检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2022年第3期49卷 1076-1083页

作者：陈旭玉刘小敏赵祥升杨美华中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

【背景】广陈皮为药食同源中药材,在高温、高湿且贮存不当的条件下容易发霉,从而产生毒素,严重威胁陈皮的质量安全。【目的】分析广陈皮表面外源真菌的组成及其产生毒素的真菌。【方法】采用平板稀释法分离广陈皮表面外源真菌,利用分生... 详细信息

【背景】广陈皮为药食同源中药材,在高温、高湿且贮存不当的条件下容易发霉,从而产生毒素,严重威胁陈皮的质量安全。【目的】分析广陈皮表面外源真菌的组成及其产生毒素的真菌。【方法】采用平板稀释法分离广陈皮表面外源真菌,利用分生孢子形态特征及DNA序列分析进行真菌鉴定,采用高效液相色谱-三重串联四极杆质谱联用技术对青霉属和曲霉属进行产毒检测。【结果】从广陈皮表面分离外源真菌共132株,鉴定为子囊菌亚门(Ascomycota,98.48%)和毛霉菌亚门(Mucoromycota,1.52%),包括散囊菌纲(Eurotiomycetes,95.45%)、座囊菌纲(Dothideomycetes,3.03%)和毛霉纲(Mucoromycetes,1.52%)。分离活动曲霉属(Aspergillus spp.)菌株共77株,为广陈皮药材外源真菌的优势菌,青霉属(Penicillium spp.)次之。毒素检测筛选出1株产毒真菌,鉴定为黄曲霉(Aspergillus flavus)JXCP1-3。该菌株产生黄曲霉毒素B;(aflatoxin B_(1),AFB_(1)),浓度为1.52 ng/m L。【结论】全面分析广陈皮表面的外源真菌及产毒真菌,为广陈皮表面产毒真菌的防控提供依据。

关键词：广陈皮外源真菌黄曲霉黄曲霉毒素

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莪术基原植物DNA条形码序列的筛选与鉴定

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广西植物 2021年第8期41卷 1263-1269页

作者：张玉秀刘杨刘培卫符传坤卢丽兰魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室&濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

为寻找适用于中药材莪术基原植物鉴定的DNA条形码序列,探索快速高效的莪术基原植物鉴定的新方法,该文首先利用扩增成功率和测序成功率对中药材莪术三种基原植物,9个样本的7种DNA条形码序列(ITS、ITS2、matK、psbA-trnH、trnL-trnF、rpoB... 详细信息

为寻找适用于中药材莪术基原植物鉴定的DNA条形码序列,探索快速高效的莪术基原植物鉴定的新方法,该文首先利用扩增成功率和测序成功率对中药材莪术三种基原植物,9个样本的7种DNA条形码序列(ITS、ITS2、matK、psbA-trnH、trnL-trnF、rpoB和atpB-rbcL)进行评估,然后利用MEGA6.0软件对获得的高质量的序列通过变异位点分析、遗传距离计算和系统树分析等进一步进行评估,最后将筛选到的DNA条形码序列对未知基原的待测样品进行基原鉴定。结果表明:(1)ITS、ITS2和matK等条形码序列在莪术基原植物中的扩增或测序成功率较低,难以应用于实际鉴定;而psbA-trnH、trnL-trnF和rpoB条形码序列变异位点信息过少,不足于区分莪术的三种不同基原植物;只有atpB-rbcL条形码序列的扩增和测序成功率较高,容易获得高质量的序列,同时序列长度(642~645 bp)理想,变异位点多(11个),可实现莪术的三种不同基原的区分鉴别。(2)待测样品经基于atpB-rbcL序列构建的系统发育树鉴别为温郁金。综上所述,叶绿体atpB-rbcL序列能够准确鉴定莪术不同基原植物,可以作为中药材莪术基原植物鉴定的条形码序列。

关键词：莪术 DNA条形码筛选 atpB-rbcL 基原植物鉴定

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沉香线香燃香调节多神经递质途径的抗焦虑/抑郁作用及机制

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中国新药杂志 2023年第13期32卷 1368-1376页

作者：弓宝王灿红吴玉兰刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室&国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室&濒危药材繁育国家工程实验室

目的:探讨沉香线香(ALI)对小鼠焦虑模型和抑郁模型的作用及其机制。方法:采用间氯苯哌嗪(MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(CUMS)法分别制作小鼠焦虑和抑郁模型，观察熏香后模型动物旷场活动(OFT)、明暗箱穿梭(LDT)、悬尾(TST)、游泳(FST... 详细信息

目的:探讨沉香线香(ALI)对小鼠焦虑模型和抑郁模型的作用及其机制。方法:采用间氯苯哌嗪(MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(CUMS)法分别制作小鼠焦虑和抑郁模型，观察熏香后模型动物旷场活动(OFT)、明暗箱穿梭(LDT)、悬尾(TST)、游泳(FST)等行为学变化；ELISA法测定海马组织中五羟色胺(5-HT)、谷氨酸(Glu)、伽马氨基丁酸A受体(GABAA)水平；Western Blot法检测颗粒体蛋白(GRN2B)、代谢型谷氨酸受体5抗体(GRM5)、谷氨酸受体1(GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白1(VGluT1)表达。结果:ALI可降低焦虑模型动物总活动路程和速度(P<0.05),增加静止时间(P<0.05),降低在暗箱中活动路程和速度(P<0.05);增加抑郁模型动物总路程和速度(P<0.05),降低静止时间(P<0.05)和强迫游泳及悬尾不动时间(P<0.05);与焦虑模型组比较，中、高剂量组的GLu水平降低(P<0.05),而GABAA,5-HT水平升高(P<0.05);与抑郁模型组比较，中、高剂量组5-HT和GLu水平升高(P<0.05),GABAA水平降低(P<0.05);ALI熏香吸入能提高焦虑模型动物GRN2B,GRM5,GluR1,VGluT1蛋白表达；可提高抑郁模型动物GRN2B,GluR1,VGluT1蛋白表达，降低GRM5蛋白表达。结论:ALI对焦虑模型和抑郁模型的行为均有改善，其作用机制可能与调控5-HT,GABAA,Glu神经递质水平和影响GRN2B,GRM5,GluR1,VGluT1的蛋白表达有关。

关键词：沉香线香燃香抗抑郁抗焦虑多神经递质

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沉香醇提物对哮喘小鼠的平喘作用及其机制研究

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中国中药杂志 2021年第16期46卷 4214-4221页

作者：王灿红彭德乾刘洋洋吴玉兰郭鹏魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 海南医学院药学院海南海口571199

沉香记载有"纳气平喘"功效,但其作用机制不清且相关研究报道稀少。为了探究沉香的平喘及其作用机制,该研究采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)+氢氧化铝(Al(OH)3)激发联合OVA滴鼻诱导小鼠哮喘模型,考察通体结香技术产沉香(简称&qu... 详细信息

沉香记载有"纳气平喘"功效,但其作用机制不清且相关研究报道稀少。为了探究沉香的平喘及其作用机制,该研究采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)+氢氧化铝(Al(OH)3)激发联合OVA滴鼻诱导小鼠哮喘模型,考察通体结香技术产沉香(简称"通体沉香")醇提物的平喘作用及机制,比较不同结香方式所产沉香平喘作用差异。首先,通过评价哮喘小鼠的哮喘次数、观察肺组织病理损伤程度及计数外周血炎性细胞白细胞和嗜酸性粒细胞数,评价通体沉香的抗炎平喘作用;其次,通过酶联免疫(enzyme-linked immunoassay, ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素1β(interleukin^(-1)β,IL^(-1)β)、白细胞介素17(interleukin 17,IL^(-1)7)和白细胞介素10(interleukin^(-1)0,IL^(-1)0)的分泌水平,并通过实时定量PCR(Real-time quantitative-PCR, RT-PCR)检测组织中炎症及凋亡相关基因的表达,初步探究其平喘机制。结果显示,通体沉香醇提物能显著减少小鼠的哮喘次数、缓解哮喘小鼠病理损伤程度并改善外周血白细胞数和嗜酸性粒细胞数,降低炎性细胞因子IL^(-1)β和IL^(-1)7水平,升高抗炎细胞因子IL^(-1)0水平,同时下调IL^(-1)R、tumor necrosis factor receptor R (TNFR)、nuclear transcription factor-kappaB (NF-κB)、Bax及caspase-3 mRNA的表达,但对high mobility group box 1 protein B1(HMGB1)、caspase-8和Bcl-2的表达无明显影响,同等剂量下通体沉香醇提物作用优于野生沉香和火烙沉香醇提物。研究表明,通体沉香可显著抗炎平喘,其作用机制可能与抑制炎症和抗凋亡作用有关。

关键词：沉香平喘作用抗炎抗凋亡

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沉香薰香吸入给药镇静促睡眠作用及机制研究

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中国药学杂志 2022年第19期57卷 1628-1635页

作者：王灿红陈细钦弓宝吴玉兰刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口570311 中国医学科学院北京协和医院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的采用沉香挥发油(essential oil,AEO)、香粉(fragrantpint,AFP)加热及线香(line incense,ALI)燃香熏香吸入给药方式,探究沉香挥发性物质吸入给药镇静促睡眠作用及作用机制。方法采用对氯苯丙氨酸(PCPA,300 mg·kg^(-1))诱导的失... 详细信息

目的采用沉香挥发油(essential oil,AEO)、香粉(fragrantpint,AFP)加热及线香(line incense,ALI)燃香熏香吸入给药方式,探究沉香挥发性物质吸入给药镇静促睡眠作用及作用机制。方法采用对氯苯丙氨酸(PCPA,300 mg·kg^(-1))诱导的失眠小鼠模型,通过自主活动检测、协同戊巴比妥钠促睡眠行为学试验,考察沉香挥发性物质吸入给药镇静促睡眠的情况,并检测海马神经递质水平及其受体表达情况,探究沉香促睡眠的作用机制。结果相比模型组,沉香线香(每只0.125 g)、香粉(每只0.1 g)及挥发油(每只1μL)吸入给药显著抑制小鼠自主活动,延长协同戊巴比妥钠(50 mg·kg^(-1))促睡眠的时间,有较好镇静促睡眠作用;机制研究结果显示,沉香挥发性物质吸入给药后可不同程度升高γ-氨基丁酸(GABA)、GABA/谷氨酸(Glu)比值、5-羟色胺(5-HT)和腺苷(AD)水平,同时可显著上调Glu合成代谢及转运蛋白的表达水平。结论沉香挥发性物质吸入给药可较好地镇静促睡眠,其作用机制与调节Glu-GABA平衡及Glu系统合成代谢和转运有关。

关键词：沉香吸入给药失眠镇静催眠神经递质 Glu-GABA平衡

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八个绿色组织特异性启动子的克隆及活性比较

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分子植物育种 2023年

作者：李姬霜薛旭徐静吴斌中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所濒危药材繁育国家工程实验室中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京市海淀区植物组织培养技术实验室

为了精准调控外源基因在特定的组织或器官中进行表达，减少不必要的资源浪费，同时提高植物光合途径的能量利用效率，增加生物固定总量，本研究查阅文献并从NCBI下载了来自6种植物的8个不同的绿色组织特异性启动子序列。通过PCR扩增得... 详细信息

为了精准调控外源基因在特定的组织或器官中进行表达，减少不必要的资源浪费，同时提高植物光合途径的能量利用效率，增加生物固定总量，本研究查阅文献并从NCBI下载了来自6种植物的8个不同的绿色组织特异性启动子序列。通过PCR扩增得到这些启动子后将其分别连至pTOPO-Blunt载体上进行测序验证；接着使用无缝克隆法或者酶切法构建了pCAMBIA2300+启动子+绿色荧光蛋白(GFP)表达载体；再将重组载体热击转化根癌农杆菌EHA105，并使用农杆菌介导的瞬时法转化烟草；最后通过观察GFP荧光强度来比较8个启动子的活性强弱。研究结果表明：来自番薯的Ibrbcs和来自牵牛的PNZIP启动子的荧光强度最接近CaMV 35S启动子，而来自玉米的PEPC启动子荧光最弱，启动子活性强弱顺序依次为：CaMV 35S>Ibrbcs>PNZIP>Ntrbcs>D540、Cmrbcs、Psak>Rca>PEPC。多个绿色组织特异性启动子的克隆及活性验证，为后续在绿色组织中实现外源多基因表达提供了理论依据和材料基础。可按照代谢途径中上游至下游基因绑定的启动子整体为由强至弱的顺序等原则，将可选的启动子调控元件协同使用不同终止子，与相关外源基因共同组成多个表达框，以构建多基因表达载体，进而完成转基因操作。本研究为相关植物基因工程试验中外源基因在绿色组织中的协同表达提供了良好基础。

关键词：启动子绿色组织特异性 GFP 基因克隆活性比较

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植物Ⅲ型聚酮合酶研究进展

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中国中药杂志 2018年第13期43卷 2639-2647页

作者：王彬彬魏建和宋振巧高志晖山东农业大学农学院山东泰安271018 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与井发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩... 详细信息

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩合反应合成聚酮化合物骨架结构。该文简要概述了植物Ⅲ型聚酮合酶的催化机制、功能改造、表达调控及其分子进化等方面的研究进展。

关键词： Ⅲ型聚酮合酶酶工程表达调控分子进化

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中药材辐射诱变育种的研究进展

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中草药 2023年第13期54卷 4367-4376页

作者：朋冬琴刘录祥郭会君李玉婷栗孟飞郭欣慰魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 甘肃农业大学生命科学学院干旱生境作物学国家重点实验室甘肃兰州730070 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

辐射诱变育种是利用物理方法加速生物体自然变异、从而快速获得性状优异的新种质、并通过严格选育形成性状稳定新品种的现代育种技术之一,其不涉及外源基因导入,并可大幅缩短育种周期。通过对^(60)Co-γ辐射、重离子辐射、常温常压等离... 详细信息

辐射诱变育种是利用物理方法加速生物体自然变异、从而快速获得性状优异的新种质、并通过严格选育形成性状稳定新品种的现代育种技术之一,其不涉及外源基因导入,并可大幅缩短育种周期。通过对^(60)Co-γ辐射、重离子辐射、常温常压等离子体、中波红斑效应紫外线、激光辐射和空间诱变6种主要辐射诱变育种方法的基本原理、特点、生物学效应及在中药材育种中的应用进行综述,并探讨了相关辐射诱变技术在中药材领域的安全性和应用前景,为中药材辐射诱变育种相关研究与应用提供借鉴和参考。

关键词：辐射诱变中药材育种安全性诱变效应变异次生代谢

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白木香AsMAPK3基因的原核表达及其在洋葱表皮瞬时表达体系中的定位研究

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中草药 2018年第9期49卷 2133-2139页

作者：徐艳红田美慧吕菲菲孙佩文魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,... 详细信息

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,构建重组原核表达载体pET-28a-AsMAPK3,并诱导蛋白表达。克隆AsMAPK3基因全长编码区,构建绿色荧光蛋白(GFP)瞬时表达载体pAN580-AsMAPK3,通过基因枪法转化洋葱表皮,荧光显微镜观察GFP的发光情况。结果含有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)在37℃经0.5 mmol/L异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导4 h后,可获得相对分子质量约为39 000的融合蛋白,该融合蛋白在上清和包涵体中均有表达。瞬时转化洋葱表皮的GFP荧光观察发现,AsMAPK3主要在细胞核和质膜表达。结论成功实现了AsMAPK3的体外表达和纯化,明确了AsMAPK3的亚细胞定位,为后续开展其功能研究奠定了基础。

关键词：白木香 MAPK 原核表达瞬时表达大肠杆菌

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沉香熏香吸入抗焦虑、抗抑郁作用及其机制研究

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中国中药杂志 2023年第4期48卷 1023-1031页

作者：弓宝王灿红吴玉兰刘洋洋魏建和中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所海南分所、海南省南药资源保护与开发重点实验室、国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所、中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室、濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525099

采用间氯苯哌嗪(m-chloropheniperazine,MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS)分别制造小鼠焦虑模型和抑郁模型,通过观察旷场活动实验(OFT)、明暗箱穿梭实验(LDE)、悬尾实验(TST)、游泳实验(FST)等行为学变化,考察沉香挥发油(agarwood essential oil,AEO)、沉香香粉(agarwood fragrant powder,AFP)、沉香线香(agarwood line incense,ALI)熏香吸入抗焦虑和抗抑郁作用;采用ELISA法测定小鼠海马组织中五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、伽马氨基丁酸(γ-aminobutyric acid A receptor,GABAA)神经递质水平,同时采用蛋白印迹法(Western blot)观察对谷氨酸能系统代谢和转运相关蛋白谷氨酸受体1(glutamate receptor 1,GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白1(vesicular glutamate transporter type 1,VGluT1)蛋白表达的影响,探究沉香熏香吸入抗焦虑和抗抑郁的作用机制。行为学数据显示,与焦虑模型组比较,AEO、AFP、ALI可显著减少动物运动总路程(P<0.05),降低运动速度(P<0.05),延长静止时间(P<0.05),降低焦虑模型动物在暗箱中活动路程和速度(P<0.05);与抑郁模型组比较,AEO、AFP、ALI可增加模型动物活动总路程和平均速度(P<0.05),减少静止时间(P<0.05),减少强迫游泳和悬尾不动时间(P<0.05);递质调控方面,AEO、AFP、ALI均可降低焦虑模型动物的Glu水平(P<0.05),增加GABAA、5-HT递质水平(P<0.05);AEO、AFP、ALI均可提高抑郁模型动物5-HT的水平(P<0.05),降低GABAA、Glu的水平(P<0.05);同时AEO、AFP、ALI均能提高焦虑模型和抑郁模型动物海马体中GluR1、VGluT1蛋白表达(P<0.05)。结果说明,AEO、AFP、ALI熏香均有显著的抗焦虑、抗抑郁作用,其作用机制可能与调控神经递质分泌及受体及转运体蛋白的表达有关。

关键词：沉香挥发油沉香香粉沉香线香抗抑郁抗焦虑

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