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中国药理学会第十四次全国学术大会暨施维雅优秀青年药理学工作者奖20周年学术论坛

作者：潘金徐燕锋张俊伶李德冠王月英陈孟毅刘冰周道洪孟爱民中国医学科学院协和医学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100221 中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学分子核医学重点实验室天津300129 Department of Pharmaceutical Sciences Winthrop P.Rockefeller Cancer Institute University of Arkans

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差.对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点.ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作用... 详细信息

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差.对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点.ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作用.研究在前期研究的基础上建立局部照射诱导的肺纤维化小鼠模型,观察ABT-263对放射性肺纤维化的治疗作用,探讨其作用机制.方法健康雄性C57BI/6J小鼠分为对照组(Control组)、给药组(ABT组)、照射组(IR组)和治疗组(IR+ABT组).小鼠接受17Gy右侧胸部X射线照射,照射后第16周开始灌胃给予ABT-263 50 mg· kg-1,每疗程给药5d,停药2周,给药2个疗程后进行观察.两个疗程治疗后CT检查小鼠肺实质的损伤情况.病理观察小鼠肺组织结构的变化、胶原生成(Masson检测)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)表达.免疫荧光检测肺组织中肺表面活性前体蛋白C(Pro-SPC)和P16的表达.基因PCR芯片技术检测肺组织纤维化相关基因的表达.结果胸部CT结果显示ABT治疗可以降低放射引起的小鼠肺组织的HU值升高(P＜0.05);降低照射引起小鼠肺脏指数显著升高(P＜0.05);减轻受照小鼠肺组织病理变化评分(P＜0.01),减少胶原沉积面积(P＜0.01),降低β-Gal表达细胞比例(P＜0.01);可以抑制受照小鼠Ⅱ型肺泡细胞P16表达(P＜0.01);纤维化相关基因芯片测定结果显示ABT可以降低受照小鼠肺组织中Bcl-2、Col3a1、Col1 a2、Ⅱ 1α、1βmRNA显著升高(P＜0.05或P＜0.01).结论上述研究结果显示ABT263可以减轻小鼠放射性肺纤维化的损伤性改变,降低衰老Ⅱ型肺上皮细胞,抑制Bcl-2及肺组织炎症性因子及纤维化相关因子的表达.研究结果将为放射性肺纤维化防治提供新的思路.

关键词：放射性肺损伤肺纤维化细胞衰老组织干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞

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发光二极管光源照射日本大耳白兔皮肤的安全性评价

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中国比较医学杂志 2016年第7期26卷 24-30页

作者：李彦红张继刚徐艳峰韩云林黄澜江彬彬朱华徐玉环杨维玲秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021 中国人民解放军火箭军总医院北京100088

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续... 详细信息

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续3个月。观察动物皮肤有无红肿,测量动物进食、体重、体温等改变情况;照射完毕采集外周血测量常规、生化指标;Elisa分析免疫细胞及细胞因子改变情况;脏器组织病理检测,及分析皮肤弹力纤维变化情况;皮肤免疫组织化学分析C-myc、P53、细胞周期蛋白D1(CCND1)等癌基因及抑癌基因的表达变化。结果照射组兔皮肤未见红肿表现,体重在6周后稍高于对照组,体温3周、6周有差别,进食未见异常;血常规有白细胞增多,生化检测尿素、肌酐水平有增高,但在正常范围内;ELISA分析血免疫细胞CD3T细胞、细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平在两组无明显差别,照射组动物CD19B细胞,IL-4水平升高;照射组动物脏器组织病理未见明显异常结构改变,皮肤弹性纤维分布无异常;皮肤组织内细胞周期蛋白(CCND1),C-Myc蛋白,P53蛋白表达与对照组相比没有差异。结论 LED光源照射日本大耳白兔3个月后,未引起体内明显的组织病理学改变,也未引起皮肤肿瘤相关因子的改变。

关键词：发光二极管日本大耳白兔皮肤安全评价

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清除衰老细胞治疗小鼠放射性肺纤维化机制研究

清除衰老细胞治疗小鼠放射性肺纤维化机制研究

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：潘金徐燕锋张俊伶李德冠王月英陈孟毅刘冰周道洪孟爱民协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学分子核医学重点实验室 Department of Pharmaceutical Sciences Winthrop P.Rockefeller Cancer InstituteUniversity of Arkansas for Medical Sciences

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差。对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点。ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作... 详细信息

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差。对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点。ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作用。研究在前期研究的基础上建立局部照射诱导的肺纤维化小鼠模型,观察ABT-263对放射性肺纤维化的治疗作用,探讨其作用机制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠分为对照组(Control组)、给药组(ABT组)、照射组(IR组)和治疗组(IR+ABT组)。小鼠接受17Gy右侧胸部X射线照射,照射后第16周开始灌胃给予ABT-263 50mg/kg,每疗程给药5天,停药2周,给药2个疗程后进行观察。两个疗程治疗后CT检查小鼠肺实质的损伤情况。病理观察小鼠肺组织结构的变化、胶原生成(Masson检测)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)表达。免疫荧光检测肺组织中肺表面活性前体蛋白C(Pro-SPC)和P16的表达。基因PCR芯片技术检测肺组织纤维化相关基因的表达。结果胸部CT结果显示ABT治疗可以降低放射引起的小鼠肺组织的HU值升高(P<0.05);降低照射引起小鼠肺脏指数显著升高(P<0.05);减轻受照小鼠肺组织病理变化评分(P<0.01),减少胶原沉积面积(P<0.01),降低β-Gal表达细胞比例(P<0.01);可以抑制受照小鼠Ⅱ型肺泡细胞P16表达(P<0.01);纤维化相关基因芯片测定结果显示ABT可以降低受照小鼠肺组织中Bcl-2、Col3a1、Colla2、Il1α、Il1βmRNA显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论上述研究结果显示ABT263可以减轻小鼠放射性肺纤维化的损伤性改变,降低衰老Ⅱ型肺上皮细胞,抑制Bcl-2及肺组织炎症性因子及纤维化相关因子的表达。研究结果将为放射性肺纤维化防治提供新的思路。

关键词：放射性肺损伤肺纤维化细胞衰老组织干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞

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清除衰老细胞治疗小鼠放射性肺纤维化机制研究

清除衰老细胞治疗小鼠放射性肺纤维化机制研究

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：潘金徐燕锋张俊伶李德冠王月英陈孟毅刘冰周道洪孟爱民协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市10021 中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学分子核医学重点实验室天津市300129 Department of Pharmaceutical Sciences Winthrop P.Rockefeller Cancer InstituteUniversity of Arkansas

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差.对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点.ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作用.研究在前期研究的基础上建立局部照射诱导的肺纤维化小鼠模型,观察ABT-263对放射性肺纤维化的治疗作用,探讨其作用机制.方法健康雄性C57BL/6J小鼠分为对照组(Control组)、给药组(ABT组)、照射组(IR组)和治疗组(IR+ABT组).小鼠接受17Gy右侧胸部X射线照射,照射后第16周开始灌胃给予ABT-263 50mg/kg,每疗程给药5天,停药2周,给药2个疗程后进行观察.两个疗程治疗后CT检查小鼠肺实质的损伤情况.病理观察小鼠肺组织结构的变化、胶原生成(Masson检测)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)表达.免疫荧光检测肺组织中肺表面活性前体蛋白C(Pro-SPC)和P16的表达.基因PCR芯片技术检测肺组织纤维化相关基因的表达.结果胸部CT结果显示ABT治疗可以降低放射引起的小鼠肺组织的HU值升高(P＜0.05);降低照射引起小鼠肺脏指数显著升高(P＜0.05);减轻受照小鼠肺组织病理变化评分(P＜0.01),减少胶原沉积面积(P＜0.01),降低β-Gal表达细胞比例(P＜0.01);可以抑制受照小鼠Ⅱ型肺泡细胞P16表达(P＜0.01);纤维化相关基因芯片测定结果显示ABT可以降低受照小鼠肺组织中Bcl-2、Col3a1、Col1a2、Il1αt、Il1β mRNA显著升高(P＜0.05或P＜0.01).结论上述研究结果显示ABT263可以减轻小鼠放射性肺纤维化的损伤性改变,降低衰老Ⅱ型肺上皮细胞,抑制Bcl-2及肺组织炎症性因子及纤维化相关因子的表达.研究结果将为放射性肺纤维化防治提供新的思路.

关键词：放射性肺损伤肺纤维化细胞衰老组织干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞

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PPARα转基因小鼠在药物毒性评价中的应用

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中国实验动物学报 2015年第3期23卷 316-320页

作者：贺银丽郭珣赵显莉裴彦宇孙井江高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的研究PPARα转基因小鼠在评价PPARα激动剂类药物毒性时,是否比传统动物更敏感。方法8周龄PPARα转基因小鼠(Tg)和C57BL/6J小鼠(WT),雌雄各半,分别随机分成3组,氯贝丁酯高剂量组(400 mg/kg)、氯贝丁酯低剂量组(300 mg/kg)、溶媒对照... 详细信息

目的研究PPARα转基因小鼠在评价PPARα激动剂类药物毒性时,是否比传统动物更敏感。方法8周龄PPARα转基因小鼠(Tg)和C57BL/6J小鼠(WT),雌雄各半,分别随机分成3组,氯贝丁酯高剂量组(400 mg/kg)、氯贝丁酯低剂量组(300 mg/kg)、溶媒对照组(10%羧甲基纤维素钠)。连续灌胃一个月,给药结束后检测血生化指标、心肝肾脏器系数及病理改变,并观察动物的一般生长情况。结果 1血生化:Tg♂高、低剂量组肌酐(CREA)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)分别显著高于各对应的野生型对照组(P<0.01,P<0.05)。2脏器系数:Tg高、低剂量组肾脏系数与Tg溶媒对照组比较均有显著增加(P<0.01,P<0.05)。3组织病理:Tg各剂量组肝脏、肾脏病理损伤较WT各剂量组更严重。结论 PPARα转基因小鼠评价PPARα激动剂药物肝脏毒性和肾脏毒性时比常规C57BL/6J野生小鼠更敏感,是一个新的动物模型。

关键词： PPARα转基因小鼠 PPARα激动剂肝毒性肾毒性

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清除衰老细胞治疗小鼠放射性肺纤维化机制

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第10期30卷 1035-1035页

目的放射性肺纤维化是放射性肺损伤的晚期改变,发病机制复杂,临床上缺乏有效的治疗方法,患者预后差。对放射性肺纤维化机制及干预的研究是当前的研究热点。ABT-263是抗肿瘤新药,近期发现具有清除衰老细胞、改善造血干细胞辐射损伤的作用。研究在前期研究的基础上建立局部照射诱导的肺纤维化小鼠模型,观察ABT-263对放射性肺纤维化的治疗作用,探讨其作用机制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠分为对照组(Control组)、给药组(ABT组)、照射组(IR组)和治疗组(IR+ABT组)。小鼠接受17Gy右侧胸部X射线照射,照射后第16周开始灌胃给予ABT-263 50 mg·kg-1,每疗程给药5 d,停药2周,给药2个疗程后进行观察。两个疗程治疗后CT检查小鼠肺实质的损伤情况。病理观察小鼠肺组织结构的变化、胶原生成(Masson检测)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)表达。免疫荧光检测肺组织中肺表面活性前体蛋白C(Pro-SPC)和P16的表达。基因PCR芯片技术检测肺组织纤维化相关基因的表达。结果胸部CT结果显示ABT治疗可以降低放射引起的小鼠肺组织的HU值升高(P<0.05);降低照射引起小鼠肺脏指数显著升高(P<0.05);减轻受照小鼠肺组织病理变化评分(P<0.01),减少胶原沉积面积(P<0.01),降低β-Gal表达细胞比例(P<0.01);可以抑制受照小鼠Ⅱ型肺泡细胞P16表达(P<0.01);纤维化相关基因芯片测定结果显示ABT可以降低受照小鼠肺组织中Bcl-2、Col3a1、Col1a2、Ⅱ1α、Il1βm RNA显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论上述研究结果显示ABT263可以减轻小鼠放射性肺纤维化的损伤性改变,降低衰老Ⅱ型肺上皮细胞,抑制Bcl-2及肺组织炎症性因子及纤维化相关因子的表达。研究结果将为放射性肺纤维化防治提供新的思路。

关键词：放射性肺损伤肺纤维化细胞衰老组织干细胞 Ⅱ型肺泡上皮细胞

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耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型的研究进展

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微生物与感染 2016年第1期11卷 59-64页

作者：占玲俊卢锦标唐军陈保文秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国食品药品检定研究院结核疫苗室北京100050

潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)复发是新发结核病的主要来源,其中耐药结核病所占比例较大,使耐药LTBI复发的防控成为结核病研究的重点。耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型是开展耐药结核病防控相关机制研究、... 详细信息

潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)复发是新发结核病的主要来源,其中耐药结核病所占比例较大,使耐药LTBI复发的防控成为结核病研究的重点。耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型是开展耐药结核病防控相关机制研究、抗耐药结核分枝杆菌药物和疫苗研究的基础。目前耐药结核分枝杆菌感染动物模型缺乏,而已有的结核分枝杆菌标准株H37Rv潜伏-复发感染模型存在缺陷,如小鼠模型的潜伏期荷菌量偏高、复发期变异大,而猴模型的潜伏期和复发期不可预测。模型的可控性差使其应用困难,且缺乏可用的免疫学评价指标,导致远期复发无法预测。因此,基于现有H37Rv潜伏-复发感染动物模型的制备方法,展望耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型可能存在的缺陷,通过选用新的抑菌剂和诱导剂,制备有稳定潜伏期、潜伏时长适中、复发起点和复发水平变异小的动物模型,是未来耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型研究的方向。

关键词：耐药结核分枝杆菌动物模型耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染稳定性可控性

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利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：刘超董伟李冰谢英苏利波张力韩梅河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北医科大学生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架... 详细信息

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架重构中的作用机制.方法利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠SM22α基因.在外显子1～2和3～4的非编码区各设计sgRNA位点并将其定向克隆至pUC57-sgRNA.设计包含外显子2、3及2个LoxP序列且两侧各带有700bp同源臂的环状供体载体.Cas9的mRNA使用mMESSAGE mMACHINE(R) T7Ultra Kit进行体外转录,sgRNA使用线性化的spUC57-sgRNA重组质粒作为模板用MEGAshortscriptTM Kit体外转录合成.将制备好Cas9 mRNA、sgRNA和供体质粒进行混合,其浓度分别为Cas9 mRNA 25 ng/μl,sgRNA 10 ng/μl,供体质粒4 ng/μl.水平显微注射法将其导入170枚C57BL/6×B6D2F1受精卵原核.将注射后存活的约140枚受精卵移植入5只当日见栓的假孕KM雌鼠输卵管中,得到17只子代小鼠,经PCR和测序筛选目标小鼠.结果有一只小鼠等位基因的特定位点插入了LoxP序列,三只小鼠删除了SM22α基因的第2第3外显子.结论借助CRISPR/Cas9技术得到了SM22α基因内部引入LoxP序列的小鼠和SM22α基因敲除小鼠,为研究SM22α在VSMC中的作用机制提供了重要实验条件.

关键词： SM22α VSMC骨架重构 CRISPR/CAS9

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免疫亲合蛋白FKBP51通过TGF-β1/Smads通路参与CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化

免疫亲合蛋白FKBP51通过TGF-β1/Smads通路参与CCl4诱导的小鼠肝...

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第三届全国发育生物学大会

作者：张玲玲徐玉雪邱彬雍伟东邓然王超中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

[背景与目的]肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化、肝癌发展的必经阶段。虽然肝纤维化发病率高，但对其发病机制尚不完全清楚，且无有效的抗纤维化治疗手段。本研究通过创建CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型，研究FKBP51在肝脏纤维化中的作用... 详细信息

[背景与目的]肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化、肝癌发展的必经阶段。虽然肝纤维化发病率高，但对其发病机制尚不完全清楚，且无有效的抗纤维化治疗手段。本研究通过创建CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型，研究FKBP51在肝脏纤维化中的作用，以期研究肝脏纤维化的发生机理，并为寻找预防和治疗肝脏纤维化提供新的靶点。

关键词： FKBP51 肝脏纤维化 TGF-β1/Smads信号通路

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动物生物安全实验室微环境污染监测预警方法研究

动物生物安全实验室微环境污染监测预警方法研究

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：孔琪魏强向志光秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的实验室生物安全事件，事关实验室工作人员和人民健康、国家形象和社会安全稳定。本文围绕应对新发和再发传染病，建立了动物生物安全实验室微环境分类和病原微生物污染监测技术、污染控制措施和风险评估方法。提出了实验室污染检... 详细信息

目的实验室生物安全事件，事关实验室工作人员和人民健康、国家形象和社会安全稳定。本文围绕应对新发和再发传染病，建立了动物生物安全实验室微环境分类和病原微生物污染监测技术、污染控制措施和风险评估方法。提出了实验室污染检测的生物安全评价指标，对提升实验室污染监测和预防能力有一定意义。

关键词：实验动物动物生物安全实验室(ABSL) 实验室微环境污染监测

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