检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代医药杂志 2008年第3期10卷 8-11页

作者：王胜芬韩佩珍穆传杰赵明辉卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所核医学室天津市分子核医学重点实验室天津300192 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

目的表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性。方法从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实。将目的序列(18-247氨基酸)亚克隆至... 详细信息

目的表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性。方法从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实。将目的序列(18-247氨基酸)亚克隆至pET-32(a)表达载体,重组质粒adiponectin/pET32(a)的序列经测序证实。将adiponectin/pET32(a)转化表达宿主菌OrigamiTM(DE3),在27℃以1mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE和氨基酸测序检测目的蛋白的表达,目的蛋白经组氨酸镍螯和树脂亲和纯化。以不同浓度的融合蛋白adiponectin-Trx和Trx蛋白处理体外培养的人脐静脉内皮细胞,细胞增殖法测定其生物学活性。结果小鼠脂肪组织脂联素基因的编码序列,337位点上的碱基A被G置换,导致在113位的蛋氨酸被缬氨酸取代。序列测定表明,构建的重组表达载体adiponectin/pET32a序列完全正确,诱导工程菌主要表达可溶性的融合蛋白adiponectin-Trx,部分以包含体形式表达。表达产物的相对分子量(Mr)同预期分子量相同,adiponectin-Trx Mr为43000,Trx Mr为19000。在低浓度时融合蛋白刺激人脐静脉内皮细胞增殖。结论小鼠脂肪组织脂联素基因编码序列与来自3T3-L1脂肪细胞的编码序列不同。成功地在***中表达了重组脂联素融合蛋白并具有生物学活性。

关键词：重组脂联素融合蛋白可溶性生物学活性

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人血清抵抗素ELISA方法的研究及其临床初步应用

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标记免疫分析与临床 2008年第1期15卷 38-41页

作者：路璐王德芝张春明潘兵赵明辉韩佩珍中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

用兔抗人抵抗素（resistin）片断（22～34氨基酸残基）的多克隆抗体（PcAb）包被固相板，用辣根过氧化物酶（HRP）标记PcAb得HRP—PcAb。在包被PcAb的孔中加入抵抗素标准品（或待测样品），加入HRP—PcAb，形成PcAb-resistin—HRP—PcA... 详细信息

用兔抗人抵抗素（resistin）片断（22～34氨基酸残基）的多克隆抗体（PcAb）包被固相板，用辣根过氧化物酶（HRP）标记PcAb得HRP—PcAb。在包被PcAb的孔中加入抵抗素标准品（或待测样品），加入HRP—PcAb，形成PcAb-resistin—HRP—PcAb复合物，加酶底物邻苯二胺（OPD）显色，用酶标仪在492nm波长处测定OD值，绘制标准曲线。从标准曲线读出样本中抵抗素含量。本方法特异性强，灵敏度高，精密度好。该法测定范围0．5～100ng／mL，最低检出量0．5ng／mL，批内和批间CV％分别为3．4％和7．2％。50例2型糖尿病患者血清抵抗素含量为23．2±3．9ng／mL，明显高于正常值16．0±2．5ng／mL。结果表明该法稳定，灵敏度适于检测人血清抵抗素水平。

关键词：抵抗素多克隆抗体酶联免疫吸附分析

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体外急性心肌梗死早期诊断方法的研究

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标记免疫分析与临床 2008年第1期15卷 32-35页

作者：褚丽萍刘鉴峰王彦胡亚楠李怀芬中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

从人心肌中提取心肌肌凝蛋白轻链(CMLC),免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞做常规融合,制备单克隆抗体。通过抗人心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体的相加指数、亲和常数测定和抗体夹心实验,筛选到配对较好的两对单抗,在此基础上建... 详细信息

从人心肌中提取心肌肌凝蛋白轻链(CMLC),免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞做常规融合,制备单克隆抗体。通过抗人心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体的相加指数、亲和常数测定和抗体夹心实验,筛选到配对较好的两对单抗,在此基础上建立起轻链夹心ELISA方法,为临床急性心肌梗死早期诊断方法研究提供条件。

关键词：肌凝蛋白 ELISA 单克隆抗体轻链

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肿瘤放射受体显像剂-肿瘤抑素T7肽及其衍生物T7-NGR的载体构建及表达

肿瘤放射受体显像剂-肿瘤抑素T7肽及其衍生物T7-NGR的载体构建及...

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第四届全国中青年核医学学术会议

作者：宋娜玲贺欣张春明王德芝赵启仁中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津分子核医学重点实验室

目的:人肿瘤抑素（tumstatin）可以抑制肿瘤新生血管的生成,为了提高作用靶向性,将导向肽 NGR 与肿瘤抑素 T肽的 C 端连接,克隆表达 T肽及其衍生物 T-NGR 融合蛋白,为人 tumstatin 的肿瘤放射受体显像奠定基础。

关键词：肿瘤抑素 T7-NGR T7 显像剂

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Cyclin B1在细胞周期调控及肿瘤发生发展中的作用

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医学研究杂志 2008年第1期37卷 8-10页

作者：秦丽莉樊飞跃詹启敏中国协和医科大学/中国医学科学院放射医学研究所天津300037 中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

高等真核生物在长期的进化过程中逐渐形成了多层次的细胞周期调控通路,这些调控通路最终都集中在各种细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)活性的精确调节上.

关键词：细胞周期调控 Cyclin 细胞周期依赖性蛋白激酶 kinases 生发肿瘤有丝分裂调控通路

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酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

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第四届全国中青年核医学学术会议

作者：赵启仁宋娜玲褚丽萍张春明王德芝贺欣中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

酶放大镧系元素发光（enzymemplified lanthanide luminescence,EALL）分析是把酶标记放大作用、BAS 系统亲和力放大作用和 TRFIA 优点结合起来,建立新的灵敏的、不用增强液的分析方法。此法的优点是:环境改变和淬灭体对荧光发射特征影... 详细信息

酶放大镧系元素发光（enzymemplified lanthanide luminescence,EALL）分析是把酶标记放大作用、BAS 系统亲和力放大作用和 TRFIA 优点结合起来,建立新的灵敏的、不用增强液的分析方法。此法的优点是:环境改变和淬灭体对荧光发射特征影响极小,外源镧系元素污染影响也较小。本课题组将 EAL L 分析应用于测定碱性磷酸酶,核酸杂交的 EALL 分析和核酸杂交的二次 EALL 分析,建立了全新的超灵敏的酶放大镧系元素发光分析法。

关键词：酶放大镧系元素时间分辨荧光分析

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酶放大时间分辨荧光分析

酶放大时间分辨荧光分析

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中国毒理学会放射毒理专业委员会第七次、中国毒理学会免疫毒理专业委员会第五次、中国环境诱变剂学会致突专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致畸专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致癌专业委员会第二次全国学术会议

作者：赵启仁宋娜玲褚丽萍张春明王德芝贺欣中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

酶放大镧系元素发光（enzymemplified lanthanide luminescence,EALL）分析是把酶标记放大作用、BAS 系统亲和力放大作用和 TRFIA 优点结合起来,建立新的灵敏的、不用增强液的分析方法。此法的优点是:环境改变和淬灭体对荧光发射特征影响极小,外源镧系元素污染影响也较小。本课题组将 EALL 分析应用于测定碱性磷酸酶,核酸杂交的 EALL 分析和核酸杂交的二次 EALL 分析,建立了全新的超灵敏的酶放大镧系元素发光分析法。

关键词：碱性磷酸酶核酸杂交酶放大时间分辨荧光分析生物素化镧系元素链霉亲和素

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PSA基因扩增研究及其在核酸杂交中的应用

PSA基因扩增研究及其在核酸杂交中的应用

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中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议

作者：褚丽萍宋娜玲赵启仁张春明颜廷东中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

目的建立前列腺癌早期诊断方法。方法培养前列腺癌LNCaP细胞,提取LNCaP细胞总RNA,RT-PCR扩增前列腺特异抗原（Prostate Specific antigen,PSA）基因,用洋地黄毒苷标记PSA DNA,通过二次酶放大和时间分辨荧光测量技术测定靶PSA DNA。结果... 详细信息

目的建立前列腺癌早期诊断方法。方法培养前列腺癌LNCaP细胞,提取LNCaP细胞总RNA,RT-PCR扩增前列腺特异抗原（Prostate Specific antigen,PSA）基因,用洋地黄毒苷标记PSA DNA,通过二次酶放大和时间分辨荧光测量技术测定靶PSA DNA。结果成功培养了LNCaP细胞,提取的总RNA浓度为1701μg/μl,OD/OD=2.1404（>2.0）,纯度很好,经RT-PCR成功的扩增出了PSA基因,将扩增DNA用于核酸杂交的二次酶放大时间分辨荧光分析中,结果靶PSA DNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级,灵敏度为10pmol/L,当靶PSA DNA浓度为10、30和60 pmol/L时,准确度和精密度分别为77%-95%和12.9%-15.3%。结论本研究为以PSA基因为靶标的前列腺癌早期诊断新方法的研究奠定了坚实的基础。

关键词： LNCaP细胞株前列腺特异抗原 RT-PCR 时间分辨荧光分析

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核酸杂交的酶放大镧系元素发光分析

核酸杂交的酶放大镧系元素发光分析

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作者：宋娜玲张春明王德芝贺欣赵启仁中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

目的:DNA 探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义。目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了解决这两方面的问题,从而建立一种超灵... 详细信息

目的:DNA 探针技术学已在基础研究中获得很大进展,而且在传染病、遗传病和肿瘤等疾病的诊断应用中有重要意义。目前,核酸杂交的分析测定系统的研究主要集中在提高分析灵敏度和非同位素两方面,为了解决这两方面的问题,从而建立一种超灵敏的非同位素的核酸杂交测定方法—二次酶放大时间分辨荧光分析法。

关键词：酶放大时间分辨核酸杂交发光分析生物素化镧系元素

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Brcal和Gadd45a在维持基因组稳定中的协同作用

Brcal和Gadd45a在维持基因组稳定中的协同作用

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第三届中-法乳腺癌高级学术论坛

作者：贾立立李丹樊飞跃詹启敏中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津300192 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的：Brcal(Breast cancer slJsceptibility gene)基因是世界上第一个被发现的家族性乳腺癌抑制基因，它在很多生物学过程中起非常重要的作用，包括转录的激活和抑制，细胞周期的调节，染色体重组，DNA损伤修复和中心体复制等。Brcal... 详细信息

目的：Brcal(Breast cancer slJsceptibility gene)基因是世界上第一个被发现的家族性乳腺癌抑制基因，它在很多生物学过程中起非常重要的作用，包括转录的激活和抑制，细胞周期的调节，染色体重组，DNA损伤修复和中心体复制等。Brcal的遗传突变导致高发的家族性乳腺癌。但它在DNA损伤中的作用还不是很清楚。Gadd45a是受Brcal调节的主要下游基因。它们共同维持基因组的稳定，并对肿瘤的发生发展有一定的抑制作用，然而到目前为止这一机制还不清楚。本文旨在对Brcal和Gadd45a在维持基因组稳定以及抑制肿瘤发生发展的机制进行研究。

关键词： Brcal基因 Gadd45a 基因组稳定协同作用乳腺癌

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