检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药物化学杂志 2015年第5期25卷 389-392页

作者：杨洪坤薛丹童元峰吴松中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室、卫生部天然药物生物合成重点实验室北京100050

目的合成艾司西酞普兰的有关物质S-(+)-1-[3-(二甲氨基)丙基]-1-对氟苯基-5-(4-二甲氨基丁酰基)-1,3-二氢异苯并呋喃(Ⅰ)。方法以4-[4-(二甲氨基)-1-(4-氟苯基)-1-羟基丁基]-3-羟甲基苯腈氢溴酸盐为起始原料,经过拆分、环合以及与格氏试... 详细信息

目的合成艾司西酞普兰的有关物质S-(+)-1-[3-(二甲氨基)丙基]-1-对氟苯基-5-(4-二甲氨基丁酰基)-1,3-二氢异苯并呋喃(Ⅰ)。方法以4-[4-(二甲氨基)-1-(4-氟苯基)-1-羟基丁基]-3-羟甲基苯腈氢溴酸盐为起始原料,经过拆分、环合以及与格氏试剂[3-(二甲氨基)丙基]氯化镁反应制得有关物质Ⅰ,总收率为59.1%。结果与结论有关物质Ⅰ的结构经1H-NMR、MS谱确证,HPLC测定纯度为98.8%,可以作为艾司西酞普兰原料药和制剂质量控制的对照品。该合成方法条件温和、原料易得、操作简单。

关键词：艾司西酞普兰抗抑郁药有关物质合成

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

催化甾体羟基化的P450氧化酶BM3的蛋白质工程的研究进展

引用

中国医药生物技术 2015年第6期10卷 540-543页

作者：刘星孔建强中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/卫生部天然药物生物合成重点实验室北京100050

甾体关键位点的羟基化在药用甾体的合成中发挥重要作用。为探究细胞色素P450（CYP450）氧化酶BM3在甾体羟基化合成中的潜在应用,基于细胞色素P450 BM3的蛋白质工程逐渐发展起来。在取得的若干P450 BM3突变酶的基础上,通过新一代测序技... 详细信息

甾体关键位点的羟基化在药用甾体的合成中发挥重要作用。为探究细胞色素P450（CYP450）氧化酶BM3在甾体羟基化合成中的潜在应用,基于细胞色素P450 BM3的蛋白质工程逐渐发展起来。在取得的若干P450 BM3突变酶的基础上,通过新一代测序技术和生物信息学分析等方法,筛选出催化甾体羟基化的相关CYP450。根据易错PCR等定向进化技术获得了突变位点信息,进一步采用（饱和）定点突变等进化技术对活性氨基酸位点进行分析,

关键词：蛋白质工程 P450氧化酶BM3 羟基化定点突变生物信息学分析定向进化测序技术突变体单加氧酶活性氨基酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甲羟戊酸途径代谢酶HMGL研究概述

引用

中国医药生物技术 2014年第1期9卷 48-52页

作者：王志标王伟程克棣孔建强中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/卫生部天然药物生物合成重点实验室北京100050

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A裂解酶（HMGL）是一种参与生物体内3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG—CoA）代谢的重要酶类，在自然界中广泛存在，具有多种功能。作为HMGL作用的前体物质，HMG-CoA在生物体内主要有两方面作用。首先，HMG—CoA可... 详细信息

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A裂解酶（HMGL）是一种参与生物体内3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG—CoA）代谢的重要酶类，在自然界中广泛存在，具有多种功能。作为HMGL作用的前体物质，HMG-CoA在生物体内主要有两方面作用。首先，HMG—CoA可在HMGL作用下形成酮体，酮体能够提供能量；其次，作为甲羟戊酸途径中一个重要中间体，可用于合成甾体、辅酶Q、萜类等生命活性物质。

关键词： 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A 甲羟戊酸代谢酶 HMG-CoA 生物体内前体物质活性物质裂解酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达HMGR催化结构域以优化酵母工程菌原人参二醇代谢途径的研究

引用

药学研究 2016年第8期35卷 444-448,493页

作者：梁会超胡宗风梁兰巩婷陈晶晶杨金玲朱平中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室国家卫生计生委天然药物生物合成重点实验室北京100050

目的过表达3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)催化结构域提高酵母工程菌中原人参二醇的产量。方法分别克隆酿酒酵母中编码3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶催化结构域的基因t HMG1、人参中达玛烯二醇-Ⅱ合酶基因ds和原人参... 详细信息

目的过表达3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)催化结构域提高酵母工程菌中原人参二醇的产量。方法分别克隆酿酒酵母中编码3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶催化结构域的基因t HMG1、人参中达玛烯二醇-Ⅱ合酶基因ds和原人参二醇合酶基因cyp1、拟南芥中CYP450还原酶基因cyp-re,构建相应表达质粒,转化酿酒酵母INVSc1,并检测重组菌中原人参二醇产量。结果重组菌INVSc1-DS-GFP/CYP1/CYP-Re和INVSc1-DS-GFP/CYP1/CYP-Re/t HMG1中原人参二醇产量分别为3.04 mg·L-1和26.5 mg·L-1。结论导入基因t HMG1,使原人参二醇产量提高了8.7倍,该结果为优化酵母工程菌中人参皂苷代谢途径奠定了基础。

关键词：原人参二醇 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR) 酿酒酵母代谢途径

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

杨梅糖基转移酶UGT71AN1的克隆与功能鉴定

引用

中国医药生物技术 2019年第5期14卷 385-393页

作者：唐铭袈杨燕王宇刘忞之王伟中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生健康委员会天然药物生物合成重点实验室

目的从杨梅中分离鉴定糖基转移酶基因,进行其生物催化特性研究并应用于天然产物的糖基化修饰。方法利用转录组测序分析从杨梅叶片中获得编码糖基转移酶的 Unigenes,再结合 RT-PCR 方法克隆获得该目标基因的 cDNA,然后构建表达载体并在... 详细信息

目的从杨梅中分离鉴定糖基转移酶基因,进行其生物催化特性研究并应用于天然产物的糖基化修饰。方法利用转录组测序分析从杨梅叶片中获得编码糖基转移酶的 Unigenes,再结合 RT-PCR 方法克隆获得该目标基因的 cDNA,然后构建表达载体并在大肠杆菌中进行异源表达,利用体外的酶促反应进行其生物催化活性研究。结果从杨梅叶片中提取总 RNA,经转录组高通量测序和生物信息学分析获得编码糖基转移酶 UGT71AN1 基因;利用大肠杆菌进行异源表达并纯化获得融合蛋白,该酶能催化槲皮素、山奈酚、紫铆因、棕矢车菊素、原花青素和圣草酚等黄酮类化合物合成相应的葡萄糖苷;利用质谱和 NMR 对合成的糖苷进行结构鉴定,确定了槲皮素-3'-O-葡萄糖的糖苷键结构。结论克隆获得一个具有催化黄酮类化合物形成葡萄糖苷的糖基转移酶基因,可利用酶促或全细胞生物催化进行黄酮类天然产物的糖基化结构修饰。

关键词：糖基转移酶类杨梅属生物催化黄酮糖苷

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于外泌蛋白质组的酿酒酵母信号肽元件的分析及鉴定

引用

中国医药生物技术 2018年第4期13卷 319-327页

作者：田雷瑜曹筠嵩刘忞之杨燕王伟中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生和计划生育委员会天然药物生物合成重点实验室

目的分析鉴定酿酒酵母细胞内源性地促进重组蛋白外泌表达的信号肽元件,并应用于重组蛋白的高效合成。方法利用生物信息学软件SignalP4.1、Phobius、Wolf Psort0.2和ProP1.0对已报道的酿酒酵母外泌蛋白质组所对应的信号肽进行计算分析,... 详细信息

目的分析鉴定酿酒酵母细胞内源性地促进重组蛋白外泌表达的信号肽元件,并应用于重组蛋白的高效合成。方法利用生物信息学软件SignalP4.1、Phobius、Wolf Psort0.2和ProP1.0对已报道的酿酒酵母外泌蛋白质组所对应的信号肽进行计算分析,确定目标信号肽功能元件;再构建融合表达载体,转化酵母细胞,对获得的阳性克隆在摇瓶培养条件下外泌蛋白的表达进行测定验证。结果通过生物信息学分析,从酿酒酵母外泌蛋白质组中确定了16个含有prepro区的信号肽功能元件,以敲除外切β-(1,3)-葡聚糖酶1(EXG1)基因的酿酒酵母W303-1b/(35)ES为宿主菌,采用酵母α-交配因子的信号肽功能元件作为对照,由EXG1的信号肽功能元件引导外泌的融合蛋白活性是α-交配因子的3倍。结论组合外泌蛋白质组和生物信息学分析的研究策略可以快速准确地分离鉴定促进异源蛋白分泌表达的信号肽功能元件,可应用于生物活性蛋白的高效表达。

关键词：酿酒酵母菌蛋白分选信号外泌蛋白信号肽元件生物信息学分析 β-(1,3)-葡聚糖酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

楸叶泡桐果皮的化学成分研究

引用

中药材 2017年第7期40卷 1590-1594页

作者：王英爱薛景贾献慧杜成林唐文照王晓静济南大学-山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250200 山东省医学科学院药物研究所/国家卫生部生物技术药物重点实验室/山东省罕少见病重点实验室山东济南250062 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所/天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

目的:研究楸叶泡桐果皮的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱等方法对楸叶泡桐果皮的95%乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定。结果:从楸叶泡桐果皮中分离纯化得到11个化合物,分别鉴定为:8-羟基... 详细信息

目的:研究楸叶泡桐果皮的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱等方法对楸叶泡桐果皮的95%乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定。结果:从楸叶泡桐果皮中分离纯化得到11个化合物,分别鉴定为:8-羟基-9-甲氧基-1,2,3,5,6,10b-六氢吡咯骈[2,1-a]异喹啉-3-酮(1)、8,9-二甲氧基-1,2,3,5,6,10b-六氢吡咯骈[2,1-a]异喹啉-3-酮(2)、2α,3α,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(3)、2α,3α,23-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(4)、myrianthic acid(5)、balanophonin(6)、tomentin B(7)、tomentin D(8)、tomentin E(9)、diplacone(10)、tomentin C(11)。结论:其中,化合物1、2为新的天然化合物,化合物6为首次从泡桐属中分离得到,化合物3~11为首次从该植物中分离得到。

关键词：泡桐属楸叶泡桐化学成分

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于转录组测序的毛萼香茶菜Ⅱ型二萜合酶的挖掘与功能鉴定

引用

中国医药生物技术 2024年第3期19卷 206-213页

作者：梅一婷梁苗苗李静一贾美荣中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生健康委员会天然药物生物合成重点实验室/中国医学科学院酶与天然药物生物催化重点实验室北京100050

目的从毛萼香茶菜中挖掘Ⅱ型二萜合酶并进行功能鉴定。方法利用转录组测序和生物信息学分析技术从毛萼香茶菜的根、茎、叶、顶芽4种组织中挖掘Ⅱ型二萜合酶候选基因,通过RT-PCR方法获取候选基因cDNAs,运用无缝克隆技术构建携带候选基因... 详细信息

目的从毛萼香茶菜中挖掘Ⅱ型二萜合酶并进行功能鉴定。方法利用转录组测序和生物信息学分析技术从毛萼香茶菜的根、茎、叶、顶芽4种组织中挖掘Ⅱ型二萜合酶候选基因,通过RT-PCR方法获取候选基因cDNAs,运用无缝克隆技术构建携带候选基因的表达载体,并基于大肠杆菌异源表达体系及GC-MS测定分析技术进行二萜合酶基因的催化功能鉴定。结果分别从毛萼香茶菜的根、茎、叶、顶芽组织中提取总RNA,经过转录组测序和生物信息学分析获得4个Ⅱ型二萜合酶候选基因IeTPS1、IeTPS2、IeTPS3和IeTPS4。利用大肠杆菌异源表达体系对其中的IeTPS1和IeTPS4基因进行功能验证,发现IeTPS1能够催化底物香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)生成对映-柯巴基焦磷酸(ent-CPP),命名为IeCPS4;IeTPS4能够催化底物GGPP生成柯巴基焦磷酸(normal-CPP),命名为IeCPS5。结论从毛萼香茶菜中筛选并鉴定了两个新的Ⅱ型二萜合酶基因IeCPS4和IeCPS5,其中IeCPS5是首个从毛萼香茶菜中发现的专一合成normal-CPP的二萜合酶基因,这不仅丰富了毛萼香茶菜的二萜合酶种类,而且为毛萼香茶菜二萜化合物生物合成途径的解析奠定了坚实基础。

关键词：毛萼香茶菜转录组测序二萜合酶萜类生物合成功能验证

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

溶酶体代谢酶甘露糖-6-磷酸糖基化修饰关键酶UCE的异源表达及功能鉴定

引用

中国医药生物技术 2022年第6期17卷 481-487页

作者：曹筠嵩杨燕刘忞之王伟中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生和计划生育委员会天然药物生物合成重点实验室北京100050

目的利用大肠杆菌表达系统对溶酶体代谢酶甘露糖-6-磷酸(M6P)糖基化修饰的关键酶N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸二酯α-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶(UCE)进行异源表达和功能鉴定。方法通过UCE的氨基酸序列分析,分别截去UCE的信号肽、前体肽、跨膜区... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达系统对溶酶体代谢酶甘露糖-6-磷酸(M6P)糖基化修饰的关键酶N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸二酯α-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶(UCE)进行异源表达和功能鉴定。方法通过UCE的氨基酸序列分析,分别截去UCE的信号肽、前体肽、跨膜区、胞浆尾肽等结构域,形成不同形式的截短型UCE。利用促溶标签麦芽糖结合蛋白(MBP)的载体和大肠杆菌表达系统,对不同的截短型UCE进行表达。将表达的可溶性融合蛋白利用Ni离子琼脂糖凝胶进行亲和层析纯化,并利用UDP-Glo试剂盒测定融合蛋白的活性。结果截短型的UCE-MBP融合蛋白能够被可溶性地融合表达,并且能够利用Ni离子琼脂糖凝胶进行亲和层析纯化。去掉其前体肽和仅保留核心区的UCE融合蛋白能够展现出较高的活性。结论利用促溶标签蛋白能够实现UCE在大肠杆菌中可溶性地融合表达,从而能够快速制备大量的UCE,该酶可用于对溶酶体代谢酶体外糖基化的生物催化修饰。

关键词：溶酶体代谢酶 N-糖基化 N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸二酯α-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶异源表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

酵母UDP-葡萄糖合成途径的优化及黄酮葡萄糖苷的合成

引用

中国医药生物技术 2016年第3期11卷 229-235页

作者：王惠敏杨燕田雷瑜周文龙王伟中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/国家卫生和计划生育委员会天然药物生物合成重点实验室北京100050

目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵... 详细信息

目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵母;同时共表达具有催化黄酮葡萄糖苷化的UDP-葡萄糖转移酶,研究摇瓶培养条件下PGM和Gal U基因的表达对工程细胞生物催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的影响。结果在酵母细胞内表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶PGM和Gal U,提高了组合表达UDP-葡萄糖转移酶的工程菌生物催化合成野黄芩素-7-O-葡萄糖苷的效率,表明PGM和Gal U基因的高表达能促进UDP-葡萄糖的合成;所构建的工程菌也能催化木犀草素、柚皮素、白杨素、汉黄芩素、木蝴蝶素A、黄芩素、槲皮素以及大豆黄酮等黄酮类化合物的葡萄糖苷化。结论组合表达大肠杆菌PGM和Gal U基因能促进酵母细胞内UDP-葡萄糖的合成,进而提高了工程细胞催化合成黄酮葡萄糖苷的效率。

关键词：黄酮类尿苷二磷酸葡糖酿酒酵母菌葡糖磷酸变位酶葡糖转移酶类

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：