子的表达量变化情况。结果显示:鸭IFNγ及干扰素刺激因子Mx、DDX50、OASI在mRNA水平上调。实验表明,DEV感染DEF细胞能够诱导鸭IFNγ产生及其相关信号通路的激活。本研究为进一步探索DEV感染DEF细胞激活Ⅱ型干扰素的机制提供理论基础,进而为水禽病的防控、净化提供思路。

关键词：鸭肠炎病毒鸭胚成纤维细胞干扰素干扰素刺激因子上调表达

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玉米赤霉烯酮检测方法的研究进展

玉米赤霉烯酮检测方法的研究进展

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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会

作者：刁晨曦张圆圆周妍陆涛峰陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队牡丹江师范学院生命科学与技术学院东北农业大学生命科学学院

玉米赤霉烯酮是由镰刀菌产生的类雌激素样真菌毒素。本文结合了国内外的最新研究成果,对玉米赤霉烯酮的检测方法及研究进展进行了综述,为真菌毒素如玉米赤霉烯酮的检测方法的探索起到重要作用。

关键词：玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

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SPF鸡不同生长阶段粪便菌群组成及多样性研究

SPF鸡不同生长阶段粪便菌群组成及多样性研究

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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会

作者：周妍刁晨曦张圆圆于海波陆涛峰赵丽丽陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室实验动物与比较创新团队东北农业大学生命科学学院牡丹江师范学院生命科学与技术学院

目的提供SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便,利用IlluminaHiSeq2500高通量测序方法,对样品16S rRNA的两个高变区(V3-V4)进行测序分析,并进行了α多样性指数、β多样性指... 详细信息

目的提供SPF鸡不同生长阶段肠道菌群的组成及多样性数据。方法采集10日龄、12周龄、23周龄和52周龄SPF鸡粪便,利用IlluminaHiSeq2500高通量测序方法,对样品16S rRNA的两个高变区(V3-V4)进行测序分析,并进行了α多样性指数、β多样性指数和粪便群落特征分析。结果四个生长阶段粪便样品菌群具有相似的较高的丰富度和良好的均匀度,物种多样性无显著差异(P>0.05);厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度占95%以上;乳杆菌属(上actobacillus)、链球菌属(Streptococcus)、拟杆菌属(Bacteroides)、肠球菌属(Enterococcus)为优势菌属,不同时期丰度差异达显著水平(P<0.05)。结论四个生长阶段菌群组成多样,且优势菌群主要为有益菌。该实验结果能够为SPF鸡品质评定、健康监测和安全性评价提供依据。

关键词： SPF鸡不同生长阶段粪便菌群 16s rRNA Illumina HiSeq 2500高通量测序

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常州市金坛区畜禽免疫抗体监测的情况分析

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第12期 130-132页

作者：蔡文博吴少莲徐荣军陆则基周娟杨文卫韩凌霞陈洪岩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物与比较医学团队/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 常州市金坛区动物疫病预防控制中心江苏常州213200

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清... 详细信息

为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清样品进行O型、亚洲Ⅰ型FMD和小反刍兽疫(PPR)的抗体检测;利用血凝抑制试验(HI)对采集的933份鸡血清样品进行高致病性禽流感(HPAI)、新城疫(ND)的抗体检测。结果表明:HPAI、ND、HP-PRRS免疫效果最好,平均免疫抗体合格率基本达到100%;HP-PRRS平均免疫抗体合格率超过99%;PPR、CSF、猪FMD免疫效果较好,平均免疫抗体合格率分别为93.33%、88.84%、88.84%;羊FMD免疫效果良好,O型和亚洲Ⅰ型FMD平均免疫抗体合格率分别为80.00%和82.22%。说明常州市金坛区2015年度春防畜禽免疫情况总体良好,但在免疫程序、动物饲养管理以及免疫技术等方面仍需改进。

关键词：免疫猪瘟高致病性猪蓝耳病口蹄疫小反刍兽疫高致病性禽流感新城疫抗体检测酶联免疫吸附试验(ELISA)

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应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

应用CRISPR/Cas9技术建立TLR3基因敲除小鼠模型

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：王伟姜雪婷李永青庞忠兵孙海阳陈洪岩孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学团队

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到IC... 详细信息

TLR3是识别病毒双链RNA的一种模式识别受体,在介导天然免疫反应中发挥重要作用。为研究TLR3在病毒感染中的作用机制,构建TLR3基因敲除小鼠模型。根据小鼠TLR3基因组序列,设计、构建了转录载体,将体外转录的sgRNA与Cas9 mRNA显微注射到ICR小鼠受精卵;F0代鼠尾基因组PCR、测序证明敲除了13bp,表

关键词： CRISPR/Cas9 基因敲除小鼠

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