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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：阳佳张斯雅杨琪汪怀山张建民医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础医学院免疫学系中国医学科学院基础医学研究所

研究背景:阿尔茨海默病是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病,而其病因与发病机制尚未明确.索瑞酶是一种具有重要生理功能的ATP水解酶,其能够调控AMPA受体在神经突触后膜表面上的表达,进而调控神经突触的可塑性,参与学习与记... 详细信息

研究背景:阿尔茨海默病是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病,而其病因与发病机制尚未明确.索瑞酶是一种具有重要生理功能的ATP水解酶,其能够调控AMPA受体在神经突触后膜表面上的表达,进而调控神经突触的可塑性,参与学习与记忆的形成.我们推测索瑞酶在阿尔茨海默病发生发展中扮演着重要角色.目的:探索索瑞酶对β淀粉样蛋白聚集沉淀的机制,进一步研究脑组织内索瑞酶缺失对阿尔茨海默病发生发展的影响.

关键词：阿尔茨海默病索瑞酶 β淀粉样蛋白

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microRNA-34a对肿瘤微环境作用的研究进展

microRNA-34a对肿瘤微环境作用的研究进展

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第九届全国免疫学学术大会

作者：张斯雅阳佳纪旭崔莲仙张建民何维医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础医学院免疫学系中国医学科学院基础医学研究所

肿瘤微环境是指由肿瘤细胞与其周围环境所组成的高度异质性的,伴随肿瘤发展而不断演变的微小生态系统。它包括肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞、骨髓来源抑制性细胞、周细胞、脉管系统、细胞外基质及其降解酶、多种... 详细信息

肿瘤微环境是指由肿瘤细胞与其周围环境所组成的高度异质性的,伴随肿瘤发展而不断演变的微小生态系统。它包括肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞、骨髓来源抑制性细胞、周细胞、脉管系统、细胞外基质及其降解酶、多种生长因子、炎症因子以及特殊的理化特征(如低氧、低pH)。肿瘤微环境在受到肿瘤细胞影响的同时也反作用于肿瘤细胞,因此作为当前癌症的研究热点,为肿瘤的治疗提供了新的视野和思路。具有21-23核苷酸的微小RNA(microRNA)分子在机体生命活动的各方面起到调节作用。microRNA-34a与p53密切相关,已被视为一个抑癌基因参与到肿瘤的发生、发展、分化、凋亡以及转侵袭的各方面。研究发现,miR-34a在抑制肿瘤血管生成、转移、有氧糖酵解(Warburg effect)等多方面有重要作用。本文将主要针对miR-34a在肿瘤微环境中的这些最新发现进行综述。

关键词： microRNA miR-34a 肿瘤微环境

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索瑞酶在阿尔茨海默病发生发展中的作用

索瑞酶在阿尔茨海默病发生发展中的作用

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第九届全国免疫学学术大会

作者：阳佳张斯雅杨琪汪怀山张建民医学分子生物学国家重点实验室北京协和医学院基础医学院免疫学系中国医学科学院基础医学研究所

研究背景:阿尔茨海默病是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病,而其病因与发病机制尚未明确。索瑞酶是一种具有重要生理功能的ATP水解酶,其能够调控AMPA受体在神经突触后膜表面上的表达,进而调控神经突触的可塑性,参与学习与记... 详细信息

研究背景:阿尔茨海默病是中枢神经系统一种常见的进行性神经退行性疾病,而其病因与发病机制尚未明确。索瑞酶是一种具有重要生理功能的ATP水解酶,其能够调控AMPA受体在神经突触后膜表面上的表达,进而调控神经突触的可塑性,参与学习与记忆的形成。我们推测索瑞酶在阿尔茨海默病发生发展中扮演着重要角色。目的:探索索瑞酶对β淀粉样蛋白聚集沉淀的机制,进一步研究脑组织内索瑞酶缺失对阿尔茨海默病发生发展的影响。方法:以APPsWe小鼠作为阿尔茨海默病模型小鼠,同时结合索瑞酶条件性基因敲除小鼠和转基因小鼠技术。通过免疫组织化学染色检测索瑞酶的表达对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织神经退行性变的影响情况,同时设立对照组小鼠(阿尔茨海默病模型小鼠及野生型小鼠)。结果:与阿尔茨海默病模型小鼠相比,在该模型中索瑞酶前脑条件性敲除小鼠的大脑皮层及海马区的β淀粉样蛋白在胞外的积累程度更明显,而且形成的老年斑数量更多。而野生型小鼠中未检测到β淀粉样蛋白在胞外的积累。同时,阿尔茨海默病模型中索瑞酶前脑条件性敲除小鼠脑组织切片中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及离子钙接头分子1(Iba1)表达量明显高于对照组小鼠。结论:索瑞酶缺失与阿尔茨海默病发生发展的密切相关,研究索瑞酶作为药物靶标,开发具有对阿尔茨海默病具有预防或治疗作用的药物奠定关键性基础

关键词：阿尔茨海默病索瑞酶 β淀粉样蛋白

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人结直肠癌细胞Drosha基因敲除细胞模型的构建

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医学研究杂志 2014年第6期43卷 21-24页

作者：李芸侨李尚泽宋伟王任先张晓东王琳芳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室100005 武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系 430072

目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感... 详细信息

目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感染、抗生素新霉素(G418)药物筛选、PCR以及Western blot鉴定获得基因敲除阳性细胞株,通过Cre病毒感染去除抗性基因,最终建立敲除Drosha基因的结直肠癌细胞模型。结果经过两轮打靶,分别将DNA双链上的Drosha基因去除并经Western blot鉴定,获得Drosha-/-阳性的HCT116细胞株。结论通过AAV病毒介导的染色体同源重组技术,成功构建Drosha基因敲除的HCT116细胞系。

关键词：基因敲除同源重组结直肠癌

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rAAV2/5-TRAIL与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关炎的作用和机制

rAAV2/5-TRAIL与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关炎的作用和机制

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中国病理生理学会第十四届肿瘤专业委员会、第十五届免疫专业委员会联合学术会议

作者：史娟周剑锁朱洁卿袁海芹尤欣刘彦信郑德先中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院分子生物学国家重点实验室北京 100005 北京协和医院风湿免疫科北京 100730

目的:研究重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)介导肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的表达与表阿霉素(Epirubicin)联合作用治疗类风湿性关节炎的作用和分子机制。方法:利用MTT检测rAAV-TRAIL与表阿霉素联合作用可以使类风湿性关节炎滑膜表面的成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的细胞死亡率;利用蛋白免疫印迹研究细胞凋亡信号通路蛋白的变化;建立小鼠胶原性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,膝关节腔内注射rAAV-TRAIL病毒并评价其治疗作用。结果:对不同亚型的AAV病毒进行了筛选，体外研究发现rAAV2/5亚型对RA病人FLS细胞的侵染率更高。化疗药物表阿霉素可显著增强rAAV215在FLS中介导的外源基因表达，在CIA小鼠中表阿霉素同样可以增强AAV TRAIL的表达，rAAV2/S-TRAIL组关节组织TRAIL表达水平为10.49±1.89pg/mg，而在rAAV2/5-TRAIL和EPB联用组TRAIL表达水平提高到61.70±23.33pg/mg。结论:发现rAAV2/S-TRAIL,和亚毒性剂量的化疗药物EPB联合应用可以大大提高rAAV2/5-TRAIL对类风湿关节炎的治疗作用，为重组AAV-TRAIL用于类风湿关节炎的基因治疗提供了新的资料。

关键词：类风湿性关节炎重组腺相关病毒肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体表阿霉素分子机制

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应用二代测序筛查家族性肥厚型心肌病的基因谱、基因型表型分析及随访研究

应用二代测序筛查家族性肥厚型心肌病的基因谱、基因型表型分析及...

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中国心脏大会2014

作者：肖嫣卢超霞刘亚欣杨坤璂刘芳田涛张学周宪梁中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院高血压诊治中心中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室医学遗传学系

目的:肥厚型心肌病（HCM）是一种常见的单基因遗传性心血管病,60%0%为家族性HCM（FHCM）。流行病学调查表明中国约有100万HCM患者,患者临床表现多样,易并发心脏性猝死,年死亡率高达3%%。基因诊断具有特异性,目前报道有22个基因是FHCM的... 详细信息

目的:肥厚型心肌病（HCM）是一种常见的单基因遗传性心血管病,60%0%为家族性HCM（FHCM）。流行病学调查表明中国约有100万HCM患者,患者临床表现多样,易并发心脏性猝死,年死亡率高达3%%。基因诊断具有特异性,目前报道有22个基因是FHCM的致病基因。二代测序具有高通量、高效、经济的特点。目前国内尚无应用二代测序筛查家族性肥厚型心肌病及进行基因型表型关联研究

关键词：家族性肥厚型心肌病二代测序基因谱随访研究基因型

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基因组科学的发展与展望

基因组科学的发展与展望

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第七届中国生物产业大会·2013基因组学与创新型药物研制高峰论坛

作者：强伯勤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室学术委员会中国科学院中国高科技产业化研究会

人类全基因组DNA序列测定的完成,带动了基因组科学以及测序技术的全面发展。在医学领域,兴起了基因组多态性、基因变异与疾病发生发展关系的系统研究。国际人类基因组单体型图计划已完成第三阶段任务,千人基因组、肿瘤基因组、人类微生... 详细信息

人类全基因组DNA序列测定的完成,带动了基因组科学以及测序技术的全面发展。在医学领域,兴起了基因组多态性、基因变异与疾病发生发展关系的系统研究。国际人类基因组单体型图计划已完成第三阶段任务,千人基因组、肿瘤基因组、人类微生物基因组(宏基因组)与表观基因组的国际合作研究计划已先后启动、顺利实施,将从多方位阐释遗传因素与疾病的关系,为疾病的预警预防、早诊早治以及个体化用药奠定科学支撑。发展包括基因组科学在内的生命"组学"与系统生物学是功在当代利在千秋的大业。

关键词：基因组发展与展望

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应用二代测序筛查家族性肥厚型心肌病的基因谱、基因型表型分析及随访研究

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中国循环杂志 2014年第S1期 32-32页

作者：肖嫣卢超霞刘亚欣杨坤璂刘芳田涛张学周宪梁北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院高血压诊治中心100037 北京市中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室医学遗传学系100005

目的：肥厚型心肌病（HCM）是一种常见的单基因遗传性心血管病，60%~70%为家族性HCM （FHCM）。流行病学调查表明中国约有100万HCM患者，患者临床表现多样，易并发心脏性猝死，年死亡率高达3%~6%。基因诊断具有特异性，目前报道有22个... 详细信息

目的：肥厚型心肌病（HCM）是一种常见的单基因遗传性心血管病，60%~70%为家族性HCM （FHCM）。流行病学调查表明中国约有100万HCM患者，患者临床表现多样，易并发心脏性猝死，年死亡率高达3%~6%。基因诊断具有特异性，目前报道有22个基因是FHCM 的致病基因。二代测序具有高通量、高效、经济的特点。目前国内尚无应用二代测序筛查家族性肥厚型心肌病及进行基因型表型关联研究的报道。此研究旨在应用二代测序方法探索中国人群家族性肥厚型心肌病相关致病基因，揭示致病基因型与临床表型的关系。

关键词：应用筛查家族性肥厚型心肌病基因谱基因型表型分析致病基因心脏性猝死中国人群心血管病年死亡率流行病学临床表型临床表现基因诊断患者关联研究方法探索遗传性

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生长相关蛋白-43在内侧颞叶癫痫小鼠模型海马中的表达

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中国医学科学院学报 2013年第6期35卷 589-594页

作者：吴晓峰沙龙泽沙志强沈岩许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究癫痫发生不同时期生长相关蛋白-43(GAP-43)及其磷酸化形式(p-GAP-43)在海马齿状回中表达的时空分布情况。方法构建海人酸(KA)诱导的内侧颞叶癫痫(MTLE)模型小鼠,采用免疫组织化学、Western blot技术检测GAP-43与p-GAP-43在模型... 详细信息

目的研究癫痫发生不同时期生长相关蛋白-43(GAP-43)及其磷酸化形式(p-GAP-43)在海马齿状回中表达的时空分布情况。方法构建海人酸(KA)诱导的内侧颞叶癫痫(MTLE)模型小鼠,采用免疫组织化学、Western blot技术检测GAP-43与p-GAP-43在模型鼠癫痫发生不同时期(5d,2、5周)海马齿状回中的表达变化。结果 GAP-43在正常对照鼠及模型鼠的齿状回、门区和海马内分子层均有较高表达。与对照组相比,p-GAP-43在KA诱导癫痫发作后的5d,2、5周3个时间点的表达水平逐步下降。结论活性形式磷酸化的GAP-43在齿状回颗粒细胞中的表达水平随着癫痫发作时间的推移逐步降低,可能与硬化海马的轴树突异常重组过程相关。

关键词：内侧颞叶癫痫生长相关蛋白-43 海人酸海马齿状回

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小RNA干扰蛋白酶体亚基α7抑制K562细胞增殖

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中国医学科学院学报 2013年第6期35卷 601-606页

作者：秦涛范翠青朱宁沈岩陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的运用小干扰RNA(siRNA)技术降低人髓性白血病细胞株K562细胞20S蛋白酶体亚基α7(PSMA7)基因的表达水平,探讨PSMA7表达下调对其细胞功能的影响。方法采用HiPerFect将化学合成的针对人PSMA7基因的特异性siRNA转染入K562细胞后,用Wester... 详细信息

目的运用小干扰RNA(siRNA)技术降低人髓性白血病细胞株K562细胞20S蛋白酶体亚基α7(PSMA7)基因的表达水平,探讨PSMA7表达下调对其细胞功能的影响。方法采用HiPerFect将化学合成的针对人PSMA7基因的特异性siRNA转染入K562细胞后,用Western blot法检测siRNA对PSMA7蛋白表达的抑制效果,采用MTS法及细胞计数法检测细胞增殖速率,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blot法检测细胞周期蛋白Cyclin A、D、E的表达水平,Annexin V/FITC染色后流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 PSMA7 siRNA转染K562细胞后使PSMA7蛋白表达水平明显下调;细胞增殖速率明显降低但无明显细胞凋亡,细胞周期中S期细胞比例减少;细胞周期蛋白Cyclin A、E表达下调。结论 PSMA7表达下调可使人髓性白血病细胞株K562细胞Cyclin A、E表达下调,使S期细胞比例降低从而抑制K562细胞增殖。

关键词： RNA干扰蛋白酶体亚基α7 细胞周期蛋白细胞增殖

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