检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2016年第12期50卷 1032-1035页

作者：董少忠朱文兵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

全球消灭脊髓灰质炎已经进入最终阶段，但依然面临巨大的挑战。《全球消灭脊髓灰质炎最后阶段战略规划（2013—2018）》（尾声战略）设定了至2018年世界无脊髓灰质炎的目标。同时，《世界卫生组织全球行动计划》（GAPⅢ）要求在消灭野... 详细信息

全球消灭脊髓灰质炎已经进入最终阶段，但依然面临巨大的挑战。《全球消灭脊髓灰质炎最后阶段战略规划（2013—2018）》（尾声战略）设定了至2018年世界无脊髓灰质炎的目标。同时，《世界卫生组织全球行动计划》（GAPⅢ）要求在消灭野生脊髓灰质炎病毒后，需严格封存脊髓灰质炎病毒。为保证尾声战略和GAPⅢ顺利实施，目前，全球每个新生儿需引入至少一剂次脊髓灰质炎灭活疫苗（IPV）。相对于野病毒生产的IPV，Sabin IPV具有生成过程安全性高，生产成本低的特点，可在全球消灭脊髓灰质炎的最后阶段中发挥重要作用。

关键词：脊髓灰质炎疫苗,灭活尾声战略计划

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不同氢氧化铝佐剂和吸附方式对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗免疫效果的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第9期38卷 697-701页

作者：粱疆莉顾琴高娜马艳姬秋彦史荔孙明波衡燮中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）免疫效果的影响.方法用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用... 详细信息

目的研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）免疫效果的影响.方法用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用顺序吸附和分别吸附两种方式吸附抗原,使用进口和自制氢氧化铝,比较各抗原的吸附率、各抗原抗体水平以及百日咳、破伤风、白喉疫苗效价.结果 0.52 mg/ml铝含量组吸附率最高,0.42 mg/ml铝含量组吸附率最低;顺序吸附和分别吸附两种吸附方式没有明显差异;使用进口氢氧化铝佐剂和自制氢氧化铝佐剂组分抗体反应各有不同,差异无统计学意义.结论 0.52 mg/ml铝含量、自制氢氧化铝佐剂和分别吸附的方式适用于DTaP-sIPV疫苗的制备.

关键词： DTaP—sIPV 吸附率疫苗效价抗百日咳毒素抗体抗丝状血凝素抗体抗百日咳粘着素抗体抗白喉类毒素抗体抗破伤风类毒素抗体

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阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡

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中国药理学通报 2017年第2期33卷 185-190页

作者：陶玉芬刘波李超李昕潼刘建生杨昭庆刘红旗中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的探讨阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡及其机制。方法 EB病毒转化的人B淋巴细胞经一定浓度的阿司匹林处理后,首先通过MTT法分析细胞的增殖情况;然后用光学显微镜和电子显微镜、PI染色和流式细胞术分析以及琼脂糖凝胶电泳等... 详细信息

目的探讨阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡及其机制。方法 EB病毒转化的人B淋巴细胞经一定浓度的阿司匹林处理后,首先通过MTT法分析细胞的增殖情况;然后用光学显微镜和电子显微镜、PI染色和流式细胞术分析以及琼脂糖凝胶电泳等方法对细胞凋亡进行评价;最后,通过免疫印记法检测凋亡相关蛋白、mTOR信号通路和PU.1-Bim信号通路蛋白表达情况。结果阿司匹林能抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖。形态学和超微结构观察发现,阿司匹林处理的细胞固缩变小、数目减少、细胞核畸形、染色质边缘化和细胞质空泡化。阿司匹林处理导致细胞膜通透性增加、细胞存活率明显下降和细胞DNA的弥散现象。免疫印迹分析显示,阿司匹林处理抑制了细胞的mTOR信号和转录因子PU.1的表达水平,激活了细胞凋亡相关蛋白caspase-3、PARP和Bim。结论阿司匹林可能通过抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖和诱导细胞凋亡表现一定的抗淋巴瘤效应,mTOR信号途径和PU.1-Bim轴可能参与了阿司匹林抗肿瘤作用机制。

关键词：阿司匹林 EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡 mTOR PU.1-Bim轴抗肿瘤

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新型Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗研究进展

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中华预防医学杂志 2021年第3期55卷 413-417页

作者：陈诗怡李颖杨净思尹兴晓中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

全球消灭脊髓灰质炎行动(GPEI)于2016年4月调整脊髓灰质炎疫苗免疫接种战略,将三价口服脊髓灰质炎疫苗(tOPV)转换为二价口服脊髓灰质炎疫苗(bOPV),并在全球全面撤出Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPVⅡ)。然而在OPVⅡ撤出以后,亚洲和非... 详细信息

全球消灭脊髓灰质炎行动(GPEI)于2016年4月调整脊髓灰质炎疫苗免疫接种战略,将三价口服脊髓灰质炎疫苗(tOPV)转换为二价口服脊髓灰质炎疫苗(bOPV),并在全球全面撤出Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPVⅡ)。然而在OPVⅡ撤出以后,亚洲和非洲多地暴发Ⅱ型循环疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(cVDPVⅡ)。为了彻底消灭脊髓灰质炎病毒,GPEI于2010年启动研发新型Ⅱ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(nOPVⅡ),并于近年开始考虑是否有必要重启OPV。本文概述了OPVⅡ撤出前后cVDPVⅡ的流行病学情况,影响OPV重启的相关因素以及nOPVⅡ相关研究进展。

关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗衍生脊髓灰质炎病毒急性弛缓性麻痹新型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗

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酪氨酸羟化酶重组腺病毒在293细胞中的表达及体外活性测定

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南方医科大学学报 2010年第4期30卷 681-685页

作者：王文举孙茂盛严敏谢天宏张光明李鸿钧中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的构建一种能够携带酪氨酸羟化酶(TH)进入帕金森氏病动物模型体内的重组腺病毒,该病毒能够使TH基因转录并且能够翻译成具有活性的功能蛋白。方法将TH基因插入穿梭质粒,重组穿梭质粒与腺病毒基因组在BJ-5183中进行同源重组,将重组成功... 详细信息

目的构建一种能够携带酪氨酸羟化酶(TH)进入帕金森氏病动物模型体内的重组腺病毒,该病毒能够使TH基因转录并且能够翻译成具有活性的功能蛋白。方法将TH基因插入穿梭质粒,重组穿梭质粒与腺病毒基因组在BJ-5183中进行同源重组,将重组成功的腺病毒基因组转染293细胞,使其在293细胞中包装出重组腺病毒,RT-PCR和免疫荧光检测目的基因的转录和表达。利用毛细管电泳法检测L-DOPA的生成。结果成功构建能够表达TH基因的重组腺病毒,RT-PCR能够扩增目的插入片段,毛细管电泳能够检测到L-DOPA的生成。结论该重组腺病毒能够在体外很好地表达具有活性的酪氨酸羟化酶,为利用该基因对帕金森氏病动物模型进行基因治疗打下基础。

关键词：酪氨酸羟化酶重组腺病毒帕金森病毛细管电泳

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共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒

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中国生物工程杂志 2018年第5期38卷 66-72页

作者：白红妹黄惟巍刘存宝孙文佳杨旭马雁冰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所

目的：构建呈现人白细胞介素-13（interleukin-13,IL-13）抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）疫苗。方法：将人IL-13抗原肽经基因重组插入Qβ噬菌体衣壳蛋白（CP）的C端。在BL21细菌中,经IPTG诱导CP及C端接有IL... 详细信息

目的：构建呈现人白细胞介素-13（interleukin-13,IL-13）抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒（virus-like particles,VLPs）疫苗。方法：将人IL-13抗原肽经基因重组插入Qβ噬菌体衣壳蛋白（CP）的C端。在BL21细菌中,经IPTG诱导CP及C端接有IL-13抗原肽的CP（CP/IL-13）同时表达。以硫酸铵沉淀及蔗糖密度梯度离心进行VLPs纯化及分析嵌合VLPs的存在,以HPLC分析VLPs纯度,以电镜观察颗粒形态。小鼠经皮下免疫VLPs后采集血清,以ELISA检测人IL-13特异性Ig G抗体水平。结果：重组蛋白CP与CP/IL-13获得成功表达,两者在密度梯度离心中有一致的、与QβVLPs相同的沉降行为,而CP/IL-13单独无Qβ颗粒行为。经纯化获得了高纯度颗粒,嵌合颗粒与Qβ颗粒形态相似。此外,该VLPs疫苗诱导小鼠产生了IL-13特异的抗体应答。结论：利用共表达策略可成功构建呈现人IL-13抗原表位的嵌合VLPs,为以主动免疫方式调控IL-13在疾病中的病理作用,提供了具有临床应用潜能的疫苗形式。

关键词：白细胞介素-13 病毒样颗粒疫苗

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幽门螺杆菌alpA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第3期26卷 203-206页

作者：孙振璐毕研伟白彩明高丹丹李智华戴宗祥李健峰徐维明中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的:在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(Hp)黏附素al-pA基因,口服免疫小鼠后检测其免疫原性。方法:PCR方法从基因组中扩增alpA基因,将其克隆至表达载体pNICE:sec,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的alpA蛋白用SDS-PAGE... 详细信息

目的:在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(Hp)黏附素al-pA基因,口服免疫小鼠后检测其免疫原性。方法:PCR方法从基因组中扩增alpA基因,将其克隆至表达载体pNICE:sec,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的alpA蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR(CV级)小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-alpA的乳酸菌、灭活的Hp灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。结果:扩增alpA基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-alpA,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约56 000的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.6%,Western blot分析其能与幽门螺杆菌抗血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:sec-alpA质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活Hp组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组(P<0.05)。结论:表达al-pA蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,可作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和Hp口服疫苗的开发提供一定的实验基础。

关键词：幽门螺杆菌乳酸乳球菌 alpA基因

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A群脑膜炎球菌多糖-白喉毒素无毒变异体CRM197结合物的制备及其初步评价

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中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1248-1253页

作者：张营营蔡路奎姜博毕研伟高丹丹闫铃梅姬秋彦李智华徐维明中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的制备A群膜炎球菌多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)-白喉毒素无毒变异体CRM197(Cross-reactive material 197)结合物,并分析其理化性质及免疫学特性。方法白喉棒状杆菌C7 M1菌株经发酵培养表达CRM197,表达产物经DEAE-4FF层析柱进行纯化,纯化产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。用溴化氰(CNBr)活化GAMP,己二酰肼(ADH)为连接剂,在碳二亚胺(EDAC)催化下将GAMP与CRM197共价结合,制备GAMP-ADH-CRM197结合物,经Sepharose 4FF层析柱纯化后,进行各项生化检测,采用免疫双扩散检测结合物的抗原性,将结合物皮下注射ICR小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP的抗体滴度,分析其免疫原性。结果发酵培养20 h时,菌液上清中的CRM197蛋白表达量最高;CRM197以分泌形式表达,纯化后纯度达95%以上,可与白喉类毒素单抗发生特异性反应;GAMP-ADH-CRM197结合物各项生化指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求,与A群流脑诊断血清形成明显的沉淀线,结合物诱生的多糖特异性抗体滴度显著高于多糖组和混合物组。结论成功制备了GAMP-ADH-CRM197结合物,其具有良好的抗原性和免疫原性,为以CRM197为蛋白载体制备脑膜炎球菌结合疫苗奠定了基础。

关键词： A群脑膜炎球菌多糖白喉毒素 CRM197 变异体结合物载体蛋白

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野生中缅鼩病毒携带情况的初步调查

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Zoological Research 2011年第1期32卷 66-69页

作者：王新兴李婧潇王文广孙晓梅何春艳代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

病毒学检测和监测是树鼩实验动物化和质量控制的重要标准和依据,而野生中缅树鼩是否携带人兽共患病毒鲜见报道。本研究采用酶联免疫吸附(ELISA)方法,对来源于云南昆明市城郊青龙峡地区的野生树鼩是否携带单纯疱疹病毒、轮状病毒、流感... 详细信息

病毒学检测和监测是树鼩实验动物化和质量控制的重要标准和依据,而野生中缅树鼩是否携带人兽共患病毒鲜见报道。本研究采用酶联免疫吸附(ELISA)方法,对来源于云南昆明市城郊青龙峡地区的野生树鼩是否携带单纯疱疹病毒、轮状病毒、流感病毒、柯萨奇病毒、甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、丁肝病毒、登革热病毒、出血热病毒和麻疹病毒等11种常见病毒进行筛查。结果表明,在已筛查的60只野生中缅树鼩中,可检测到单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒,其血清抗体阳性比例分别为36.7%(22/60)和1.67%(1/60),而在粪便中仅检测到轮状病毒,其抗原阳性为6.7%(4/60),未检测到其他病毒,初步显示了野生树鼩自然状态下携带病毒的状况。为此,建议将单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒和轮状病毒列为普通级树鼩病毒质量控制的首检项目,进一步大样本筛查将显示是否将其他病毒列为必检项目。

关键词：中缅树鼩病毒监测酶联免疫吸附试验

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RNA分子抗SARS病毒的应用和研究进展

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病毒学报 2010年第4期26卷 336-339页

作者：陈婕蔡宏荣李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome, SARS)又称传染性非典型肺炎,是一种严重急性呼吸系统传染病,系由SARS相关冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome associated coronavirus, SARS-CoV)引起的新发传染病[1]. SARS-CoV是单股正链RNA病毒,呈现典型冠状病毒基因组结构特征:5′-复制酶基因-S基因-E基因-M基因-N基因-3′以及5′和3′端非编码区[2]. SARS-CoV侵入宿主细胞后,首先以病毒基因组RNA为模板,翻译自身RNA依赖的RNA聚合酶,然后利用这种聚合酶完成病毒负链亚基因组RNA转录、各结构蛋白的mRNA转录以及病毒基因组RNA复制等病毒粒增殖过程中的一系列环节[3]

关键词： SARS病毒严重急性呼吸综合征呼吸系统传染病 RNA 传染性非典型肺炎应用分子冠状病毒

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