检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2022年第3期36卷 327-336页

作者：李兴航李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染造成的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是人类本世纪来面临的威胁最大的传染病之一。目前,全球范围内有4类疫苗已经获批上市或授权紧急使用—灭活疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗和重组蛋白疫苗。随着COVID-19大流行的持续,已进行全程免疫人群的抗体水平逐渐降低,加强免疫是必要的措施,而序贯免疫策略似乎是一种更好的疫苗接种策略。本文将对四类不同技术路线疫苗在序贯免疫中的研究进行综述。

关键词：新型冠状病毒新型冠状病毒肺炎序贯免疫疫苗

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单纯疱疹病毒Ⅱ型经不同途径感染BALB/c小鼠的病理学研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第7期39卷 485-491页

作者：曾洁媛李琦涵范胜涛廖芸冯敏徐兴丽沈冬王建斌程继帅张莹昆明医科大学基础医学院 650500 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的观察并比较分析单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)经不同途径感染小鼠后的致病情况。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠分为实验组和对照组。实验组小鼠分别经滴鼻、生殖道途径感染HSV-2(每只104CCID50/20 μl),对照组... 详细信息

目的观察并比较分析单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)经不同途径感染小鼠后的致病情况。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠分为实验组和对照组。实验组小鼠分别经滴鼻、生殖道途径感染HSV-2(每只104CCID50/20 μl),对照组小鼠经上述两种途径注射PBS。感染后不同时间点,分别取肺、神经系统、生殖系统组织进行病理学观察及病毒载量检测。通过原位杂交对小鼠三叉和骶神经节中lat基因的表达进行定位,同时对组织中病毒进行重激活检测。结果两种途径感染HSV-2的小鼠体重在6 d后均呈下降趋势,且均能观察到组织病理损伤。鼻腔感染以肺泡壁充血、脑血管袖套、淋巴细胞浸润等肺部、中枢神经系统病理损伤为主;而生殖道感染组主要出现是骶神经节坏死、阴道和子宫嗜酸性粒细胞增多、卵巢充血等生殖道病理现象。经两种途径感染的小鼠组织器官中病毒载量的情况也印证了上述病理结果,即鼻腔感染组小鼠的神经、肺组织中病毒载量明显高于生殖道组,而生殖道感染组小鼠的生殖道和骶神经节中病毒增殖则明显高于鼻腔感染组。感染后28 d,在处于潜伏感染小鼠的三叉和骶神经节中均能检测到HSV-2 lat基因mRNA的阳性信号,并且采集的组织碎块均能在与Vero细胞共培养时使细胞病变,且生殖道感染组的lat基因阳性信号及重激活后病毒增殖趋势相对高于鼻腔感染组。结论HSV-2通过鼻腔和生殖道两种途径感染BALB/c小鼠均能引起组织病理损伤,且病理损伤空间特异性与感染途径密切相关。

关键词：单纯疱疹病毒Ⅱ型生殖道感染鼻腔感染病理学分析

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人肠道病毒71型与宿主相互作用研究进展

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病毒学报 2011年第5期27卷 505-509页

作者：郭素杰李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

自1969年首次从美国加利福尼亚患者分离出人肠道病毒71型（Human enterovirus 71，HEV71）后，该病毒已在世界范围内造成多次暴发流行，近年来又在中国大陆、中国台湾及其他亚太地区流行。

关键词：肠道病毒71型相互作用宿主中国大陆加利福尼亚暴发流行世界范围亚太地区

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2019年云南省埃可病毒18型分离株的全基因组分析

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中国病原生物学杂志 2021年第8期16卷 888-892页

作者：张名许丹菡冯昌增王晓辉丛山日郭伟唐靖月卢志敏马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的对2019年云南省埃可病毒18型(E-18)的分离株K88R3-19进行全基因组序列测定及分析,了解其进化和变异特性。方法利用RD、Vero和KMB17细胞分离病毒,提取病毒RNA,RT-PCR扩增全基因,并测序拼接获得全基因组序列。利用Mega 5.05、Geneious... 详细信息

目的对2019年云南省埃可病毒18型(E-18)的分离株K88R3-19进行全基因组序列测定及分析,了解其进化和变异特性。方法利用RD、Vero和KMB17细胞分离病毒,提取病毒RNA,RT-PCR扩增全基因,并测序拼接获得全基因组序列。利用Mega 5.05、Geneious Basic 5.4.1和SimPlot 3.5.1等软件分析全基因组序列。结果 K88R3-19株全基因组序列长度为7 422 bp,编码含2 190个氨基酸的多聚蛋白。K88R3-19与E18/LJ/0601/2019全基因组核苷酸一致性和氨基酸同源性分别为97.6%和99.2%;与其他E-18毒株的核苷酸一致性和氨基酸同源性分别为79.7%~86.1%和95.8%~97.7%;与其他E18毒株的各区段核苷酸一致性和氨基酸同源性分别为72.7%~98.5%和91.9%~100%,其中与中国株VP1-VP4区段核苷酸的一致性为89.8%~98.7%。基于E18全长VP1序列的种系进化分析可将E18分为1-6个基因型,其中5基因型可再分为5-1~5-3 3个基因亚型。中国E-18流行株主要聚集在5-3基因亚型。K88R3-19株较其他E-18株在VP1氨基酸序列上有2个独特突变:第2和28位点分别由D→V和V→A。结论 K88R3-19分离株为5-3基因亚型,为2019年中国大陆流行株。

关键词：埃可病毒18型序列分析种系发生

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云南汉族人群IL-4基因5’和3’非编码区域多态性与HCV慢性感染无相关性

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免疫学杂志 2015年第6期31卷 545-548,552页

作者：李莹童绍勇李桃意刘城秀姚月婷俞建昆史荔姚宇峰中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的探讨IL-4基因5’和3’非编码区域单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP)与HCV慢性感染的相关性。方法选取云南地区汉族人群HCV慢性感染患者380例,健康体检人群439例。采用Taq Man探针基因分型方法对IL-4基因5’和... 详细信息

目的探讨IL-4基因5’和3’非编码区域单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP)与HCV慢性感染的相关性。方法选取云南地区汉族人群HCV慢性感染患者380例,健康体检人群439例。采用Taq Man探针基因分型方法对IL-4基因5’和3’非编码区域6个SNP位点SNP-1138A/G(rs2243247)、-1098G/T(rs2243248)、-589C/T(rs2243250)、-33C/T(rs2070874)、2979C/A(rs2227284)、3’端C/T(rs2243292)进行基因分型,并构建单倍型,评估上述6个SNP位点及单倍型与HCV慢性感染的相关性。结果 IL-4基因SNP-1138A/G(rs2243247),3’端C/T(rs2243292)在病例组和对照组中无多态性;SNP位点-1098G/T(rs2243248)、-589C/T(rs2243250)、-33C/T(rs2070874)、2979C/A(rs2227284)的基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组中差异无统计学意义(P>0.05);单倍型分析结果显示:SNP位点-1098G/T(rs2243248)、-589C/T(rs2243250)、-33C/T(rs2070874)、2979C/A(rs2227284)构建的单倍型频率在病例组和对照组中差异无统计学意义(P>0.05)。结论在云南汉族群体中,IL-4基因5’和3’非编码区域SNP位点-1138A/G(rs2243247)、-1098G/T(rs2243248)、-589C/T(rs2243250)、-33C/T(rs2070874)、2979C/A(rs2227284)、3’端C/T(rs2243292)与HCV慢性感染没有相关性。

关键词： HCV 慢性感染单核苷酸多态性 IL-4

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人柯萨奇B2病毒感染恒河猴模型的初步研究

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中国比较医学杂志 2019年第12期29卷 52-60页

作者：段素琴杨亚平杨凤梅李艳艳刘权赵远马绍辉和占龙中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

目的通过对人柯萨奇B2病毒经口腔感染恒河猴婴猴的感染特征进行初步分析研究,为人柯萨奇B2病毒恒河猴感染模型的建立提供实验方法及技术支持,为后续开展其感染机制、病理生理等研究奠定基础。方法将柯萨奇B2病毒经口腔感染方式感染3~4... 详细信息

目的通过对人柯萨奇B2病毒经口腔感染恒河猴婴猴的感染特征进行初步分析研究,为人柯萨奇B2病毒恒河猴感染模型的建立提供实验方法及技术支持,为后续开展其感染机制、病理生理等研究奠定基础。方法将柯萨奇B2病毒经口腔感染方式感染3~4月龄的恒河猴婴猴,观察记录恒河猴临床症、体温;采集血液检测生理生化指标;血样和疱疹检测病毒;疱疹组织进行病理检测。结果恒河猴感染后2~5 d出现手、足、口疱疹;动物出现精神沉郁、活动及饮食量减少的情况;体温呈现稽留热曲线图;疱疹液和血样中都可检测到柯萨奇B2病毒;血常规检测出现白细胞减少、单核细胞增加、淋巴细胞数量减少、粒细胞数量增加、嗜酸性细胞增加、嗜碱性细胞减少的情况。血液生化检测发现肝功、肾功、心肌酶都发生了不同程度的升高;疱疹组织病理学显示恒河猴疱疹呈鳞状上皮增厚,表面角化过度,局部坏死伴炎细胞浸润,脓肿形成。结论人柯萨奇B2病毒感染婴猴后出现一系列较为特征的手足口疱疹、临床症状、生理生化、病毒血症等情况,表明经口腔感染方式恒河猴婴猴可以成功构建柯萨奇B2病毒感染的动物模型,建立的相关检测方法和技术是可行的,为后续建立开展恒河猴柯萨奇B2病毒感染模型、发病机制研究、药物及疫苗的评价奠定了实验基础。

关键词：手足口病人柯萨奇B2病毒恒河猴模型口服感染

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轮状病毒结构蛋白VP6的原核表达及其作为检测抗原在病毒检测中的应用

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中国生物制品学杂志 2012年第6期25卷 730-733页

作者：袁静潘小霞滕玉梅姬秋彦文喻玲陈元鼎中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研究与开发重点实验室昆明650118

目的原核表达轮状病毒(Rotavirus,RV)结构蛋白VP6,并初步应用于以VP6为检测抗原检测RV血清抗体的ELISA方法,用于不同型RV免疫后抗体水平的检测。方法提取TB-Chen株RV基因组RNA,采用RT-PCR法扩增VP6基因,插入表达载体pETL中,构建重组表... 详细信息

目的原核表达轮状病毒(Rotavirus,RV)结构蛋白VP6,并初步应用于以VP6为检测抗原检测RV血清抗体的ELISA方法,用于不同型RV免疫后抗体水平的检测。方法提取TB-Chen株RV基因组RNA,采用RT-PCR法扩增VP6基因,插入表达载体pETL中,构建重组表达质粒pET-VP6,转化*** BL21(DE3),表达rVP6。表达的rVP6经纯化后,与TB-Chen株(G2P[4]型)、Wa株(G1P[8]型)和SA11株(G3P[2]型)RV分别免疫豚鼠,制备血清抗体,以SA11株血清抗体,经Western blot鉴定纯化的rVP6,以纯化的rVP6为检测抗原,采用ELISA法检测不同型RV免疫血清抗体。结果重组表达质粒pET-VP6经双酶切和测序鉴定证明构建正确;表达的rVP6相对分子质量约为45 000,表达量占菌体总蛋白的34.7%;纯化的rVP6纯度达90%以上,蛋白浓度为8.304μg/μl,可与豚鼠抗RV SA11株血清抗体发生特异性反应;以纯化的rVP6为检测抗原,可检测TB-Chen、Wa、SA11株和抗rVP6的豚鼠免疫血清抗体。结论成功地在大肠杆菌中表达了rVP6,以具有共同组/亚组抗原特异性的rVP6作为检测抗原,可检测同一组/亚组内不同型的RV血清抗体,为研制以VP6为检测抗原检测RV感染的ELISA试剂盒奠定了基础。

关键词：轮状病毒属病毒结构蛋白质类 VP6 酶联免疫吸附测定

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恒河猴肺中阴沟肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

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中国比较医学杂志 2020年第1期30卷 68-73页

作者：李艳艳禹文海杨凤梅刘权陈丽雄王俊斌马进徐鸿界杨亚平赵远和占龙中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种... 详细信息

目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种在SS琼脂培养基进行培养,培养时间24 h观察细菌生长情况,进行生化鉴定和8种药敏试验。结果菌落呈白色或乳白色、圆形、湿润、不透明,进一步分离培养,经梅里埃微生物生化鉴定,确定该细菌为阴沟肠杆菌,ID:99.9%,T:0.71,ID编码:35074753311;药敏试验表明该菌对氨苄西林,头孢呋辛中等敏感;对诺氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、头孢曲松、头孢哌酮,头孢噻肟敏感。动物实验表明该分离菌对实验小鼠具有致病性。结论该恒河猴肺部感染阴沟肠杆菌,头孢哌酮,头孢噻肟等药物可作为治疗临床用药。

关键词：阴沟肠杆菌恒河猴分离鉴定药敏试验

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候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗免疫小鼠的效果研究

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中国疫苗和免疫 2018年第5期24卷 559-564页

作者：江文文梁疆莉高娜顾琴马艳牟大超史荔孙明波中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

目的观察候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）在小鼠中的免疫原性,为疫苗临床前研究提供依据。方法将候选疫苗分别稀释成5倍、10倍、20倍三组,以相应稀释的无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合... 详细信息

目的观察候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）在小鼠中的免疫原性,为疫苗临床前研究提供依据。方法将候选疫苗分别稀释成5倍、10倍、20倍三组,以相应稀释的无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗（DTaP-IPV/Hib）、无细胞百白破联合疫苗（DTaP）为对照组,每组按0、4、8周3剂免疫程序免疫NIH小鼠（10只/组）,检测各组小鼠每剂免疫后28d的血清百白破组分抗体水平。结果候选疫苗三个组完成3剂次免疫后PT抗体的几何平均浓度（GMC）（IU/mL）分别为2 157.29、2 142.51、2 135.17;FHA抗体GMC分别为10 098.30、10 068.33、9 143.30;PRN抗体GMC分别为1 683.86、1 130.29、193.00;DT抗体几何平均滴度（GMT）（1∶）分别为23.48、22.44、22.44;TT抗体GMT分别为22.31、21.24、21.34。候选疫苗三个组PT、FHA、DT、TT抗体水平均高于两种疫苗对照组或者与其无显著性差异,但PRN抗体水平低于DTaP对照组。结论候选疫苗免疫小鼠具有良好的免疫原性。

关键词：无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗小鼠免疫原性

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2008~2016年国内报道的重症手足口病易发人群Meta分析

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中国生物制品学杂志 2020年第6期33卷 689-694页

作者：冯骁殷琼洲张莹徐兴丽李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的探讨与普通病例相比,重症手足口病的发病是否取决于患者居住于农村、散居、患者为男性、年龄≤3岁等人群特征因素,找出重症手足口病发病的人群特征规律,为重症手足口病易发人群的预防及保护提供参考。方法利用Review Manager 5.3分... 详细信息

目的探讨与普通病例相比,重症手足口病的发病是否取决于患者居住于农村、散居、患者为男性、年龄≤3岁等人群特征因素,找出重症手足口病发病的人群特征规律,为重症手足口病易发人群的预防及保护提供参考。方法利用Review Manager 5.3分析软件对我国不同地区调查的2008~2016年间重症手足口病患者人群特征因素(居住于农村、散居、患者为男性、年龄≤3岁)进行Mantel-Haenszel法二分类变量的Meta分析。结果共纳入符合标准的21篇文献,累计调查307713人,其中重症病例8370人,普通病例299343人。Meta分析显示,患者居住于农村(OR=1.18,95%CI:1.05~1.33)、散居(OR=1.55,95%CI:1.29~1.87)、患者为男性(OR=1.13,95%CI:1.07~1.20)、年龄≤3岁(OR=5.18,95%CI:4.33~6.19)均是重症手足口病发病的影响因素。结论患者居住于农村、散居、患者为男性、年龄≤3岁为重症手足口病发病的影响因素,具有以上特征的人群应成为下一次手足口病大流行时的重点保护对象,以降低重症手足口病的发病率及死亡率。

关键词：重症手足口病病例对照 Meta分析

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