检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘怀然孙敏华葛鑫刘胜旺刘培欣孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北农业大学动物医学院

为阐明不同宿主、不同基因型新城疫病毒(NDV)对鸡致病性,选择分离自鸡、番鸭、鹅、健康野鸟的Ⅶd基因亚型NDV6株,基因Ⅲ型鸡源和基因Ⅵb型鸽源毒株各1株,以及我国标准强毒F48E9,共9株NDV毒株,在15日龄SPF鸡上进行致病性实验,并采取攻毒... 详细信息

为阐明不同宿主、不同基因型新城疫病毒(NDV)对鸡致病性,选择分离自鸡、番鸭、鹅、健康野鸟的Ⅶd基因亚型NDV6株,基因Ⅲ型鸡源和基因Ⅵb型鸽源毒株各1株,以及我国标准强毒F48E9,共9株NDV毒株,在15日龄SPF鸡上进行致病性实验,并采取攻毒后不同时间段组织样品,以Real-time PCR检测其中病毒载量。结果表明,基因Ⅶd亚型NDV均为对15日龄SPF鸡高致病性毒株,发病率100%,死亡率90%以上;基因Ⅲ、Ⅵb型为导致SPF鸡发病但不死亡的中等毒力毒株。根据攻毒鸡的病程综合判断,Ⅶd亚型毒株毒力并未高于F48E9株,攻毒后病理变化、组织嗜性及病毒载量与F48E9也没有显著差异,提示这些毒株的流行不是毒力增强的结果。健康野鸟携带高致病性NDV强毒具有重要的生态学意义,警示应该进一步加强对野鸟的流行病学监控及相关研究。

关键词：新城疫病毒基因型致病性病毒载量

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表达禽流感HA基因的重组火鸡疱疹病毒的构建

表达禽流感HA基因的重组火鸡疱疹病毒的构建

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：兰德松王云峰石星明王玫李继松史春林曾伟伟童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室辽宁省动物疫病预防控制中心中国农业科学院上海兽医研究所

火鸡疱疹病毒(HVT)作为活病毒载体在携带外源保护性抗原基因方面,与其它病毒载体相比具有许多优势,因而以HVT为载体的基因工程疫苗的研究具有广阔的应用前景。本研究的目的是构建表

关键词：火鸡疱疹病毒 CEF 禽流感病毒

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反向遗传操作研究进展

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东北农业大学学报 2008年第1期39卷 134-138页

作者：吴波平时洪艳陈建飞冯力东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

反向遗传操作(又称感染性克隆)为在DNA水平上研究RNA病毒的基因组结构及功能和病毒宿主相互作用提供了重要手段。文章综述了反向遗传操作的研究策略,包括全长克隆的获得、体外转录和病毒的挽救,概括了反向遗传操作在病毒分子生物学研究... 详细信息

反向遗传操作(又称感染性克隆)为在DNA水平上研究RNA病毒的基因组结构及功能和病毒宿主相互作用提供了重要手段。文章综述了反向遗传操作的研究策略,包括全长克隆的获得、体外转录和病毒的挽救,概括了反向遗传操作在病毒分子生物学研究、疫苗的研制、基因治疗和重组载体中的应用,分析了当前反向遗传操作研究中存在的问题。

关键词：反向遗传操作感染性克隆全长克隆体外转录病毒挽救

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以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

以BAC为基础的疱疹病毒反向遗传技术研究进展

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：崔红玉王云峰石星明童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室河北北方学院动物科技学院动物医学系

近年来,BAC分子克隆化病毒在现代疫苗的研究和应用仍处于活跃的探索阶段,其表现出来的优势令人鼓舞。BAC系统以其容量大(可至数Mb),能够稳定遗传且易于操作的载体系统巨大优势,成为众多分子生物学工作者实现对大基因组病毒进行

关键词：反向遗传技术疱疹病毒 BAC

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几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97I的保护作用评价

几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97I的保...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张晓楠李成仁王钰刘乔然韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北农业大学黑龙江八一农垦大学

本研究选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110和tl/CH/LDT3/03F120和1株同种毒株CK/CH/LDL/97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,... 详细信息

本研究选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110和tl/CH/LDT3/03F120和1株同种毒株CK/CH/LDL/97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,研究了CK/CH/LDL/97Ⅰ与其他病毒的基因型关系。证明CK/CH/LDL/97Ⅰ属于有别于其它IBV毒株的一个独立的基因群。在此基础上,通过血清抗体检测、攻毒后发病率、死亡率、临床症状、病理变化观察以及气管和肾脏中病毒分离等方面研究了同种致弱毒株和异种致弱毒株对CK/CH/LDL/97Ⅰ的免疫效力。结果显示,同种致弱毒株对CK/CH/LDL/97Ⅰ强毒的攻击可提供100%的免疫保护,临床和病毒分离均为阴性。异种毒株tl/CH/LDT3/03F120可提供100%的临床保护,但呼吸道病毒检出率达50%,表明对呼吸系统的保护效果不好。异种毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110免疫组临床发病率为50%,气管样品病毒检出率为100%。免疫保护。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因交叉保护同种异种

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2005年～2006年黑龙江省部分地区健康野鸟NDVF基因分子特征

2005年～2006年黑龙江省部分地区健康野鸟NDVF基因分子特征

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘怀然李东伟刘培欣刘胜旺华育平孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北林业大学野生动物资源学院

将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV),通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后,每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定,并进行进化分析。根... 详细信息

将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV),通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后,每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序列测定,并进行进化分析。根据F基因47～420nt片段构建的分子进化树分析表明,可将其中13/14株野鸟NDV归于基因Ⅶd亚型,具有该型毒株典型的F蛋白裂解位点,属于我国目前流行的优势基因型毒株,与上世纪90年代分离自我国的鸡、水禽、珍禽基因Ⅶd亚型NDV核苷酸序列同源性在93%～97.3%之间。1/14株野鸟NDV属于基因Ⅲ型,与代表毒株Mutkeswar间核苷酸和氨基酸同源性均为100%。健康野鸟携带的Ⅶ亚型和基因Ⅲ型NDV,与目前优势NDV流行毒株和中等毒力疫苗毒株亲源关系相近,表明野鸟与家禽、水禽携带的NDV可以相互传染,对家禽构成巨大潜在威胁,提示加强野鸟NDV的监控及流行病学研究的紧迫性和重要性。

关键词：新城疫病毒黑龙江省健康野鸟基因型

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马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立

马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：郭巍戴伶俐李雪峰闫妍王英原周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室/慢病毒及马病课题组

根据马流感病毒的M基因和HA基因的保守序列,设计了两对引物,MF和MR为通用引物,可以检测出H3N8和H7N7亚型EIV,目的片段227bp,HF和HR为H3N8亚型特异性引物,目的片段595bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测... 详细信息

根据马流感病毒的M基因和HA基因的保守序列,设计了两对引物,MF和MR为通用引物,可以检测出H3N8和H7N7亚型EIV,目的片段227bp,HF和HR为H3N8亚型特异性引物,目的片段595bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测鉴别H3N8亚型EIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。

关键词：马流感病毒 RT-PCR

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A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学生命科学院

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有... 详细信息

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有1个981bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与已知的15个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为74.5%～78.5%和75.2%～83.1%,核苷酸系统发育进化树结果表明,JS毒株与轮状病毒G9型参考毒株ICB2185、O-1亲缘关系较近,分为1个群,表明JS毒株血清型为G9型。目前,我国尚未见猪及其它动物轮状病毒G9型流行株的报道。

关键词：猪轮状病毒 VP7基因序列分析

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PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会

作者：苗岚飞崔尚金张超范胡守萍陈长木周盛华岳丰雄戚亭谢红玲张垚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室东北农业大学动物医学学院

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID=10～7/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于... 详细信息

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID=10～7/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0、7、14、28、35天进行PCV2接种。阴性对照组和一次性攻毒组分别在接种后7、14、28和42天处死,连续攻毒组在首次接种后42天处死。试验过程中每天观察、记录小鼠生活状态并在处死前进行体重测量。脱颈椎法分批处死小鼠并采集心、肝、脾、肺、肾、胸腺、淋巴、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、舌、脑等组织进行病理切片观察。用PCR方法对机体中PCV2病毒的分布和含量进行分析,用ELISA试剂盒检测血清中的抗PCV2抗体水平。通过试验发现:三组试验小鼠体重均有增加,其中阴性对照组小鼠体重增长比率大于一次性攻毒组和连续攻毒组,而一次性攻毒组又明显高于连续攻毒组。PCR检测结果显示一次性攻毒组和连续攻毒组体内存在病毒复制并有其特定的转归规律,对照组体内无病毒复制。ELISA方法证实一次性攻毒组和连续攻毒组均产生抗PCV2抗体,但连续攻毒组抗体水平要明显高于一次性攻毒组,整个实验过程中对照组未检测到抗PCV2抗体。将采集的病料进行组织切片观察发现一次性攻毒组和连续攻毒组有明显的微观病理损伤,损伤最严重的器官是淋巴结,对照组未发现明显病理损伤。据此,根据攻毒组小鼠体重增长比率的差异、淋巴结内持续的病毒复制、血清PCV2抗体阳性、明显的微观病理损伤得到小鼠已经感染了PCV2的结论,并初步探讨了小鼠感染PCV2的检测标准。本试验成功建立了PCV2感染SPF昆明小鼠的动物模型,为PCV2的致病机理研究、疫苗研究等奠定了理论基础。

关键词： SPF昆明小鼠 PCV2 微观病理损伤动物模型

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猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：袁婧刘长明魏萍东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)于1997年首先被发现,并被确认为是断奶仔猪多系统衰竭综合征(Post-weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的重要病原。各国学者相继对PCV2病原学进行深入研究发现,除PMWS外,PCV2感染... 详细信息

关键词：混合感染 PRRSV 猪圆环病毒猪肺炎支原体断奶仔猪多系统衰竭综合征

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