检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤临床 2012年第10期29卷 666-669页

作者：智亚芹易树华安刚于珍徐燕李增军邹德慧邱录贵张翼鷟王亚非天津医科大学附属肿瘤医院血液科天津市肿瘤防治重点实验室天津市300070 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨伴骨髓侵犯(bone marrow involvement,BMI)弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-celllymphoma,DLBCL)患者的细胞遗传学特征。方法:采用常规细胞遗传学(conventional cytogenetic,CC)分析55例伴BMI的DLBCL患者染色体核型;采用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测其中18例患者IgH、Rb-1、D13S25、p53、ATM、Bcl-2、Bcl-6、c-MYC基因位点;分析其细胞遗传学特征。结果:55例患者中CC检测34例(61.8%)具有染色体核型异常(CA),21例(38.2%)为复杂畸变,14例(25.5%)高度复杂畸变。FISH检测示8例(44.4%)伴Bcl-2扩增,2例(11.1%)伴Bcl-2易位,7例(38.9%)伴IGH易位,5例(27.8%)伴Bcl-6扩增,5例(27.8%)伴p53缺失,3例(16.7%)伴D13S25缺失,2例(11.1%)伴Rb-1缺失及4例(22.2%)伴c-MYC扩增。3例CC正常患者经FISH检测出异常。随着骨髓侵犯程度的增加,遗传学异常检出率增加。结论:伴BMI的DLBCL患者CA检出率高,各条染色体均有累及,且复杂畸变核型异常多见;检测细胞遗传学异常,FISH较CC灵敏性及特异性高;骨髓侵犯程度较轻患者的细胞遗传学异常易于漏诊。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤骨髓侵犯细胞遗传学荧光原位杂交

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抑制NHE1和p38 MAPK通路增加白血病细胞对伊马替尼的敏感性

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中国实验血液学杂志 2012年第6期20卷 1341-1345页

作者：胡蓉华金薇娜常国强蔺亚妮王建茹永新李庆华庞天翔首都医科大学宣武医院血液科中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津医科大学总医院神经研究所

本研究旨在探讨抑制NHE1活性和细胞内酸化能否逆转白血病细胞对伊马替尼的耐药,以及慢性髓系白血病(CML)患者细胞的BCR/ABL下游分子网络。对CML患者原代白血病细胞或K562/DOX,K562/G01耐药细胞株进行酸化处理,检测细胞内P-糖蛋白(Pgp)... 详细信息

本研究旨在探讨抑制NHE1活性和细胞内酸化能否逆转白血病细胞对伊马替尼的耐药,以及慢性髓系白血病(CML)患者细胞的BCR/ABL下游分子网络。对CML患者原代白血病细胞或K562/DOX,K562/G01耐药细胞株进行酸化处理,检测细胞内P-糖蛋白(Pgp)基因及蛋白表达,药物在细胞内蓄积。考察细胞酸化后原代白血病细胞ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平的变化。结果表明:细胞酸化后进展期患者细胞内药物蓄积增加,对伊马替尼的敏感性增强。随着细胞内pH的降低,进展期CML患者的细胞内p38MAPK磷酸化水平呈下降趋势,ERK1/2磷酸化水平3 min时升高、30 min后下降。特异性p38 MAPK抑制剂SB203580可与NHE1抑制剂卡立泊来德协同下调Pgp蛋白的表达。结论:抑制NHE1活性能够显著降低耐药细胞中Pgp表达,增加CML疾病进展期患者细胞中罗丹明123及阿霉素的累积,增加细胞对伊马替尼的敏感性,p38 MAPK信号传导通路参与其中。

关键词：钠氢交换蛋白1 细胞内pH值慢性髓系白血病丝裂原激活蛋白激酶多药耐药 P-糖蛋白

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3,5-二氯苯基双胍抑制黑色素瘤肺转移的裸鼠体内药效学研究

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中国实验动物学报 2012年第3期20卷 56-59,96页

作者：张永慈纪庆杨铭范冬梅熊冬生杨纯正周圆中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学免疫教研室天津市细胞与分子免疫学重点实验室天津市共建教育部免疫微环境与疾病重点实验室天津300070

目的确认整合素αvβ3新型抑制剂3,5-二氯苯基双胍对人黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法应用前期建立的人黑色素瘤裸鼠肺转移模型,观察3,5-二氯苯基双胍的治疗效果。裸鼠尾静脉接种黑色素瘤细胞(第1天)后,于第5、9、13、17和21天给予该... 详细信息

目的确认整合素αvβ3新型抑制剂3,5-二氯苯基双胍对人黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法应用前期建立的人黑色素瘤裸鼠肺转移模型,观察3,5-二氯苯基双胍的治疗效果。裸鼠尾静脉接种黑色素瘤细胞(第1天)后,于第5、9、13、17和21天给予该药物治疗。50 d实验结束,处死裸鼠并取完整的肺组织,Bouin氏液固定24 h后根据肺表面癌结节的大小和数量给予评分,以此评价肺转移的程度。结果 3,5-二氯苯基双胍6、12 mg/kg和24 mg/kg治疗组的转移分数分别为(55.25±13.60)、(35.13±17.36)和(12.83±11.44),与溶剂对照组(转移分数是82.50±17.72)相比具有明显差异(P<0.05)。阳性对照组的转移分数为(11.50±10.44)(P<0.05 vs溶剂对照组),阴性对照组和PBS对照组的转移分数分别为(88.50±17.21)、和(88.87±11.29)(P>0.05 vs溶剂对照组)。结论 3,5-二氯苯基双胍在裸鼠体内能够明显抑制黑色素瘤肺转移,并呈现一定的剂量依赖性。

关键词： 3,5-二氯苯基双胍黑色素瘤转移整合素αvβ3

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Th17细胞在原发免疫性血小板减少症动物模型中的作用

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中华血液学杂志 2011年第9期32卷 592-596页

作者：王婷婷李慧媛王昭周泽平付丽魏娜黄大勇杨仁池首都医科大学北京友谊医院血液科北京100050 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨Th17细胞在原发免疫性血小板减少症（ITP）中的作用。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（MWReg30）的方法诱导BALB／c小鼠产生ITP，之后分离外周血和脾单个核细胞，采用实时定量PCR法检测Th17细胞相关转录因子及细胞因子mRN... 详细信息

目的探讨Th17细胞在原发免疫性血小板减少症（ITP）中的作用。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（MWReg30）的方法诱导BALB／c小鼠产生ITP，之后分离外周血和脾单个核细胞，采用实时定量PCR法检测Th17细胞相关转录因子及细胞因子mRNA的表达水平，同时采用流式细胞术检测外周血和脾细胞内Th17细胞的比例。结果ITP模型小鼠外周血及脾单个核细胞Th17细胞百分比分别为（1．410±0．307）％和（0．220±0．045）％，明显高于正常对照小鼠[分别为（0．457‘0．089）％和（0．0644-0．024）％]（P值分别为0．007、0．006）。同时，ITP模型小鼠脾单个核细胞中IL-17F、IL-17A和IL-6mRNA相对表达量分别为2．203±0．427、2．98±0．860和1．949±0．423，明显高于对照组（分别为1．099±0．250、1．005±0．253和0．990±0．110）（P值均〈0．05）。外周血有核细胞IL-21mRNA相对表达量为1．857±0．533，明显高于正常对照（0．824±0．190）（P〈0．05）。结果显示IL-17F和IL-17A的表达呈明显正相关性（r=0．934，p=0．000），IL-17F和IL-17A与IL-6也具有相关性（r=0．598，P=0．001；r=0．619，P=0．000）。结论Th17细胞在ITP发病过程中起重要作用，它至少参与了血小板的清除。

关键词： Th17细胞小鼠模型免疫性血小板减少症

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染色体13q14缺失在多发性骨髓瘤发生发展中的意义及对其临床预后的影响

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中华血液学杂志 2011年第4期32卷 217-220页

作者：李倩安刚李承文徐燕邓书会刘旭平齐军元王亚非邹德慧赵耀中邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院

目的研究染色体13q14缺失在多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率及其临床意义.方法对我院淋巴瘤中心132例初治MM患者骨髓标本行CD138免疫磁珠富集骨髓瘤细胞后,采用13q14（RB1）探针进行荧光原位杂交（FISH）检测,结合不同治疗方案分析... 详细信息

目的研究染色体13q14缺失在多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率及其临床意义.方法对我院淋巴瘤中心132例初治MM患者骨髓标本行CD138免疫磁珠富集骨髓瘤细胞后,采用13q14（RB1）探针进行荧光原位杂交（FISH）检测,结合不同治疗方案分析其临床意义.结果 ①检出率：FISH检测13q14缺失率为51.5%,而常规染色体核型分析△l3（-13/13q-）检出率仅为5.0%.②单因素分析显示,13q14缺失比例＞25%、ISS分期为Ⅱ或Ⅲ期、血β2-MG≥5.5 mg/L、起病时骨髓涂片浆细胞比例＞0.500是不良预后因素.多因素分析显示,只有13q14缺失比例＞25%是独立的不良预后因素.硼替佐米与传统化疗相比可明显提高13q14缺失患者的近期疗效.应用硼替佐米后13q14缺失比例＞25%患者与缺失比例≤25%患者的总生存时间差异无统计学意义,提示硼替佐米能克服13q14缺失对预后的不良影响.结论 CD138磁珠分选后行FISH检测可以显著提高MM患者中13q14缺失的检出率;FISH检测MM患者13q14缺失比例＞25%是独立的预后不良因素,且与患者自身的肿瘤负荷、其他遗传学指标密切相关;硼替佐米可以克服13q14缺失对近期疗效的不良影响.

关键词：多发性骨髓瘤原位杂交,荧光硼替佐米

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SiRNA干扰β-catenin对K562细胞在体内成瘤能力作用的研究

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中国实验血液学杂志 2011年第4期19卷 861-864页

作者：王国蓉李增军李长虹李茜邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 首都医科大学附属北京朝阳医院血液科北京100020

本研究旨在探讨β-联蛋白(β-caten in)对K562细胞体内成瘤能力的影响。采用β-caten in序列特异的siRNA下调K562细胞中靶基因β-caten in的表达,将处理后的K562细胞植入BALB/c裸鼠皮下,观察其在裸鼠皮下成瘤率及成瘤曲线。同时用未处理... 详细信息

本研究旨在探讨β-联蛋白(β-caten in)对K562细胞体内成瘤能力的影响。采用β-caten in序列特异的siRNA下调K562细胞中靶基因β-caten in的表达,将处理后的K562细胞植入BALB/c裸鼠皮下,观察其在裸鼠皮下成瘤率及成瘤曲线。同时用未处理的K562细胞及非特异序列siRNA处理的K562细胞作为对照。结果表明,未处理组(n=9)、对照组(无关序列干扰)(n=8)和试验组(β-caten in特异性干扰)(n=9)成瘤率分别为100%、87.5%和0%,试验组成瘤率与前两组比较有显著的统计学差异(p<0.001)。未处理组瘤块体积增长略快于对照组,但2组的瘤块体积增长速度无统计学差异;在试验组未见成瘤。结论:特异性干扰下调β-caten in的表达,影响K562细胞体内成瘤。

关键词： β-catenin siRNA K562细胞成瘤能力

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靶向白血病干细胞CD123的毒性融合蛋白的制备

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白血病．淋巴瘤 2011年第8期20卷 490-493页

作者：任思楣张砚君彭洪薇王金宏纪庆范冬梅张楠曾洁卫生部北京医院卫生部临床检验中心北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的构建靶向白血病干细胞CD123的融合蛋白，检测其表达效果及其识别白血病干细胞的活性。方法采用PCR法扩增白细胞介素-3（IL-3）和毒素蛋白（LP）的编码DNA序列，经酶切、连接，克隆至表达载体pAYZ，转化大肠杆菌E-coli 16C9，鉴定阳... 详细信息

目的构建靶向白血病干细胞CD123的融合蛋白，检测其表达效果及其识别白血病干细胞的活性。方法采用PCR法扩增白细胞介素-3（IL-3）和毒素蛋白（LP）的编码DNA序列，经酶切、连接，克隆至表达载体pAYZ，转化大肠杆菌E-coli 16C9，鉴定阳性克隆菌落，经低磷培养基AP5诱导表达融合蛋白***，用CM—FF阳离子柱和抗-Etag亲和层析柱纯化，纯化产物经SDS—PAGE和Western blot鉴定，流式细胞术测定其与红白血病细胞TFl的结合活性。结果构建的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶性蛋白表达，纯化后纯度达95％以上，表达量约为1mg／L，并有与白血病干细胞表面IL-3受体d亚基（CD123）特异性结合的活性。结论构建的融合蛋白IL-3-G4S—LP具有与白血病干细胞结合的特性，可望成为复发和耐药白血病的治疗药物。

关键词：融合蛋白白细胞介素3 肿瘤干细胞靶向治疗

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双功能抗体抗CD3／抗CD19介导T细胞对靶细胞的杀伤作用

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中国癌症杂志 2011年第1期21卷 6-11页

作者：范冬梅李崴杨铭赵英新许元富陈礼平王敏中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科天津300060

背景与目的:双功能抗体有2个抗原结合臂,一方面具有肿瘤相关抗原,另一方面具有和免疫效应细胞表面分子标记结合的能力,并能有效地使效应细胞靶向杀灭肿瘤细胞的作用。本实验探讨抗CD3/抗CD19双功能抗体介导T细胞杀伤靶细胞的作用。方法... 详细信息

背景与目的:双功能抗体有2个抗原结合臂,一方面具有肿瘤相关抗原,另一方面具有和免疫效应细胞表面分子标记结合的能力,并能有效地使效应细胞靶向杀灭肿瘤细胞的作用。本实验探讨抗CD3/抗CD19双功能抗体介导T细胞杀伤靶细胞的作用。方法:利用非放射性荧光染料Calcein-AM进行抗体介导的体外特异性杀伤活性检测,Ficoll-Hypaque法分离外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),流式细胞术从中分选T淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞作为效应细胞。首先以Raji细胞为靶细胞,按不同效靶比,不同抗体浓度分组,以PBS、抗CD3scFv+、抗CD3scFv抗体及非相关抗体抗CD3/抗PGP为对照,另设CD19-K562细胞为非相关靶细胞组,比较双功能抗体介导特异性体外杀伤活性。取上述杀伤实验效靶比25∶1,抗体浓度500 ng/mL各组,ELISA法比较激活的T细胞分泌IL-2的量,Real-time PCR法检测T细胞因子IL-3、IFN-γ、TNF-α激活后的表达变化。结果:体外介导T细胞杀伤靶细胞Raji的效果比对照组明显增强(P<0.05),激活T细胞分泌IL-2、IL-3、IFN-γ及TNF-α的表达均明显高于对照组。结论:双功能抗体抗CD3/抗CD19在体外介导T细胞对靶细胞具有较强的杀伤作用。

关键词：双功能抗体 CD3 CD19 淋巴瘤免疫治疗

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脐血中性粒细胞上清液对脐带间充质干细胞Bax、MCL-1基因表达的影响

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实用医学杂志 2011年第5期27卷 745-747页

作者：郑丽坤张磊刘牧赵辉卢士红吴寿岭陈乃耀联合大学附属开滦医院血液科河北省唐山市063000 联合大学附属开滦医院骨科河北省唐山市063000 联合大学附属医院河北省唐山市063000 天津大学化工学院生物制药实验室 300000 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津市300020 联合大学附属开滦医院心内科河北省唐山市063000

目的:探讨脐血中性粒细胞上清液对脐带间充质干细胞(UC-MSCs)Bax、MCL-1基因表达的影响。方法:分离脐血中性粒细胞,按UC-MSCs和中性粒细胞以1∶1、1∶10、1∶50、1∶100比例提取中性粒细胞上清液,实验设立单独UC-MSCs培养的对照组(1∶0)... 详细信息

目的:探讨脐血中性粒细胞上清液对脐带间充质干细胞(UC-MSCs)Bax、MCL-1基因表达的影响。方法:分离脐血中性粒细胞,按UC-MSCs和中性粒细胞以1∶1、1∶10、1∶50、1∶100比例提取中性粒细胞上清液,实验设立单独UC-MSCs培养的对照组(1∶0)和UC-MSCs在不同浓度的中性粒细胞上清液中的实验组,在分别培养18和40h后,根据四甲基偶氮唑盐(MTT)实验结果选择具有统计学意义的1∶0、1∶1、1∶50分组作为实验对象,根据MTT实验结果选择具有统计学意义的18h作为实验对象,实时定量PCR检测不同组间MSCs的Bax和MCL-1基因表达量。结果:实时定量PCR检测1∶0、1∶1、1∶50各组间MSCs的Bax和MCL-1基因表达量,1∶50实验组Bax和MCL-1表达量较1∶0和1∶1实验组明显升高(P<0.05),且以Bax升高为主。结论:高浓度的中性粒细胞上清液使MSCs的Bax和MCL-1基因表达量升高,且以凋亡基因Bax升高为主。

关键词：干细胞脐血中性粒细胞上清液 Bax MCL-1

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抗CD3/抗CD19微型双功能抗体的构建、表达及活性测定

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中国癌症杂志 2010年第4期20卷 241-246页

作者：李崴范冬梅程昕师锐赞刘荣任思楣王敏杨铭中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科天津300060

背景与目的:微型双功能抗体是基因工程抗体的一种形式,它具有两个抗原结合位点,可选择性募集效应细胞到靶细胞周围,介导特异性杀伤作用。本实验构建抗CD3/抗CD19微型双功能抗体(diabody)载体,表达纯化后测定其生物学活性。方法:用重叠PC... 详细信息

背景与目的:微型双功能抗体是基因工程抗体的一种形式,它具有两个抗原结合位点,可选择性募集效应细胞到靶细胞周围,介导特异性杀伤作用。本实验构建抗CD3/抗CD19微型双功能抗体(diabody)载体,表达纯化后测定其生物学活性。方法:用重叠PCR(overlap PCR)和PCR方法,构建抗CD3/抗CD19 diabody载体,转化感受态大肠埃希菌进行原核表达。表达产物经抗His-tag亲和层析柱分离纯化,12% SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FACS)检测生物学活性。结果:基因重组质粒经测序证实序列正确。抗CD3/抗CD19 diabody能够在原核表达系统中进行可溶性表达。12% SDS-PAGE显示28×103和26×103各有一条带,Western blot在28×103显示有条带,与预期相符。表达产物经纯化定量可达5mg/L。FACS检测抗CD3/抗CD19 diabody可与CD19+ Raji细胞和CD3+ Jurkat细胞特异结合,并能竞争性抑制HIT3a和HIT19a与上述细胞的结合活性。结论:本实验成功构建了抗CD3/抗CD19 diabody,并且能够进行可溶性表达,可与CD19+ Raji细胞和CD3+ Jurkat细胞特异结合,为以后的抗体功能实验奠定了基础。

关键词：基因工程抗体双功能抗体 CD3 CD19 淋巴瘤免疫治疗

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