检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 615-619,I0010页

作者：高小博姚楠马旭陆彩玲杨伯清彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 国家人口计生委科学技术研究所遗传室北京100081 中国医学科学院北京协和医学院医学信息研究所基层卫生与妇幼保健研究室北京100020

目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观... 详细信息

目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观察活化型ERK5和显性负性ERK5对颗粒细胞甾体激素生成的影响。结果 Western blot检测结果表明,FSH处理颗粒细胞后ERK5的表达随处理时间延长而下调,而ERK5活性形式的表达随处理时间延长而逐渐上升。荧光共聚焦技术分析结果显示,FSH的处理并没有明显影响ERK5在颗粒细胞中的定位。腺病毒技术观察结果发现,在细胞中联合感染活化型MEK5重组腺病毒和野生型ERK5重组腺病毒能促进FSH引起的细胞内StAR的表达升高和孕酮分泌,而显性负性ERK5重组腺病毒感染细胞则出现相反的效应。结论 ERK5可能促进了FSH介导的颗粒细胞甾体激素生成。

关键词：细胞外信号激酶蛋白5 卵泡刺激素颗粒细胞甾体激素孕酮

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γδT细胞在病毒感染中的免疫学作用

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国际免疫学杂志 2011年第2期34卷 85-90页

作者：卢燕来朱于莉何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系医学分子生物学国家重点实验室100005

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫... 详细信息

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫细胞及免疫细胞的桥梁，除了起到直接的细胞毒杀伤作用，还作为免疫调节细胞和抗原递呈细胞发挥了抗感染的免疫功能。

关键词： γδT细胞病毒细胞毒免疫调节抗原递呈

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非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白C'末端SBP-3×Flag标记的HCT 116结直肠癌细胞模型的建立

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 624-628页

作者：黄泽彬张泽延张晓东缪时英王琳芳杜润蕾中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系武汉430072

目的建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。方法 PCR扩增同源臂,构建TPX2的腺相关病毒打靶载体,包装病毒后打靶HCT116结直肠癌细胞,G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的... 详细信息

目的建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。方法 PCR扩增同源臂,构建TPX2的腺相关病毒打靶载体,包装病毒后打靶HCT116结直肠癌细胞,G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的阳性细胞株,最后通过Cre病毒感染去除抗性基因,并用PCR方法筛选获得TPX2C末端SBP和3×Flag内源性双标签的HCT116结直肠癌细胞株。结果筛选获得2个含有新霉素抗性基因的细胞株,随后经Cre病毒感染得到去除新霉素抗性基因的阳性细胞克隆,并经Western blot检测验证了SBP-3×Flag基因的敲入。结论成功建立了TPX2 C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。

关键词：非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白基因敲入同源重组 HCT116 结直肠癌

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MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 609-614页

作者：蒋崇亮汪晓艳龚佳男王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心生物化学与分子生物学教研室重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共... 详细信息

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27,72 h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平,Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体,感染胃癌细胞HGC-27后,能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b,其靶基因MCL-1的表达明显被抑制,并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比,Lenti-29b组的迁移能力显著降低(P<0.01);Lenti-29b组与Lenti-vector组相比,Lenti-29b组在48、72及96 h 3个时间点的增殖能力均显著下降(P<0.01)。结论成功获得过表达miR-29b的重组慢病毒颗粒,miR-29b能够抑制其靶基因MCL-1的表达,并对HGC-27细胞的迁移和增殖有明显的抑制作用。

关键词： miR-29b 胃癌细胞慢病毒细胞迁移细胞增殖

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MicroRNA-144调控红系分化

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 642-646页

作者：汪晓艳蒋崇亮朱勇王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白(RB)对红系分化的影响。方法用氯化高铁血红素(hemin)诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程,使用Real-time PCR检测miR-144表达;利用体外合成的寡核苷... 详细信息

目的研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白(RB)对红系分化的影响。方法用氯化高铁血红素(hemin)诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程,使用Real-time PCR检测miR-144表达;利用体外合成的寡核苷酸(mimic-144)转染K562细胞,检测过量表达miR-144对红系分化的影响;结合生物信息学分析、双荧光素酶报告系统和Western blot寻找并确定miR-144的靶基因。结果 miR-144在hemin诱导的K562红系分化过程中表达显著升高(P<0.05),在K562细胞中过表达miR-144可以促进血红蛋白(γ-globin)和红细胞表面标志CD235a的表达和积累;RB为miR-144的靶基因之一;在K562红系分化中,RB呈先略升后降的趋势,以0 h为参照,12 h RB/GAPDH灰度值最低为:0.092±0.007(P<0.05)。结论 miR-144通过负调控RB的表达促进hemin诱导的K562红系分化。

关键词： microRNA-144 红系分化视网膜母细胞瘤蛋白

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生长因子受体结合蛋白7(Grb7)研究进展

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 467-470页

作者：张丹高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理与病理生理学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005

Grb7蛋白是Grb7蛋白家族的成员之一,该蛋白有3种结构区域:N末端富含脯氨酸,中间结构域与线虫(Caenorhabditis elegans)的MIG-10蛋白有着很高的同源性,C末端为SH2结构域。Grb7通过3种结构域尤其是SH2结构域,参与细胞各种信号传导途径。... 详细信息

Grb7蛋白是Grb7蛋白家族的成员之一,该蛋白有3种结构区域:N末端富含脯氨酸,中间结构域与线虫(Caenorhabditis elegans)的MIG-10蛋白有着很高的同源性,C末端为SH2结构域。Grb7通过3种结构域尤其是SH2结构域,参与细胞各种信号传导途径。研究其不同结构域在肿瘤细胞中所发挥的作用,将对Grb7高表达的肿瘤治疗产生重要影响。

关键词： Grb7 结构域

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电压门控钠离子通道与恶性肿瘤的转移

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生理科学进展 2011年第3期42卷 217-220页

作者：潘惠艳黄秉仁首都医科大学附属北京妇产医院中心实验室北京100006 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学和分子生物学系国家医学分子生物学重点实验室北京100005

电压门控钠离子通道(VGSC)是可兴奋组织中动作电位的关键离子通道,具有重要的生理功能。近年来国内外研究发现,VGSC在转移的前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等细胞中表达,其增加了癌细胞的运动和侵袭,促使了癌症的转移,其还将被作为... 详细信息

电压门控钠离子通道(VGSC)是可兴奋组织中动作电位的关键离子通道,具有重要的生理功能。近年来国内外研究发现,VGSC在转移的前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等细胞中表达,其增加了癌细胞的运动和侵袭,促使了癌症的转移,其还将被作为治疗靶点而进行药物开发和临床应用。

关键词：电压门控钠离子通道癌症转移侵袭

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PCGF1蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第1期27卷 71-73页

作者：李辉吴旭东龚燕华阴彬武警医学院组织学与胚胎学教研室天津300162 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 武警医学院生物化学教研室天津300162

目的:原核表达人表观抑制因子Polycomb家族成员PCGF1蛋白片段,并制备其鼠源单克隆抗体(mAb)。方法:应用PCR技术扩增人PCGF1基因编码区部分序列(CDS区第382～567bp的DNA片段)并插入到pET-32a(+)质粒中,在大肠杆菌BL21中进行His-PCGF1-128... 详细信息

目的:原核表达人表观抑制因子Polycomb家族成员PCGF1蛋白片段,并制备其鼠源单克隆抗体(mAb)。方法:应用PCR技术扩增人PCGF1基因编码区部分序列(CDS区第382～567bp的DNA片段)并插入到pET-32a(+)质粒中,在大肠杆菌BL21中进行His-PCGF1-128/189融合蛋白(简写为His-N128/189)的原核表达。利用所表达的融合蛋白中含有的6×His标签进行亲和层析纯化。用所获得的纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术,分别通过ELISA和Western blot法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,用免疫双向扩散法鉴定mAb的Ig亚类。取1株杂交瘤细胞按照常规方法制备腹水,利用Millipore公司的mAb纯化试剂盒纯化mAb,用Western blot法检测mAb的效价。结果:表达纯化了重组人His-N128/189蛋白;筛选出2株可稳定分泌特异性抗人PCGF1 mAb的杂交瘤细胞株,其免疫球蛋白类型均为IgG1类;通过腹水制备和纯化获得高效价(1∶6000)、高特异性的鼠抗人PCGF1 mAb。结论:原核表达的PCGF1片段融合蛋白可以被纯化,并具有足够的蛋白免疫原性,所制备的相应mAb可特异识别内源性和外源性PCGF1蛋白,可以运用于PCGF1基因功能的研究。

关键词： PCGF1 单克隆抗体杂交瘤技术

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胰岛素-胰岛素样生长因子代谢轴在胎儿生长发育中的作用

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中国糖尿病杂志 2011年第3期19卷 204-206页

作者：茅李莉肖新华刘英朱席琳孙晓方张茜李文慧于淼张化冰北京协和医学院、中国医学科学院、北京协和医院内分泌科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨胰岛素-胰岛素样生长因子(IGF)代谢轴在胎儿宫内生长发育中的作用。方法连续收集266名单胎足月新生儿基本资料,采用放免法检测脐血胰岛素和IGF水平。结果 (1)脐血胰岛素水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.... 详细信息

目的探讨胰岛素-胰岛素样生长因子(IGF)代谢轴在胎儿宫内生长发育中的作用。方法连续收集266名单胎足月新生儿基本资料,采用放免法检测脐血胰岛素和IGF水平。结果 (1)脐血胰岛素水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.01)。(2)脐血IGF水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.01)。(3)脐血胰岛素水平和IGF水平呈显著正相关(P<0.01)。结论脐血胰岛素、IGF水平可作为评价胎儿宫内生长发育情况的参考指标。

关键词：脐血胰岛素胰岛素样生长因子宫内生长发育

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PcG相关蛋白RYBP

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生命的化学 2011年第6期31卷 827-831页

作者：田硕陈等陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所清华大学医学部北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于... 详细信息

30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于细胞质和细胞核,参与调节基因转录、个体发育、细胞凋亡以及人类恶性肿瘤的发生等生物学过程。本文就RYBP的特性、作用机制及生物学功能进行综述。

关键词： PcG蛋白复合体 RYBP 转录抑制细胞凋亡

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