检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2008年第5期18卷 41-44页

作者：杨帆刘先菊林树柱秦川张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的制备辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗麻雀IgY抗体,为禽类血清学检测体系的建立提供技术储备。方法硫酸铵盐析法粗提麻雀血清IgY,进一步在SDS-PAGE上分离后,切下带有目的条带的凝胶作为免疫原,免疫实验兔制备抗血清,Protein-A柱亲和... 详细信息

目的制备辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗麻雀IgY抗体,为禽类血清学检测体系的建立提供技术储备。方法硫酸铵盐析法粗提麻雀血清IgY,进一步在SDS-PAGE上分离后,切下带有目的条带的凝胶作为免疫原,免疫实验兔制备抗血清,Protein-A柱亲和纯化兔抗IgY血清IgG,,使用改良过碘酸钠法制备酶结合物。ELISA检测酶标抗体的工作浓度,western blotting检测酶标抗体的特异性。结果硫酸铵盐析法粗提IgY,可去除部分杂蛋白,SDS-PAGE上分离后切下带有目的条带的凝胶,可以得到足够纯度的抗原,将带有IgY的凝胶作为抗原免疫后获得的抗血清经Protein-A纯化后,二抗在SDS-PAGE上鉴定,纯度达到99%以上。改良的过碘酸钠法标记获得的抗体浓度为1.008 mg/mL,ELISA检测酶标抗体效价为1∶1000。Western blotting鉴定抗体具有特异性。结论获得了优质可靠的兔抗麻雀IgY酶标抗体。

关键词：麻雀抗IgY HRP

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

荧光标记技术在肿瘤模型研究中的应用

引用

中国比较医学杂志 2008年第5期18卷 59-61,I0007,I0008页

作者：高苒刘学丽冯娟张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的利用绿色荧光小鼠和红色荧光蛋白标记肿瘤细胞,建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法将小鼠B16黑色素瘤细胞接种到绿色荧光蛋白转基因小鼠皮下,建立GFP小鼠肿... 详细信息

目的利用绿色荧光小鼠和红色荧光蛋白标记肿瘤细胞,建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法将小鼠B16黑色素瘤细胞接种到绿色荧光蛋白转基因小鼠皮下,建立GFP小鼠肿瘤模型。以红色荧光蛋白作为标记基因导入小鼠黑色素瘤细胞B16细胞,建立稳定表达红色荧光蛋白的细胞株。将表达红色荧光蛋白B16细胞接种到绿色荧光转基因小鼠皮下,建立双荧光小鼠肿瘤模型。用荧光显微镜和活体荧光成像系统检测小鼠肿瘤的发生发展。结果分别建立了GFP小鼠肿瘤模型和双色荧光小鼠肿瘤模型。利用活体荧光影像仪可以观察双色荧光小鼠模型中受体绿色荧光组织和红色荧光移植肿瘤相互融合。利用荧光显微镜,可以观察到肿瘤内绿色荧光标记的来源于受体小鼠的血管和免疫细胞。经香菇多糖刺激的GFP小鼠肿瘤模型的移植瘤组织中,来源于受体小鼠绿色荧光标记的免疫细胞明显多于经生理盐水刺激的对照小鼠。结论利用绿色荧光小鼠和红色荧光RFP标记肿瘤细胞建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,采用活体荧光成像仪和荧光显微镜可在整体和细胞水平直接观察肿瘤的生长以及肿瘤与宿主的相互作用。

关键词：绿色荧光蛋白红色荧光蛋白肿瘤模型,动物荧光显微镜

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

LRRK2基因与帕金森病

引用

中国比较医学杂志 2008年第8期18卷 40-43,52页

作者：刘鹏秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

帕金森病是一种复杂的多因素共同作用的神经变性性疾病,遗传因素和环境因素被认为是发病的重要原因。越来越多的研究发现遗传因素在其发病中起着重要作用,而最近LRRK2基因的发现更加确定了遗传因素在帕金森发病中不可忽视的作用。本文对... 详细信息

帕金森病是一种复杂的多因素共同作用的神经变性性疾病,遗传因素和环境因素被认为是发病的重要原因。越来越多的研究发现遗传因素在其发病中起着重要作用,而最近LRRK2基因的发现更加确定了遗传因素在帕金森发病中不可忽视的作用。本文对LRRK2基因以及LRRK2基因在帕金森病中的研究做一综述。

关键词：帕金森基因 LRRK2 dardarin

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

动物与新发传染病

引用

实验动物与比较医学 2008年第3期28卷 133-137页

作者：秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

从最近几年发生的SARS、高致病性禽流感等新发传染病的流行病学调查结果来看,野生动物与新发传染病密切相关。许多因素可以导致人兽共患病或新发人兽共患病的发生,如环境改变、人类和动物的密切接触、病原因子的变异、农业行为方式改变... 详细信息

从最近几年发生的SARS、高致病性禽流感等新发传染病的流行病学调查结果来看,野生动物与新发传染病密切相关。许多因素可以导致人兽共患病或新发人兽共患病的发生,如环境改变、人类和动物的密切接触、病原因子的变异、农业行为方式改变等,社会和文化因素同样起到一定作用。人类与其他动物的和平共处,维护生态平衡,是控制新发传染病的重要方面。

关键词：动物人兽共患病新发传染病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

光化学法制作食蟹猴局部脑缺血模型

光化学法制作食蟹猴局部脑缺血模型

引用

亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：朱华李秦徐艳峰冯铭李昊孙井江赵春华王任直秦川中国医学科学院&北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院实验动物研究所motac合作实验室中国医学科学院北京协和医院中国医学科学院基础医学研究所

目的使用光化学法构建食蟹猴局部脑缺血模型,为干细胞移植治疗提供必要的条件。方法选择8只健康成年食蟹猴,静脉注射35mg/kg体重的玫瑰红B 5 min后用冷光源照射大脑皮层中央前回10 min。第一次注射后10 min注射第二次玫瑰红B,浓度与第... 详细信息

目的使用光化学法构建食蟹猴局部脑缺血模型,为干细胞移植治疗提供必要的条件。方法选择8只健康成年食蟹猴,静脉注射35mg/kg体重的玫瑰红B 5 min后用冷光源照射大脑皮层中央前回10 min。第一次注射后10 min注射第二次玫瑰红B,浓度与第一次相同。照射完毕后,向颞侧移动光源发光口,在第二点照射10 min。利用影像学、神经功能缺损评分和组织病理学对模型进行评价。结果动物清醒后表现出不同程度的脑缺血症状与体征。病理学检查可见明显的坏死灶。坏死灶周围脑组织水肿,神经细胞变性坏死。结论成功的将光化学法首次应用于灵长类动物,为进行与临床有重要意义的神经细胞保护研究提供了重要的工具。

关键词：光化学法脑出血食蟹猴

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

食蟹猴脑出血模型的建立及评价

食蟹猴脑出血模型的建立及评价

引用

亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：朱华李秦冯铭陈云新李昊孙井江赵春华王任直秦川中国医学科学院&北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院实验动物研究所motac合作实验室中国医学科学院北京协和医院中国医学科学院基础医学研究所

目的建立稳定的食蟹猴自体股动脉抗凝血脑出血模型。方法健康成年食蟹猴8只,采用新鲜抗凝自体股动脉血1.5ml立体定向一次性缓慢匀速注入右侧基底节区屏状核内侧,利用MRI、PET、神经功能缺损评分和组织病理学对模型进行评价。结果动物在... 详细信息

目的建立稳定的食蟹猴自体股动脉抗凝血脑出血模型。方法健康成年食蟹猴8只,采用新鲜抗凝自体股动脉血1.5ml立体定向一次性缓慢匀速注入右侧基底节区屏状核内侧,利用MRI、PET、神经功能缺损评分和组织病理学对模型进行评价。结果动物在麻醉苏醒后出现了与血肿部位相对应的神经系统定位体征,影像学检查血肿腔位于右侧基底节,注血部位大片代谢缺损区,中线向左侧移位。组织病理学检查损伤局部周围可见多量泡沫细胞、淋巴细胞及单核巨噬细胞浸润,部分损伤脑组织已被肉芽组织机化。结论自体股动脉抗凝血定向脑内注射法可建立稳定、可靠的食蟹猴脑出血模型,注血量、注血部位和速度是模型成功与否的关键。

关键词：动物模型脑出血食蟹猴基底节

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

心肌营养素-1在心脏发育和心脏病发生中的作用

引用

中国分子心脏病学杂志 2008年第1期8卷 55-59页

作者：吕丹张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所比较医学中心北京市朝阳区潘家园南里5号100021

心肌营养素-1是1995年Pennica等从小鼠心脏发育的胚胎干细胞中克隆表达出的一种蛋白质因子。其为白细胞介素-6细胞因子家族的新成员,它可促使心肌细胞肥大,同时也有促使心肌细胞存活的作用。在缺血性心脏病、心肌病及心力衰竭等疾病时C... 详细信息

心肌营养素-1是1995年Pennica等从小鼠心脏发育的胚胎干细胞中克隆表达出的一种蛋白质因子。其为白细胞介素-6细胞因子家族的新成员,它可促使心肌细胞肥大,同时也有促使心肌细胞存活的作用。在缺血性心脏病、心肌病及心力衰竭等疾病时CT-1水平均有升高。本文就CT-1在心血管领域的作用及其机理的研究进展作一综述。

关键词：心肌营养素-1 心肌病心衰心室重塑高血压

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

活体荧光技术在肿瘤研究中的应用

活体荧光技术在肿瘤研究中的应用

引用

亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：高苒刘学丽冯娟董伟全雄志张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立绿色荧光(GFP)转基因小鼠模型,用GFP和DsRed标记肿瘤细胞,建立系统的活体光学成像技术所需标记动物和标记细胞。并且利用GFP小鼠和DsRed标记的肿瘤细胞,建立双荧光小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细... 详细信息

目的建立绿色荧光(GFP)转基因小鼠模型,用GFP和DsRed标记肿瘤细胞,建立系统的活体光学成像技术所需标记动物和标记细胞。并且利用GFP小鼠和DsRed标记的肿瘤细胞,建立双荧光小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法把EGFP和DsRed基因插入chickenβ-actin强启动子下游构建转基因载体,并且用上述载体标记肿瘤细胞;利用显微注射转基因技术建立绿色荧光转基因C57BL/6J小鼠;将DsRed标记的B16小鼠黑色素瘤细胞接种到绿色荧光转基因小鼠皮下,建立双荧光小鼠肿瘤模型;用活体荧光成像仪和荧光纤维镜分别在整体和细胞水平观察肿瘤的生长。结果建立了绿色荧光转基因小鼠模型和荧光素酶转基因小鼠模型,标记了12种人和小鼠的肿瘤细胞。利用DsRed标记的B16小鼠黑色素瘤细胞和GFP转基因小鼠建立了双荧光小鼠肿瘤模型。利用活体荧光影像仪可以动态监测肿瘤的生长,可以观察到双色荧光小鼠模型中受体绿色荧光组织和红色荧光移植肿瘤相互融合。利用荧光显微镜,可以观察到肿瘤内绿色荧光标记的来源于受体小鼠的血管和免疫细胞。经香菇多糖刺激的GFP小鼠肿瘤模型的移植瘤组织中,来源于受体小鼠绿色荧光标记的血管明显少于经生理盐水刺激的对照组,而免疫细胞明显多于对照小鼠。结论成功建立了绿色荧光转基因小鼠,将成为活体荧光影像系统的重要实验动物模型;利用绿色荧光转基因小鼠和红色荧光DsRed标记的肿瘤细胞建立的双荧光小鼠肿瘤模型,采用活体荧光成像仪和荧光显微镜可在整体和细胞水平直接观察肿瘤的生长以及肿瘤与宿主的相互作用;而且香菇多糖治疗效果的观察也证实了活体光学成像技术的直观性和实用性。

关键词：活体荧光转基因小鼠肿瘤模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肝素结合类表皮生长因子参与DCM模型小鼠心脏间质纤维化

肝素结合类表皮生长因子参与DCM模型小鼠心脏间质纤维化

引用

亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：冯娟彭健豪张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的探讨肝素结合类表皮生长因子对DCM模型小鼠心脏间质纤维化的作用。方法 Western blotting检测野生型和DCM模型小鼠心脏中HB-EGF的表达,H&E和Masson染色检测DCM模型小鼠心脏组织学,Realtime PCR检测DCM模型小鼠心脏Ⅰ型胶原和Ⅲ... 详细信息

目的探讨肝素结合类表皮生长因子对DCM模型小鼠心脏间质纤维化的作用。方法 Western blotting检测野生型和DCM模型小鼠心脏中HB-EGF的表达,H&E和Masson染色检测DCM模型小鼠心脏组织学,Realtime PCR检测DCM模型小鼠心脏Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达。显微注射法建立HB-EGF转基因C57BL/6J小鼠,PCR鉴定基因表型,Western blotting检测表达水平。病理检测HB-EGF转基因小鼠心脏的组织学,Realtime PCR检测HB-EGF转基因小鼠心脏Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达。原代培养C57BL/6J小鼠心肌成纤维细胞,重组人HB-EGF(10ng/ml)刺激心肌成纤维细胞后,BrdU免疫组织化学法检测心肌成纤维细胞的增殖,Realtime PCR检测Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达,Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs),ERK1/2和JNK信号通路的变化。结果野生型小鼠心脏HB-EGF的表达随月龄增加而逐渐降低,而DCM转基因小鼠心脏中HB-EGF随月龄增加病情加重而增加,并伴随有间质纤维化以及Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达增加(1.7倍和1.6倍)。用HB-EGF转基因小鼠研究HB-EGF的功能,发现HB-EGF可增加心脏间质纤维化,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达(1.8倍)。用重组人HB-EGF刺激原代培养心肌成纤维细,30 min即引起Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达显著增加,24h引起心肌成纤维细胞明显增殖,10 min即可引起ERK1/2,JNK磷酸化水平增加。结论结果证实HB-EGF参与DCM模型小鼠心脏间质纤维化。HB-EGF促进Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达,可能通过MAPKs信号通路发挥上述作用。

关键词：肝素结合类表皮生长因子转基因模型心肌细胞成纤维细胞丝裂原活化蛋白激酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Dkk3转基因模型

Dkk3转基因模型

引用

亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会

作者：吕丹冯娟赵海平张丽张伟董伟秦川张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的为在体内研究Dkk3对心脏功能的影响而建立心脏特异的Dkk3转基因小鼠。背景WNT家族WNT1、WNT3a、WNT8等成员对心脏发育具有重要的作用,Dkk3作为Wnt通路拮抗剂Dickkopf(Dkk)家族成员之一,目前发现其与肿瘤发生发展,细胞保护、凋亡等... 详细信息

目的为在体内研究Dkk3对心脏功能的影响而建立心脏特异的Dkk3转基因小鼠。背景WNT家族WNT1、WNT3a、WNT8等成员对心脏发育具有重要的作用,Dkk3作为Wnt通路拮抗剂Dickkopf(Dkk)家族成员之一,目前发现其与肿瘤发生发展,细胞保护、凋亡等病理进程关系密切,但对于Dkk3对心脏及心血管系统的生物学功能所知甚少,本研究特建立心脏特异的Dkk3转基因小鼠,为研究Dkk3对心脏功能的影响提供病理模型工具。方法利用基因克隆技术,构建α-MHC-m-Dkk3表达载体,经酶切及序列测序鉴定后,通过显微注射将制备好的片段注入受精卵,将注射后存活的受精卵移入ICR假孕母鼠,产下的仔鼠经聚合酶链反应(PCR)筛选出整合有外源目的基因的阳性转基因鼠;对转基因小鼠心脏组织RNA行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及RNA印迹(Northern blot)分析,检测Dkk3在转基因小鼠心脏中的表达水平;对转基因小鼠心脏进行超声波分析,观察转基因小鼠心脏结构形态及功能的变化情况;利用光镜观察转基因小鼠心脏整体结构形态及心肌细胞、胶原纤维等显微结构的改变;利用光镜观察转基因小鼠左心房及左心室等部位心肌纤维、肌质网及线粒体等超微结构的改变。结果重组质粒α-MHC-m-Dkk3中α-MHC启动子及Dkk3 cDNA序列正确,假孕鼠所产仔鼠经PCR检测,检出15只首建鼠;依RT-PCR和Northern blot分析结果筛出高、中、低不同表达水平的3个首建鼠用于其他实验研究;超声波检查发现Dkk3于心脏中过表达可引起转基因小鼠左心室心壁变厚,左心室心腔缩小,心重指数增加,射血分数增加,心肌收缩力增强等改变;光镜观察转基因小鼠整体心脏HE、Masson染色,可见左心室心腔及心肌细胞间间隙变小,心肌细胞增大等改变;电镜观察转基因小鼠心脏超微结构发现其心肌纤维排列轻度紊乱,肌质网轻度扩张,线粒体有增生等改变。结论 Dkk3对心脏的正常生理功能具有重要的影响,α-MHC-m-Dkk3转基因小鼠系的建立为深入研究Dkk3对心脏功能的影响提供了病理模型。

关键词： Dkk3转基因心脏模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：