检索结果-内蒙古大学图书馆

现代药物与临床 2016年第6期31卷 742-746页

作者：辛玥丁亚辉纪庆杨铭李迎辉高瀛岱天津医科大学总医院儿科天津300052 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探索木香烃内酯对白血病耐药细胞系K562/A02阿霉素耐药的逆转作用。方法将木香烃内酯与K562/A02细胞共培养72 h后,采用MTT法检测木香烃内酯对细胞生长的抑制作用。不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24 h后,采用Annexin V和PI双染... 详细信息

目的探索木香烃内酯对白血病耐药细胞系K562/A02阿霉素耐药的逆转作用。方法将木香烃内酯与K562/A02细胞共培养72 h后,采用MTT法检测木香烃内酯对细胞生长的抑制作用。不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24 h后,采用Annexin V和PI双染法检测木香烃内酯对细胞的凋亡。不同浓度木香烃内酯与阿霉素共培养72 h后采用MTT法检测木香烃内酯对K562/A02细胞的耐药逆转情况。采用流式细胞仪检测木香烃内酯处理24 h之后K562/A02细胞阿霉素蓄积以及细胞膜表面P-糖蛋白（P-gp）的表达。结果木香烃内酯对K562/A02细胞的生长具有明显抑制作用,呈显著的剂量相关性。与对照组比较,2.5～50μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P〈0.05、0.01、0.001）。随着木香烃内酯浓度的增加,凋亡细胞的比例明显增加。与对照组比较,不同浓度木香烃内酯组细胞凋亡比例显著升高（P〈0.05、0.01、0.001）。加入5μmol/L木香烃内酯后,使K562/A02细胞对阿霉素的敏感性提高12倍。木香烃内酯处理后K562/A02细胞内部阿霉素的蓄积明显增加,呈浓度相关性。与对照组比较,5、10μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞内部阿霉素的蓄积增加显著升高（P〈0.05）。细胞表面的P-gp的表达并无显著影响。结论木香烃内酯能够抑制K562/A02细胞增殖,诱导K562/A02细胞凋亡,增强阿霉素的化疗敏感性,逆转阿霉素耐药。

关键词：木香烃内酯 K562/A02细胞阿霉素耐药细胞凋亡 P-糖蛋白

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建立非基因整合原发性骨髓纤维化诱导性多能干细胞株

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中国实验血液学杂志 2015年第5期23卷 1415-1421页

作者：许静盛梦瑶周圆邢文白洁温伟纪光臻张鸿雁金晖吕翠翠袁卫平张孝兵程涛中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:利用诱导多能性干细胞(iPSC)技术建立原发性骨髓纤维化(PMF)诱导多能性干细胞系,为研究血液病的发生发展提供一个实验模型。方法:采用非基因整合型质粒重编程携带JAK2V617F突变的PMF患者骨髓来源的单个核细胞,诱导生成该患者特异的... 详细信息

目的:利用诱导多能性干细胞(iPSC)技术建立原发性骨髓纤维化(PMF)诱导多能性干细胞系,为研究血液病的发生发展提供一个实验模型。方法:采用非基因整合型质粒重编程携带JAK2V617F突变的PMF患者骨髓来源的单个核细胞,诱导生成该患者特异的iPS细胞株。结果:采用此方法建立的iPS细胞株,在体外能够稳定传代,无外源性基因整合,多能性基因表达水平与人胚胎干细胞类似,在体内具有形成三胚层结构的能力。测序结果显示,所建立的患者的iPS细胞株携带不同负荷的JAK2V617F突变。结论:成功地建立非基因整合的PMF患者特异的iPS细胞株,这为研究PMF的发病机制、化疗药物筛选及实现精准化治疗提供了一个重要的疾病模型。

关键词：诱导多能性干细胞原发性骨髓纤维化非整合 Episomal载体

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过氧化氢酶对人造血干细胞在免疫缺陷小鼠中植入的作用

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中国实验血液学杂志 2015年第1期23卷 183-189页

作者：师鸣胡林萍张孝兵袁卫平程涛中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究人脐带组织来源的间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,UC-MSC)过表达过氧化氢酶(catalase,CAT)基因对人造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)移植作用的影响。方法:用携带GFP空载体与GFP-CAT载体的逆转录病毒感染UC-MSC,流式细胞术分选得到MSC-GFP和MSC-GFP-CAT两种细胞株,检测两种细胞株中CAT的mRNA表达水平和过氧化氢酶的酶活力;将其与人脐血CD34+细胞体外共培养;与人Lin-CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49f+Rholow细胞共同移植到NOD/SCID小鼠胫骨中,移植12周后,检测骨髓中的人CD45+细胞比例。结果:感染48 h后能够观察到UC-MSC发出绿色荧光,并能够稳定传代;流式细胞术分选后,MSC-GFP的纯度达到97.6%,MSC-GFP-CAT达到96.8%;MSC-GFP-CAT细胞中CAT的mRNA水平为对照组的23.9倍;体外检测UC-MSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT细胞的酶活力分别为19.5、20.3、74.1 Unit;在共培养实验中,各组中的CD34+细胞比例无显著差异;在共移植实验中,HSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT组中人CD45+细胞的比例分别为(3.22±3.1)%、(4.26±3.56)%和(7.37±4.51)%,MSC-GFP-CAT组的植入率为对照组MSC-GFP的1.7倍。结论:MSC-GFP-CAT对人HSC体外扩增无影响;MSC-GFP-CAT与人HSC共移植能够提高人HSC的植入率。

关键词：造血干细胞间充质干细胞过氧化氢酶植入率 NOD/SCID小鼠

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巨噬细胞炎性蛋白-1α促进急性髓细胞白血病细胞生长

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中国实验血液学杂志 2015年第2期23卷 306-311页

作者：鹿萍王娅婕郑亚伟董芳庞雅坤程辉袁卫平程涛郝莎中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

背景:巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)是趋化因子CCL家族中的一员,主要参与炎性反应中中性粒细胞的渗出,同时在许多恶性血液肿瘤中扮演着危险因素的角色。目的:探讨MIP-1α对AML细胞增殖的影响。方法:以MLL-AF9诱导的小鼠急性髓细胞白血... 详细信息

背景:巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)是趋化因子CCL家族中的一员,主要参与炎性反应中中性粒细胞的渗出,同时在许多恶性血液肿瘤中扮演着危险因素的角色。目的:探讨MIP-1α对AML细胞增殖的影响。方法:以MLL-AF9诱导的小鼠急性髓细胞白血病(AML)为模型,流式细胞术检测小鼠白血病发病进程及白血病干细胞比例变化;实时定量荧光PCR技术检测AML小鼠全骨髓和全脾脏细胞中MIP-1α基因的表达水平;采用集落形成实验(CFC)和体外培养AML细胞并进行细胞计数的方法检测AML细胞的增殖能力;应用小分子拮抗剂从治疗角度干预MIP-1α与其受体CCR1作用,检测阻断MIP-1α作用后对AML增殖及致病力的影响。结果:MIP-1α可以促进AML细胞增殖和集落形成,阻断MIP-1α作用可抑制AML细胞增殖并延缓AML发病。结论:MIP-1α对于AML的发生发展具有促进作用,可作为AML潜在的治疗靶点。

关键词：巨噬细胞炎性蛋白-1α 急性髓细胞白血病白血病干细胞

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显微成像分析技术在中性粒细胞运动及吞噬功能研究中的应用

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中国实验血液学杂志 2015年第3期23卷 832-837页

作者：杨晚竹高亚男梁昊岳程雪莲于文颖陈婷汪晓敏袁卫平中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:使用转盘式激光共聚焦显微镜及显微图像处理软件对中性粒细胞的运动及吞噬功能进行分析与评估。方法:使用Percoll分离液分离小鼠骨髓中性粒细胞,用PE荧光标记后与FITC标记的酵母聚糖颗粒(Zymosan)混匀,置于转盘式激光共聚焦显微镜... 详细信息

目的:使用转盘式激光共聚焦显微镜及显微图像处理软件对中性粒细胞的运动及吞噬功能进行分析与评估。方法:使用Percoll分离液分离小鼠骨髓中性粒细胞,用PE荧光标记后与FITC标记的酵母聚糖颗粒(Zymosan)混匀,置于转盘式激光共聚焦显微镜下进行多通道时间序列成像。使用Volocity和Image J分析中性粒细胞的运动及吞噬相关参数,包括形态变化、运动轨迹、伪足振荡、结合吞噬指数,得出时间序列下各项参数的变化趋势。结果:中性粒细胞在受到Zymosan诱导后趋化作用明显,大部分细胞在短时间内发生极性化,在40分钟内能快速结合Zymosan,行使吞噬功能。结论:使用显微成像技术结合图像处理分析技术可准确、定量地分析中性粒细胞运动及吞噬功能,直观快速地对中性粒细胞的生理学状态进行初步评估。通过这项技术,得到正常生理状态下中性粒细胞对Zymosan的快速响应情况,为今后中性粒细胞相关功能学研究提供了参考依据。

关键词：显微成像技术图像定量分析中性粒细胞

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白血病染色体MLL基因断裂(易位)FISH探针的研究

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中国医药生物技术 2016年第6期11卷 497-501页

作者：孙江漫胡林萍李承文陆宏卿薛卫霞程涛缪为民中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液病理中心天津300020 南京福隆特医疗科技有限公司 211100

目的自主研制可以检测白血病染色体MLL基因断裂的双色FISH检测试剂盒。方法根据染色体基因图谱,选定合适的BAC克隆重叠群分别作为MLL基因断裂点5'端探针和3'端探针。采用缺口平移法,制作出5'端标记绿色荧光素,3'端标记... 详细信息

目的自主研制可以检测白血病染色体MLL基因断裂的双色FISH检测试剂盒。方法根据染色体基因图谱,选定合适的BAC克隆重叠群分别作为MLL基因断裂点5'端探针和3'端探针。采用缺口平移法,制作出5'端标记绿色荧光素,3'端标记红色荧光素的探针。用双盲法检测白血病临床样本40例,对自制探针和同类进口探针在各项技术参数上进行对比研究。结果自制探针检测MLL基因断裂(易位)的阴、阳性率与同类进口产品完全相符;在Spectrum Green和Cy3?v1通道中,自制探针的平均荧光信号强度比进口探针明显提高(自制探针分别为:2930.5±38.00,2766±59.54;进口探针分别为:2239±45.13,1986±59.56;P<0.01),自制探针信噪比分别为进口探针的2.4倍和1.9倍。结论自制的MLL基因FISH检测探针设计合理、质量可靠,与进口探针相比,荧光信号更强,信噪比更高,将来可能替代价格昂贵的进口产品。

关键词：白血病髓淋巴细胞性白血病蛋白质易位,遗传原位杂交,荧光 FISH探针

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骨髓增生异常综合征患者合并疾病的预后意义研究

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中华血液学杂志 2015年第3期36卷 196-201页

作者：李羿秦铁军徐泽锋张悦方力维张宏丽潘丽娟胡耐博曲士强李冰肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨合并疾病对骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后的影响.方法回顾性分析676例连续入组有详细合并疾病评估的MDS患者临床资料并进行统计学分析.结果 676例患者中395例（58.4％）伴有合并疾病（合并疾病组）,281例（41.6％）不伴... 详细信息

目的探讨合并疾病对骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后的影响.方法回顾性分析676例连续入组有详细合并疾病评估的MDS患者临床资料并进行统计学分析.结果 676例患者中395例（58.4％）伴有合并疾病（合并疾病组）,281例（41.6％）不伴合并疾病（无合并疾病组）.两组患者≥60岁比例（32.4％对18.5％）、骨髓原始细胞比例中位数[0.035（0～0.190）对0.025（0～0.190）]、染色体核型异常比例（37.5％对35.9％）、分型诊断构成比和修正版国际预后积分系统（IPSS-R）分组比较,差异均有统计学意义（P值均＜ 0.05）.多因素COX分析证实合并疾病为影响患者总生存（OS）的独立预后因素（HR=3.051,95％CI2.018～4.612,P＜0.001）.按MDS特异性合并疾病指数（MDS-CI）评分模型对伴有合并疾病的MDS患者进行危险度分组,低、中、高危患者中位OS时间分别为32（1～153）、19（2～85）、13（1～37）个月,而不伴有合并疾病的患者中位OS时间为96（1～166）个月,差异有统计学意义（P＜0.001）.IPSS-R低危、中危及高危组患者根据MDS-CI模型进行再分组,各组患者OS时间比较差异均有统计学意义（P值均＜0.01）.结论合并疾病是MDS患者独立于IPSS-R之外的预后影响因素.

关键词：骨髓增生异常综合征共病现象预后

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TBLR1-RARα融合基因对K562细胞向红系分化的影响

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1702-1708页

作者：陈晶李欢安娜李寿芸卢文婷邢海燕饶青王敏王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验学血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨融合基因TBLR1-RARα的表达对于白血病细胞系K562细胞向红系分化的作用及其可能的机制。方法:应用Tet-Off系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控TBLR1-RARα的条件性表达。将TBLR1-RARα融合基因与慢病毒目的载体p LVX-Tight... 详细信息

目的:探讨融合基因TBLR1-RARα的表达对于白血病细胞系K562细胞向红系分化的作用及其可能的机制。方法:应用Tet-Off系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控TBLR1-RARα的条件性表达。将TBLR1-RARα融合基因与慢病毒目的载体p LVX-Tight-Puro连接,感染K562细胞并获得稳定克隆,Western blot证实TBLR1-RARα融合蛋白的表达情况。应用实时定量荧光PCR检测全反式维甲酸(all-trans retinoid acid,ATRA)处理的K562细胞红系分化的表面标志CD71以及α,ε,γ-珠蛋白的基因表达水平;流式细胞术(flow cytometry)分析细胞表面CD71和CD235a的表达情况,联苯胺染色观察血红蛋白的生成情况。结果:实时定量PCR显示,ATRA能够使这些细胞的红系分化相关的CD71及α,ε,γ-珠蛋白的基因表达水平上调;流式分析结果同样表明,ATRA促使红系分化早期标志CD71细胞所占比例增加。ATRA处理后,联苯胺染色证实这些细胞的胞浆出现蓝染,表明ATRA能够诱导表达TBLR1-RARα的K562细胞产生血红蛋白。结论:TBLR1-RARα融合基因表达,有利于ATRA诱导K562细胞向红系分化。

关键词： TBLR1-RARα融合基因 K562 全反式维甲酸红系分化

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骨髓增生异常综合征的精确诊断

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中华血液学杂志 2015年第5期36卷 361-362页

作者：肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

骨髓增生异常综合征（myelodysplastic symdrome，MDS）是一组克隆性造血干细胞疾病，其特征是血细胞减少、主要髓系细胞一系或多系发育异常（dysplasia）、无效造血以及演变为急性髓系白血病（AML）的风险增高。

关键词：骨髓增生异常综合征克隆性造血干细胞疾病急性髓系白血病诊断血细胞减少发育异常髓系细胞无效造血

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环孢素联合沙利度胺治疗IPSS低危／中危－1骨髓增生异常综合征远期疗效影响因素分析

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中华血液学杂志 2015年第11期36卷 942-946页

作者：王静雅秦铁军徐泽锋张悦张宏丽方力维潘丽娟胡耐博曲士强李冰肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、实验血液学国家重点实验室天津300020

目的评价环孢素（CsA）联合沙利度胺治疗国际预后积分系统（IPSS）低危／中危．1骨髓增生异常综合征（MDS）患者的远期疗效及预后影响因素。方法回顾性分析CsA联合沙利度胺治疗的76例IPSS低危／中危-1MDS患者临床资料。采用PCR联合直接... 详细信息

目的评价环孢素（CsA）联合沙利度胺治疗国际预后积分系统（IPSS）低危／中危．1骨髓增生异常综合征（MDS）患者的远期疗效及预后影响因素。方法回顾性分析CsA联合沙利度胺治疗的76例IPSS低危／中危-1MDS患者临床资料。采用PCR联合直接测序法检测患者cereblon基因rsl672753位点基因型。结果76例患者中，男48例，女28例，中位年龄41（18～70）岁。CsA联合沙利度胺治疗后，40例（53％）获得血液学改善（HI），其中红系反应（HI-E）率为43％（73例中31例），中性粒细胞反应（HI-N）率为30％（50例中15例），血小板反应（HI-P）率为31％（58例中18例）。59例红细胞输注依赖患者中27例（46％）获得HI-E并脱离输血。HI中位维持时间为22（1～131^＋）个月。单因素分析显示骨髓原始细胞≤2％的患者疗效持续时间更长（P=0．010）。cereblon基因rsl672753位点基因型与HI率及治疗反应的维持时间均无明显相关性（P值均〉0．05）。67例未行造血干细胞移植患者中位生存时间为82（95％CI38～126）个月。多因素分析显示IPSS-R分组（HR=3．461，95％CI1．126～10．639，P=0．030）、年龄≥60岁（HR=4．120，95％CI1.070～15．867，P=0．040）以及HI-N（HR=7．733，95％CI1.007～59．396，P=0．049）为影响患者生存时间的独立预后因素。结论CsA联合沙利度胺治疗能长期改善IPSS低危／中危-1 MDS患者贫血症状，不良反应轻。在此组患者中未能验证cereblon基因rs1672753位点基因型对疗效的预测价值。

关键词：骨髓增生异常综合征环孢素沙利度胺 cereblon基因

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