检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物科学 1995年第2期 35-43页

作者：张永江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所ＳＰＦ实验动物中心动物房的工艺设计张永江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心环境对实验动物饲养，管理和动物实验的影响一直是生物医学研究中的一个重要环节。现代生物医学和实验技术的发展... 详细信息

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所ＳＰＦ实验动物中心动物房的工艺设计张永江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心环境对实验动物饲养，管理和动物实验的影响一直是生物医学研究中的一个重要环节。现代生物医学和实验技术的发展使实验动物管理技术不断得到充实，提...

关键词：实验动物生物检验 SPF 动物房动物实验设施滤过器工艺设计中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

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禽流感、新城疫二联五价灭活疫苗的免疫效果研究

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中国农业科学 2025年第1期58卷 182-191页

作者：于晴晴周祥瑜李文昕刘艳晶王燕和新文何晨邓国华施建忠田国彬包红梅曾显营陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/国家禽类实验动物资源库农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室哈尔滨维科生物技术有限公司

【背景】H5、H7、H9亚型禽流感病毒（avian influenza virus, AIV）和新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）是严重危害禽业的重要病原，接种油乳剂型灭活疫苗是预防禽流感和新城疫的主要手段。当前养殖场预防这些传染病至少需要... 详细信息

【背景】H5、H7、H9亚型禽流感病毒（avian influenza virus, AIV）和新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）是严重危害禽业的重要病原，接种油乳剂型灭活疫苗是预防禽流感和新城疫的主要手段。当前养殖场预防这些传染病至少需要2种以上疫苗，导致家禽接种疫苗次数多，免疫负担重；另外，制备油乳剂型灭活疫苗的白油主要依赖进口，存在“卡脖子”风险。【目的】为了减少疫苗接种次数，降低免疫负担，对比国产和进口白油佐剂效果，本研究制备并评估了同时预防禽流感（H5+H7+H9）、新城疫的不同白油佐剂二联五价灭活疫苗，以期达到“一针防多病”的免疫效果，并为实现动物疫苗进口白油佐剂国产化替代提供数据支撑。【方法】将已构建的禽流感H5-Re13、H5-Re14、H7-Re4、H9-GX11583株和新城疫ND rLa-VII株共5株疫苗株分别接种鸡胚，收获尿囊液，经浓缩灭活后，按照1份抗原3份佐剂的比例加入不同的矿物油佐剂（Total、Marcol 52和HTM70），混合乳化，制成二联五价灭活疫苗，并分别以2 mL/只和0.5 mL/只的剂量通过肌肉注射接种3周龄SPF鸡，评价疫苗的安全性和有效性。【结果】免疫效力试验结果显示，3种白油佐剂制备的二联五价灭活疫苗对鸡均具有良好的安全性；3种白油佐剂疫苗接种鸡或免疫后均可产生针对H5-Re13株、H5-Re14株、H7-Re4株、H9-GX11583株和ND rLa-VII株有效的HI抗体，均可获得对效力检验毒株攻击的完全免疫保护。HI抗体持续期结果显示，3种白油佐剂灭活疫苗均可持续诱导高水平抗体半年以上，与进口白油（Total、Marcol 52）相比，国产白油HTM70诱导的HI抗体水平与进口白油Total差异不显著，高于进口白油Marcol 52，且国产白油佐剂HTM70批次间无明显差异。【结论】制备的禽流感（H5+H7+H9）、新城疫二联五价灭活疫苗对SPF鸡具有良好的免疫效果，且有望实现进口白油佐剂国产化替代。

关键词：禽流感新城疫多联多价灭活疫苗佐剂免疫效果

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猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

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畜牧兽医学报 2025年第1期56卷 319-326页

作者：曾苗苗杨小曼张鑫刘大凯时洪艳张记宇张燎原陈建飞冯廷帅李修文石达冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/猪消化道传染病创新团队哈尔滨150069

为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用... 详细信息

为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,以兔抗猪HRP-IgG作为二抗,利用方阵滴定法优化各反应条件,建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法,并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。SDS-PAGE及Western blot结果显示,重组表达的N蛋白约为70 ku,且具有良好的反应原性。采用该方法检测SADS-CoV阳性血清抗体效价可达1∶3 200,并且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒(PCV)阳性血清均无交叉反应,具有良好的敏感性和特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有较好的重复性。利用该方法和间接免疫荧光方法(IFA)分别对50份猪临床血清样品进行检测,结果显示二者的总符合率为98%。综上,本研究建立了一种基于SADS-CoV N蛋白的间接ELISA抗体检测方法,可用于临床SADS-CoV血清抗体检测以及流行病学的监测,对防控SADS-CoV的流行具有重要意义。

关键词：猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV) N蛋白原核表达间接ELISA

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单链DNA退火蛋白介导细菌基因组同源重组的机制及应用研究进展

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生物技术通报 2025年第1期41卷 39-48页

作者：尹号尤留超韩瑞高鹏程付磊储岳峰中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心兰州730046

基因组编辑技术是研究细菌等微生物在基因功能、耐药机制及致病机制等方面的重要工具,而同源重组是细菌基因组编辑的重要方式之一,传统的细菌内源性重组途径存在效率低下的问题,而一种来自噬菌体的单链DNA退火蛋白(SSAP)表现出了远超内... 详细信息

基因组编辑技术是研究细菌等微生物在基因功能、耐药机制及致病机制等方面的重要工具,而同源重组是细菌基因组编辑的重要方式之一,传统的细菌内源性重组途径存在效率低下的问题,而一种来自噬菌体的单链DNA退火蛋白(SSAP)表现出了远超内源性重组途径的基因组编辑效率,该蛋白具有单链DNA结合活性、介导基因组定向重组的特点,使其成为目前极具潜力的基因组编辑工具。本文主要对同源重组基本原理、噬菌体源SSAP介导的同源重组途径的基本元件、重组机制模型以及应用策略展开概述,旨在为进一步解析单链DNA退火蛋白介导的同源重组过程提供帮助,为研究更多细菌基因功能、致病机制以及开发工程菌株提供技术支撑,也为缺乏基因编辑方法的细菌提供技术参考。

关键词：细菌单链DNA退火蛋白同源重组机制应用

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灯光颜色对SPF鸡育雏质量的影响

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畜牧与兽医 2025年第3期57卷 28-31页

作者：张伟于海波王园园李昌文夏长友中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/国家禽类实验动物资源库/动物疫病防控全国重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150069

旨在通过探讨灯光颜色对SPF鸡育雏质量的影响,筛选出一种适合SPF鸡育雏期使用的灯光颜色。将360只0日龄SPF鸡随机均分为绿光组、白光组、红光组,每组3个重复,每个重复40只,分别放置在采用绿色、白色、红色LED灯管照明的饲养隔离器内,饲... 详细信息

旨在通过探讨灯光颜色对SPF鸡育雏质量的影响,筛选出一种适合SPF鸡育雏期使用的灯光颜色。将360只0日龄SPF鸡随机均分为绿光组、白光组、红光组,每组3个重复,每个重复40只,分别放置在采用绿色、白色、红色LED灯管照明的饲养隔离器内,饲养至4周龄,在育雏期(0~4周龄)每周统计雏鸡存活率、增重、体重均匀度、料重比及胫骨长。结果:红光组4周的存活率显著高于其他2组(P<0.05);3组的累计4周增重情况差异不显著(P>0.05),其中红光组的增重最多;体重均匀度方面,红光组1~4周的体重均匀度均显著高于其他2组同期值(P<0.05);3组的料重比、胫骨长指标差异不显著(P<0.05);综合动物存活率、增重、体重均匀度、料重比、胫骨长这5个指标比较,红光组在存活率、增重及体重均匀度指标优于其他2组,料重比和胫骨长指标与其他2组差异不显著。综上,红光是较为理想的SPF雏鸡育雏期使用的灯光颜色。

关键词： SPF鸡育雏灯光颜色生长性能料重比

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一株基因Ⅶ型新城疫病毒L蛋白致弱突变株的拯救及其免疫效力评价

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中国兽医科学 2025年第2期55卷 143-150页

作者：胡伟王祥锟蒲龄高潇祎朱启运吉艳红中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008

为防控流行的基因Ⅶ型新城疫,以基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)为骨架,将其F蛋白裂解位点氨基酸序列突变为La Sota株相应序列并且将其L蛋白第1159位赖氨酸突变为精氨酸,获救1株NDV L蛋白突变弱毒株并命名为rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)。rNDV-F_(m... 详细信息

为防控流行的基因Ⅶ型新城疫,以基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)为骨架,将其F蛋白裂解位点氨基酸序列突变为La Sota株相应序列并且将其L蛋白第1159位赖氨酸突变为精氨酸,获救1株NDV L蛋白突变弱毒株并命名为rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)。rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)突变株在鸡胚中连续传代至第15代,突变位点能稳定遗传。rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)突变株和La Sota株分别以1×10^(7) EID_(50)/羽的剂量免疫4周龄SPF鸡1次,免疫21 d后使用基因Ⅶ型NDV攻毒,攻毒剂量为1×10^(5) EID_(50)/羽。结果表明,rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)突变株能显著提高SPF鸡外周血淋巴细胞内IFN-γmRNA表达量,显著刺激机体产生体液和细胞免疫应答,且对SPF鸡提供完全免疫保护,并有效阻止排毒和抑制病毒在其脏器内复制。综上所述,rNDV-F_(mut)-L_(K1159R)突变株免疫原性优良,具有成为基因Ⅶ型新城疫弱毒疫苗候选株的潜力。

关键词：基因Ⅶ型新城疫弱毒疫苗反向遗传免疫效力

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腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究

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中国家禽 2025年第2期47卷 27-33页

作者：王震陈运通魏天悦陈洪岩王旭光高玉龙夏长友孟庆文新疆农业大学动物科学学院新疆乌鲁木齐830052 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江哈尔滨150069 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室国家禽类实验动物资源库黑龙江哈尔滨150069

鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价... 详细信息

鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果显示:使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变,其中36%单克隆细胞株存在W38缺失;T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性;W38缺失的细胞对ALV-J感染具有完全抗性,同时具有E35A替换、P36缺失、T37缺失的细胞对ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明,CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细胞,W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性,该方案为培育抗ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。

关键词： J亚群禽白血病病毒鸡Na^(+)/H^(+)交换蛋白-1 腺病毒载体 CRISPR/Cas9

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海南地区五指山猪七种主要病原体血清抗体检测与分析

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中国兽医科学 2025年第3期55卷 375-380页

作者：蒋鑫杰徐梓纯李梦雨李强李欣蒋逸刘光亮乔传民甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 三亚中国农业科学院国家南繁研究院海南三亚572025 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心) 海南三亚572025 海南省农业科学院畜牧兽医研究所、海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海南海口571100

了解海南地区五指山猪未经免疫主要病原体的自然感染情况和流行特点。采集160份五指山猪血清样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、口蹄疫病毒(FMDV)... 详细信息

了解海南地区五指山猪未经免疫主要病原体的自然感染情况和流行特点。采集160份五指山猪血清样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪链球菌2型(SS-2)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)和猪伪狂犬病毒(PRV)等7种主要病原体进行抗体检测。结果表明:PEDV的阳性率最高,达99.37%;而PRV未检测到感染。PRRSV、TGEV、FMDV、SS-2和APP抗体阳性率分别为41.88%、18.24%、3.18%、46.41%和39.38%,这些感染表现出性别和年龄相关的现象:公猪的抗体阳性率普遍高于母猪,尤其是SS-2和APP;5月龄和12月龄猪群中的PRRSV和SS-2阳性率较高,APP在12月龄时达到峰值。研究发现PEDV在海南地区五指山猪中广泛流行。不同病原体的感染程度因性别和年龄而异,公猪和年长猪群的抗体阳性率较高。建议在断奶后加强对TGEV的防控,并针对PRRSV、TGEV、FMDV、SS-2和APP,按性别分群饲养并制定差异化免疫策略,尤其在5至12月龄猪群中加强对PRRSV、SS-2和APP的防控。这些发现可为疫病防控、净化及实验动物的培育提供参考。

关键词：五指山猪抗体阳性率 ELISA检测

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G3BP1基因在鸡肌内前脂肪细胞增殖与分化中的作用及其分子标记鉴定

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畜牧兽医学报 2025年第1期56卷 159-167页

作者：李远方吴冉李帅浩魏千然王亚东王丹丹李智李国喜刘翘铭哈尔滨工业大学医学与健康学院哈尔滨150001 哈尔滨工业大学郑州研究院郑州450000 神农种业实验室郑州450002 河南农业大学动物科技学院郑州450046 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

旨在利用721只固始鸡F2代鸡群,鉴定影响肌内脂肪沉积的候选基因G3BP1的SNPs位点,用于肉质性状的分子标记开发,并利用固始鸡肌内前脂肪细胞深入探究其功能。本研究首先鉴定了G3BP1基因上的SNPs位点,发现3个突变位点处于强连锁不平衡状态... 详细信息

旨在利用721只固始鸡F2代鸡群,鉴定影响肌内脂肪沉积的候选基因G3BP1的SNPs位点,用于肉质性状的分子标记开发,并利用固始鸡肌内前脂肪细胞深入探究其功能。本研究首先鉴定了G3BP1基因上的SNPs位点,发现3个突变位点处于强连锁不平衡状态,尤其是13588667G>A位点的不同基因型与固始鸡F_2资源群的皮脂、皮脂率和肌内脂肪等肉质性状显著相关(P<0.05)。因此,G3BP1基因13588667G>A位点可以作为影响肌内脂肪沉积的一个重要的分子标记。此外,本研究利用qRT-PCR、CCK-8、流式细胞术、甘油三酯含量测定和油红O染色等方法,评价了G3BP1基因对固始鸡肌内前脂肪细胞增殖与分化的影响。结果表明,过表达G3BP1后,肌内前脂肪细胞中增殖标志基因CDK1、CCNB2、PCNA和CCND1表达水平均极显著上升(P<0.001),并显著促进了细胞周期进程。过表达G3BP1后也显著促进了肌内前脂肪细胞分化标志基因LPL的表达(P<0.05),极显著促进了CEBPA的表达(P<0.001),肌内前脂肪细胞内脂滴生成和甘油三酯含量也极显著增加(P<0.01)。本研究明确了G3BP1在促进肌内前脂肪细胞增殖与脂肪细胞生成中的作用,并鉴定了影响肌内脂肪沉积的分子标记,为我国优质肉鸡培育提供重要的理论依据和应用价值。

关键词：固始鸡肌内脂肪 G3BP1 分子标记

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非洲猪瘟病毒免疫逃避机制研究进展

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中国生物工程杂志 2025年第2期45卷 113-126页

作者：杨思宇李海洋高永宇桑辰君曹玉蝶唐越李子彬李芳高凤山大连大学生命健康学院大连116622 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、动物疫病防控全国重点实验室、国家非洲猪瘟专业实验室哈尔滨150069 吉林农业大学动物医学院长春130118 大连市动物病毒抗原表位筛选及蛋白质工程药物研发重点实验室大连116622

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种急性、出血性、烈性传染病,死亡率可高达100%,对畜牧业造成严重影响。ASFV已在非洲、欧洲及亚洲等多地蔓延,因其结构复杂且具备独特... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种急性、出血性、烈性传染病,死亡率可高达100%,对畜牧业造成严重影响。ASFV已在非洲、欧洲及亚洲等多地蔓延,因其结构复杂且具备独特的免疫逃避机制,使得疫苗研发工作未曾取得突破性进展。系统阐述了近期ASFV研究的新进展。在探讨免疫逃避机制方面,深入阐释了ASFV运用多种蛋白质对宿主免疫系统实施调控的具体方式。详细阐明了ASFV通过干扰cGAS-STING、RIG-I-MAVS及JAK-STAT等关键信号通路,抑制干扰素生成,从而削弱宿主抗病毒能力的机制;进而剖析了ASFV编码的各类蛋白质在调控炎症反应、细胞凋亡、焦亡、自噬以及影响抗原提呈功能等诸多免疫相关进程中的作用机制,这些研究有助于深化对ASFV与宿主免疫相互作用的理解。未来ASF研究方向,一方面应借助持续革新的生物学技术,持续深入探究ASFV未知基因的功能及其在免疫逃逸中的作用机制,以探寻更多广谱疫苗及药物的潜在靶点;另一方面,需加强疫苗研发工作,设计出更具针对性与有效性的疫苗。此外,须强化ASF综合防控措施,实施分区防治,最终实现对ASF的有效防控。

关键词：非洲猪瘟病毒免疫逃避机制

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