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第四届国际络病学大会

作者：程宇彤杨跃进张海涛钱海燕赵京林孟宪敏罗富良中国医学科学院北京协和医学院心血管病研究所阜外心血管病医院冠心病诊治中心中国医学科学院北京协和医学院心血管病研究所阜外心血管病医院中心实验室中国医学科学院北京协和医学院心血管病研究所阜外心血管病医院实验动物中心

目的探讨方药通心络对猪心肌缺血再灌注的保护作用及机制,为通心络治疗心肌缺血再灌注损伤提供实验依据。方法28只中华小型猪随机分为假手术（sham）组、安慰剂（placebo）组、通心络（TXL）组、通心络联合一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-左... 详细信息

目的探讨方药通心络对猪心肌缺血再灌注的保护作用及机制,为通心络治疗心肌缺血再灌注损伤提供实验依据。方法28只中华小型猪随机分为假手术（sham）组、安慰剂（placebo）组、通心络（TXL）组、通心络联合一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-左旋精氨酸（TXL+L-NNA）组。开胸冠状动脉结扎1.5 h,松解3 h制备急性心肌梗死再灌注模型。术中监测动脉血压、心室压、心率及冠脉血流量。手术结束前经左房注射硫磺素S、伊文思蓝染料,病理组织用红四氮唑染色,用面积求积法测定心肌的缺血、梗死及无再流面积。髓过氧化物酶（MPO）法测定心肌MPO活力。免疫印迹法测定心肌内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、血管内皮钙粘连素（VE-cadherin）含量。结果再灌注期间各组血压心率乘积及左室舒张末压无明显差异;再灌注120、180 min时TXL组冠脉血流量明显高于安慰剂组和TXL+L-NNA组（P＜0.05）;安慰剂组心肌梗死、无再流面积与心肌缺血面积的百分比值分别是（90±3）%和（70±4）%,心肌再流区、无再流区MPO活力分别是（1.77±0.09）IU/g和（2.07±0.17）IU/g,TXL组上述指标[（78±3）%和（47±5）%,（1.12±0.15）IU/g和（1.30±0.11）IU/g]与安慰剂组和TXL+L-NNA组[（95±3）%和（63±3）%,（1.57±0.05）IU/g和（1.81±0.28）IU/g]相比均有明显差异（P＜0.05）;与安慰剂组、TXL+L-NNA组比较,TXL组明显增加无再流区VE-cadherin含量,但不改变eNOS含量。结论通心络可能通过抑制中性粒细胞浸润、减少内皮损伤而对缺血再灌注心肌产生保护作用,此保护作用与NO生成有关。

关键词：心肌梗死再灌注损伤通心络一氧化氮中性粒细胞浸润

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细胞表面分子在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的表达

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中国医学科学院学报 2007年第1期29卷 62-66,I0009页

作者：陈苗曲强沈悌张伸陈翠珠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基本外科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室北京100730

目的研究成人骨髓间充质干细胞(MSCs)在诱导条件下定向分化为成骨细胞过程中,细胞表面分子的表达及变化特征。方法从人骨髓中分离有核细胞,在含有15%胎牛血清、维生素C和β-甘油磷酸钠的α-MEM培养基中培养。在培养早期加入10-8mol/L地... 详细信息

目的研究成人骨髓间充质干细胞(MSCs)在诱导条件下定向分化为成骨细胞过程中,细胞表面分子的表达及变化特征。方法从人骨髓中分离有核细胞,在含有15%胎牛血清、维生素C和β-甘油磷酸钠的α-MEM培养基中培养。在培养早期加入10-8mol/L地塞米松(实验组)或保持基础培养状态(对照组1),同时部分细胞仅培养于α-MEM培养基中(对照组2)。于培养第7、12、17天分别收集实验组和各对照组细胞,用流式细胞方法观察细胞表面分子CD45、CD34、CD117、CD90和人白细胞抗原-DR(HLA-DR)的表达,并定量对比分析。结果成人骨髓MSCs在体外诱导条件下分化为具有成骨细胞特征的成熟细胞。培养第7天实验组、对照组1和对照组2均少量表达CD45,第12、17天CD45表达转为阴性。各组各时间点CD34、CD117表达均为阴性。培养第12天,实验组和各对照组细胞CD90表达均较第7天升高,以对照组升高明显。实验组细胞HLA-DR表达随着成骨细胞分化成熟逐渐上升,而对照组细胞HLA-DR表达下降。结论MSCs在诱导条件下可以向成骨细胞分化。细胞表面分子的表达在细胞分化过程中呈特征性改变,是成骨细胞分化早期的一个重要标志。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨细胞细胞表面分子

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幼年起病的2例晚发型糖原贮积症Ⅱ型/Pompe病临床和基因分析

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中华儿科杂志 2007年第10期45卷 760-764页

作者：仇佳晶魏珉张为民施惠平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄... 详细信息

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄糖苷酶的19个外显子,测序,进行突变检测。同时对50例健康对照100个等位基因进行15号外显子的 PCR 扩增,测序,确定突变特征。结果 1例临床表现为进行性近端肌肉无力,肌张力低下;1例表现为肌容积减少,呼吸肌受累;2例均有肌酸磷酸肌酶升高,肌电图提示肌源性损害,肌活检呈空泡性改变,皮肤成纤维细胞α-1,4-葡萄糖苷酶活性测定明显低下。突变检测:测序发现4个杂合错义突变,例1为 c796 C>T,p.266Pro>Ser;c2105 G>A,p.702Arg>His;例2为 c2132 C>G,p.711Thr>Arg;c2167 G>A,p.723Val>Met。其中后3个为新突变,50例健康对照100个等位基因测序未发现同样突变。结论幼年起病的 Pompe 病患儿临床表现存在差异,呼吸肌受累情况影响其预后;检测到3个错义新突变,可能为致病突变。

关键词：糖原贮积病,Ⅱ型葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶外显子突变

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一种新的BBL Mycotube方法对酵母菌鉴定能力的评估

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中华检验医学杂志 2007年第4期30卷 465-466页

作者：陈翠珠徐英春窦红涛谢秀丽陈民钧中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730

目前临床上用于酵母菌鉴定的方法主要有色原底物显色鉴定法、API20CAUX和Vitek2CompactYBC方法。其中色原底物显色鉴定法操作最简单，但是能够鉴定的菌株范围有限，API20CAUX方法菌株鉴定范围广但操作复杂，BBLMycotube方法操作比API20C... 详细信息

目前临床上用于酵母菌鉴定的方法主要有色原底物显色鉴定法、API20CAUX和Vitek2CompactYBC方法。其中色原底物显色鉴定法操作最简单，但是能够鉴定的菌株范围有限，API20CAUX方法菌株鉴定范围广但操作复杂，BBLMycotube方法操作比API20CAUX方法简单，与色原底物显色鉴定法相比耗时相似，菌种鉴定范围更广。本试验以API20CAUX方法为标准，色原底物显色鉴定法和Vitek2CompactYBC方法作为补充方法，探讨BBLMycotube方法是否适用于临床酵母样真菌的鉴定。BBLMycotube是一种包含了8种反应底物，可以读取10种生化反应结果，各个成分互相间隔塑料管。采用封入套管内的金属接种针，挑取一个或多个纯菌落，将待测菌株一步接种到8种反应底物中。孵育48～72h后，读取结果，记录所有阳性和阴性反应。与结果比色板的颜色反应表进行比对，计算阳性编码。通过查询编码表，鉴定出受试菌株（鉴定率≥80％）。如果表中列出多种菌株名（鉴定率〈80％），可使用列出的补充试验进一步鉴定。

关键词：鉴定法酵母菌 BBL 菌株鉴定生化反应评估能力补充试验

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人类肿瘤组织中非编码RNA-NC28和NC119的鉴定及表达

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中国医学科学院学报 2007年第5期29卷 618-621页

作者：孙贞媛袁艳华刘长宁赵屹黄洁夫桑新亭毛一雷卢欣王歈常永生赵海涛中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肝脏外科北京100730 北京大学临床肿瘤学院生物诊疗中心北京100036 中国科学院计算技术研究所生物信息学研究组北京100080 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约... 详细信息

目的寻找并验证与肿瘤相关的非编码RNA。方法采用RT-PCR和Northern blot分析非编码RNA在肿瘤组织及细胞系中的表达情况。结果RT-PCR在实体肿瘤和细胞系中鉴定了2个非编码RNA-NC28和NC119的表达,Northernblot检测发现NC28转录子长度大约为1800个核苷酸,NC119转录子长度大约为1200个核苷酸。结论这两种非编码RNA具有一定的肿瘤共享性,非编码RNA在肿瘤发生发展中可能发挥一定作用。

关键词：肿瘤非编码RNA 肿瘤特异性差异表达表达序列标签

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1型糖尿病小鼠下肢缺血恢复受损的机制

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中国医学科学院学报 2007年第6期29卷 742-746,F0003页

作者：李拥军柳夏林刘昌伟管珩林清中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科北京100730 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州510060 芝加哥伊利诺伊州立大学药学院药学系芝加哥美国60612

目的研究1型糖尿病小鼠肢体对缺血刺激的血管生成反应,及其骨髓内皮祖细胞的数量和功能。方法雄性C57BL/6小鼠20只,静脉注射四氧嘧啶,建立1型糖尿病模型;年龄、性别相匹配的正常小鼠20只为对照组。所有小鼠均行单侧股动脉结扎切除术,建... 详细信息

目的研究1型糖尿病小鼠肢体对缺血刺激的血管生成反应,及其骨髓内皮祖细胞的数量和功能。方法雄性C57BL/6小鼠20只,静脉注射四氧嘧啶,建立1型糖尿病模型;年龄、性别相匹配的正常小鼠20只为对照组。所有小鼠均行单侧股动脉结扎切除术,建立下肢动脉缺血模型。应用激光多普勒扫描仪记录肢体血流恢复情况至术后第4周。取缺血下肢肌肉组织行免疫组织化学染色,评价血管密度。分离小鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞,采用流式细胞术鉴定内皮祖细胞,收集后进行培养,观察其增殖和分化能力。结果小鼠静脉注射四氧嘧啶后,出现典型1型糖尿病表现。1型糖尿病小鼠下肢缺血后血流恢复、缺血肢体肌肉血管密度及1型糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞的数量、增殖和分化能力均显著低于对照组(P<0.001,P<0.05)。结论1型糖尿病小鼠肢体对缺血刺激的反应明显减弱,可能与糖尿病状态下内皮祖细胞的数量和功能降低有关。

关键词：糖尿病外周血管病变内皮祖细胞

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1999～2005年北京协和医院真菌流行病学调查

1999～2005年北京协和医院真菌流行病学调查

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第二届全国深部真菌感染学术会议

作者：陈翠珠徐英春王澎杨启文谢秀丽陈民钧中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室

目的调查北京协和医院1999～2005年临床分离的真菌的种属分类和分布。方法录入北京协和医院1999～2005年临床分离的真菌,并进行数据统计和分析。结果1999～2005年临床送检真菌标本量从1727升高到8533例,菌株检测阳性数从554升高到2848株... 详细信息

目的调查北京协和医院1999～2005年临床分离的真菌的种属分类和分布。方法录入北京协和医院1999～2005年临床分离的真菌,并进行数据统计和分析。结果1999～2005年临床送检真菌标本量从1727升高到8533例,菌株检测阳性数从554升高到2848株,阳性菌株数占送检标本比例为25.3%～41.5%。白念株菌占40%～60%,光滑念珠菌占7.7%～17.8%,热带念珠菌为9.5%～16.8%,克柔念珠菌为0.9 %～4.4%,近平滑念珠菌为0.2%～1.3%。烟曲霉比例由1999年的2.7%升高到2005年的6.8%,黄曲霉比例由1999年的0.3%升高到2005年的3.6%。克柔念珠菌2002检出量为59株,在这几年中所占比例最高为4.4%。不同标本来源分离的菌株分布如下:血液标本分离的白念株菌占最多,依次为热带念珠菌,近平滑念珠菌,光滑念珠菌,新型隐球菌等;肺泡灌洗液标本分离的白念株菌最多,其次烟曲霉、青霉、光滑念珠菌和黄曲霉;尿、咽拭子、生殖道标本分离的白念株菌最多,其次为光滑念珠菌和热带念珠菌;脑脊液标本分离的新型隐球菌最多,其次白念株菌和热带念珠菌。血培养阳性菌株总计462（226）株。血中鉴定的真菌阳性标本患者例数从1999年的11例上升到2005年的106例。结论北京协和医院1999～2005年临床分离的真菌仍以白念株菌所占比例最大,其次热带念珠菌和光滑念珠菌,曲霉菌所占比例有所增高。不同标本分离的菌株所占比例不同。血源念珠菌感染危险因素有手术治疗,中心静脉插管,抗生素治疗等。

关键词：流行病真菌念珠菌

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高效液相色谱仪的管理与维护

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现代科学仪器 2007年第2期 106-110页

作者：张燕婉汪劭婷中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室北京协和医学院(清华大学医学部)

本文介绍了高效液相色谱仪的结构组成和发展,阐述了关于流路泵系统、色谱柱和几种常用检测器的管理与维护,为广大液相色谱工作者今后更好的从事液相色谱分析工作,提供了一些有用的色谱知识和值得借鉴的仪器管理经验。

关键词：高效液相色谱仪泵系统色谱柱检测器管理维护

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液相色谱技术在定量分析中的应用

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实验技术与管理 2007年第10期24卷 25-28,50页

作者：张燕婉汪劭婷中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室北京100037 北京协和医学院（清华大学医学部）临床医学北京100005

该文介绍了高效液相色谱仪的结构组成,从样品预处理方法和仪器使用技术（流动相、色谱柱、检测器）方面阐述了液相色谱技术在定量分析中的应用,为广大液相色谱工作者今后更好的从事液相色谱分析工作,提供了一些有用的色谱知识和仪器管... 详细信息

该文介绍了高效液相色谱仪的结构组成,从样品预处理方法和仪器使用技术（流动相、色谱柱、检测器）方面阐述了液相色谱技术在定量分析中的应用,为广大液相色谱工作者今后更好的从事液相色谱分析工作,提供了一些有用的色谱知识和仪器管理经验。

关键词：高效液相色谱技术仪器组成样品预处理色谱检测器

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成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞的冻存与复苏研究

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中华外科杂志 2006年第21期44卷 1460-1462页

作者：曲强李秉璐赵玉沛陈翠珠闫旭王磊周立何小东中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基本外科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730

目的在体外诱导人骨髓基质干细胞向肝细胞分化成熟的基础上,将细胞深冻保存,观察冻存复苏后细胞存活率及功能状况。方法在含有多种细胞因子的条件培养基中体外诱导成人骨髓基质干细胞,当细胞显示成熟肝细胞特征后,将细胞分别冻存于90%... 详细信息

目的在体外诱导人骨髓基质干细胞向肝细胞分化成熟的基础上,将细胞深冻保存,观察冻存复苏后细胞存活率及功能状况。方法在含有多种细胞因子的条件培养基中体外诱导成人骨髓基质干细胞,当细胞显示成熟肝细胞特征后,将细胞分别冻存于90%胎牛血清(FBS)和10%二甲亚砜(DMSO)(A组)、10%FBS、30%甘油和60%培养基(B组)和10%FBS、10%DMSO和80%威斯康星器官保存液(UW液)(C组)中。冻存4周后复苏细胞,测定各组细胞存活率及白蛋白合成情况。结果成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞经冻存复苏后可恢复功能细胞形态,A、B和C组冻存液中细胞复苏后细胞存活率分别为(60·0±3·3)%、(91·0±2·6)%和(89·0±1·4)%,培养24h后检测上清液白蛋白浓度分别为(0·210±0·005)g/L、(0·340±0·020)g/L和(0·330±0·030)g/L。结论成人骨髓基质干细胞分化来源的肝细胞冻存复苏后仍保持较高的细胞存活率和功能,可作为临床肝细胞移植及生物人工肝的重要肝细胞来源。

关键词：干细胞肝细胞低温保藏细胞存活肝移植

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