检索结果-内蒙古大学图书馆

中国皮肤性病学杂志 2016年第11期30卷 1172-1174页

作者：苑春雨陈崑北京协和医学院中国医学科学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

婴儿血管瘤是婴儿期最常见的良性肿瘤,临床多见。尽管大多数具有自限性的良性病程,但部分仍有导致严重功能障碍及毁容的风险,需要积极治疗。治疗方法多种多样,传统的治疗方法如糖皮质激素、干扰素、长春新碱、手术、激光等副作用大,并... 详细信息

婴儿血管瘤是婴儿期最常见的良性肿瘤,临床多见。尽管大多数具有自限性的良性病程,但部分仍有导致严重功能障碍及毁容的风险,需要积极治疗。治疗方法多种多样,传统的治疗方法如糖皮质激素、干扰素、长春新碱、手术、激光等副作用大,并非对所有血管瘤都有效。目前β受体阻滞剂以其安全高效的优点成为一线首选药物。

关键词：婴儿血管瘤分类流行病学自然病程 β受体阻滞剂

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不同剂量中波紫外线对HaCaT细胞p62及自噬体形成关键基因Beclin-1、Atg12和Atg3的调控效应研究

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中华皮肤科杂志 2014年第4期47卷 233-236页

作者：金慧陈旭徐松曹蕾黄丹鞠梅陈崑李新宇周之海顾恒天津医科大学总医院皮肤科 300052 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨不同剂量中波紫外线（UVB）照射培养的HaCaT细胞后不同时间点对p62、Beclin-1、Atg12和Atg3蛋白表达水平的调控效应。方法使用4．5、10和50mJ／cm2 UVB照射HaCaT细胞，照射后加入新鲜培养基继续培养4h和12h，同时设相同处理但... 详细信息

目的探讨不同剂量中波紫外线（UVB）照射培养的HaCaT细胞后不同时间点对p62、Beclin-1、Atg12和Atg3蛋白表达水平的调控效应。方法使用4．5、10和50mJ／cm2 UVB照射HaCaT细胞，照射后加入新鲜培养基继续培养4h和12h，同时设相同处理但不照射UVB的细胞为对照细胞。另设观察组，在照射后立即（包括对照细胞），使用含蛋白酶抑制剂E64D（10ug／L）和胃酶抑素（10ug／L）的培养基孵育4h和12h，以阻断对p62的降解。使用Western印迹法测定Hac胛细胞p62、Beclin-1、Atg12和Atg3蛋白的表达水平。结果50mJ／cm2 UVB照射HaCaT细胞后4h，p62表达水平（p62与内参的比值为0．473±0．022）较对照细胞（0．246±0．038）升高（t=15．27，P〈0．05）；阻断溶酶体后，细胞新生p62的水平（0．445±0．035）与阻断溶酶体的对照（0．244±0．016）相比，仍为上调（t=7．62，P〈0．05）。在4．5mJ／cm2 UVB照射细胞后12h，与对照（0．254±0．035）相比，HacaT细胞p62表达上调（0．497±0．047，t=22．89，P〈0．05）；阻断溶酶体后，与阻断溶酶体的对照（0．257±0．025）相比，p62表达水平仍然上调（0．548±0．051，t=17．42，P〈0．05）。4．5mJ／cm2和50mJ／cm2 UVB照射后4h和12h，对照细胞和照射细胞间的Beelin-1、Atg12和Atg3的表达差异均无统计学意义（P〉0．05），阻止溶酶体对白噬体内容物的降解也未能发现Beclin-1、Atg12和Atg3的表达差异（P〉0．05）。结论p62表达在不同剂量UVB照射和照射后不同时间存在差异调控，并且这种调控效应与自噬体形成可能没有生物学联系。

关键词：紫外线角蛋白细胞原癌基因蛋白质类 Beclin-1 Atg12 Atg3

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儿童肛门生殖器疣45例HPV病毒检测分析

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中国皮肤性病学杂志 2018年第12期32卷 1407-1410页

作者：黄丹张小华朱艳顾恒鞠梅陈崑中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

目的检测儿童肛门生殖器疣的HPV病毒基因型。方法门诊收集12岁以下的儿童肛门生殖器疣患者,记录病史及查体,留取皮损处脱落细胞标本,运用PCR-反向点杂交法检测15种高危型别,3种疑似高危型别,10种低危型别和1种皮肤型别。统计患者的一般... 详细信息

目的检测儿童肛门生殖器疣的HPV病毒基因型。方法门诊收集12岁以下的儿童肛门生殖器疣患者,记录病史及查体,留取皮损处脱落细胞标本,运用PCR-反向点杂交法检测15种高危型别,3种疑似高危型别,10种低危型别和1种皮肤型别。统计患者的一般情况、皮损分布和HPV检查结果。结果共收集了45例4个月～12岁的儿童肛门生殖器疣患者,男女分别为12例,23例,男女比例0. 4∶1,年龄中位值4岁,病程4个月。皮损分布在肛周者最多为38例(84. 44%),其次外生殖器8例(17. 78%)。8例(17. 78%)为多部位发病,其余37例(82. 22%)均为单部位发病,单发于肛周者最多为30例(66. 67%)。HPV检测阳性者有24例,阳性率53. 33%,6型感染16例(66. 67%),11型感染4例(16. 67%),7型感染4例(16. 67%),59+6型混合感染1例。HPV6型在性别间分布差异有统计学意义(P=0. 023)。结论本地区儿童肛门生殖器疣HPV感染亚型以低危型6型为主,多为单一型感染,皮肤型感染的比率可能被低估。

关键词：疣生殖器儿童人乳头瘤病毒基因型

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西罗莫司和饥饿处理对人A431细胞自噬水平的影响

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中华皮肤科杂志 2016年第11期49卷 776-780页

作者：张云杨晓雯徐倩倩施辛陈旭李莉徐松黄丹鞠梅陈崑顾恒苏州大学附属第二医院皮肤科 215004 中国医学科学院、北京协和医学院、皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室、理疗科

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫... 详细信息

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后，Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ-氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示，对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值差异无统计学意义（P〉0.05）；20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值较对照组均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示，HeLa细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r=0.869，95%CI：0.807~0.999，P=0.051），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.742，95%CI：-0.982~0.406，P=0.042）；A431细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r=0.837，95%CI：-0.173~0.989，P=0.037），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.684，95%CI：-0.977~0.500，P=0.047）。吖啶橙染色显示，A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750%±0.260%）与EBSS组（32.450%±0.488%）同样高于对照组（15.987%±0.242%，均P 〈0.05）；HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307%±0.715%）和EBSS组（66.097%±1.141%）高于对照组（14.117%±0.295%，均P〈0.05）。结论经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平，GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。

关键词：自噬细胞系肿瘤 HeLa细胞西罗莫司饥饿 A431细胞 GABARAP

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白念珠菌对人THP-1细胞产生白细胞介素6、活化信号分子IκBα的影响

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中华皮肤科杂志 2014年第11期47卷 803-805页

作者：杨海平杜蕾蕾曾荣段志敏沈永年胡素泉刘维达陈青李岷解放军454医院南京210002 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏省血液中心

目的探讨白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞系）分泌白细胞介素6（IL-6）和细胞内信号分子NF-κB抑制蛋白（IκBα）激活的影响.方法实时荧光定量PCR分析105、106 CFU/ml灭活白念珠菌刺激THP-1细胞IL-6 mRNA表达水平变... 详细信息

目的探讨白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞系）分泌白细胞介素6（IL-6）和细胞内信号分子NF-κB抑制蛋白（IκBα）激活的影响.方法实时荧光定量PCR分析105、106 CFU/ml灭活白念珠菌刺激THP-1细胞IL-6 mRNA表达水平变化,酶联免疫吸附法检测IL-6分泌量.免疫印迹法分析白念珠菌体外作用THP-1细胞后不同时间IκBα和磷酸化IκBα的水平.结果 105 CFU/ml白念珠菌刺激THP-1细胞后l、3、6h,IL-6 mRNA水平（2-△△α）分别为1.48±0.06、6.48±0.30、125.34±1.47,刺激3h、6h后明显高于空白对照组（P＜ 0.001）.106 CFU/ml白念珠菌刺激THP-1细胞后1、3、6h,IL-6 mRNA水平分别为2.96±0.35、8.57±1.27、588.10±2.31,与空白对照组比较,P值分别为0.036、0.001、＜0.001.106 CFU/ml白念珠菌刺激THP-1细胞后24 h,IL-6蛋白水平为（924.9±30.13） ng/L,与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜ 0.001）.106 CFU/ml白念珠菌作用THP-1细胞后30 min、60 min,磷酸化IκBα蛋白水平显著升高,而IκB α蛋白水平相应降低.结论人THP-1细胞体外与白念珠菌作用后激活信号分子NF-κB并分泌IL-6,参与抗念珠菌感染固有免疫反应.

关键词：念珠菌白色白血病单核细胞急性白细胞介素6 I—KB蛋白质类 NF—KB

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白念珠菌诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞焦亡的初步研究

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中华皮肤科杂志 2023年第4期56卷 301-308页

作者：杨璐段志敏何艳艳王嘉宁陈青陈旭李岷中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 南京医科大学全球健康中心南京211166 南京大学医学院附属鼓楼医院输血科南京210008

目的探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)焦亡的影响。方法通过活细胞工作站实时观察白念珠菌[感染复数(MOI)=50,下同]体外诱导BMDM后是否发生焦亡;将BMDM分为对照组、白念珠菌组,分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h,... 详细信息

目的探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)焦亡的影响。方法通过活细胞工作站实时观察白念珠菌[感染复数(MOI)=50,下同]体外诱导BMDM后是否发生焦亡;将BMDM分为对照组、白念珠菌组,分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h,实时荧光定量PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18 mRNA表达水平,Western印迹法检测NLRP3、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)的表达及剪切水平。用白念珠菌诱导BMDM不同时间(0、10、15、20及25 h)后,酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-18分泌水平。白念珠菌体外诱导野生型(WT)BMDM及GSDMD敲除(KO)BMDM 15 min,采用流式细胞仪比较WT、GSDMD KO BMDM对白念珠菌的吞噬率;诱导6 h后,采用流式细胞仪及乳酸脱氢酶(LDH)释放法分别检测WT、GSDMD KO BMDM的死亡率。分别设置空白对照组、对照组、样品最大酶活性对照孔组、IL-1β组、白念珠菌组、IL-1β+白念珠菌组,用IL-1β和/或白念珠菌酵母诱导BMDM后用LDH释放法分析WT及GSDMD KO BMDM死亡率。采用非配对t检验、Kruskal-Wallis检验、方差分析等统计学方法进行统计分析。结果白念珠菌体外诱导BMDM后细胞可出现气球样变及出泡现象,证实焦亡发生;与对照组相比,白念珠菌组诱导BMDM 6 h后NLRP3、IL-1β的mRNA表达水平明显升高(t=13.02、17.51,P=或<0.001),而IL-18 mRNA表达水平无明显变化(P=0.486),且白念珠菌诱导可引起炎症小体NLRP3表达增多及Caspase-1、GSDMD剪切。白念珠菌诱导BMDM不同时间(0、10、15、20及25 h)后IL-1β的分泌水平随时间逐渐升高(H=12.90,P=0.012),而IL-18的分泌水平无明显变化(F=0.48,P=0.753),且GSDMD KO组BMDM的IL-1β分泌水平低于WT BMDM组(F=24.22,P=0.008)。白念珠菌体外诱导15 min后,GSDMD KO BMDM[(50.3±1.10)%]对白念珠菌的吞噬率低于WT BMDM[(58.53±1.19)%,t=5.09,P=0.007];白念珠菌体外诱导6 h后,流式细胞仪检测显示GSDMD KO组BMDM的死亡率(38.40%±0.50%)高于WT组BMDM(34.37%±0.52%),t=4.72,P=0.009;LDH检测同样显示GSDMD KO BMDM的死亡率(22.52%±0.18%)高于WT BMDM(12.48%±0.15%),t=42.36,P<0.001;IL-1β预处理后予白念珠菌体外诱导的WT BMDM及GSDMD KO BMDM的细胞死亡率均较单纯白念珠菌诱导组降低(均P<0.001)。结论白念珠菌可诱导BMDM发生焦亡,焦亡的发生可促进IL-1β释放,并通过提高巨噬细胞的免疫活性,降低巨噬细胞死亡率。

关键词：白色念珠菌巨噬细胞焦亡白细胞介素1β 白细胞介素18 Gasdermin D

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miR-21、miR-494对黑素瘤A375细胞凋亡和细胞周期的影响

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中华皮肤科杂志 2013年第10期46卷 719-722页

作者：王焱王震英孙建方陈浩周武庆方方张国成中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 山东大学附属省立医院皮肤科

目的探讨miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞的最佳有效转染浓度及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响。方法取6个浓度梯度的miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞，实时荧光定量PCR法检测相应的miRNA。继而用Cy5标记的miRNA模拟... 详细信息

目的探讨miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞的最佳有效转染浓度及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响。方法取6个浓度梯度的miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞，实时荧光定量PCR法检测相应的miRNA。继而用Cy5标记的miRNA模拟物阴性对照转染A375细胞，荧光显微镜下观察转染效率。用流式细胞仪检测转染后细胞增殖的变化。结果从A375细胞中成功提出miRNA。定量PCR结果显示，当转染物miR-21抑制物浓度为120nmol／L时，转染细胞内有miR-21模拟物最大程度的下调表达，2^-△△Cr值为0．80（0．65～0．92），低于对照组；当miR-494模拟物浓度为250nmol／L时，转染细胞内有miR-494模拟物最大程度的上调，2^-△△Cr值为126．82（111．52～144．22），明显高于对照组；miR-21抑制物转染组与miR-494模拟物转染组G。期细胞比率分别为（61．61±3．25）％、（61．05±3．17）％，高于对照组（P〈0．05）；增殖指数分别为（38．39±3．25）％、（38．95±3．17）％，低于对照组（P〈0．05）；细胞凋亡率分别为（27．74±1．39）％、（34．30±2．35）％，高于对照组（P〈0．01），细胞转染效率达90％以上。结论miR-21抑制物和miR-494模拟物促使肿瘤细胞的G，期阻滞和促进凋亡作用，miR-21可增强A375细胞增殖，有原癌基因样功能；miR-494可抑制A375细胞增殖，有抑癌基因样作用。

关键词：黑色素瘤 miRNA-21 miRNA-494 转染细胞周期细胞凋亡

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番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌COLO16细胞关键信号受体调控研究

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中华皮肤科杂志 2018年第6期51卷 421-424页

作者：毕素云李莉徐松张孟丽顾恒周之海陈旭天津医科大学总医院皮肤性病科 300070 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌细胞系COL016细胞关键信号受体调控的影响。方法COL016细胞分为0（对照组）、5、10、15、20、25μmol／L番茄红素6个处理组，处理24h后进行LDH实验确定对细胞活力的影响。根据LDH分泌量确定细胞死亡... 详细信息

目的探讨番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌细胞系COL016细胞关键信号受体调控的影响。方法COL016细胞分为0（对照组）、5、10、15、20、25μmol／L番茄红素6个处理组，处理24h后进行LDH实验确定对细胞活力的影响。根据LDH分泌量确定细胞死亡水平，选取番茄红素对细胞作用的安全浓度信号受体表达量实验，蛋白免疫印迹检测关键信号受体蛋白表达水平。使用SPSS软件进行单因素方差分析，采用Tukey Multiple Comparison和Brown-Forsythe（B）检验方法。结果5、10、15、20、25μmol／L番茄红素处理COL016细胞24h后，25μmol／L组细胞死亡率和对照组比差异有统计学意义（F=13．116，P〈0．05），选取5、10、20μmol／L三个浓度番茄红素处理COL016细胞24h后，表皮生长因子受体蛋白磷酸化水平降低（P〈0．05），糖皮质激素受体蛋白表达水平升高（P〈0．05），而维A酸受体、雄激素受体、孕激素受体蛋白表达水平变化不显著。5、10、20μmol／L番茄红素处理HaCaT、HEK细胞24h后，HaCaT细胞和人原代角质形成细胞中表皮生长因子受体蛋白磷酸化水平和糖皮质激素受体蛋白表达量差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论番茄红素可降低COL016细胞活力，抑制表皮生长因子受体蛋白活化，上调糖皮质激素受体表达，这种效应可能有肿瘤细胞特异性。

关键词：癌,鳞状细胞细胞系肿瘤受体,表皮生长因子受体,糖皮质激素 COL016细胞番茄红素

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依维莫司与顺铂协同损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞机制的初步研究

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中华皮肤科杂志 2017年第10期50卷 738-741页

作者：丁敏徐松李莉毕素云周之海李岷陈旭顾恒天津医科大学总医院皮肤性病科 300070 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司... 详细信息

目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司、25 μmol/L顺铂、50 nmol/L依维莫司＋ 25 μmol/L顺铂处理细胞组4组。通过Western印迹进行mTOR、Akt、DNA损伤相关信号以及Chk通路分析。结果 50、100、200 nmol/L依维莫司处理COLO-16细胞12、24 h后，mTOR 2448位点和2481位点的磷酸化水平降低，Rictor 1135位点磷酸化水平也降低。然而，下游信号ULK1蛋白的ser757位点的磷酸化水平、P70 S6激酶的thr389位点的磷酸化水平以及PKCα的thr638/641位点磷酸化水平的变化并不显著。依维莫司处理对Akt的总蛋白水平和磷酸化水平无明显影响。顺铂处理COLO-16细胞12、24 h后，Rictor的thr1135位点磷酸化水平和Chk1的ser345位点磷酸化水平明显升高，但依维莫司单独处理无类似效应。当依维莫司与顺铂联合处理后12和24 h，相对于顺铂单独处理的细胞，上调的Chk1和Rictor磷酸化水平受到明显抑制。结论 COLO-16细胞mTOR信号对依维莫司处理敏感，但其下游信号并非同步产生级联反应。依维莫司可能通过抑制检测点激酶1的激活增强顺铂诱导COLO-16细胞死亡，但无加重顺铂所导致的DNA损伤。

关键词：顺铂细胞凋亡 COLO-16细胞依维莫司检测点激酶1

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iTRAQ技术筛选人黑素瘤A375细胞系let-7a靶标蛋白

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中华皮肤科杂志 2016年第5期49卷 342-347页

作者：王焱张倩周晓伟王震英方方孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室皮肤外科南京210042 中国医学科学院中心实验室南京210042 中国医学科学院中心实验室病理科南京210042 山东大学附属省立医院皮肤科

目的同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术在人黑素瘤A375细胞系中筛选let-7a潜在的靶标蛋白，探讨let-7a的抑癌机制。方法100nmol／Llet-7a模拟物及其对照转染A375细胞，提取细胞总蛋白，运用同位素标记的iTRAQ技术分析和鉴定差异表... 详细信息

目的同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术在人黑素瘤A375细胞系中筛选let-7a潜在的靶标蛋白，探讨let-7a的抑癌机制。方法100nmol／Llet-7a模拟物及其对照转染A375细胞，提取细胞总蛋白，运用同位素标记的iTRAQ技术分析和鉴定差异表达的蛋白质，运用生物信息学分析let-7a靶标蛋白及其功能，采用双荧光素酶报告系统验证靶标。结果let-7a模拟物组和对照组相比，质谱共分析鉴定到327个显著差异蛋白，其中表达量上调〉1．2倍的蛋白有151种，下调〈0．8倍的蛋白有176种。下调的176种蛋白中，软件预测到结合靶标有47个，双荧光素酶报告系统验证表明，let-7a模拟物组与对照组相比，HMGA2和THOC2野生型3’UTR比值分别降低64．3％和46．4％。结论iTRAQ技术和生物信息学方法在人黑素瘤A375细胞系中筛选出47个let-7a候选靶标蛋白，其中HMGA2和THOC2分别为let-7a的靶标。

关键词：黑色素瘤细胞系肿瘤微RNAs 蛋白质组学 iTRAQ

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