检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2017年第7期37卷 1042-1046页

作者：张潇怡王晓月中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用癌基因组图谱数据库中的大量胃癌基因组数据,在高频突变或肿瘤组织高表达的基因中挖掘与临床分化和预后相关的基因。方法从癌基因组图谱数据集中下载胃癌基因组的突变数据,基因表达数据以及病例样本的临床信息资料。筛选并统计... 详细信息

目的利用癌基因组图谱数据库中的大量胃癌基因组数据,在高频突变或肿瘤组织高表达的基因中挖掘与临床分化和预后相关的基因。方法从癌基因组图谱数据集中下载胃癌基因组的突变数据,基因表达数据以及病例样本的临床信息资料。筛选并统计出现有害突变频率较高的基因,并比较这些基因在不同分化程度病例中的突变次数。同时利用DESeq2对基因表达数据进行差异表达分析,对于在肿瘤组织中高表达的基因做生存分析,使用Log-rank检验并做FDR校正,筛选出mRNA表达量与胃癌预后相关联的基因。结果突变分析得到PIK3CA和APC的有害突变频率在不同分化程度的胃癌存在差异(Fisher's exact test:P<0.05)。差异表达分析得到2 040个在肿瘤组织中上调的基因,2 357个在肿瘤组织中下调的基因。生存分析得到8个对胃癌预后有影响的基因,1个为保护因素,7个危险因素。结论本研究通过挖掘癌基因组图谱中的胃癌数据集,得到了ANGPT2、MMP10和WISP3等与胃癌分化及预后相关的基因,为接下来的研究提供了线索和依据,也为临床治疗提示了新的预后指标。

关键词：癌症基因组图谱体细胞突变表达量预后

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FTO在胃癌组织中的表达降低及其对细胞系MGC-803功能的影响

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 907-911页

作者：皮静楠张杰王学鹏熊家超余佳中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京10005

目的探讨RNA甲基化相关蛋白FTO在胃癌中的表达变化情况,及其对胃癌细胞功能的影响。方法用realtime PCR检测54例胃癌组织及对应癌旁组织中FTO的表达;用质粒(p CMV6-FTO)实现FTO在胃癌细胞系MGC-803中的过表达;通过增殖实验、划痕试验和T... 详细信息

目的探讨RNA甲基化相关蛋白FTO在胃癌中的表达变化情况,及其对胃癌细胞功能的影响。方法用realtime PCR检测54例胃癌组织及对应癌旁组织中FTO的表达;用质粒(p CMV6-FTO)实现FTO在胃癌细胞系MGC-803中的过表达;通过增殖实验、划痕试验和Transwell实验,检测FTO对MGC-803细胞功能的影响。结果 FTO mRNA在胃癌组织的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),且其表达与胃癌样本的临床分期密切相关(P<0.05);在MGC-803细胞系中过表达FTO,可抑制胃癌细胞增殖(P<0.05)、抑制细胞迁移(P<0.05)和侵袭(P<0.05)。结论 FTO在胃癌组织中低表达,并且抑制胃癌细胞系的增殖、迁移和侵袭,可能与胃癌发生发展密切相关。

关键词：胃癌 MGC-803 FTO

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miR-449b介导5-氟尿嘧啶/顺铂抑制肝癌细胞的迁移

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 792-796页

作者：侯彭姣邓艳春梁娜刘长征中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检... 详细信息

目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检测miR-449b的表达;在肝癌细胞中过表达miR-449b或用5-氟尿嘧啶和顺铂分别处理肝癌细胞,利用细胞划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力变化;设计拯救实验,探究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b表达,参与肝癌细胞迁移能力调控;软件预测结合Western blot实验,鉴定miR-449b的功能靶基因。结果 miR-449b在肝癌患者组织中表达下调(P<0.001);5-氟尿嘧啶和顺铂诱导肝癌细胞内源性miR-449b的表达上调(P<0.001);过表达miR-449b可以抑制肝癌细胞的迁移(P<0.001);敲低miR-449b的表达可以抑制5-氟尿嘧啶和顺铂对肝癌细胞迁移能力的抑制作用(P<0.05);catenin-δ是miR-449b的直接靶基因。结论5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b的表达抑制肝癌细胞的迁移。

关键词： miR-449b 5-氟尿嘧啶顺铂肝细胞癌

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一种利用吖啶橙染色快速鉴定重力密度梯度沉降法中生精细胞类型的方法

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基础医学与临床 2017年第5期37卷 591-595页

作者：赵晴韩睿钦王琳芳宋伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的建立一种重力梯度沉降法分离粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的快速精确的镜检方法。方法利用重力密度梯度沉降法分离,将收集到的每管细胞分别放入96孔板中,每孔加入一定浓度的吖啶橙染液,于荧光显微镜下观察。结果通过分析对应... 详细信息

目的建立一种重力梯度沉降法分离粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的快速精确的镜检方法。方法利用重力密度梯度沉降法分离,将收集到的每管细胞分别放入96孔板中,每孔加入一定浓度的吖啶橙染液,于荧光显微镜下观察。结果通过分析对应荧光通道下3种生精细胞的细胞核/细胞质染色结果,可快速精确的分辨出粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞。结论建立了一种在重力密度梯度沉降法分离生精细胞过程中快速镜检检测粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的方法。

关键词：重力密度梯度沉降法粗线期精母细胞圆形精子细胞长形精子细胞吖啶橙染色

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CRIF1参与高糖诱导的rRNA基因转录

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医学研究杂志 2017年第11期46卷 20-23,27页

作者：贾会会阎海霞程谟斌张业中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室 100005

目的探索CRIF1在高糖诱导下对rRNA基因转录中的作用。方法在HEK293T细胞中,转染CRIF1表达载体或空载对照,培养48h后收取细胞提取总RNA,通过RT-q PCR检测pre-rRNA的mRNA水平;用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基培养HEK293T细胞12h后,收集全... 详细信息

目的探索CRIF1在高糖诱导下对rRNA基因转录中的作用。方法在HEK293T细胞中,转染CRIF1表达载体或空载对照,培养48h后收取细胞提取总RNA,通过RT-q PCR检测pre-rRNA的mRNA水平;用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基培养HEK293T细胞12h后,收集全细胞提取物,进行Western blot法检测CRIF1蛋白的表达水平;在HEK293T细胞中转染sh CRIF1干扰质粒或空载对照,36h后换用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基继续培养细胞12h后,收取细胞提取总RNA,通过RTq PCR检测pre-rRNA的水平。结果 CRIF1可促进pre-rRNA的表达;随着糖浓度的升高,CRIF1的表达量逐渐增加;敲低CRIF1可抑制糖浓度依赖的pre-rRNA的表达。结论 CRIF1可提高高糖诱导下pre-rRNA的表达水平,从而参与高糖诱导的rRNA基因的转录调控。

关键词： CRIF1 pre-rRNA 葡萄糖诱导

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头孢曲松钠抗颞叶癫痫的效果

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基础医学与临床 2017年第5期37卷 658-662页

作者：李晶许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家医学分子生物学重点实验室北京100005

目的研究头孢曲松钠(Cef)对颞叶癫痫模型小鼠的抗癫痫效果以及对谷氨酸转运蛋白(GLT-1)表达情况的作用。方法首先构建颞叶癫痫小鼠模型,利用同步视频脑电监测(v EEG)技术,24 h不间断记录小鼠癫痫发作情况。实验组腹腔注射Cef 200 mg/(kg... 详细信息

目的研究头孢曲松钠(Cef)对颞叶癫痫模型小鼠的抗癫痫效果以及对谷氨酸转运蛋白(GLT-1)表达情况的作用。方法首先构建颞叶癫痫小鼠模型,利用同步视频脑电监测(v EEG)技术,24 h不间断记录小鼠癫痫发作情况。实验组腹腔注射Cef 200 mg/(kg·d),对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,从癫痫发作频率、间期棘波及海马硬化等方面评价Cef对癫痫发作的控制情况,并用Western blot检测其对谷氨酸转运蛋白GLT-1表达情况的影响。结果单侧海马注射200 ng海人酸(KA)可模拟内侧颞叶癫痫患者反复自发性癫痫发作和海马硬化等两个疾病症状,成功构建内侧颞叶癫痫模型。Cef处理使癫痫发作次数从2.145次/d降低到1.597次/d,平均发作次数降低了31.2%(P<0.05)。KA癫痫小鼠较正常小鼠GLT-1表达明显降低,但Cef处理并未明显提升GLT-1的表达。结论腹腔注射Cef部分抑制KA癫痫小鼠的慢性自发性癫痫发作,但无明显提升海马中GLT-1的表达,提示其可能并非是通过提高星形胶质细胞的谷氨酸清除能力而抑制癫痫发作。

关键词：头孢曲松钠海人酸内侧颞叶癫痫模型谷氨酸转运蛋白(GLT-1)

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肿瘤来源外泌体通过激活肺上皮细胞TLR3促进肺转移前微环境形成

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第2期24卷 I0001-I0003页

作者：刘艳芳顾炎韩岩梅张迁蒋正平张相黄波许小青郑建明曹雪涛第二军医大学免疫学研究所医学免疫学国家重点实验室上海200433 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所免疫学教研室医学分子生物学国家重点实验室北京100005 第二军医大学长海医院病理科上海200433

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官，与靶器官中基质细胞的协同作用，创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞（如中性粒细胞等）被... 详细信息

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官，与靶器官中基质细胞的协同作用，创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞（如中性粒细胞等）被证实参与了转移前微环境的形成。

关键词：肿瘤患者微环境肺转移肺上皮细胞外泌体激活肿瘤转移来源细胞

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肿瘤来源外泌体通过激活肺上皮细胞TLR3促进肺转移前微环境形成

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第1期24卷 I0013-I0015页

关键词：肿瘤患者微环境肺转移肺上皮细胞外泌体激活肿瘤转移来源细胞

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miR-130b促进小鼠胚胎发育过程中大脑皮质神经元的迁移

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 959-962页

作者：刘佳辰许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家医学分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的通过胚胎在体电转染技术,在胚胎小鼠大脑皮质神经元中过表达miR-130b,探讨其对神经元迁移的影响。方法利用miR-130b过表达载体,在昆明小鼠E15.5胚胎大脑中电转染,并于E17.5处死母鼠,取胚胎进行冰冻切片,于荧光显微镜下观察阳性神经... 详细信息

目的通过胚胎在体电转染技术,在胚胎小鼠大脑皮质神经元中过表达miR-130b,探讨其对神经元迁移的影响。方法利用miR-130b过表达载体,在昆明小鼠E15.5胚胎大脑中电转染,并于E17.5处死母鼠,取胚胎进行冰冻切片,于荧光显微镜下观察阳性神经元的迁移情况。结果过表达miR-130b的小鼠胚胎,大脑皮质神经元的迁移速率上升,最终迁移到达MZ层的神经元占总阳性神经元的75.1%,远高于对照组的22.1%;且停留在VZ/SVZ层的神经元(7.9%)远低于对照组(69.3%)。结论 miR-130b在神经发育过程中能够促进神经元的迁移。在未来的研究中需要进一步探索其深层机制。

关键词： miR-130b 神经发育神经元迁移

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利用矩阵式单倍体胚胎干细胞突变体文库进行表型驱动的遗传筛选

利用矩阵式单倍体胚胎干细胞突变体文库进行表型驱动的遗传筛选

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中国干细胞第七届年会

作者：王雪刘光中国医学科学院/北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

利用哺乳动物细胞进行的遗传筛选工作已经被广泛的用于揭示基因的生物学功能。然而，哺乳动物细胞二倍体性的特点一直是一个阻碍，因为很多基因只有在纯合突变时才有表型。最近，单倍体胚胎干细胞(ESC)的成功分离很好地解决了这一问题... 详细信息

利用哺乳动物细胞进行的遗传筛选工作已经被广泛的用于揭示基因的生物学功能。然而，哺乳动物细胞二倍体性的特点一直是一个阻碍，因为很多基因只有在纯合突变时才有表型。最近，单倍体胚胎干细胞(ESC)的成功分离很好地解决了这一问题，并已经成功地应用于遗传筛选中。目前大多数遗传筛选工作是以混合突变体文库的形式进行，因此主要用于筛选出表型显著的突变克隆，在负性筛选上有较大的局限。

关键词：单倍体胚胎干细胞突变体文库遗传筛选

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