检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 61-66,I0008页

作者：张丽陈炜张旭孙彩显张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的大鼠的大脑比小鼠更大,是研究神经系统的重要模型。建立APPswe/PS1dE9/TAU三转基因大鼠,发展能更全面表现人类阿尔兹海默病表型的动物模型。方法构建人PrP-hAPP695 K595N/M596L、PrPhPS1dE9和PDGF-TAU转基因表达载体,显微注射法制... 详细信息

目的大鼠的大脑比小鼠更大,是研究神经系统的重要模型。建立APPswe/PS1dE9/TAU三转基因大鼠,发展能更全面表现人类阿尔兹海默病表型的动物模型。方法构建人PrP-hAPP695 K595N/M596L、PrPhPS1dE9和PDGF-TAU转基因表达载体,显微注射法制备转基因大鼠。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因大鼠脑组织中人APP、PS1和TAU蛋白的表达。Morris水迷宫检测6月龄三转基因大鼠学习记忆能力改变。APP、PHF-TAU免疫组织化学染色观察三转基因大鼠脑组织APP及TAU的表达。结果得到1个同时高表达人APP、PS1和TAU三个基因的转基因大鼠品系。转基因大鼠6月龄已经出现显著的行为学改变:学习记忆能力下降,病理学改变表现为过度磷酸化TAU增多和神经元胞浆内Aβ表达异常增加。结论成功建立了APPswe/PS1dE9/TAU三转AD大鼠,可做为新一代工具动物模型用于基础医学和AD转化医学研究。

关键词：转基因微管相关蛋白Tau 阿尔兹海默病神经纤维缠结大鼠

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抑制小鼠乳腺肿瘤转移microRNA的筛选

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中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 72-77,I0005页

作者：张丽李小颖孙彩显张旭陈炜张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的鉴定25种microRNA的功能及其在乳腺癌中发挥的作用,以筛选新的抑制乳腺癌转移的microRNA分子。方法利用脂质体2000将25种鼠源microRNA表达载体转染至4TO7细胞,经G418筛选结合流式细胞仪分选获绿色荧光细胞得稳定表达鼠源microRNA的... 详细信息

目的鉴定25种microRNA的功能及其在乳腺癌中发挥的作用,以筛选新的抑制乳腺癌转移的microRNA分子。方法利用脂质体2000将25种鼠源microRNA表达载体转染至4TO7细胞,经G418筛选结合流式细胞仪分选获绿色荧光细胞得稳定表达鼠源microRNA的细胞株。将细胞2×105个/只尾静脉注射接种于BALB/C小鼠,14 d后解剖分离肺组织,统计小鼠肺组织结节数目。结果和接种阴性对照细胞小鼠相比,接种mir-449a稳转细胞的小鼠肿瘤肺转移减少。而接种mir-1935稳转细胞的小鼠肿瘤肺转移增多。其它23种microRNA稳转细胞接种小鼠肿瘤肺转移既不增加也不减少。结论从25种鼠源microRNA中筛选到2种与乳腺癌肿瘤转移相关的microRNA:mir-449a抑制乳腺癌细胞肺转移,mir-1935则促进癌细胞肺转移。

关键词： 4TO7 乳腺癌转移尾静脉注射

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利用CRISPR/Cas9敲除大鼠胰岛素受体底物1(Irs1)基因

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中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 55-60页

作者：马元武马婧路迎冬陈炜张旭于磊张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sg... 详细信息

目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9。将Cas9 mRNA和sgRNA混合物注射入SD大鼠的受精卵中,实现靶基因敲除。用T7EN1实验初步检测靶基因的修饰情况,再经过测序分析确定突变。结果获得了5个在Irs1基因突变的首建鼠,突变效率为83%。结论得到了稳定遗传的Irs1基因敲除大鼠。

关键词： Irs1 基因敲除大鼠 CRISPR Cas9

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北京市花鸟市场常见留鸟流感病毒携带情况调查

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 91-93页

作者：姚艳丰许黎黎鲍琳琳李枫棣吕琦谷松至袁静于品秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的阐明H7N9爆发季节北京市禽流感的流行现状,为流感防控提供依据。方法对北京市花鸟市场开展流感监测,使用SPF鸡胚进行病毒分离。结果病毒分离显示从鸽子中分到1株高致病性新城疫病毒,从麻雀中分到1株禽副黏病毒2型,并未分离到H7N9流... 详细信息

目的阐明H7N9爆发季节北京市禽流感的流行现状,为流感防控提供依据。方法对北京市花鸟市场开展流感监测,使用SPF鸡胚进行病毒分离。结果病毒分离显示从鸽子中分到1株高致病性新城疫病毒,从麻雀中分到1株禽副黏病毒2型,并未分离到H7N9流感病毒。结论初步掌握了北京花鸟市场留鸟的病毒流行情况,H7N9流感病毒在此尚未流行,为流感防控提供第一手的材料。

关键词：花鸟市场留鸟流感流行病学

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实验动物金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立

实验动物金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：荣蓉张丽芳李雨函佟巍刘先菊王艳蓉向志光刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部实验动物检测中心北京100021

目的建立一种能够应用于实验动物金黄色葡萄球菌检测及鉴定的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法.方法本研究针对金黄色葡萄球菌特异的nuc基因设计4条引物,对反应条件进行优化.结果通过优化,该方法60o... 详细信息

目的建立一种能够应用于实验动物金黄色葡萄球菌检测及鉴定的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法.方法本研究针对金黄色葡萄球菌特异的nuc基因设计4条引物,对反应条件进行优化.结果通过优化,该方法60oC、40 min、Mg2+浓度8 mmol/L、dNTP浓度2.0 mmol/L、甜菜碱浓度0.8 mmol/L时,对金黄色葡萄球菌检测限为2cfu,且与其它常见实验动物致病菌无交叉反应.反应结果可通过添加荧光染料SYBR green Ⅰ直接肉眼观察.结论本研究建立的金黄色葡萄球菌LAMP方法具有快速、灵敏、操作简单,设备要求低的特点,适用于基层、大批量样本、快速检测的要求.

关键词： LAMP 金黄色葡萄球菌检测

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季节性流感疫苗对小鼠感染H7N9禽流感病毒的保护效力

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 44-47页

作者：吕琦鲍琳琳许黎黎邓巍李枫棣袁静于品姚艳丰秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的评价季节性流感裂解疫苗对流感病毒H7N9的免疫保护效力.方法用我国2012～2013年度季节性流感裂解疫苗,以腹腔注射方式免疫BALB/c小鼠,并设PBS免疫模型组,末次免疫14 d后以5 LD50 A/Anhui/1（H7N9）进行攻试验.感染后观察记录小鼠... 详细信息

目的评价季节性流感裂解疫苗对流感病毒H7N9的免疫保护效力.方法用我国2012～2013年度季节性流感裂解疫苗,以腹腔注射方式免疫BALB/c小鼠,并设PBS免疫模型组,末次免疫14 d后以5 LD50 A/Anhui/1（H7N9）进行攻试验.感染后观察记录小鼠临床表现,体重变化,并分别于第2天和第4天每组处死3只小鼠,取肺组织和鼻甲骨测病毒滴度和载量.结果感染后疫苗与模型组小鼠体重下降明显,疫苗组存活率为10%,模型组全部死亡.感染后第4天疫苗组鼻甲骨滴度显著低于模型组.血凝抑制试验及中和实验表明免疫小鼠血清无中和H7N9病毒抗体.结论季节性流感疫苗在小鼠中对于H7N9流感病毒感染无明显保护作用.

关键词： H7N9流感病毒季节性流感疫苗免疫保护效力

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豚鼠镍变应性接触性皮炎动物模型

豚鼠镍变应性接触性皮炎动物模型

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：赵显莉刁颖贺银丽徐艳峰郭珣李挚孙劲旅高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京 100021 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院变态反应科北京100730

目的建立豚鼠镍变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)的动物模型,观察不同条件(镍浓度、致敏时间、汗液和接触时间)对造模的影响,为临床前评价镍ACD治疗药物提供动物模型.方法选择86只240～270g豚鼠,按不同条件(硫酸镍... 详细信息

目的建立豚鼠镍变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)的动物模型,观察不同条件(镍浓度、致敏时间、汗液和接触时间)对造模的影响,为临床前评价镍ACD治疗药物提供动物模型.方法选择86只240～270g豚鼠,按不同条件(硫酸镍浓度、致敏时间、人工汗液、封闭接触时间)随机分为14组,第0d、第7d、第14 d致敏且第28 d激发的8组(20％ Ni-28d-6h、10％ Ni-28d-6h、20％ Ni-28d-SP-6h、10％ Ni-28d-SP-6h、20％ Ni-28d-24h、10％ Ni-28d-24h、20％ Ni-28d-SP-24h、10％ Ni-28d-SP-24h),第0d、第1d、第2d连续3d致敏且第9d激发的6组(20％ Ni-9d-6h、20％ Ni-9d-24h、20％ Ni-9d-SP-6h、20％ Ni-9d-SP-24h、阳性对照组、阴性对照组);激发后0～72 h,对激发部位皮肤红斑和水肿情况进行动态分级;分别于激发后24、48、72h采集第9d激发的6组豚鼠激发部位皮肤,酶联免疫吸附法检测皮损组织中白介素(interleukin,IL)-2和干扰素(interferon,IFN)-γ含量;HE染色观察激发部位皮肤病理变化;结果第28 d激发组,激发后各组激发部位皮肤48 h时红斑程度最强,并于48后红斑程度减轻,而第9d激发组中,红斑在24 h程度最强并一致持续到72 h;而皮肤水肿均不明显.第9d激发后皮损部位皮肤组织中IL-2和IFN-γ均在24 h达到峰值并持续到72 h,峰值分别为(533.53 ±41.51)pg/mL和(1235.63±76.85) pg/mL.激发部位皮肤表面结痂,表皮增厚,轻度角化过度,真皮毛细血管扩张,真皮及表皮内有炎性细胞浸润,与人类ACD病理表现一致.结论第0d、第1d、第2d致敏且第9d激发的致敏方法能建立皮肤反应较严重的ACD模型,并通过增加镍浓度、封闭接触时间以及人工汗液控制变态反应程度;第0d、第7d、第14 d致敏且第28 d激发的致敏方法则能得到不同程度的皮肤反应ACD模型;本研究为研究镍ACD提供与临床相似的各种豚鼠ACD动物模型.

关键词：硫酸镍镍过敏性接触性皮炎动物模型豚鼠

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新型H7N9病毒在同居小鼠中的传播途径

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 27-31,I0009页

作者：鲍琳琳朱华邓巍许黎黎陈霆吕琦李枫棣袁静徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品秦川索勋中国农业大学北京100083 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的进一步了解新型H7N9流感病毒的致病性、传播能力以及通过何种途径进行传播。方法 H7N9病毒感染小鼠后与同居小鼠合笼,研究同居小鼠的临床变化指征、病毒复制情况、病毒在组织中的分布以及病理变化。以同居小鼠分泌物接种其他小鼠,... 详细信息

目的进一步了解新型H7N9流感病毒的致病性、传播能力以及通过何种途径进行传播。方法 H7N9病毒感染小鼠后与同居小鼠合笼,研究同居小鼠的临床变化指征、病毒复制情况、病毒在组织中的分布以及病理变化。以同居小鼠分泌物接种其他小鼠,观察同居小鼠通过何种途径传播病毒。结果 H7N9病毒可以在肺组织、肠组织和脑组织中复制,并可以在同居小鼠中传播。H7N9病毒感染小鼠其咽、眼分泌物以及粪便均具有感染性,其中尤以咽拭子的传播风险最高。结论 H7N9病毒可以不通过适应就感染小鼠,并引起小鼠间传播。被感染小鼠分泌物具有感染性。

关键词： H7N9流感病毒小鼠接触传播黏膜

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肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

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中国比较医学杂志 2014年第10期24卷 1-6,17页

作者：徐珮丛喆陈霆王卫薛婧骆杨吴小闲魏强北京协和医学院比较医学中心、中国医学科学院医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况。比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点。方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac... 详细信息

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况。比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点。方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒,通过有限稀释分离培养病毒单克隆,提取病毒RNA后反转录,PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析。同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况。结果 SIVmac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化。肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区,肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加,而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3。结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关,两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上。

关键词： SIV Gp120 变异肠道嗜性神经嗜性糖基化位点

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猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠暴露对机体细胞免疫的影响

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中国比较医学杂志 2014年第8期24卷 1-6页

作者：王卫刘克剑吴芳新丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠粘膜暴露对机体细胞免疫的影响。方法建立小剂量多次直肠粘膜暴露模型,测定实验猴的血浆病毒载量了解病毒复制水平,测定外周CD4+T细胞绝对数了解疾病进展情况,测定T细胞亚群和外周单个核细胞I... 详细信息

目的研究猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠粘膜暴露对机体细胞免疫的影响。方法建立小剂量多次直肠粘膜暴露模型,测定实验猴的血浆病毒载量了解病毒复制水平,测定外周CD4+T细胞绝对数了解疾病进展情况,测定T细胞亚群和外周单个核细胞IFN-γ分泌情况了解机体细胞免疫状况。结果小剂量SIVmac239病毒多次暴露能导致病毒通过直肠粘膜进入动物体内,诱导机体免疫系统出现变化,但未见SIVmac239典型感染。病毒多次直肠暴露诱导出特异性细胞免疫,但与普通病毒感染相比,水平较低。结论本研究明确了猴免疫缺陷病毒小剂量暴露对机体细胞免疫的作用,为HIV疫苗研究提供了基础信息。

关键词： SIVmac239 直肠粘膜暴露细胞免疫

来源：评论

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