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生物化学与生物物理进展 2002年第6期29卷 855-859页

作者：刘晓李长友陈元鼎中国医学科学院中国协和医科大学医学生物研究所昆明600118

过去十几年 ,指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术得到了充分的发展 ,目前已经成为在数量众多的靶分子中 ,高亲和性和特异性地确定适配子的一种崭新的方法 .SELEX的流程即是人工合成随机寡核苷酸序列、适配子筛选、扩增、再循环的过程 ... 详细信息

过去十几年 ,指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术得到了充分的发展 ,目前已经成为在数量众多的靶分子中 ,高亲和性和特异性地确定适配子的一种崭新的方法 .SELEX的流程即是人工合成随机寡核苷酸序列、适配子筛选、扩增、再循环的过程 .在这一过程中 ,适配子修饰基团文库的应用使得SELEX流程更加经济、快捷、高通量 .回顾了SELEX的研究和应用 ,期待着这一方法能够在理论和实践上得到进一步的发展 .

关键词：指数富集配基系统进化原理应用适配子 SELEX

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毕赤酵母表达的neurturin对恒河猴帕金森氏病模型中黑质多巴胺能神经元的保护作用

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生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 722-726页

作者：李鸿钧苏婷马雁冰和占龙鲁帅尧戴长柏孙茂盛中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118

帕金森氏病 (PD)是由于多巴胺能神经元变性、坏死 ,导致黑质纹状体系统的多巴胺含量下降而引起的一种神经系统退行性疾病 ,目前还没有一种很好的方法能使之治愈 .Neurturin (NTN)能特异地作用于中脑多巴胺能神经元 ,对该类神经元具营... 详细信息

帕金森氏病 (PD)是由于多巴胺能神经元变性、坏死 ,导致黑质纹状体系统的多巴胺含量下降而引起的一种神经系统退行性疾病 ,目前还没有一种很好的方法能使之治愈 .Neurturin (NTN)能特异地作用于中脑多巴胺能神经元 ,对该类神经元具营养和保护作用 .经静脉注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导恒河猴产生帕金森氏病模型 ,并在NTN治疗组 ,注射MPTP之前 4 8h脑室内注射重组毕赤酵母表达的人NTN 1mg .结果表明 :模型组猴均逐渐出现了PD症状 ,而NTN治疗组猴 ,PD症状比较轻或不明显 ;荧光分光光度法测定MPTP模型组猴黑质、壳核和尾状核多巴胺 (DA)、 5 羟色胺 (5 HT)和 5 羟吲哚乙酸 (5 HIAA)的含量结果与正常对照组相比均显著降低 ,NTN治疗组猴的黑质、壳核和尾状核中的DA、 5 HT和 5 HIAA与对照组相比无显著性差异 ,而与模型组相比 ,DA、 5 HT和 5 HIAA含量均明显增加 ;光镜检查MPTP模型组猴黑质神经元细胞明显脱失 ,而NTN治疗组猴黑质神经元细胞丢失不明显 ,与正常对照组猴无差别 .上述结果表明 ,制备的重组人NTN在恒河猴体内能保护中脑黑质多巴胺能神经元不受MPTP的损伤 ,使其DA含量及多巴胺能神经元维持正常。

关键词：帕金森氏病多巴胺能神经元变性坏死毕赤酵母表达

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力达霉素对人肝癌BEL-7402细胞基因组DNA的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第3期23卷 65-68页

作者：何琪杨姜兵李电东中国 100050 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京

目的:深入研究力达霉素对人肝癌BEL-7402细胞基因组DNA的影响.方法:琼脂糖凝胶电泳检测DNA泳带;Southern杂交检测对基因的损伤;中性凝胶电泳检测DNA断裂修复;超螺旋GEM质粒检测断裂DNA位点.结果:力达霉素1μmol/L处理BEL-7402细胞15、30... 详细信息

目的:深入研究力达霉素对人肝癌BEL-7402细胞基因组DNA的影响.方法:琼脂糖凝胶电泳检测DNA泳带;Southern杂交检测对基因的损伤;中性凝胶电泳检测DNA断裂修复;超螺旋GEM质粒检测断裂DNA位点.结果:力达霉素1μmol/L处理BEL-7402细胞15、30、60min,可检测到明显的DNA梯带.低浓度的力达霉素对活跃基因N-ras的外显子和内含子均有明显的损伤作用,但对沉默IL-2基因没有影响.力达霉素断裂DNA后,DNA损伤难以修复.力达霉素断裂GEM质粒DNA的位点是-OH HO-.结论:力达霉素明显地损伤人肝癌BEL-7402细胞的基因组DNA.该结果有助于解释其高活性地杀伤肿瘤细胞的分子机制.

关键词： lidamycin 抗肿瘤药 DNA损伤 ras基因肝细胞瘤

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云南籍G6PD缺乏症病例的基因型分析

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中华医学遗传学杂志 2001年第4期18卷 259-263页

作者：杨昭庆褚嘉佑班贵宏黄小琴许绍斌李梅章中国医学科学院中国协和医科大学医学生物研究所遗传室昆明650118

目的　确定 2 3例云南籍 G6 PD缺乏症病例的基因突变类型 ,了解 G6 PD基因突变的分子遗传特性。方法　运用扩增阻滞突变系统、自然及错配引物 PCR/限制性酶切、PCR-单链构象多态分析及 DNA自动测序技术 ,检测分析了 2 3例云南 G6 PD缺... 详细信息

目的　确定 2 3例云南籍 G6 PD缺乏症病例的基因突变类型 ,了解 G6 PD基因突变的分子遗传特性。方法　运用扩增阻滞突变系统、自然及错配引物 PCR/限制性酶切、PCR-单链构象多态分析及 DNA自动测序技术 ,检测分析了 2 3例云南 G6 PD缺乏症病例第 2～ 12共 11个 G6 PD基因外显子和部分内含子的基因突变。结果　 2 3例中共发现 5种突变 ,形成了 5种突变基因型 :G487A10例 (7例汉族、3例傣族 )、IVS- 11T39C复合 C1311T7例、IVS- 5 6 36或 6 37T→del4例、G871A1例、G487A/ T93C/ C1311T1例。云南人群中存在 93C/ 1311T、487A/ 93C/ 1311T两种单体型。IVS- 11T93C突变产生的多态性 Nla 酶切位点与 1311T呈现紧密关联。首次报道了 IVS- 5 6 36或 6 37T→ del在中国人群中、G871A在中国大陆地区以及G487A在云南汉族的存在。结论　云南省 G6 PD缺乏症具有明显的异质性 ;G487A突变是该地区的常见G6 PD基因突变 ,并可能有不同的起源 ;IVS- 11T93C突变可能起源于非洲以外地区 ,并与 C1311T共同作用而导致 G6 PD活性降低。 G6 PD基因突变型研究对疾病防治。

关键词：聚合酶链反应单链构象多态基因型分析 G6PD缺乏症

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Ⅲ型脊髓灰质炎病毒感染转基因小鼠的研究

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中国医学科学院学报 1998年第1期20卷 70-75页

作者：郭仁陈淑范罗其胜王庆玲易红昆詹琼芬中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所

目的验证ＰＶＲＴｇ２１转基因小鼠是否可作为脊髓灰质炎病毒的动物模型。方法应用３个不同毒力的Ⅲ型脊髓灰质炎病毒株（Ｓａｂｉｎ－３，Ｖａｃｃｉｎｅ３２１和Ｌｅｏｎ株）对能编码脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠（ＰＶＲＴｇ... 详细信息

目的验证ＰＶＲＴｇ２１转基因小鼠是否可作为脊髓灰质炎病毒的动物模型。方法应用３个不同毒力的Ⅲ型脊髓灰质炎病毒株（Ｓａｂｉｎ－３，Ｖａｃｃｉｎｅ３２１和Ｌｅｏｎ株）对能编码脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠（ＰＶＲＴｇ２１）进行感染性实验。结果经脊髓接种，均可引起临床麻痹和神经细胞的特异性损伤。其表现随毒力的不同而不同，３个毒株的小鼠半数致麻痹剂量（ＰＤ５０）分别为１０￣１．１，１０￣２．６和１０￣４．９７ＴＣＩＤ＿５０，接种不同病毒引起的中枢神经系统组织学损伤也有明显的差别。结论ＰＶＲＴｇ２１转基因小鼠有可能成为评价脊髓灰质炎病毒和疫苗的神经毒力，研究病毒的变异和实施流行病监视的一种有用的动物模型。

关键词：脊髓灰质炎病毒转基因动物模型

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胞内抗体技术及医学应用

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生物化学与生物物理进展 1996年第5期23卷 386-390页

作者：周春水甄永苏中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所

胞内抗体技术是近年来随抗体工程技术发展起来的一项新型基因治疗方法．它将单链抗体表达于非淋巴细胞内，并使之定向分布于细胞核、细胞浆或内质网等部位，特异性阻断、干扰分布于该部位的大分子物质生物活性或加工分泌过程．实验证明... 详细信息

胞内抗体技术是近年来随抗体工程技术发展起来的一项新型基因治疗方法．它将单链抗体表达于非淋巴细胞内，并使之定向分布于细胞核、细胞浆或内质网等部位，特异性阻断、干扰分布于该部位的大分子物质生物活性或加工分泌过程．实验证明该技术能抑制生长因子受体的表达，灭活原癌基因蛋白，抑制病毒复制．在生物科学及医学研究中具有很大应用潜力．

关键词：抗体工程胞内抗体单链抗体基因治疗

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重组痘苗病毒为载体表达脊髓灰质炎病毒（Ⅰ型）及甲型肝炎病毒双价抗原

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中国医学科学院学报 1996年第3期18卷 209-213页

作者：刘金辉苏晔戴长柏郭仁中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所

本文报道含有脊髓灰质炎病毒Ⅰ型中和抗原位点及甲型肝炎病毒中和抗原位点重组痘苗病毒的构建，用重组痘苗病毒感染１４３ＴＫ－细胞后成功地表达了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型和甲型肝炎病毒的抗原。免疫荧光显示，两种抗原的荧光颗粒均分布在... 详细信息

本文报道含有脊髓灰质炎病毒Ⅰ型中和抗原位点及甲型肝炎病毒中和抗原位点重组痘苗病毒的构建，用重组痘苗病毒感染１４３ＴＫ－细胞后成功地表达了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型和甲型肝炎病毒的抗原。免疫荧光显示，两种抗原的荧光颗粒均分布在胞浆内。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实，重组痘苗病毒所表达的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗原和甲型肝炎病毒抗原为一融合蛋白。用此重组痘苗病毒免疫动物，可诱导脊髓灰质炎病毒Ⅰ型和甲型肝炎病毒的中和抗体产生。

关键词：痘苗病毒脊髓灰质炎病毒甲型肝炎病毒抗原

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用核酸序列分析鉴别甲肝病毒疫苗株与野毒株

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第3期19卷 219-221页

作者：周德久黄小琴白惠珠曹逸云董德祥中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所

目的鉴别在接种甲肝减毒活疫苗（Ｈ２株）后２３天发生的一例甲型肝炎，其病原体是疫苗株还是野毒株。方法用细胞培养、ＩＥＭ等确认病原体，接种普通狨猴检定病毒毒力，测定核苷酸序列分析病毒基因型。结果甲型肝炎的确诊依据有：抗Ｉ... 详细信息

目的鉴别在接种甲肝减毒活疫苗（Ｈ２株）后２３天发生的一例甲型肝炎，其病原体是疫苗株还是野毒株。方法用细胞培养、ＩＥＭ等确认病原体，接种普通狨猴检定病毒毒力，测定核苷酸序列分析病毒基因型。结果甲型肝炎的确诊依据有：抗ＩｇＭ（＋），双份血清ＨＡＶ总抗体效价１６倍增长以及粪便排出ＨＡＶ（郑株）。该粪便悬液攻击普通狨猴后，肝脏呈现持续性组织病理改变，证明郑株是强毒ＨＡＶ。郑株的３个片段共１３７７个核苷酸序列分析表明，与１９８８年上海甲肝流行株合－５２的同源性高达（９８．３０～９９．４０）％，判定为ＩＡ基因亚型，与Ｈ２株疫苗病毒的基因亚型不同。结论该例甲型肝炎是接种甲肝减毒活疫苗中交叉感染野毒株引发的偶合病例。

关键词：甲肝减毒活疫苗核苷酸序列鉴别诊断野毒株

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两种病毒与细胞结合诱导的原癌基因早期表达

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第2期32卷 145-148页

作者：李琦涵董承红王炯王丽春孙明杨芳中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所!昆明650118

脊髓灰质炎病毒和单纯疱疹病毒I型结合人二倍体细胞后 1h内 ,导致了不同的早期基因形式的原癌基因表达反应 ,其主要表现为c fos、src等的表达增强或抑制。

关键词：脊髓灰质炎病毒单纯疱疹病毒早期原癌基因反应

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抗乳腺癌人单克隆抗体的制备及其应用的实验研究

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中国医学科学院学报 1996年第3期18卷 177-182页

作者：王树蕙孙月英王维刚苏小玲杨子义幺崇正孙强顾方舟甄永苏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所中国协和医科大学医学生物技术研究所中国协和医科大学协和医院

用乳腺癌术后腋下淋巴结淋巴细胞与人鼠骨髓瘤细胞ＳＨＭ－Ｄ_（３３）融合，获得分泌抗乳腺癌人单克隆抗体杂交瘤细胞株ＣＭ－１。用ＰＡＰ免疫组化法分析，ＣＭ－１与被检乳腺癌均呈阳性反应，但与乳腺纤维瘤和被检其他肿瘤组织及正... 详细信息

用乳腺癌术后腋下淋巴结淋巴细胞与人鼠骨髓瘤细胞ＳＨＭ－Ｄ_（３３）融合，获得分泌抗乳腺癌人单克隆抗体杂交瘤细胞株ＣＭ－１。用ＰＡＰ免疫组化法分析，ＣＭ－１与被检乳腺癌均呈阳性反应，但与乳腺纤维瘤和被检其他肿瘤组织及正常组织均无反应。ＣＭ－１用于裸鼠移植瘤放免显像（ＲＩＩ）能进行肿瘤定位。ＲＩＩ对乳腺癌志愿者能初步达到乳腺癌腋下淋巴结转移灶定位。ＣＭ－１－药物（平阳霉素；ＰＹＭ）偶联物对裸鼠移植乳腺癌生长的抑瘤率为９５％，而同等剂量的游离药物为５８％。显示了抗乳腺癌人单抗ＣＭ－１的特异性及其在临床诊断和治疗乳腺癌中的光明前景。

关键词：单克隆抗体乳腺癌 CM-1

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