检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病毒学 2006年第6期21卷 581-584页

作者：卲昱昊王静王懂帅韩宗玺刘胜旺冉多良孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 甘肃省商业科技研究院甘肃兰州730020 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-... 详细信息

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-30a,阳性重组质粒经确证性序列测定,证明外源片断插入到pET-30a的预期位置。将其转入大肠杆菌BL21,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE表明外源基因获得表达,融合蛋白分子量约为34kDa。将诱导后的工程菌用6mol/L盐酸胍裂解,经超声处理后离心,利用镍离子亲和树脂对裂解产物的上清进行纯化。用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备兔抗该融合蛋白的抗血清。Westernblotting结果表明制备的兔抗血清与该融合蛋白及亲本病毒的结构蛋白都具有反应性。结合前期工作进展对GPVVP蛋白的B细胞线性抗原表位进行定位。

关键词：鹅细小病毒 vp基因片断原核表达抗血清

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

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广西农业生物科学 2006年第B9期25卷 97-102页

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD 4+和CD 8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异。用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30%(3/10),死亡率为10%(1/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为40%(4/10)。体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白

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猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展

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动物医学进展 2006年第10期27卷 11-14页

作者：孙东波冯力时洪艳陈建飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得... 详细信息

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。

关键词：猪流行性腹泻病毒分子生物学分子结构特征病原学血清学诊断技术体液免疫

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传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：邓小芸高玉龙高宏雷祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码五种病毒蛋白:VP1、VP2、VP3、VP4和***1由B节段编码,具有依赖RNA的RNA聚合酶活性.其它四种病毒蛋白由A节段编码,VP4为病毒自身蛋白酶,VP5的功能尚不明确,VP2和VP3是病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳.虽然VP2是IBDV主要的毒力基因,也是构象表位的集中区,但越来越多的证据佐证了VP3也是IBDV重要的毒力基因.VP3基因位于IBDV A节段的2390-3169位,全长780bp.这个内衣壳蛋白有两个相互作用域:与基因组双链RNA的相互作用域在该蛋白的上游,与VP1结合域在该蛋白的C末端,这些相互作用对病毒的组装十分重要.本文对传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定进行了探讨.

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位

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传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：何来王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV),属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus ***能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义.已有的研... 详细信息

传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV),属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus ***能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义.已有的研究证明ILTV是非常有潜力的禽呼吸道病毒疫苗载体,且gE基因又是疱疹病毒重要的毒力相关基因,将gE蛋白的主要抗原性片段表达于大肠杆菌中,为进一步研究gE基因缺失标记疫苗和病毒感染的监测奠定基础.

关键词：传染性喉气管炎病毒 gE基因抗原性片段大肠杆菌

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的...

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异.用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30﹪(3/10),死亡率为10﹪(1/10),非免疫对照组的发病率为100﹪(10/10),死亡率为40﹪(4/10).体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组.从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用.

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白基因工程疫苗

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LSC株病毒攻击的免疫保护

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LSC株病毒攻击的...

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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：王云峰石星明王玫刘胜旺童光志徐灵龙木古丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管炎病毒异源病毒LSC株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管炎病毒异源病毒LSC株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,但攻毒后保护率结果说明,该疫苗不能对异源病毒提供坚强保护,攻毒后免疫组的发病率为50％(5/10),死亡率为20％(2/10),非免疫对照组的发病率为100％(10/10),死亡率为50％(5/10).疫苗接种之后外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组,但这种差异并不显著.用LSC株IB病毒攻击后,虽然免疫鸡的病理损伤程度没有非免疫对照组严重,但二者差异不十分明显,在排毒时间和排毒量上也没有明显变化;体重分析结果显示,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组试验鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组.从以上结果可以说明,重组疫苗虽然能在动物体内很好表达,但不能对试验动物产生较好的保护作用,而鸡干扰素-γ基因能在动物体内表达并发挥其免疫调节作用,减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用.

关键词：重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白支气管炎病毒

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实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒

实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒

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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：许红喜符芳鲁晶红李曦黑龙江八一农垦大学大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

本试验建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测PCV-2.分析表明,10倍系列稀释的标准质粒9个点均在一条直线上,二者相关系数R2＞0.999,扩增效率达到97％.敏感性、特异性及重复性实验证明,批间、批内重复试验的变异系数均小于1.5％;... 详细信息

本试验建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测PCV-2.分析表明,10倍系列稀释的标准质粒9个点均在一条直线上,二者相关系数R2＞0.999,扩增效率达到97％.敏感性、特异性及重复性实验证明,批间、批内重复试验的变异系数均小于1.5％;可检测10-5.5TCID50.40份被检样品,SyReTi-PCR检测阳性率为87.5％,与普通PCR检测的符合率为94.6％,其敏感性是普通PCR 100倍.本研究建立的SyReTi-PCR检测PCV-2的方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性.

关键词： Ⅱ型猪圆环病毒 SyReTi-PCR检测标准曲线 PCV-2方法

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鸡法氏囊B淋巴细胞三框cDNA文库的构建

鸡法氏囊B淋巴细胞三框cDNA文库的构建

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：高玉龙刘伟高宏雷邓小芸李铁强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的危害雏鸡的一种急性、高度接触性病毒性传染病.该病主要引起3～8周龄的鸡发病,导致死亡和引起免疫抑制,并可诱发... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的危害雏鸡的一种急性、高度接触性病毒性传染病.该病主要引起3～8周龄的鸡发病,导致死亡和引起免疫抑制,并可诱发多种鸡病或使多种疫苗免疫失败.此外,由于近年来变异株和超强毒株的流行,常使IBD免疫鸡群发病,病死率升高达80％以上,严重威胁着养鸡业的发展. IBDV主要侵害鸡的中枢免疫器官-法氏囊,对法氏囊中的B淋巴细胞具有很强的亲嗜性.Kaufer等研究证实,切除法氏囊的鸡可以耐过IBDV的感染,仅有轻微的病理变化,但可以产生抗体.法氏囊是IBDV感染宿主及其复制的组织基础,B淋巴细胞上存在IBDV病毒细胞受体,与病毒的结合、侵入以及复制有关. 本研究从3周龄SPF鸡的法氏囊中分离B淋巴细胞,运用Gateway技术构建了鸡法氏囊B淋巴细胞三框表达cDNA文库,为研究IBDV与宿主相互作用以及筛选病毒受体奠定了基础.

关键词：鸡传染性法氏囊病淋巴细胞 cDNA文库

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表达鸡IFN-γ基因重组鸡痘病毒与鸡传染性法氏囊疫苗联合接种对鸡免疫应答的影响

表达鸡IFN-γ基因重组鸡痘病毒与鸡传染性法氏囊疫苗联合接种对鸡...

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：都兴洋石星明王云峰杨春富王玫童光志尹训南王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

本研究将表达鸡IFN-γ的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与鸡传染性法氏囊病MB43活疫苗联合接种SPF鸡,研究重组鸡IFN-γ对传染性法氏囊疫苗免疫效果的影响.结果,rFPV-IFN-γ(103PFU)和MB43活苗联合免疫组(MB43r+FPV-IFN-γ)以及重组干扰素(rI... 详细信息

本研究将表达鸡IFN-γ的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与鸡传染性法氏囊病MB43活疫苗联合接种SPF鸡,研究重组鸡IFN-γ对传染性法氏囊疫苗免疫效果的影响.结果,rFPV-IFN-γ(103PFU)和MB43活苗联合免疫组(MB43r+FPV-IFN-γ)以及重组干扰素(rIFN-γ,200U)和MB43活苗联合免疫组(MB43+rIFN-γ)在免疫后2周即可检出ELISA抗体,比MB43单独免疫组早1周左右.在受到鸡传染性法氏囊病病毒Gx株攻击之后,MB43+rFPV-IFN-γ免疫鸡和MB43+rIFN-γ免疫鸡的脾脏只有个别淋巴细胞核浓缩、核崩解,少数滤泡萎缩变性坏死;胸腺结构清晰,仅有个别胸腺小体变性坏死,损伤程度轻于MB43单独免疫组和非免疫对照组.疫苗免疫后1周,与非免疫对照相比3个免疫组外周血CD8+T淋巴细胞含量均有显著上升,但CD4+T淋巴细胞含量变化却不明显;IBDV Gx株强毒攻击之后2周,3个疫苗免疫组CD4+、CD8+T淋巴细胞百分含量均显著升高,各组之间CD4+、CD8+T淋巴细胞百分含量无明显差异.结果表明,rFPV-IFN-γ和rIFN-γ可较全面地加强疫苗引起的免疫应答,加快疫苗诱导的体液免疫应答.

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒活疫苗 IFN-γ基因免疫应答联合接种痘病毒

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