检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2001年第6期17卷 729-732页

作者：董承红,王丽春,赵红玲,孙明,刘龙丁,李琦涵中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所中国医学科学院中国协

根据mRNA差异显示分析 ,由单纯疱疹病毒 (HSV)Ⅰ型结合人成纤维细胞膜受体后 2h诱导产生的早期基因cDNA库中 ,分离到一个编码具有SR蛋白结构特征的新基因 ,该基因长 90 4bp .编码产生的蛋白含 12 1个氨基酸残基 ,分子量 14 9kD ,具有RS... 详细信息

根据mRNA差异显示分析 ,由单纯疱疹病毒 (HSV)Ⅰ型结合人成纤维细胞膜受体后 2h诱导产生的早期基因cDNA库中 ,分离到一个编码具有SR蛋白结构特征的新基因 ,该基因长 90 4bp .编码产生的蛋白含 12 1个氨基酸残基 ,分子量 14 9kD ,具有RS重复区和PPLP结构域 ,但不具备SR蛋白家族所特有的RNA识别区域 (RRM) .主要分布于细胞质内 ,仅在细胞膜相应受体与HSVⅠ结合后特异产生

关键词： HSVⅠ 早期基因反应 SR-15蛋白克隆

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重组杆状病毒表达轮状病毒SA11毒株VP4蛋白

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中国医学科学院学报 1997年第1期19卷 48-53页

作者：孙茂盛 SusanaGiambiagi OscarBurrone 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650107

从培养的SA11病毒中提取病毒dsRNA作为模板，经逆转录、多聚酶链反应（RT-PCR）获得编码VP4蛋白的全基因，全长2362bp.完整的VP4基因克隆到杆状病毒转移载体pVL-1393中，转染Sf9细胞进行同源重组，用声、杂交法筛选出表达VP4蛋白的重组... 详细信息

从培养的SA11病毒中提取病毒dsRNA作为模板，经逆转录、多聚酶链反应（RT-PCR）获得编码VP4蛋白的全基因，全长2362bp.完整的VP4基因克隆到杆状病毒转移载体pVL-1393中，转染Sf9细胞进行同源重组，用声、杂交法筛选出表达VP4蛋白的重组杆状病毒。表达的VP4蛋白能被抗轮状病毒抗体所识别，表达产量约占总蛋白的10％。用表达的VP4蛋白免疫动物后可产生高水平抗亲本SA11毒株中和抗体。抗体能阻断SA11病毒在MA104细胞上引起的细胞病变（CPE），免疫荧光和Westernblot也证实抗体可特异性识别轮状病毒抗原。结果表明，重组杆状病毒表达的VP4蛋白具有良好的抗原性和免疫原性，可望用VP4基因研制轮状病毒重组疫苗和亚单位疫苗。

关键词：轮状病毒 VP4蛋白重组杆状病毒疫苗

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甲型肝炎减毒活疫苗H_2株在狨猴体内传代的实验

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中华预防医学杂志 1997年第5期31卷 260-262页

作者：黄小琴练幼辉王庆龄王祥杨净思白惠珠曹逸云中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所

为探索甲型肝炎减毒活疫苗的残余毒力及毒力返祖的可能性，将血清抗－ＨＡＶ阴性，肝功能正常的普通狨猴用于甲型肝炎减毒活疫苗Ｈ２株传代试验。即用甲型肝炎疫苗接种普通狨猴，将其粪便排出的子代病毒，直接用粪便悬液或／和用组织培... 详细信息

为探索甲型肝炎减毒活疫苗的残余毒力及毒力返祖的可能性，将血清抗－ＨＡＶ阴性，肝功能正常的普通狨猴用于甲型肝炎减毒活疫苗Ｈ２株传代试验。即用甲型肝炎疫苗接种普通狨猴，将其粪便排出的子代病毒，直接用粪便悬液或／和用组织培养增殖液接种狨猴进行传代。３次连续体内传代的结果揭示：血清抗－ＨＡＶ无明显差异，没有或有低水平肝脏酶活性变化，全部肝脏组织检查无病理学改变，全部动物排毒，但排毒量少。

关键词：甲型肝炎疫苗减毒活疫苗狨猴动物实验

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TPA对Bcl-X前体mRNA在U251细胞中选择性剪接调控的初步研究

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Acta Genetica Sinica 2004年第10期31卷 1037-1045页

作者：李长友褚嘉祐刘晓娟俞建昆黄小琴史荔朱泳璋纳剑波谢久永中国协和医科大学中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

以含有部分Bcl X序列的微小基因为研究模型 ,研究了TPA对Bcl X前体mRNA选择性剪接在体内和体外的调控作用。通过RT PCR和定点突变实验检测 ,结果表明PKC信号系统能调控Bcl X前体mRNA选择性剪接 ,其机制可能是通过应答序列来调控Bcl X前... 详细信息

以含有部分Bcl X序列的微小基因为研究模型 ,研究了TPA对Bcl X前体mRNA选择性剪接在体内和体外的调控作用。通过RT PCR和定点突变实验检测 ,结果表明PKC信号系统能调控Bcl X前体mRNA选择性剪接 ,其机制可能是通过应答序列来调控Bcl X前体mRNA

关键词： Bcl-XL/Bcl-Xa 选择性剪接灯盏花乙素

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左炔诺孕酮长效缓释埋植剂 Ⅰ.结构特征的研究和体内外药物释放的长期观察

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中国生物医学工程学报 1999年第1期18卷 22-29页

作者：宋存先杨菁孙洪范王彭延史瑞文施化莲崔秀敏中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所

用生物降解性聚己内酯（ＰＣＬ）为载体制备女性抗生育药物左炔诺孕酮（ＬＮＧ）的长效皮下埋植胶囊。除可降解外，该胶囊具有微孔结构，重要技术特征是在ＰＣＬ中加入固体水溶性大分子ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８（Ｆ６８）作为致孔剂，... 详细信息

用生物降解性聚己内酯（ＰＣＬ）为载体制备女性抗生育药物左炔诺孕酮（ＬＮＧ）的长效皮下埋植胶囊。除可降解外，该胶囊具有微孔结构，重要技术特征是在ＰＣＬ中加入固体水溶性大分子ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８（Ｆ６８）作为致孔剂，研究了加入致孔剂的工艺和微孔形成的原理，用核磁共振和扫描电镜等方法证明在亲水介质中Ｆ６８很快溶出，形成多微孔结构。体外和动物体内药物释放的研究证明该埋植剂具有零级释放动力学，可在体内长期维持稳定的药物释放量，每根３ｃｍ长的埋植剂在体内每天释放约２１微克ＬＮＧ。

关键词：生物降解聚己内酯皮下埋植左炔诺孕酮胶囊

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温灸温度生物反馈系统及应用

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中国生物医学工程学报 1996年第2期15卷 164-169页

作者：孙秀兰屈承端巩望松杨战松袁平中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所

皮温控制属非随意行为。温度生物反馈由于有自主神经参与，因而患者学习随意控制皮温比较困难。本文介绍了温灸温度生物反馈和临床应用。用电子温灸产生的神经反射和对经络的调节作用，辅助进行温度生物反馈，能促进大脑意识对皮温的控... 详细信息

皮温控制属非随意行为。温度生物反馈由于有自主神经参与，因而患者学习随意控制皮温比较困难。本文介绍了温灸温度生物反馈和临床应用。用电子温灸产生的神经反射和对经络的调节作用，辅助进行温度生物反馈，能促进大脑意识对皮温的控制，产生靶反应，加速生物闭环形成。临床已用于原发性高血压、高粘血症、主观性耳鸣等的治疗。

关键词：行为治疗生物反馈温灸治疗

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力达霉素对碱性成纤维细胞生长因子诱导的肿瘤细胞PKC活性的抑制(英文)

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药学学报 2005年第12期40卷 1110-1115页

作者：甄红英黄云虹甄永苏中国医学科学院中国协和医科大学医学生物技术研究所北京100050

目的研究和探讨力达霉素对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的癌细胞中信号转导的抑制作用。方法MTT法检测LDM和阿霉素(ADR)对3种人癌细胞系的增殖抑制作用。受体结合实验检测LDM对bFGF与其受体结合的作用。W estern b lotting检测bFG... 详细信息

目的研究和探讨力达霉素对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的癌细胞中信号转导的抑制作用。方法MTT法检测LDM和阿霉素(ADR)对3种人癌细胞系的增殖抑制作用。受体结合实验检测LDM对bFGF与其受体结合的作用。W estern b lotting检测bFGF受体复合物的形成,流式细胞测定细胞内Ca2+的流动,免疫印迹法测定bFGF所诱导的3种PKC亚型的活性。结果MTT法实验结果,LDM在体外对3种人癌细胞均显示出强烈的增殖抑制作用。按IC50值进行比较表明,LDM的活性比ADR强1 000倍以上。LDM抑制[125I]-bFGF对大鼠肺细胞膜受体的IC50为2.0×10-4nmol.L-1。LDM能阻碍bFGF与其受体复合物的形成,LDM(10 nmol.L-1)预孵育2 h可阻止bFGF诱导的细胞内Ca2+效应。免疫印迹法证明,LDM可抑制bFGF诱导的癌细胞的3种PKC亚型的活性。结论力达霉素抗肿瘤作用的机制之一可能是通过阻断bFGF受体的信号转导途径。

关键词：力达霉素碱性成纤维细胞生长因子信号转导抗肿瘤作用

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氨基酸序列突变对TFPI生物半衰期和生物活性的影响

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生物化学与生物物理进展 2007年第4期34卷 382-388页

作者：余波罗师平宋丽萍冷希岗赵明辉牛惠生中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所天津生物材料重点实验室天津300192 中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津300192

通过对个别氨基酸突变的研究,获得了保持良好生物活性的长半衰期组织因子途径抑制因子(tissue factor pathwayinhibitor,TFPI)重组蛋白的有效途径.采用定点诱变和基因重组技术,首先在TFPI cDNA特定位点形成一个位点的沉默突变,以提高TFP... 详细信息

通过对个别氨基酸突变的研究,获得了保持良好生物活性的长半衰期组织因子途径抑制因子(tissue factor pathwayinhibitor,TFPI)重组蛋白的有效途径.采用定点诱变和基因重组技术,首先在TFPI cDNA特定位点形成一个位点的沉默突变,以提高TFPI在毕赤酵母细胞内的表达量,此cDNA称为mTFPI.在此基础上,通过系列位点突变,形成3个羧基端突变体:m0TFPI、m1TFPI和m2TFPI.将上述4种TFPI cDNA与表达质粒pPic9连接,转染大肠杆菌,通过PCR和DNA测序确认重组质粒,转染酵母细胞GS115,甲醇诱导表达重组蛋白.采用层析方法纯化TFPI重组蛋白,用125I标记重组蛋白,静脉注射给药,比较四者在SD大鼠体内血浆代谢清除速度.用底物显色法测定重组蛋白抑制凝血因子Xa(Fxa)的活性,比较各株TFPI重组蛋白突变体在体内、体外对FXa的抑制作用及肝素对各株TFPI重组蛋白功能的影响.结果显示,相比野生型TFPI重组蛋(mTFPI)而言,3株羧基端突变体m0TFPI、m1TFPI、m2TFPI在SD大鼠体内血浆代谢清除时间均有不同程度延长,其生物代谢半衰期分别是mTFPI的1.5倍、1.9倍和大于2倍,与m-TFPI相比,3个rTFPI突变体在体内、体外抑制FXa的作用无明显减弱,与肝素的结合能力及协同能力也无明显减弱.结果表明,m0TFPI、m1TFPI和m2TFPI在生物半衰期得到明显延长的同时,仍保持良好的抑制Fxa的生物活性.

关键词：组织因子途径抑制因子(TFPI) 基因突变血浆清除

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5′-溴-4′-氯-吲哚-3′-氧唾液酸苷合成研究

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中国药学杂志 2003年第4期38卷 300-302页

作者：李卓荣刘宗英姜威汤雁波中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京100050

目的　研究生色底物 5′ 溴 4′ 氯吲哚 3′ 氧唾液酸苷 1的合成工艺。方法　以市售唾液酸为原料 ,经 5步反应 4步操作制得生色底物 1,即乙酰化、氯化、缩合和脱保护基。结果　得到的样品经1H NMR和质谱分析为结构正确化合物。结论... 详细信息

目的　研究生色底物 5′ 溴 4′ 氯吲哚 3′ 氧唾液酸苷 1的合成工艺。方法　以市售唾液酸为原料 ,经 5步反应 4步操作制得生色底物 1,即乙酰化、氯化、缩合和脱保护基。结果　得到的样品经1H NMR和质谱分析为结构正确化合物。结论　此合成工艺简化了操作、降低了成本。

关键词： 5′—溴—4′—氯—吲哚—3′—氧唾液酸苷合成显色测定质谱分析

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巨型引物PCR法对抗CD3改型单链抗体的定点诱变

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生物化学与生物物理进展 2001年第5期28卷 756-760页

作者：刘晶尹长城黄华梁姜述德中国协和医科大学中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118 中国科学院遗传学研究所北京100101

亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一 .利用巨型引物PCR定点诱变方法 ,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物 ,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段 ,即巨型引物 ,将其经琼脂... 详细信息

亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一 .利用巨型引物PCR定点诱变方法 ,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物 ,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段 ,即巨型引物 ,将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯化后 ,作为 3′和 5′的两端引物应用于第二轮PCR反应中 .通过改变标准PCR反应条件 ,调整引物与模板的浓度 ,扩增出特异性较强的目的DNA条带 .PCR产物经回收后 ,进行DNA测序 .

关键词： CD3改型单链抗体定点诱变 PCR 巨型引物慢速退火

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