检索结果-内蒙古大学图书馆

抑癌基因PTEN与其假基因PTENPl在急性白血病细胞中的表达及其相关性研究

中华血液学杂志 2012年第11期33卷 896-901页

作者：王翠翠怀磊张翠萍贾玉娇李其辉陈一瑞田征唐克晶邢海燕王敏王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨抑癌基因PTEN与其假基因PTENP1在急性白血病（AL）细胞中的表达情况及两者之间的相关性，并观察在白血病细胞系中PTENP1对PTEN的调控作用。方法应用实时定量PCR方法检测138例初诊AL患者及15名正常对照者骨髓细胞中PTEN与PTENP1m... 详细信息

目的探讨抑癌基因PTEN与其假基因PTENP1在急性白血病（AL）细胞中的表达情况及两者之间的相关性，并观察在白血病细胞系中PTENP1对PTEN的调控作用。方法应用实时定量PCR方法检测138例初诊AL患者及15名正常对照者骨髓细胞中PTEN与PTENP1mRNA的表达水平。构建PTENP13’UTR的慢病毒载体pCDH1-PTENP13’UTR—GFP，磷酸钙共沉淀法转染293T细胞，病毒原液感染HL-60细胞，流式细胞术分选获得混合克隆。实时定量PCR检测两组不同克隆PTENP1mRNA表达变化，Western blot检测两组不同克隆PTEN蛋白表达变化，MTT法检测细胞增殖抑制率。结果与正常对照组相比，AL患者骨髓细胞PTEN及PTENP1mRNA表达水平均明显降低（P〈0．05）。相关性分析显示，PTEN与PTENP1mRNA表达水平呈正相关（P〈0．05）。将PTENP1阳性急性髓系白血病（AML）组患者（108例）按NCCN2011年AML治疗指南进行预后分组，各组之间PTEN及PTENPl表达水平无明显差异。pCDH1一PTENP13’UTR—GFP病毒原液感染的HL一60细胞，与对照组（pCDH1一GFP）相比，前者感染的HL-60细胞PTENP1mRNA水平明显升高，PTENmRNA水平亦有升高，但PTEN蛋白表达和细胞增殖无明显变化。结论AL患者骨髓细胞PTEN及PTENP1mRNA表达水平降低，两者的表达存在相关性。PTENP1可能在mRNA水平对PTEN的表达具有调控作用。

关键词：白血病急性基因 PTEN 假基因

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5-氮杂-2'-脱氧胞苷对多药耐药MCF-7/ADR和KBV/200细胞增殖及细胞周期影响作用机制的研究

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肿瘤 2012年第11期32卷 874-879页

作者：张梦楠范冬梅杨铭胡蕴慧李双静姜琳琳李真真张砚君熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对肿瘤多药耐药细胞生长抑制率、细胞周期的影响及可能的作用机制。方法:采用MTT法检测5-Aza-dC对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR、口腔表皮癌多药耐药细胞KBV/200... 详细信息

目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)对肿瘤多药耐药细胞生长抑制率、细胞周期的影响及可能的作用机制。方法:采用MTT法检测5-Aza-dC对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR、口腔表皮癌多药耐药细胞KBV/200及其相应的亲本敏感MCF-7和KB细胞的生长抑制率;FCM法检测不同浓度5-Aza-dC(1、5和10μmol/L)作用72h及5-Aza-dC(10μmol/L)作用24、48和72h后,各细胞周期分布的变化;分别采用实时荧光定量-PCR及蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达情况。结果:5-Aza-dC对耐药细胞株MCF-7/ADR及KBV/200均呈现明显的生长抑制作用,细胞周期被阻滞在G2/M期,并呈时间及剂量依赖性;细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1mRNA及蛋白的表达均上调。结论:5-Aza-dC可以通过使MCF-7/ADR及KBV/200细胞的细胞周期被阻滞在G2/M期,从而抑制肿瘤多药耐药细胞的增殖;其作用机制可能与上调细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin E和p21waf1/cip1的表达有关。

关键词：乳腺肿瘤口腔肿瘤脱氧胞苷细胞抑制剂细胞周期蛋白类

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范可尼贫血肿瘤相关通路的基因集富集分析

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中华血液学杂志 2012年第5期33卷 371-377页

作者：周全全王晓娟竺晓凡袁卫平程涛中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨范可尼贫血（FA）患者高肿瘤易感性的潜在机制与原因。方法采用基因集富集分析（Genesetenrichmentanalysis，GSEA）对NCBIGEO数据库中21例FA患者和11例健康志愿者的骨髓单个核细胞基因表达谱进行比较研究，分析其在肿瘤相关通... 详细信息

目的探讨范可尼贫血（FA）患者高肿瘤易感性的潜在机制与原因。方法采用基因集富集分析（Genesetenrichmentanalysis，GSEA）对NCBIGEO数据库中21例FA患者和11例健康志愿者的骨髓单个核细胞基因表达谱进行比较研究，分析其在肿瘤相关通路及肿瘤相关基因集中的富集特征与核心富集基因。然后利用对基因本体学（Geneontology）生物过程和结构基因组相关基因集的富集分析，进一步阐释了该病高肿瘤易感性的潜在原因。结果FA患者在抗Bcl-2抑制剂相关基因集和成纤维细胞生长因子、胰岛素及胰岛素样生长因子（IGF）信号通路介导的肿瘤基因集中有显著富集特征。其中核心富集基因D4S234E、SST、FGF、IGF、FGFR和IGFBP等的高表达与促进肿瘤形成及耐药相关。在生物学过程上，FA患者细胞外分子的生物合成和结构与对照组具有显著差异。在结构基因组相关分析中发现，包含上述IGF2在内的转录起始位点附近具有模体RRCAGGTGNCV及CCT-NTMAGA的基因集具有富集特征，其中前者与肿瘤发生的关键转录因子TCF3匹配。结论FA患者的高肿瘤易感性与其体内在关键转录因子介导下的肿瘤相关细胞因子、激素等内环境变化密切相关。

关键词：范可尼贫血肿瘤易感性基因表达谱基因集富集分析

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CD34＋CD38-Lin-细胞群单个细胞培养的初步研究

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中国医学科学院学报 2012年第1期34卷 19-24页

作者：韩有金齐军元邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨单个CD34+CD38-Lin-细胞在体外培养体系中的生存和增殖能力。方法用免疫磁珠从脐带血单个核细胞中分选出Lin-细胞,然后用流式细胞仪筛选出CD34+CD38-Lin-细胞,并由流式细胞仪将单个CD34+CD38-Lin-细胞直接放入培养孔中进行培养... 详细信息

目的探讨单个CD34+CD38-Lin-细胞在体外培养体系中的生存和增殖能力。方法用免疫磁珠从脐带血单个核细胞中分选出Lin-细胞,然后用流式细胞仪筛选出CD34+CD38-Lin-细胞,并由流式细胞仪将单个CD34+CD38-Lin-细胞直接放入培养孔中进行培养。培养基中分别加细胞因子Shh、BMP-4或Jagged-1作为实验组,未加细胞因子的以等量PBS作为对照。应用细胞计数法、集落培养计数法检测不同培养条件下各组细胞数量的变化及集落形成能力的差异。结果培养第3天,各组均能见到单个细胞的分裂倍增现象。培养1周后,各实验组的细胞存活率均高于对照组,顺序为Jagged-1组>BMP-4组>Shh组>对照组,而每孔细胞数的顺序为Jagged-1组>BMP-4组>对照组;实验组中每孔细胞数为0的孔数明显低于对照组,尤其是Jagged-1组,而实验组每孔细胞数多于17的孔数高于对照组,其中BMP-4组最高。实验组的每孔集落数明显高于对照组,实验组之间的差异并不明显。另外,单个细胞集落培养后能形成红系爆式集落及粒细胞、单核细胞、粒-单核细胞集落形成单位等各式集落。结论单个CD34+CD38-Lin-细胞能够单独完成生存、自我更新及增殖等过程,而添加细胞因子Shh、BMP-4、Jagged-1能够增强其上述能力,显示微环境的重要性。单个CD34+CD38-Lin-细胞只能形成一种细胞集落,说明微环境对于维持CD34+CD38-Lin-细胞群的全能性必不可少。

关键词： CD34+CD38-Lin-细胞 Shh BMP-4 Jagged-1 自我更新增殖微环境

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原发性骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化患者的临床特征和预后分析

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中华血液学杂志 2012年第5期33卷 378-382页

作者：苏涛张培红徐泽锋陈辉树秦铁军张悦张宏丽方力维潘丽娟肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津 300020

目的分析原发性骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化（MDS-MF）患者的临床特征和预后，提高对MDS-MF的认识。方法回顾性分析有骨髓活检结果的466例原发性MDS患者资料，根据是否伴有MF分为两组比较临床特征，并进行预后分析。结果466例原发性... 详细信息

目的分析原发性骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化（MDS-MF）患者的临床特征和预后，提高对MDS-MF的认识。方法回顾性分析有骨髓活检结果的466例原发性MDS患者资料，根据是否伴有MF分为两组比较临床特征，并进行预后分析。结果466例原发性MDS患者中167例（35．8％）MDS患者伴有MF，其中MF-1级123例（26．4％），MF-2级40例（8．6％），MF-3级4例（0．9％）。MDS-MF组患者肝脏和（或）脾脏肿大比例高于MDS不伴MF组，差异有统计学意义（P=0．031）。MDS-MF组患者骨髓活检增生程度较MDS不伴MF组活跃，MDS-MF组患者骨髓原始细胞数、巨核细胞数和异常巨核细胞数高于MDS不伴MF组，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。有可供分析的细胞遗传学检查结果的345例患者中MDS-MF患者121例，MDS-MF组患者染色体核型预后分组中危及高危组比例高于MDS不伴MF组，差异有统计学意义（P=0．047）。MDS-MF组患者中位生存期17（1-60）个月，MDS不伴MF组患者中位生存期32（1-62）个月，两组差异有统计学意义（P=0．001）。将单因素分析有预后意义的参数纳入COX模型进行多因素分析，结果显示MF具有独立预后意义（P=0．019）。结论MDS伴MF患者骨髓以网状纤维增生为主，其网状纤维增生与原始细胞数、巨核细胞的增生和发育异常、染色体核型密切相关。伴有MF的MDS患者预后较差。

关键词：骨髓增生异常综合征骨髓纤维化临床研究预后

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联合X-连锁基因多个多态性位点采用逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析

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中华血液学杂志 2012年第4期33卷 261-265页

作者：刘柳马晓瑭王婕妤苏涛杨琳徐泽锋秦铁军肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探索中国正常女性X-连锁葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）、P55、BTK、FHL-1基因外显子多态性位点的杂合子基因型频率，并探讨应用以上位点采用基于X染色体失活克隆性检测法-逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析的价值。方法采集446名中... 详细信息

目的探索中国正常女性X-连锁葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）、P55、BTK、FHL-1基因外显子多态性位点的杂合子基因型频率，并探讨应用以上位点采用基于X染色体失活克隆性检测法-逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析的价值。方法采集446名中国正常女性外周血标本，提取基因组DNA，应用等位基因特异性PCR或PCR-限制性片段长度多态性方法分析X-连锁G6PD、P55、BTK、FHL·1基因外显子多态性位点的杂合基因型频率。以上述杂合位点作为克隆性分析的标记，采用逆转录检测法分析有JAK2V617F突变或克隆性染色体异常的原发性血小板增多症（ET）女性患者造血细胞的克隆性。结果446名中国正常女性G6PD基因杂合基因型频率为12．8％（57例），P55基因杂合基因型频率为29．4％（131例），BTK基因杂合基因型频率为52．0％（232例），FHL-1基因杂合基因型频率为46．4％（207例）。4个多态性位点中具有至少1个杂合位点的正常女性占81．4％（363例）。对G6PD、P55、BTK或FHL-1为杂合子且伴JAK2V617F突变的10例ET患者，应用逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析，所有患者均为单克隆／寡克隆。结论基于X染色体失活的克隆性检测法-逆转录检测法可用于约80％中国女性患者的克隆性分析。

关键词：连锁不平衡多态性单核苷酸克隆排除血小板增多

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FISH在骨髓增生异常综合征患者细胞遗传学评估中的作用

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中华血液学杂志 2012年第10期33卷 839-842页

作者：曲士强徐泽锋李承文刘旭平秦铁军张悦肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究骨髓及外周血荧光原位杂交（FISH）检测在骨髓增生异常综合征（MDS）患者细胞遗传学评估中的作用。方法前瞻性对比了112例初诊MDS患者的常规染色体核型分析和骨髓FISH检测结果，同时对56例患者骨髓及外周血FISH结果进行了比较... 详细信息

目的研究骨髓及外周血荧光原位杂交（FISH）检测在骨髓增生异常综合征（MDS）患者细胞遗传学评估中的作用。方法前瞻性对比了112例初诊MDS患者的常规染色体核型分析和骨髓FISH检测结果，同时对56例患者骨髓及外周血FISH结果进行了比较。结果在41例检出克隆胜异常核型的病例中，有22例骨髓FISH检测与核型分析结果不完全一致，16例是探针组合不能覆盖异常染色体区段所致，涉及到探针检测位点不同仅有6例，FISH检测结果并未改变这6例患者的细胞遗传学预后分组。在71例未检出克隆性异常核型的病例中，15例（21％）通过骨髓FISH检出异常，在〈20个分裂相和≥20个分裂相的病例中FISH异常检出率分别为27％（14／51）和5％（1／20）。72％（21／29）的骨髓FISH异常病例同时检出外周血异常，4％（1／27）的骨髓FISH结果正常病例外周血检出异常。结论对于染色体核型分析少于20个正常中期分裂相的MDS患者，应使用组合探针进行骨髓标本的间期FISH检测。外周血标本FISH检测有相对高的假阴性率，但对于骨髓标本取材失败的病例也是合理的选择。

关键词：骨髓增生异常综合征细胞遗传学荧光原位杂交

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合并自身免疫异常的原发性骨髓增生异常综合征患者临床特征及生存分析

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中华血液学杂志 2012年第7期33卷 527-531页

作者：李冰徐泽锋崔蕊陈悦丹苏涛张天佼方力维张宏丽秦铁军肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津300020

目的分析合并自身免疫异常的原发性骨髓增生异常综合征（MDS）患者的临床特征及生存。方法回顾性分析免疫相关检查完善或既往有自身免疫性疾病明确诊断病史的194例MDS患者临床资料并进行统计学分析。结果194例患者中37例（19．07％）合... 详细信息

目的分析合并自身免疫异常的原发性骨髓增生异常综合征（MDS）患者的临床特征及生存。方法回顾性分析免疫相关检查完善或既往有自身免疫性疾病明确诊断病史的194例MDS患者临床资料并进行统计学分析。结果194例患者中37例（19．07％）合并自身免疫异常，其中16例（8．25％）例合并自身免疫性疾病，21例（10．82％）为无相关症状的免疫检查异常者。合并自身免疫性疾病组中〈60岁患者比例、女性比例、外周血CD4＋T细胞／CD8＋T细胞比值〈1者的比例、染色体异常为＋8者的比例显著高于免疫检查无异常组（P值均〈0．05）。合并自身免疫性疾病组患者2年预期生存率较免疫检查无异常组高，但差异无统计学意义（P=0．065）。无相关症状的免疫检查异常组中女性比例显著高于免疫检查无异常组（P〈0．05）。合并自身免疫性疾病组、无相关症状的免疫检查异常组与免疫检查无异常组相比，在年龄、诊断分型、IPSS预后分组、外周血血红蛋白、中性粒细胞计数、血小板计数、贫血严重程度、中性粒细胞减少程度、血清肿瘤坏死因子增高比例、染色体核型异常检出率、染色体核型预后分组、骨髓活检增生程度差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。结论合并自身免疫性疾病的原发性MDS患者以女性、年龄〈60岁者为主，染色体异常为＋8的比例高，可能具有较好的预后。

关键词：骨髓增生异常综合征自身免疫异常疾病特征存活率分析

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骨髓增生异常综合征患者血小板减少的预后意义初步研究

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中华血液学杂志 2012年第7期33卷 532-535页

作者：陈悦丹徐泽锋崔蕊王婕妤张天佼秦铁军方力维张宏丽张悦肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院；实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨血小板减少对判断骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后的意义。方法回顾性分析419例原发性MDS患者临床资料，应用Kaplan—Meier、Log—rank检验及COX回归模型评估影响预后的因素。结果419例MDS患者中血小板减少（PLT〈10×1... 详细信息

目的探讨血小板减少对判断骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后的意义。方法回顾性分析419例原发性MDS患者临床资料，应用Kaplan—Meier、Log—rank检验及COX回归模型评估影响预后的因素。结果419例MDS患者中血小板减少（PLT〈10×10^9／L）者256例（61．1％），严重减少（PLT〈30×10^9／L）者103例（24．6％）。PⅡ≥100×10^-9／L组、（50—99）×10^9／L组、（30～49）×10^9／L组和〈30×10^9／L组患者中位生存时间分别为41、38、19和17个月，差异有统计学意义（P=0．000）。单因素分析显示PLT〈30×10^9／L、红细胞平均体积（MCV）≤95fl、LDHI〉300U／L、有淋巴样小巨核细胞、有核红细胞糖原染色（E-PAS）阳性、国际预后积分系统（IPSS）染色体核型预后中等及不良为MDS不良预后因素；WHO分型中难治性血细胞减少伴有多系发育异常（RCMD）、难治性贫血伴有原始细胞过多（RAEB）一I及RAEB-11的患者较其他类型的患者预后差。多因素分析显示PLT〈30×10^9／L，MCV≤95fl，IPSS染色体核型预后中等及不良，WHO分型RCMD、RAEB-I及RAEB-II具有独立预后意义。修订的WHO分型预后积分系统（WPSS）各参数赋值如下：PLT〈30×10^91分，其他0分；MCV≤95fl 1分，其他0分；染色体核型良好0分，中等1分，不良2分；WHO分型中RCMD1分，RAEB—I2分，RAEB一Ⅱ3分，其他0分。患者分为低危（0—1分）、中危-1（2—3分）、中危-2（4—5分）和高危组（6～7分），其中位生存期分别为59、28、14和4个月，各组间差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。结论血小板严重减少的MDS患者预后不良，结合血小板计数、染色体核型、MCV及修订的WPSS有望更好地促进我国MDS患者分组治疗策略的制订。

关键词：骨髓增生异常综合征血小板减少预后 WHO分型预后积分系统

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卡立泊来德对K562细胞诱导的血管生成的影响

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中国药理学通报 2012年第5期28卷 617-620页

作者：高伟马丽张洪菊张玉娟常国强王建李华文庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院、血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究卡立泊来德(cariporide)处理对K562细胞诱导的血管生成能力的影响。方法应用MTT检测K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响;transwell检测K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞迁移能力的影响;基质胶血管形成法检测K562细胞... 详细信息

目的研究卡立泊来德(cariporide)处理对K562细胞诱导的血管生成能力的影响。方法应用MTT检测K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响;transwell检测K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞迁移能力的影响;基质胶血管形成法检测K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞体外血管形成能力的影响;激光扫描共聚焦显微镜测定K562细胞的细胞内的pH;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测K562细胞上清中血管内皮生长因子的表达水平。结果cariporide处理可以明显降低K562细胞上清液对脐静脉内皮细胞增殖,迁移和体外成管能力的诱导;cariporide处理后K562细胞的细胞内pH明显下降,分泌VEGF能力也受到抑制。结论 cariporide能抑制K562细胞的血管生成诱导能力,这种抑制是通过细胞内pH下降以及VEGF分泌减少引起的。

关键词：卡立泊来德钠氢交换蛋白1 血管生成细胞内pH 血管内皮生长因子脐静脉内皮细胞 K562细胞

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