检索结果-内蒙古大学图书馆

天津医药 2007年第12期35卷 921-923,I0009页

作者：袁文肃李克马丽芦颖李庆华李静马小彤庞天翔中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室300020

目的:研究短干扰RNA(siRNA)对K562细胞中c-kit基因表达的影响。方法:构建针对c-kit基因的shRNA表达质粒pSilencer-kit,在脂质体介导下转染人白血病细胞系K562,应用RT-PCR检测c-kit mRNA水平变化,并将转染后的K562细胞注射裸小鼠体内检... 详细信息

目的:研究短干扰RNA(siRNA)对K562细胞中c-kit基因表达的影响。方法:构建针对c-kit基因的shRNA表达质粒pSilencer-kit,在脂质体介导下转染人白血病细胞系K562,应用RT-PCR检测c-kit mRNA水平变化,并将转染后的K562细胞注射裸小鼠体内检测成瘤能力的变化。结果:重组体pSilencer-kit转染细胞后显著下调c-kit mRNA水平及其在裸鼠体内成瘤能力,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:利用RNA干扰技术能有效抑制靶基因c-kit的表达,为肿瘤的基因治疗提供新思路。

关键词： RNA 小分子干扰 K562细胞原癌基因蛋白质c—kit 基因表达转染逆转录聚合酶链反应

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小鼠IL-18基因修饰瘤苗的抗白血病作用研究

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现代免疫学 2007年第4期27卷 274-278页

作者：徐玢马小彤董成亚石洋林永敏吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

我们在前期工作中成功制备了IL-18基因修饰的白血病疫苗,为了探讨IL-18基因修饰瘤苗的体内抗白血病作用,实验采用L1210小鼠淋巴细胞白血病模型,在小鼠体内接种IL-18基因修饰瘤苗,观察瘤苗对L1210细胞致瘤性的影响及免疫保护作用,并进一... 详细信息

我们在前期工作中成功制备了IL-18基因修饰的白血病疫苗,为了探讨IL-18基因修饰瘤苗的体内抗白血病作用,实验采用L1210小鼠淋巴细胞白血病模型,在小鼠体内接种IL-18基因修饰瘤苗,观察瘤苗对L1210细胞致瘤性的影响及免疫保护作用,并进一步对其抗白血病作用机制进行了探索。结果显示,IL-18基因修饰瘤苗能够明显延长荷瘤小鼠存活时间,大部分小鼠达到长期生存,且长生存小鼠用野生型L1210细胞二次攻击后大多数仍能长期生存,表明IL-18基因修饰瘤苗有显著的抗白血病作用,并可诱导小鼠产生免疫记忆和免疫保护。机制探讨发现,接种IL-18基因修饰瘤苗后,小鼠脾脏淋巴细胞对L1210肿瘤细胞的CTL及NK细胞杀伤活性明显高于对照组(P<0.05),提示IL-18基因修饰瘤苗能够显著增强抗肿瘤CTL和NK细胞反应。接种瘤苗可使小鼠IFN-γ水平升高,但与对照相比无统计学意义,提示IFN-γ可能在IL-18基因修饰瘤苗诱导的抗肿瘤免疫应答中作用不大。

关键词：白细胞介素18 L1210白血病肿瘤疫苗

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不同细胞因子对两步法所得树突细胞的数量及功能的影响

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中华血液学杂志 2007年第2期28卷 121-123页

作者：王亚非孟恒星葛薇于珍李云涛李桥川万长春徐燕李新李增军王国蓉尤胜国邱录贵中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市脐带血库

从造血干细胞（HSC）诱导树突细胞（DC）传统方法是在GM-CSF＋TNF-α的基础上联合早期细胞因子一步诱导获得。但如果采用先扩增、后诱导的两步法则可以在保证DC功能的基础上显著提高DC数量。我们已经成功建立了一个先用SCF＋FL＋TPO＋I... 详细信息

从造血干细胞（HSC）诱导树突细胞（DC）传统方法是在GM-CSF＋TNF-α的基础上联合早期细胞因子一步诱导获得。但如果采用先扩增、后诱导的两步法则可以在保证DC功能的基础上显著提高DC数量。我们已经成功建立了一个先用SCF＋FL＋TPO＋IL-3扩增10d再加入GM-CSF、IL4、TNF-α诱导8d的两步法从脐血（CB）CD34^＋细胞大量获得DC的体系，但与文献报道类似，所得DC以CD1a^＋细胞为主，代表DC成熟状态的CD83表达不充分。因此，我们在前期工作的基础上探讨扩增阶段的细胞因子及诱导阶段的细胞因子对两步法所得DC的产量及功能的影响，以期进一步提高两步法所得DC的功能。

关键词：细胞因子树突细胞两步法 CD34^+细胞 TNF-α GM-CSF 造血干细胞 CD83

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基质细胞衍生因子-1及其受体在G-CSF诱导的造血干／祖细胞动员中的作用

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中华血液学杂志 2007年第2期28卷 98-102页

作者：靳凤艳邱录贵李桥川孟恒星王亚非于珍李茜韩俊领中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所、血液病医院、实验血液学国家重点实验室天津300020 吉林省肿瘤医院肿瘤内科 132011 天津市脐带血造血干细胞库

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其特异性受体CXCR4在G-CSF诱导的造血干／祖细胞（HSPC）动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫组织化学、流式细胞术等方法检测健康供者稳态及G-CSF动员过程中骨髓、外周血SDF-... 详细信息

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其特异性受体CXCR4在G-CSF诱导的造血干／祖细胞（HSPC）动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫组织化学、流式细胞术等方法检测健康供者稳态及G-CSF动员过程中骨髓、外周血SDF-1／CXCR4的变化，并应用SDF-1中和性抗体阻断BALB／c小鼠SDF-1信号通路，进一步验证SDF-1／CXCR4在动员中的作用。结果G-CSF动员前骨髓和外周血的SDF-1浓度分别为（7．23±0．66）μg/L和（5．43±0．35）μg／L，动员后分别为（5．88±1．03）μg／L和（5．42±0．52）μg/L。动员后骨髓SDF-1蛋白水平下降（P＜0．05），骨髓和外周血之间的SDF-1浓度梯度消失（P＞0．05）；稳态骨髓、动员后骨髓和动员后外周血的CD34^＋ CXCR4^＋细胞在CD34^＋细胞群中的比例分别为（40．98±21．56）％、（65．80±24．68）％和（27．54±26．03）％。动员后CXCR4在骨髓CD34^＋胞上表达增加（P＜0．05），而外周血CD34^＋细胞CXCR4表达降低（P＜0．05）。SDF-1中和性抗体可降低G-CSF动员的BALB／c小鼠外周血成熟白细胞和祖细胞集落数量（P＜0．05）。结论骨髓中SDF-1水平的降低以及CXCR4在HSPC上表达的下降促进了G-CSF介导的动员的发生。

关键词：基质细胞衍生因子-1 受体 CXCR4 粒细胞集落刺激因子造血干细胞动员

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糖尿病患者动员后外周血单个核细胞促血管新生能力

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中国医学科学院学报 2007年第2期29卷 262-267,I0004页

作者：周斌顾东生刘鹏霞郑翠玲董春兰杜伟廷武开宏韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院小儿心胸外科北京100037

目的研究糖尿病患者来源的动员后外周血单个核细胞(M-PBMNCs)移植治疗肢体缺血的疗效,探讨糖尿病患者M-PBMNCs促血管新生能力是否有缺陷及其病理生理机制。方法体外培养内皮祖细胞并鉴定和计数。结扎链脲菌素诱导的糖尿病裸鼠股动脉,造... 详细信息

目的研究糖尿病患者来源的动员后外周血单个核细胞(M-PBMNCs)移植治疗肢体缺血的疗效,探讨糖尿病患者M-PBMNCs促血管新生能力是否有缺陷及其病理生理机制。方法体外培养内皮祖细胞并鉴定和计数。结扎链脲菌素诱导的糖尿病裸鼠股动脉,造成重度缺血模型后,将来自糖尿病患者、正常人的M-PBMNCs(106)及磷酸盐缓冲液(PBS)分别局部注射到缺血组织中。在第1、3、7、14、21、28天分别用激光多普勒检测局部血流,观察缺血肢体的活动度和缺血情况,用免疫组织化学方法检测缺血部位毛细血管密度和小动脉密度。结果体外内皮祖细胞培养显示糖尿病患者M-PBMNCs中的内皮祖细胞数量相对较少(P<0.05),裸鼠局部缺血组织血流量及血管密度均与糖尿病患者的内皮祖细胞数量呈正相关(R=0.486,P<0.05;R=0.491,P<0.05),而糖尿病患者内皮祖细胞的数量又与其病程呈负相关(R=-0.587,P<0.05)。糖尿病患者M-PBMNCs促进缺血下肢血流和功能恢复的疗效强于PBS组,但不及正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。移植了糖尿病患者M-PBMNCs的缺血组织的毛细血管、小动脉密度均低于正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。结论糖尿病患者M-PBMNCs的促血管新生能力存在缺陷,使其移植治疗肢体缺血的疗效减低。

关键词：糖尿病动员后外周血单个核细胞内皮祖细胞缺血

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人mda-7/IL-24对淋巴瘤细胞Namalwa的抑制作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2007年第5期14卷 417-422页

作者：段永娟马小彤董成亚张芳林永敏杨宾霞中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7,又称IL-24)对淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的抑制作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测10个造血系统恶性肿瘤细胞系(Namalwa、Raji、K562、NB4、U937、Ramous、CEM、KG1a、HL60、J6-1)中mda-7/IL-24的表达情况。用RT-PCR方法从活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆mda-7/IL-24编码区,构建真核表达载体pTarget-IL-24。经测序鉴定后,用脂质体法转染Namalwa细胞,筛选稳定表达细胞株。转染细胞经RT-PCR和Western blotting证实mda-7/IL-24的表达。通过MTF法、集落形成试验、流式细胞术、裸鼠体内成瘤实验来评价mda-7/IL-24对肿瘤细胞增殖、生长特性、集落形成、凋亡情况、体内致瘤能力的作用。结果:10个造血系统恶性肿瘤细胞系中未检测到mda-7/IL-24的表达;转染重组质粒pTarget-IL-24的Namalwa细胞在mRNA与蛋白水平都有mda-7/IL-24的表达;稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞增殖活力以及集落形成能力与转染空载体的对照组相比明显下降(P<0.05);但是两者的凋亡率比较无统计学意义。裸鼠体内移植瘤实验结果显示稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞株的致瘤性明显低于转染空载体的对照组(P<0.05)。结论:mda-7/IL-24对来源于Burkitt淋巴瘤的Namalwa细胞系具有明显的增殖抑制作用,为Burkitt淋巴瘤的基因治疗提供了新的思路。

关键词：黑素瘤分化相关基因-7 IL-24 淋巴瘤基因治疗

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异基因外周血造血干细胞移植物细胞成分对移植预后的影响

异基因外周血造血干细胞移植物细胞成分对移植预后的影响

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第11次中国实验血液学会议

目的：探讨异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）中供体单个核细胞（MNC）、 CD34细胞、CD3T 细胞、CD3CD4辅助性 T 细胞、CD3CD8抑制性 T 细胞、CD3CD56 NK 细胞、CD4CD25调节性 T 细胞、DC 细胞的输注数量与移植后造血重建、原... 详细信息

目的：探讨异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）中供体单个核细胞（MNC）、 CD34细胞、CD3T 细胞、CD3CD4辅助性 T 细胞、CD3CD8抑制性 T 细胞、CD3CD56 NK 细胞、CD4CD25调节性 T 细胞、DC 细胞的输注数量与移植后造血重建、原发病的复发、移植相关死亡（TRM）、移植物抗宿主病（GVHD）的发生以及总体生存率（OS）和无病生存率（DFS）的相关性。

关键词：异基因外周血造血干细胞移植无病生存率总体生存率 PBSCT 细胞成分

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间充质干细胞对急性白血病患者IL-23和TGF-β1表达的影响

间充质干细胞对急性白血病患者IL-23和TGF-β1表达的影响

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第11次中国实验血液学会议