检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2004年第16期84卷 1334-1334页

作者：韩忠朝杨晨中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心天津300020

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到... 详细信息

早在一个世纪前就有人提出造血细胞和血管细胞可能有一个共同的干细胞--血液血管干细胞(hemangioblast).血液血管干细胞可以发育分化成造血干细胞(HSC)和血管干细胞(angioblast),后两者进一步分化增殖形成血细胞和血管两大系统.但直到近几年,才有实验研究证实了血液血管干细胞的存在,并可通过免疫磁珠或流式细胞仪等技术进行鉴别和分离纯化.这些干细胞虽然数量很少,但其双重分化潜能使之成为临床移植治疗血液和血管性疾病的候选干细胞.

关键词：外周血干细胞血管闭塞性脉管炎造血干细胞 HSC 心血管病

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脐血干/祖细胞短期体外扩增后归巢相关粘附特性的研究

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中华血液学杂志 2003年第2期24卷 64-67页

作者：翟琼莉周余邱录贵李茜韩俊领于珍孟恒星应红光王亚非韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较... 详细信息

目的　探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法　将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较扩增前后CD34+ 细胞表面VLA 4 (CD4 9d)、VLA 5(CD4 9e)、LFA 1(CD1 1a)、L selectin (CD6 2L)、PECAM 1(CD31 )、ICAM 1(CD54)和HCAM(CD4 4)等归巢相关粘附分子 (CAMs)的表达情况 ,并检测CD34+ 细胞与纤连蛋白 (FN)间的自发粘附率和基质细胞来源因子 1(SDF 1)诱导粘附率。结果　①在第 14天的培养扩增中 ,表达上述CAMs的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度 (15～ 72倍 )的扩增 ;②扩增后CD34+ 细胞表面粘附分子CD4 4、CD1 1a、CD4 9e和CD4 9d的表达与原代CD34+ 细胞持平或高于培养开始时水平 ,而CD6 2L、CD54和CD31 的表达则有不同程度下调 ;③在前 10d的扩增中 ,CD34+ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF 1诱导粘附率均呈上升趋势。结论　所建立的短期培养体系不仅可以支持表达重要CAMs的UCBCD34+ 细胞亚群的有效扩增 ,而且扩增后的HSPC总体上保持原有的粘附功能。

关键词：脐血干/祖细胞体外扩增归巢相关粘附特性研究

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ETO转录抑制结构域的分析与鉴定

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中华血液学杂志 2003年第1期24卷 10-13页

作者：王敏王玲郝长来邢海燕唐克晶王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院血液内科实验血液学国家重点实验室天津300020

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ... 详细信息

目的　进一步确定ETO抑制基因转录的区域及其与组蛋白脱乙酰化酶之间的关系。方法　以位点诱变法使ETO的两个锌指结构分别突变 ,使用聚合酶链反应扩增ETO突变体 ,克隆入真核细胞表达质粒pFA CMV中。通过基因转染、报告基因转录活性分析 ,确定ETO的不同区段对基因转录调节的作用。结果　成功构建出锌指突变和不同区段的ETO表达载体 ,并发现ETO存在两个抑制转录的区域 ,分别位于羧基末端的两个锌指结构和第 2 75～ 487位氨基酸残基。结论　ETO通过 2个区域抑制转录 ,并且与组蛋白脱乙酰化酶密切相关 ,后者可能会用作急性髓系白血病M2b的治疗靶点。

关键词：急笥髓系白血病 ETO基因组蛋白脱乙酰基酶鉴定

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人脐血单个核细胞体外分化为神经细胞

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中华血液学杂志 2003年第9期24卷 484-487页

作者：赵宗茂卢士红张庆俊刘海英杨仁池李洪钧蔡英林韩忠朝河北医科大学第二医院神经外科中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的　探讨核转录因子 (NF) κB配体受体激动因子 (receptoractivatorofNF KappaBligand ,RANKL)和脑源性神经营养因子 (brain derivedneurotrophicfactor,BDNF)体外诱导人脐血细胞 (humanum bilicalcordbloodcells,HUCBC)分化为神经元和神经胶质细胞的可行性。方法　采集足月妊娠、正常分娩的新鲜脐血 ,取单个核细胞 (MNC) ,利用人可溶性NF κB配体受体激动因子 (sRANKL)、BDNF作为分化诱导因子进行体外诱导 ,维甲酸 (RA)诱导分化作为对照 ,倒置显微镜动态观察细胞生长、分化情况 ;培养 10d后 ,应用免疫细胞化学染色法检测培养细胞的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和神经元特异核蛋白 (NeuN)表达情况 ,进行细胞性质鉴定。结果　诱导分化 10d后 ,RANKL、BDNF和BDNF +RANKL组的NeuN阳性细胞数分别为 (97.0± 13.5 )个 ,(85 .0± 5 .6 )个 ,(16 7.0± 19 7)个 ,分别是对照组 [(5 5 .7±8.5 )个 ]的 1.7,1.5 ,3.0倍 ,GFAP阳性细胞数分别为 114 .7± 18.0 ,2 33.3± 2 1.7,2 89.0± 2 4 .9,分别是对照组的 1.4 ,2 .9,3.6倍。RANKL向神经元方向诱导分化的作用与BDNF相当 ,向神经胶质细胞分化的作用不及BDNF。RANKL和BDNF对HUCBC向神经细胞分化具有协同作用 ,二者联合应用明显促进HUCBC向神经元和神经胶质细胞分化?

关键词：人脐血单个核细胞细胞分化神经细胞核转录因子-κB配体受体激动因子脑源性神经营养因子

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单价抗CD20抗体诱导人B细胞淋巴瘤Raji细胞的凋亡

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癌症 2003年第12期22卷 1249-1253页

作者：刘银星范冬梅熊冬生许元富邵晓枫许元生彭晖杨铭秦岚朱祯平杨纯正中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第一中心医院核医学室天津300192

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建... 详细信息

背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建。本研究目的是观察HI47(鼠抗-CD20抗体)和其嵌合抗CD20抗体片段抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:用免疫荧光法测定抗CD20抗体与CD20+人B细胞淋巴瘤Raji细胞的结合能力;MTT法测定抗CD20抗体片段对Raji细胞生长的影响;用膜联蛋白Ⅴ染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测和验证抗CD20抗体片段诱导Raji细胞凋亡。结果:HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段均可与CD20+Raji细胞结合,结合率可达90%以上;HI47不能与美罗华竞争结合Raji细胞;HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段浓度为100μg/ml对Raji细胞的抑制率分别为:(57.0±1.5)%、(65.2±2.5)%、(77.2±3.2)%;单价的抗CD20抗体片段Fab(20μg/ml)能够诱导Raji细胞的凋亡,早期凋亡率为17%。结论:HI47的嵌合抗体片段对Raji细胞有抑制作用,能诱导Raji细胞的凋亡。

关键词：单价抗CD20抗体诱导 B细胞淋巴瘤 Raji细胞细胞凋亡

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骨髓间质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响

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中华神经外科杂志 2003年第1期19卷 58-62页

作者：赵宗茂张庆俊韩忠朝刘海英李洪钧孙国柱杨仁池邱录贵蔡英林朱慧芳卢士红河北医科大学第二医院神经外科 050000 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的　观察成人骨髓间质干细胞 (hBMSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法　Wistar大鼠 90只 ,随机分为脊髓半切 +hBMSCs组、脊髓半切 +PBS组、单纯脊髓半切组和假手术组。脊髓半切 +hBMSCs组和PBS组又分别分为头侧注射、尾... 详细信息

目的　观察成人骨髓间质干细胞 (hBMSCs)移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法　Wistar大鼠 90只 ,随机分为脊髓半切 +hBMSCs组、脊髓半切 +PBS组、单纯脊髓半切组和假手术组。脊髓半切 +hBMSCs组和PBS组又分别分为头侧注射、尾侧注射和头尾两侧注射三个亚组。移植后 1、 7、 1 4、 2 1、 2 8d观察大鼠神经功能恢复情况 ,应用免疫组化和免疫荧光技术检测BrdU标记hBMSCs的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和神经元特异性核蛋白 (NeuN)表达情况。结果　大鼠脊髓半切损害后 ,hBMSCs组动物较PBS组死亡率下降并有明显的神经功能恢复。移植的hBMSCs在宿主脊髓中存活 ,从第 7天开始即有NeuN和GFAP表达并向损伤部位及对侧迁移 ,第 2 8天hBMSCs来源GFAP阳性细胞可见明显的树突生长。结论　　hBMSCs可在宿主损伤脊髓中存活、向损伤部位迁移并向神经元和星形胶质细胞分化 ,并促进神经功能恢复 ,降低死亡率 ;

关键词：脊髓损伤骨髓间质干细胞移植大鼠神经功能恢复

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PI3K/Akt信号传导途径介导HAPO拮抗MO7e细胞凋亡的作用

PI3K/Akt信号传导途径介导HAPO拮抗MO7e细胞凋亡的作用

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第九届全国实验血液学会议

作者：战梅李文颖卢士红杨仁池韩忠朝中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所中国协和医科大学血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的人促血液血管生成素(Hemangiopoietin,HAPO)最初由我室从再生障碍性贫血病人的尿中分离出来,是一种新的促造血干细胞和血管内皮细胞存活和增殖的细胞因子。体内外研究表明,HAPO对人和小鼠早期造血调控,造血干、祖细胞和血管内皮细... 详细信息

目的人促血液血管生成素(Hemangiopoietin,HAPO)最初由我室从再生障碍性贫血病人的尿中分离出来,是一种新的促造血干细胞和血管内皮细胞存活和增殖的细胞因子。体内外研究表明,HAPO对人和小鼠早期造血调控,造血干、祖细胞和血管内皮细胞的增殖、存活具有促进作用。依赖GM-CSF生长的人巨核细胞白血病细胞系MO7e在撤除支持因子后生长缓慢以至终止并发生凋亡。初步实验发现,HAPO能够拮抗MO7e去除因子诱发的凋亡。由于磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号转导途径的激活能够促进多种抗凋亡蛋白的活性(如bcl-2,Mcl-1,NF-κB,IAPs等),降低具有促凋亡性的蛋白功能

关键词：细胞凋亡信号转导途径 AKT PI3K/Akt 信号传导途径

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两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突状细胞的初步研究

两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突状细胞的初步研究

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第九届全国实验血液学会议

目的树突状细胞（dendritic cells,DCs）是目前所知的功能最强而且是惟一可以激活初始T细胞的抗原提呈细胞,广泛参与多种免疫反应,在肿瘤免疫、移植免疫、抗感染免疫等方面均发挥着重要作用。但人体内DC数量极少、纯化困难。我们利用CB... 详细信息

目的树突状细胞（dendritic cells,DCs）是目前所知的功能最强而且是惟一可以激活初始T细胞的抗原提呈细胞,广泛参与多种免疫反应,在肿瘤免疫、移植免疫、抗感染免疫等方面均发挥着重要作用。但人体内DC数量极少、纯化困难。我们利用CB-CD细胞,采用先扩增后诱导的“两步法”获得DC,并通过对其形态学、免疫表型及功能进行检测和分析,初步探索“两步法”获得DC时,不同的扩增、诱导时间对其数量及功能的影响。方法（1）CB-CD细胞的分离纯化与扩增:在无菌条件下取足月顺产胎儿CB,6%羟乙基淀粉沉淀红细胞,Ficoll分离的单个核细胞,免疫磁珠分选获得CB-CD细胞。

关键词：初步研究两步法

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一个可保持长期植入潜能的扩增脐带血造血干细胞体系的建立和临床前研究

一个可保持长期植入潜能的扩增脐带血造血干细胞体系的建立和临床...

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第九届全国实验血液学会议

作者：邱录贵翟琼莉 Roger H.Herzig Ronald Brown 韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室 University of Louisville Brown Cancer Center Louisville KY U.S.A Quality Biological Ihc Gaithersburg MD U.S.A 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的建立一个适合于临床应用的能够在一定时期内持续有效扩增保持体内外功能完整的各阶段造血干/祖细胞（HSPC）的培养扩增体系。方法将从UCB标本中纯化的CD细胞接种于我们建立的无血清无基质悬浮扩增体系培养2周,分别于培养7 d、10 d和... 详细信息

目的建立一个适合于临床应用的能够在一定时期内持续有效扩增保持体内外功能完整的各阶段造血干/祖细胞（HSPC）的培养扩增体系。方法将从UCB标本中纯化的CD细胞接种于我们建立的无血清无基质悬浮扩增体系培养2周,分别于培养7 d、10 d和14 d评价扩增效率,并从扩增产物中再次纯化CD细胞,比较扩增前后CD细胞的增殖和自我更新潜能及归巢相关功能特性。而后将扩增体系放大,并应用异种胎羊-人造血干细胞移植模型评价扩增不同时点的脐带血HSPC的体内植入潜能。结果（1）在2周培养扩增期内,自最早期的LTC-IC和CDCDHLA-D亚群、HPP-CFU和CD细胞到较成熟的各系列祖细胞等各阶段造血干/祖细胞均得到持续和有效的扩增。经过10d和14d扩增培养后,大部分（7/8）脐带血标本可分别产生超过60×10～6和100×10～6CD细胞,这将有可能足够成人

关键词：无血清体内外临床前研究细胞体系

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体外扩增中CD34+细胞CD38与HLA-DR抗原表达的变化

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中华放射医学与防护杂志 2003年第10期 752-752页

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