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2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：胡蕴慧盛梦瑶张孝云李双静熊冬生周圆中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室

目的探讨乳腺癌细胞中miR-1 06b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇的MCF-7-mirC,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒... 详细信息

目的探讨乳腺癌细胞中miR-1 06b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇的MCF-7-mirC,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒性实验、耐药克

关键词： miR-106b～25 乳腺癌肿瘤干细胞肿瘤耐药细胞衰老 P糖蛋白

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造血干细胞研究若干进展和思考

造血干细胞研究若干进展和思考

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2013中国工程院医学科学前沿论坛

作者：程涛中国医学科学院/北京协和医学院血液病医院血液学研究所、实验血液学国家重点实验室

"Yamanaka因子"(OCT4,SOX2,KLF4和c-Myc)能够将来自不同细胞类型的细胞生成诱导性多能干细胞(iPS),然而原发性恶性细胞可以被重新编程为何等多能状态尚未被集中研究.在携带doxycycline(Dox)调控下表达Yamanaka因子的小鼠造血... 详细信息

"Yamanaka因子"(OCT4,SOX2,KLF4和c-Myc)能够将来自不同细胞类型的细胞生成诱导性多能干细胞(iPS),然而原发性恶性细胞可以被重新编程为何等多能状态尚未被集中研究.在携带doxycycline(Dox)调控下表达Yamanaka因子的小鼠造血干细胞中,通过过表达人类的混合系白血病AF9(MLL-AF9)融合基因建立了急性髓系白血病(AML)的模型.一旦在培养基中加入doxycycline,可移植的白血病细胞即被有效地转化成iPS细胞,可以形成畸胎瘤并产生嵌合体.有趣的是,大多数嵌合体小鼠自发生成同类型的AML.此外,无论是iPS细胞重编程,还是白血病的重新启动,都可能是来自于同一个白血病起始细胞.RNA-seq分析显示MLL-AF9激活时或重新激活时,白血病和iPS细胞之间可逆的基因表达模式互换表明了在推动白血病发生过程中表观遗传因子的有力推动作用.这项研究是在进一步定义MLL白血病的致癌分子和重编程因子之间的潜在相互作用中的重要一步.更重要的是,重编程方法可以用于鉴定一系列造血系统恶性肿瘤的特征,从而为临床诊断和治疗发展新的策略。

关键词：急性髓系白血病致病机理诱导性多能干细胞分子调控

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白血病微环境与造血干细胞

白血病微环境与造血干细胞

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广东省医学会第十七次血液病学学术会议

作者：郑国光袁卫平程涛中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室

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含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用研究

含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用研究

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第十一届全国博士生学术年会

作者：许华王建王迟鹃马丽庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA/1小鼠模型的治疗作用。方法将40只6周龄雄性DBA/1小鼠随机分为4组,空白对照组Nor(不作任何处理),模型对照组Con(诱导发病并腹腔注射DMSO),甲氨喋呤治疗组MTX(诱导发病并腹腔注射甲氨喋呤),实验组MCL... 详细信息

目的探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA/1小鼠模型的治疗作用。方法将40只6周龄雄性DBA/1小鼠随机分为4组,空白对照组Nor(不作任何处理),模型对照组Con(诱导发病并腹腔注射DMSO),甲氨喋呤治疗组MTX(诱导发病并腹腔注射甲氨喋呤),实验组MCL(诱导发病并腹腔注射含笑内酯),用牛Ⅱ型胶原法诱导MTX、Con和MCL组小鼠发病建立类风湿关节炎模型;在二次免疫注射24小时后开始隔天腹腔注射给药并对小鼠体重和关节炎发病情况进行隔天观察,给药28次后停止给药,继续观察4次,眼球取血、蛋白芯片测血清中细胞因子,处死小鼠取爪子及膝盖骨做组织病理学检查。结果成功构建了DBA/1小鼠类风湿关节炎模型;体重观察结果显示各组小鼠之间无明显差异;关节炎评分结果显示MCL组小鼠关节炎评分低于Con组(P<0.001),高于MTX组(P<0.001);病理结果显示Nor组小鼠组织正常,Con组受累关节出现炎性细胞浸润、滑膜增生、炎性肉芽组织形成,坏死组织出现等而MCL组接近与MTX组均比Con组症状轻;血清细胞因子检测结果显示共检测出6种细胞因子:C5/C5a、TIMP-1、M-CSF、sICAM-1、IFN-γ和BLC;诱导发病组小鼠的C5/C5a、TIMP-1和M-CSF表达量降低,其中含笑内酯治疗后这些因子均有不同程度恢复,P<0.001;仅仅在含笑内酯治疗后检测到BLC表达。结论含笑内酯对小鼠DBA/1类风湿关节炎具有治疗作用,C5/C5a、TIMP-1、M-CSF和BLC等因子在这一过程发挥不同的作用。

关键词：含笑内酯类风湿关节炎模型 DBA/1 甲氨喋呤

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过表达热休克蛋白22抑制造血系统恶性肿瘤细胞生长的研究

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白血病．淋巴瘤 2013年第12期22卷 706-711页

作者：崔雪莹马小彤王丽娜王楠任倩林永敏首都医科大学附属北京同仁医院血液科 100730 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨过表达热休克蛋白22（HSP22）对造血系统恶性肿瘤细胞生长和凋亡的影响.方法构建含HSP22或空载体的慢病毒表达载体,感染K562和Namalwa细胞;荧光显微镜及流式细胞术观察感染效率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot... 详细信息

目的探讨过表达热休克蛋白22（HSP22）对造血系统恶性肿瘤细胞生长和凋亡的影响.方法构建含HSP22或空载体的慢病毒表达载体,感染K562和Namalwa细胞;荧光显微镜及流式细胞术观察感染效率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot鉴定HSP22表达.采用细胞计数法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,甲基纤维素半固体集落形成实验测定集落数,Annexin VPE／7-AAD流式细胞术检测细胞凋亡.在裸鼠皮下注射K562和Namalwa细胞进行成瘤实验以观察成瘤体积.结果与转导空载体的对照细胞相比,HSP22过表达能抑制Namalwa和K562细胞集落形成,每孔平均集落数转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP空载体的K562细胞为108,转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFPHSP22的K562细胞为72,两者差异有统计学意义（P=0.000 16）;转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP空载体的Namalwa细胞为125,转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HSP22的Namalwa细胞为80,两者差异有统计学意义（P=0.000 37）.HSP22还能抑制Namalwa细胞体外增殖（第5天,P=0.015;第6天,P=0.042;第7天,P=0.048）,抑制K562细胞体内增殖（第21天,P=0.022）.K562、Namalwa细胞HSP22转导组与对照组间G0～G1期、G2～M期及S期细胞所占百分比差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）.结论过表达HSP22能够抑制造血系统恶性肿瘤K562和Namalwa细胞的生长.

关键词：血液肿瘤热休克蛋白22 K562细胞 Namalwa细胞细胞凋亡

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典型模式B细胞受体在慢性淋巴细胞白血病中的研究进展：第54届美国血液学会年会报道

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白血病．淋巴瘤 2013年第2期22卷 65-66,70页

作者：于珍邱录贵作者单位:300020天津中国医学科学院北京协和医院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

B细胞受体在慢性淋巴细胞白血病的发病机制中发挥着重要作用。独特的B细胞受体亚群表现出独特的生物学特征，在与微环境的相互作用中导致不同克隆亚群和不同预后亚群的形成。

关键词： B细胞受体白血病,淋巴细胞,慢性美国血液学会年会

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IgD型多发性骨髓瘤伴脑膜浸润一例

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中华医学杂志 2013年第12期93卷 959-959页

作者：章艳茹徐燕邓书会安刚赵耀中赵鸾珠邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

患者男，52岁，主因间断骨痛3年、多发包块1年于2009年2月19日收入院。体格检查：生命体征平稳，无贫血貌，双侧锁骨上、颈部、颌下、腋下、腹股沟多发肿大淋巴结，部分融合，质韧，无压痛，最大者2．8cm×0．9cm，胸骨前、左侧肋... 详细信息

患者男，52岁，主因间断骨痛3年、多发包块1年于2009年2月19日收入院。体格检查：生命体征平稳，无贫血貌，双侧锁骨上、颈部、颌下、腋下、腹股沟多发肿大淋巴结，部分融合，质韧，无压痛，最大者2．8cm×0．9cm，胸骨前、左侧肋骨扪及肿大包块，质硬，无压痛，最大者7cm×10cm。心肺腹无特殊。

关键词： IgD型多发性骨髓瘤脑膜浸润肿大淋巴结 2009年生命体征体格检查腹股沟包块

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Sorcin沉默抑制肿瘤上皮-间质转化与乳腺癌转移

Sorcin沉默抑制肿瘤上皮-间质转化与乳腺癌转移

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2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：胡蕴慧李双静 Ernesto Yage 熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室 Division of Cancer Imperial College LondonHammersmith Hospital Campus

研究背景与目的:可溶性耐药相关钙结合蛋白sorcin已被证明其表达与多种肿瘤细胞的耐药性呈正相关。多项研究表明肿瘤细胞转移侵袭能力提高与耐药性的产生存在一致性,本实验研究了sorcin与肿瘤细胞上皮间质转化、转移及肿瘤干细胞特性的... 详细信息

研究背景与目的:可溶性耐药相关钙结合蛋白sorcin已被证明其表达与多种肿瘤细胞的耐药性呈正相关。多项研究表明肿瘤细胞转移侵袭能力提高与耐药性的产生存在一致性,本实验研究了sorcin与肿瘤细胞上皮间质转化、转移及肿瘤干细胞特性的关系。方法:利用RNA干扰技术在高转移乳腺癌细胞系MDA-MB-231中稳定降低sorcin表达,体外划痕实验与transwell小室实验评价各组细胞迁移侵袭能力;CD44/CD24表型分析及

关键词：乳腺癌转移 Sorcin 抑制肿瘤 sorcin 上皮-间质转化

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shRNA干扰CIAPIN1基因表达促进K562细胞粒系分化

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中华临床医师杂志（电子版） 2013年第20期7卷 77-80页

作者：王建王迟鹃许华张丽媛蔺亚妮常国强梁昊岳茹永新李庆华张洪菊张海瑞庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市第四中心医院急诊科

目的探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562粒系分化的影响。方法针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,转染K562细胞并作为干扰组,以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time... 详细信息

目的探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562粒系分化的影响。方法针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,转染K562细胞并作为干扰组,以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time PCR及Western blot技术鉴定干扰效率;采用瑞氏染色和电镜分别观测K562细胞形态学和超微结构的改变;采用Real-time PCR方法检测粒系分化标志基因中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)、血清黏蛋白1(ORM1)以及粒系分化转录因子CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPα)、低氧诱导因子1α(HIF1α)mRNA水平的改变;流式细胞术检测K562细胞表面分化抗原CD11b表达的改变;Western blot技术检测ERK1/2、JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果与对照组相比,干扰组的CIAPIN1基因表达被有效抑制(P<0.05);K562细胞的形态和超微结构趋向成熟粒细胞阶段;NCF1、ORM1、C/EBPα及HIF1αmRNA表达水平升高(P<0.05);CD11b表达升高(P<0.01);ERK1/2磷酸化水平升高(P<0.05),而JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平未见明显改变。结论抑制CIAPIN1基因表达能促进K562细胞向成熟的粒细胞阶段分化,ERK1/2磷酸化水平的升高可能参与了该分化过程。

关键词： K562细胞 CIAPIN1基因 shRNA干扰粒系分化

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骨髓增生异常综合征集落形成细胞培养特征及其与非重型再生障碍性贫血的比较研究

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中华血液学杂志 2012年第7期33卷 516-521页

作者：张天佼冯敏郑以州李星鑫徐泽锋秦铁军张悦杨玉宝刘俊霞任彦松肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者体外集落形成细胞（CFC）培养特征及其与非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者的异同。方法回顾性分析了初诊未治的155例MDS患者的EFC培养结果及其与其他相关实验室检查参数的相关性，并与初诊未治的... 详细信息

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者体外集落形成细胞（CFC）培养特征及其与非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者的异同。方法回顾性分析了初诊未治的155例MDS患者的EFC培养结果及其与其他相关实验室检查参数的相关性，并与初诊未治的122例NSAA患者体外CFC培养结果进行了比较分析。结果MDS患者红细胞爆式集落形成单位（BFU—E）中位数9（0～157）／10^5骨髓单个核细胞（BMMNC），红细胞集落形成单位（CFU-E）中位数30（0～625）／10^5BMMNC，粒一单该细胞集落形成单位（CFU—GM）中位数14（0—125）／10^5BMMNC，较正常参考值均显著减；66例（42．6％）仅BFU—E和（或）CFU—E低于正常下限，3例（1．9％）仅CFU—GM低于正常下限，70例（45．2％）BFU—E和（或）CFU—E且***低于正常下限。MDS患者中集簇数同BFU—E、CFU—E及***数均呈正相关（r值分别为0．415、0．338、0．642，P值均为0．000），同中性粒细胞碱性磷酸酶（N—ALP）阳性率和阳性积分均呈负相关（rm性率=-0．315，P=0．001；r日性积分=-0．257，P=0．006）。MDS组各类型集落中位数均明显高于NSAA组（BFU—E9对5／10^5BMMNC，P=0．017；CFU—E30对19．5／10^5BMMNC，P=0．023；CFU—GM14对10／10。BMMNC，P=0．003），两组内BFU—E和CFU—E均呈正相关（rMDS=0．712，P=0．000和rNSAA=0．757，P=0．000），MDS组相关度低于NSAA组（P〈0．05）。结论MDS起病初期造血祖细胞数量明显减少，且红系受累更为广泛而显著；BFU—E、CFU—E和CFU—GM能够反映出体内造血祖细胞水平但并非残存的正常造血克隆，集簇数代表了发育异常祖细胞克隆但不等同于白血病样原始细胞。

关键词：骨髓增生异常综合征集落形成单位测定骨髓发育异常骨髓衰竭

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