检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科技论文在线精品论文 2016年第3期9卷 200-204页

作者：白琳中国医学科学院/北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类比较医学重点实验室北京 100021

caveolin-1是细胞膜结构胞膜窖的重要组成蛋白,其参与胆固醇的运输、细胞信号的传导、细胞增殖、肿瘤生成、细胞内吞等生物学过程.本文总结了caveolin-1在胚胎干细胞、造血干细胞、神经干细胞、间充质干细胞等细胞增殖和分化的调节作用... 详细信息

caveolin-1是细胞膜结构胞膜窖的重要组成蛋白,其参与胆固醇的运输、细胞信号的传导、细胞增殖、肿瘤生成、细胞内吞等生物学过程.本文总结了caveolin-1在胚胎干细胞、造血干细胞、神经干细胞、间充质干细胞等细胞增殖和分化的调节作用及其相关的下游信号通路.综述了caveolin-1在不同干细胞中的调节作用对干细胞治疗和再生医学发挥重要作用.

关键词：细胞生物学 caveolin-1 综述干细胞增殖分化

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慢性皮质酮处理对小鼠学习记忆和突触相关蛋白的影响

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中国实验动物学报 2016年第3期24卷 253-257页

作者：孙秀萍杨久山张楠宋铭晶秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021 山东中医药大学附属医院济南250014

目的建立饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对学习记忆和突触相关蛋白的影响。方法c57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5 mg/(kg·d)。正常组动物给予0.45%羟... 详细信息

目的建立饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对学习记忆和突触相关蛋白的影响。方法c57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5 mg/(kg·d)。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后,进行社会识别实验和水迷宫实验。行为学实验结束后,动物断头取海马,应用western blot进行突触相关蛋白测定。结果社会识别实验显示,正常组和皮质酮组对刺激鼠笼的嗅闻时间均比空鼠笼长(P<0.05)。对照组对刺激鼠2的嗅闻时间比刺激鼠1长(P<0.05)。皮质酮组对刺激鼠2的嗅闻时间与对刺激鼠1的嗅闻时间差异无显著性。水迷宫实验定位航行结果显示,皮质酮组学习能力下降,寻台潜伏期延长(P<0.05)。空间探索结果显示,皮质酮组穿台次数、进入实台象限的次数和实台象限路程均明显减少(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。Western blot结果显示,皮质酮组突触后致密物质(postsynaptic density,PSD-95)、突触素(synapsin-1,Syn-1)和磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)表达明显下降(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论通过饮入方式,慢性给予皮质酮,动物出现社会记忆和空间学习记忆障碍,可能与海马突触相关蛋白表达下降,突触功能受损有关。

关键词：皮质酮学习记忆突触蛋白小鼠

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慢性给予皮质酮对小鼠抑郁样行为和突触素的影响

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中国比较医学杂志 2016年第1期26卷 14-18页

作者：孙秀萍杨久山徐艳峰徐玉环宋铭晶秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021 山东中医药大学附属医院济南250014

目的通过饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对动物抑郁样行为和海马突触素的影响。方法c57雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5mg/kg/d。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-... 详细信息

目的通过饮入方式,慢性给予皮质酮,观察皮质酮对动物抑郁样行为和海马突触素的影响。方法c57雄性小鼠随机分为正常组和皮质酮组,每组10只。皮质酮组饮用含皮质酮的0.45%羟丙基-β-环糊精溶液,5mg/kg/d。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后,进行行为学实验。行为学实验结束后,动物灌注固定,应用免疫组化方法,检测突触素-1的表达。结果糖水偏爱测试结果表明,正常组和皮质酮组糖水偏爱指数无显著性差异(P>0.05)。强迫游泳实验结果表明,皮质酮组强迫游泳不动时间显著延长(P<0.05)。空场实验结果显示,正常组和皮质酮组总路程和速度无显著性差异。皮质酮组中央区停留时间、路程及进入中央区频次减少,边缘区停留时间增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。新奇抑制摄食实验结果表明,皮质酮组摄食潜伏期显著延长(P<0.05),5 min内摄食量无变化。免疫组化结果显示,皮质酮组突触素-1表达显著下降(P<0.05)。结论通过饮入方式,慢性给予皮质酮,动物出现抑郁样表现,可能与海马突触素-1表达减少,神经突触传递效能降低有关。

关键词：皮质酮抑郁突触素小鼠

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中国实验动物从业人员标准的编制

中国实验动物从业人员标准的编制

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：孔琪郑志红魏强秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 全国实验动物标准化技术委员会北京100021 中国医科大学实验动物部沈阳110001 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的实验动物科学发展对生物医学、药学等领域研究起到支撑作用，是衡量一个国家科技水平的重要标志。从业人员素质直接影响实验动物行业发展的速度和质量。本标准制定的目的是规范实验动物从业人员要求，加强培训和资质认证工作，以... 详细信息

目的实验动物科学发展对生物医学、药学等领域研究起到支撑作用，是衡量一个国家科技水平的重要标志。从业人员素质直接影响实验动物行业发展的速度和质量。本标准制定的目的是规范实验动物从业人员要求，加强培训和资质认证工作，以推动从业人员素质提高。

关键词：实验动物从业人员标准教育培训

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FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达及其与孕激素受体的相关性研究

FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达及其与孕激素受体的相关性研究

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第九届中国肿瘤学术大会暨第十五届海峡两岸肿瘤学术大会

作者：舒桐白萍雍伟东孙慧李淑敏张蓉李斌国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院北京协和医学院中国医学科院医学实验动物研究所

目的 FKBP52作为一种激素受体辅助调节蛋白，在激素相关肿瘤研究中逐渐受到重视，但尚在起步阶段.子宫内膜癌是一种激素依赖性肿瘤，发病率逐年升高，孕激素治疗是早期保留生育功能患者的主要治疗手段，也是晚期或复发子宫内膜癌治疗中... 详细信息

目的 FKBP52作为一种激素受体辅助调节蛋白，在激素相关肿瘤研究中逐渐受到重视，但尚在起步阶段.子宫内膜癌是一种激素依赖性肿瘤，发病率逐年升高，孕激素治疗是早期保留生育功能患者的主要治疗手段，也是晚期或复发子宫内膜癌治疗中非常重要的组成部分.本研究意在探讨FKBP52在子宫内膜癌组织中的表达情况及其与孕激素及其受体的相关性.方法收集中国医学科学院肿瘤医院2012年10月至2013年9月手术标本子宫内膜癌40例，正常内膜组织40例，应用RT-PCR及WesternBlot技术分别检测FKBP52mRNA及蛋白在子宫内膜癌及正常内膜中的表达差异.通过免疫组化分析FKBP52在在子宫内膜癌及正常内膜中的表达情况.利用siRNA转染Ishikawa细胞系，抑制FKBP52的表达，应用WesternBlot技术检测细胞转染后孕激素受体的表达情况，并通过MTT法对比转染前后孕激素对子宫内膜癌细胞增殖的影响.结果 FKBP52mRNA及其蛋白在子宫内膜癌组织中的表达均显著低于正常内膜组织.免疫组化显示FKBP52表达可见于子宫内膜癌组织腺体及间质.FKBP52敲降后可促进Ishikawa细胞增殖，且孕激素受体表达明显降低，孕激素抑制细胞增殖的效用随之减弱.结论 FKBP52可抑制子宫内膜癌细胞增殖，该蛋白表达缺失可使孕激素受体表达下调，从而导致孕激素抵抗，促进子宫内膜癌细胞增殖.

关键词： FKBP52 孕激素受体子宫内膜癌 Ishikawa细胞系孕激素抵抗

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乙型病毒性肝炎动物模型的比较分析

乙型病毒性肝炎动物模型的比较分析

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：张倩刘江宁秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的全世界有将近2.4亿慢性乙型病毒性肝炎(HBV)患者,尽管已有HBV疫苗和抗病毒治疗药物的产生,但乙肝仍是严重威胁人类健康的传染病。由于缺乏理想的动物模型,使得对于乙型病毒性肝炎的研究受到局限。本综述按照现有HBV动物模型进行对... 详细信息

目的全世界有将近2.4亿慢性乙型病毒性肝炎(HBV)患者,尽管已有HBV疫苗和抗病毒治疗药物的产生,但乙肝仍是严重威胁人类健康的传染病。由于缺乏理想的动物模型,使得对于乙型病毒性肝炎的研究受到局限。本综述按照现有HBV动物模型进行对比分析,探讨各种模型病原学和病理与病理生理学应用的区别,为科研人员在今后的HBV研究中更好的利用相关资源,提供参考。

关键词：乙型病毒性肝炎动物模型病原学病理与病理生理学

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利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因

利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武中国医学科学院&北京协和医学院医学实验动物研究所卫计委人类疾病比较医学重点实验室

目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型FokI核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的... 详细信息

目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型FokI核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas9蛋白（dCas9）进行融合,形成融合蛋白用于降低脱靶效应。Fok I是一种依赖于二聚化才能行使内切酶活性的核酸酶,在本研究中,我们通过将Fok I功能结构融合到dCas9的N端,构建表达质粒pST1374-dCas9-Fok I。前期研究中,发现一个sgRNA在介导Cas9编辑Dnmt1基因建立条件敲除大鼠时,存在显著的脱靶现象。以此为基础,我们利用dCas9-Fok I/sgRNA系统编辑大鼠Dnmt1基因,研究该系统是否能够进行基因编辑以及是否能够提高基因编辑特异性。将转录好的dCas9-Fok I mRNA和sgRNA显微注射到SD大鼠的受精卵中,用于产生基因编辑大鼠。通过显微注射以及胚胎移植,最终获得43只F代大鼠,其中两只在靶点位置包含突变,突变效率达4.5%。对脱靶情况进行分析,结果显示无脱靶现象存在。综上,表明dCas9-Fok I/sgRNA可以应用于编辑大鼠基因,并能显著提高特异性。尽管dCas9-FokI/sgRNA系统相比于Cas9/sgRNA系统,基因编辑效率有所下降,但是该技术的发展为基因治疗提供了可供选择的潜在工具。

关键词： Dnmt1 基因编辑大鼠 dCas9 Fok I 脱靶

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利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24小时后分别梯度浓度给药,实时细胞分... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24小时后分别梯度浓度给药,实时细胞分析技术监测给药前后细胞生长曲线,计算药物对胰腺癌细胞的生长抑制率(IC50)。同时,细胞培养板内给药,行AO/EB染色和激光共聚焦观察。结果药物作用72小时,同一药物对不同细胞抑制率不同。盐酸吉西他宾对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为1.69μmol/L、10.05μmol/L、12.74μmol/L。替吉奥胶囊对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为180.29μmol/L、765.70μmol/L、95.57μmol/L。AO/EB染色验证ICS0真实可靠。结论 SW1900及Capan-2可作为盐酸吉西他宾及替吉奥的对照,建立细胞模型,对药物进行体外筛选,为临床推广提供参考。

关键词：胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因

利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武中国医学科学院&北京协和医学院医学实验动物研究所卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具.然而，该系统在提供靶向性基因修饰的同时，会产生一些不需要的突变，即脱靶现象.为提高CRISPR/Cas9的特异性，我们将野生型FokⅠ核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失... 详细信息

目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具.然而，该系统在提供靶向性基因修饰的同时，会产生一些不需要的突变，即脱靶现象.为提高CRISPR/Cas9的特异性，我们将野生型FokⅠ核酸内切酶的功能结构域与催化功能区失活的Cas9蛋白(dCas9)进行融合，形成融合蛋白用于降低脱靶效应.Fok Ⅰ是一种依赖于二聚化才能行使内切酶活性的核酸酶，在本研究中，我们通过将Fok Ⅰ功能结构融合到dCas9的N端，构建表达质粒pST1374-dCas9-Fok Ⅰ.前期研究中，发现一个sgRNA在介导Cas9编辑Dnmt1基因建立条件敲除大鼠时，存在显著的脱靶现象.以此为基础，我们利用dCas9-Fok I/sgRNA系统编辑大鼠Dnmt1基因，研究该系统是否能够进行基因编辑以及是否能够提高基因编辑特异性.将转录好的dCas9-Fok Ⅰ mRNA和sgRNA显微注射到SD大鼠的受精卵中，用于产生基因编辑大鼠.通过显微注射以及胚胎移植，最终获得43只F0代大鼠，其中两只在靶点位置包含突变，突变效率达4.5％.对脱靶情况进行分析，结果显示无脱靶现象存在.综上，表明dCas9-Fok I/sgRNA可以应用于编辑大鼠基因，并能显著提高特异性.尽管dCas9-Fok I/sgRNA系统相比于Cas9/sgRNA系统，基因编辑效率有所下降，但是该技术的发展为基因治疗提供了可供选择的潜在工具.

关键词： Dnmt1 基因编辑大鼠 dCas9 FokⅠ 脱靶

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利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性，为胰腺癌个体化诊疗提供参考.方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系，选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物，接种24小时后分别梯度浓度给药，实时细... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性，为胰腺癌个体化诊疗提供参考.方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系，选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物，接种24小时后分别梯度浓度给药，实时细胞分析技术监测给药前后细胞生长曲线，计算药物对胰腺癌细胞的生长抑制率(IC50).同时，细胞培养板内给药，行AO/EB染色和激光共聚焦观察.结果药物作用72小时，同一药物对不同细胞抑制率不同.盐酸吉西他宾对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为1.69μmol/L、10.05μmol/L、12.74μmol/L.替吉奥胶囊对SW 1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为180.29μmol/L、765.70μmol/L、95.57μmol/***/EB染色验证IC50真实可靠.结论 SW1900及Capan-2可作为盐酸吉西他宾及替吉奥的对照，建立细胞模型，对药物进行体外筛选，为临床推广提供参考.

关键词：胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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