检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2021年第8期54卷 741-743页

作者：宋歌梁官钊张美洁董嘉琤刘维达中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院真菌科江苏省皮肤病与性病重点分子生物学实验室南京210042

毳毛癣是由皮肤癣菌感染毳毛所致,儿童发病率较高,常感染面部,临床表现为环状或半环状红斑,逐渐向周围扩展蔓延,皮损中央有自愈倾向,边缘有丘疹、丘疱疹隆起于皮面。重症患者炎症反应较重,可见脓疱、糜烂、渗出、脱屑、结痂等。真菌直... 详细信息

毳毛癣是由皮肤癣菌感染毳毛所致,儿童发病率较高,常感染面部,临床表现为环状或半环状红斑,逐渐向周围扩展蔓延,皮损中央有自愈倾向,边缘有丘疹、丘疱疹隆起于皮面。重症患者炎症反应较重,可见脓疱、糜烂、渗出、脱屑、结痂等。真菌直接镜检可见毳毛上菌丝和/或孢子。局部抗真菌治疗无效,需系统抗真菌治疗。由于该疾病的漏诊及误诊率高,故本文对毳毛癣的发病情况、临床特征及诊治策略进行综述,以提高临床医生对该病的认识。

关键词：癣毛发诊断治疗毳毛癣

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miRNA-193b-5p抑制转录调节因子CITED2表达对黑素合成的影响

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中华皮肤科杂志 2023年第1期56卷 29-34页

作者：杨荷丹丁徽方富民郑慧颖张晓丽刘杏葛一平杨寅林彤中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院激光科南京210042 中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的初步探讨miRNA(miR)-193b-5p对黑素合成的影响及可能机制。方法从健康男性包皮环切术后废弃的正常包皮组织中分离培养人原代黑素细胞。分别转染miR-NC模拟物(miR-NC mimics组)和miR-193b-5p模拟物(miR-193b-5p mimics组)至人原代黑... 详细信息

目的初步探讨miRNA(miR)-193b-5p对黑素合成的影响及可能机制。方法从健康男性包皮环切术后废弃的正常包皮组织中分离培养人原代黑素细胞。分别转染miR-NC模拟物(miR-NC mimics组)和miR-193b-5p模拟物(miR-193b-5p mimics组)至人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞,转染48 h时实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-193b-5p的过表达效率,转染72 h时Western印迹检测黑素合成相关蛋白酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子的表达,转染1周时采用氢氧化钠法测定细胞中黑素含量。通过TargetScan网站预测miR-193b-5p的靶基因并采用双荧光素酶报告实验验证,RT-qPCR及Western印迹检测miR-193b-5p过表达后该靶基因mRNA和蛋白表达水平的变化。两组间比较采用两独立样本t检验。结果人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组miR-193b-5p的表达水平均显著高于miR-NC mimics组,t值分别为65.57、22.49,均P<0.001,且miR-193b-5p mimics组黑素含量(0.091±0.007、0.130±0.004)显著低于miR-NC mimics组(0.117±0.002、0.188±0.032),t值分别为5.98、3.24,P值分别<0.01、<0.05。Western印迹检测显示,人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达均显著低于miR-NC mimics组(均P<0.05)。通过TargetScan预测及双荧光素酶报告实验验证,转录调节因子CITED2的3′非翻译区存在miR-193b-5p的结合位点。人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1中上调miR-193b-5p表达后,CITED2 mRNA及蛋白的表达水平均显著低于miR-NC mimics组(均P<0.05)。结论miR-193b-5p过表达可下调黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达,抑制黑素合成,该过程与靶向抑制CITED2的表达有关。

关键词：黑素细胞黑素瘤细胞黑素合成 CITED2 miRNA-193b-5p

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白藜芦醇对中波紫外线照射的人角质形成细胞凋亡及细胞周期的影响

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中华皮肤科杂志 2021年第5期54卷 408-413页

作者：陈虹颖陈旭李莉顾恒中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院理疗科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的探讨白藜芦醇对中波紫外线(UVB)照射后人原代角质形成细胞(HEK)凋亡和细胞周期的影响。方法0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇处理人原代角质形成细胞12 h,分别采用CCK-8、BrdU和LDH法检测白藜芦醇对细胞增殖活性和死亡的影... 详细信息

目的探讨白藜芦醇对中波紫外线(UVB)照射后人原代角质形成细胞(HEK)凋亡和细胞周期的影响。方法0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇处理人原代角质形成细胞12 h,分别采用CCK-8、BrdU和LDH法检测白藜芦醇对细胞增殖活性和死亡的影响。分别采用50 mJ/cm^(2)UVB和100μmol/L白藜芦醇处理HEK细胞,分为正常对照组、白藜芦醇组、UVB组和UVB+白藜芦醇组,采用Western印迹检测凋亡相关蛋白多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)和胱天蛋白酶3(caspase-3)以及细胞周期相关蛋白(cyclin)B1和cyclin E1的表达水平,采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平和细胞周期分布。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇组HEK细胞增殖活性差异有统计学意义(F=46.52,P<0.001),不同浓度组均低于对照组(均P<0.001);100μmol/L白藜芦醇组细胞DNA合成活力(0.761±0.141)低于对照组(2.226±0.141,t=17.92,P<0.001);25、50、100和200μmol/L白藜芦醇组细胞死亡率差异无统计学意义(F=1.938,P>0.05)。UVB和白藜芦醇处理后,4组细胞凋亡率和G1期、G2期、S期的细胞比例以及PARP、caspase-3、cyclin B1、cyclin E1的表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。UVB组细胞凋亡率(24.69%±3.54%)及PARP、caspase-3的剪切水平(2.190±0.349、0.090±0.016)均高于对照组和UVB+白藜芦醇组(4.00%±0.81%、0.926±0.040、0.024±0.019,均P<0.05);UVB组cyclin E1、cyclin B1蛋白水平(0.116±0.017、0.775±0.080)均低于正常对照组,UVB+白藜芦醇组cyclin E1表达水平(0.287±0.047)高于UVB组、cyclin B1表达水平(0.504±0.009)低于UVB组(均P<0.05);UVB组S期细胞比例低于对照组和UVB+白藜芦醇组,G1期、G2期细胞比例均高于UVB+白藜芦醇组(P<0.05)。结论白藜芦醇可以抑制HEK增殖活力,抑制紫外线照射诱导的细胞凋亡,调控细胞周期进程。

关键词：角蛋白细胞紫外线细胞增殖细胞凋亡细胞周期白藜芦醇

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早老蛋白增强子2基因沉默对HaCaT细胞增殖及γ分泌酶表达的影响

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中华皮肤科杂志 2021年第4期54卷 318-324页

作者：李文锐张媛媛贾苇雪何艳艳徐浩翔林麟李诚让中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院皮肤科南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的构建早老蛋白增强子2(PSENEN)基因沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)模型,探究PSENEN基因表达下调对HaCaT细胞增殖以及γ分泌酶表达的影响。方法设计3组靶向PSENEN基因的shRNA序列,与线性化的LV3-pGLV-h1-GFP-puro载体构建慢病毒... 详细信息

目的构建早老蛋白增强子2(PSENEN)基因沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)模型,探究PSENEN基因表达下调对HaCaT细胞增殖以及γ分泌酶表达的影响。方法设计3组靶向PSENEN基因的shRNA序列,与线性化的LV3-pGLV-h1-GFP-puro载体构建慢病毒重组表达质粒,经酶切及测序鉴定后,进行慢病毒的包装、纯化和滴度测定。将HaCaT细胞分为5组进行转染:shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组分别加入含沉默PSENEN基因的shRNA1、shRNA2、shRNA3慢病毒原液,NC组加入含阴性对照shNC慢病毒原液,空白组不加病毒液。转染完成后,荧光显微镜下观察荧光表达,流式细胞仪检测转染效率。CCK8法测定HaCaT细胞增殖活性,实时荧光定量PCR(qPCR)、Western印迹法分别检测PSENEN、呆蛋白(NCT)、早老蛋白1(PS1)、前咽缺陷蛋白1a(APH1a)mRNA、蛋白的相对表达量。统计分析采用重复测量方差分析、单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果倒置荧光显微镜下观察到shRNA1~shRNA3组、NC组均有荧光表达,流式细胞仪示转染效率均达98%以上。qPCR、Western印迹法显示,与NC组(1.054±0.272、1.076±0.075)相比,shRNA1、shRNA2、shRNA3组PSENEN mRNA(0.187±0.010、0.163±0.022、0.174±0.009)、蛋白(0.219±0.097、0.208±0.014、0.185±0.062)表达均显著降低(均P<0.001)。CCK8法显示,与NC组相比,shRNA1组细胞增殖活性在0、12、36、48 h均显著增高(均P<0.05),24和60 h差异无统计学意义(均P>0.05);shRNA2、shRNA3组在0、12、24、36、48、60 h细胞增殖水平均显著高于NC组(均P<0.05)。shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组、NC组、空白组间NCT、PS1、APH1a基因mRNA表达差异无统计学意义(F值分别为8.168、4.644、1.981,均P>0.05),mNCT、imNCT、PS1-CTF、APH1a蛋白相对表达差异有统计学意义(F值分别为39.268、5.929、27.842、20.663,均P≤0.01)。与NC组相比,shRNA1、shRNA2、shRNA3组mNCT、PS1-CTF、APH1a蛋白表达均显著降低(均P<0.01),imNCT蛋白表达变化无统计学意义(均P>0.05)。结论成功构建了PSENEN基因沉默的HaCaT细胞模型,PSENEN基因沉默会引起HaCaT细胞增殖活性增强,γ分泌酶其他亚基蛋白含量下降。

关键词：化脓性汗腺炎基因沉默细胞增殖 PSENEN基因 γ分泌酶 HaCaT细胞

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人工智能在临床基因组学中的应用进展

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中国医学科学院学报 2021年第6期43卷 950-955页

作者：刘杏杨寅葛一平林彤中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院(研究所)激光科南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院(研究所)江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

临床基因组学主要研究基因组信息在临床中的应用,包括诊断、治疗决策、预测预后。在传统的算法和技术难以处理基因组学中复杂又庞大的数据时,人工智能的应用带来新的希望。目前,人工智能已参与到临床基因组学的多种任务中,如识别变异、... 详细信息

临床基因组学主要研究基因组信息在临床中的应用,包括诊断、治疗决策、预测预后。在传统的算法和技术难以处理基因组学中复杂又庞大的数据时,人工智能的应用带来新的希望。目前,人工智能已参与到临床基因组学的多种任务中,如识别变异、变异分类、影像-遗传诊断、电子病历-基因诊断、药物作用及不良反应预测等。本文主要综述临床基因组中不同方面的人工智能应用。

关键词：临床基因组学人工智能应用

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耳念珠菌耐药机制的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2021年第6期41卷 484-487页

作者：景丹蕤李筱芳刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所真菌科南京210042 江苏省皮肤病与性病学分子生物学重点实验室南京210042

耳念珠菌是近年来新发现的病原体,不仅鉴别困难、致死率高、易导致院内传播,还可对多种抗真菌药物产生耐药性。但其耐药机制尚不十分明确。本文综述了ERG11的错义突变或过表达、外排泵、TAC1B突变、额外的5号染色体的获得、Hsp90及生物... 详细信息

耳念珠菌是近年来新发现的病原体,不仅鉴别困难、致死率高、易导致院内传播,还可对多种抗真菌药物产生耐药性。但其耐药机制尚不十分明确。本文综述了ERG11的错义突变或过表达、外排泵、TAC1B突变、额外的5号染色体的获得、Hsp90及生物膜形成在耳念珠菌对唑类药物的耐药性产生中所起的作用,以及耳念珠菌对其他药物包括棘白菌素类、多烯类、核苷类似物及丙烯胺类的耐药机制。

关键词：耳念珠菌耐药性研究进展

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氨基酮戊酸孵育不同时间对光动力疗法抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应的影响

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中华皮肤科杂志 2022年第3期55卷 208-212页

作者：刘宇甄曾荣郑娜娜段志敏徐浩翔吴秋菊林彤李岷南京医科大学附属江宁医院皮肤科南京211100 中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院激光科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院真菌科南京210042

目的探讨氨基酮戊酸(ALA)孵育不同时间对ALA光动力疗法(ALA-PDT)抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应的影响。方法在预先放置细胞爬片的24孔和96孔细胞培养板中构建痤疮丙酸杆菌生物膜,使用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察生物膜的形成情况,用... 详细信息

目的探讨氨基酮戊酸(ALA)孵育不同时间对ALA光动力疗法(ALA-PDT)抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应的影响。方法在预先放置细胞爬片的24孔和96孔细胞培养板中构建痤疮丙酸杆菌生物膜,使用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察生物膜的形成情况,用甲基四氮盐(XTT)法观察生物膜生长活力情况。确定生物膜体外模型构建成功后,分成6组,阴性对照组不加入ALA、不照光;ALA组仅予ALA孵育30 min,不照光;LED组仅予照光但不加入ALA;ALA-PDT1组、ALA-PDT2组、ALA-PDT3组分别与ALA孵育15、30、60 min后,接受LED光照射。处理完成后采用CLSM检测生物膜结构、死菌/活菌比例,XTT法观察生物膜生长活力差异。组间差异比较采用单因素方差分析及LSD-t检验。结果CLSM观察显示,痤疮丙酸杆菌生物膜体外模型构建成功。ALA-PDT1组、ALA-PDT2组、ALA-PDT3组死菌/活菌比值分别为0.90±0.16、1.75±0.19和2.57±0.32,均显著高于阴性对照组(0.31±0.01,t值分别为55.56、138.62、74.64,均P<0.001);生物膜活力值分别为0.35±0.02、0.26±0.02和0.18±0.01,均显著低于阴性对照组(0.43±0.00;t值分别为35.66、2.64、110.96,均P<0.001)。CLSM显示,痤疮丙酸杆菌生物膜在ALA-PDT作用下结构被破坏,且随着ALA孵育时间延长,生物膜破坏越严重。结论ALA孵育时间延长会增强ALA-PDT抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应。

关键词：痤疮丙酸杆菌生物膜光化学疗法氨基酮戊酸孵育时间

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烟曲霉对小鼠巨噬细胞自噬流的影响初步研究

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中华皮肤科杂志 2022年第11期55卷 962-968页

作者：杨璐段志敏徐松陈旭李岷中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所真菌科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 南京医科大学全球健康中心南京210029

目的:探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法:灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间(0、0.5、4、12 h),提取细胞蛋白,Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)Ser2481的蛋... 详细信息

目的:探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法:灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间(0、0.5、4、12 h),提取细胞蛋白,Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)Ser2481的蛋白水平。用烟曲霉和溶酶体阻断剂[包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴佛洛霉素-A1(BAF-A1)、氯化铵、氯喹]单独或联合体外诱导小鼠BMDM不同时间(4、12 h)后,Western印迹法检测烟曲霉对新生的LC3-Ⅱ、细胞基础自噬流的影响,并通过共聚焦荧光显微镜观察烟曲霉与LC3、Rubicon(RUN domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich-domain-containing protein)的共定位关系。不同处理时间数据结果采用非匹配t检验分析,烟曲霉孢子和自噬溶酶体阻断剂两因素处理数据结果采用2×2析因分析方法。结果:Western印迹显示,与对照组(0 h组)比较,烟曲霉体外诱导小鼠BMDM 0.5、4、12 h后细胞内LC3-Ⅱ表达逐渐增加,差异均有统计学意义(t值分别为6.58、3.28、3.02,均P<0.05),但各组p-mTOR蛋白水平差异无统计学意义(t值分别为0.441、0.477、0.382,P值分别为0.682、0.660、0.722)。与单独氯喹处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合氯喹处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异均有统计学意义(t=2.13、2.78,均P<0.05)。与单独氯化铵处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合氯化铵处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异均有统计学意义(t=2.92、2.92,均P<0.05)。与单独BAF-A1处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合BAF-A1处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异有统计学意义(t=2.13、2.13,均P<0.05)。与单独E-64d+pepstatin处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合E-64d+pepstatin处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异有统计学意义(t=2.13、2.92,均P<0.05)。用钙荧光白荧光标记的烟曲霉孢子刺激BMDM 8 h后,共聚焦荧光显微镜显示LC3、Rubicon主要包绕于烟曲霉周围,与烟曲霉均有共定位关系。结论:烟曲霉体外诱导可增加小鼠BMDM基础自噬流。

关键词：烟曲霉菌巨噬细胞自噬微管相关蛋白质类微管相关蛋白1轻链3 LC3相关吞噬

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nicastrin基因沉默的斑马鱼模型构建及其色素异常机制的初步研究

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中华皮肤科杂志 2021年第5期54卷 402-407页

作者：李文锐贾苇雪张蕴斌林麟李诚让中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院皮肤科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马鱼黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马鱼nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射... 详细信息

目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马鱼黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马鱼nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射的方式将nct-MO或ctrl-MO与EGFP mRNA共注射入斑马鱼胚胎中,验证nct-MO的沉默效率,观察其表型变化。以野生型斑马鱼作为空白对照组,实时荧光定量PCR检测黑素合成notch信号通路相关基因mitfa、tyr、tyrp1a、tyrp1b、dct、pmela、notch1a、notch1b、hey1 mRNA表达水平的变化。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果斑马鱼受精后8 h,ctrl-MO+EGFP mRNA组斑马鱼胚胎中均有绿色荧光表达,而nct-MO+EGFP mRNA组及空白对照组胚胎均未见绿色荧光。受精后48 h,nct-MO组幼鱼尾部色素沉着区面积占比(0.169±0.083)低于ctrl-MO组(0.258±0.042,t=3.202,P=0.005),且nct-MO组色素分布紊乱。实时荧光定量PCR显示,nct-MO组、ctrl-MO组、空白对照组间pmela、tyrp1a、hey1基因mRNA相对表达量差异有统计学意义(均P<0.05),mitfa、tyr、tyrp1b、dct、notch1a、notch1b mRNA相对表达差异无统计学意义(均P>0.05);nct-MO组pmela、tyrp1a相对表达水平(0.708±0.028、0.558±0.136)低于ctrl-MO组(1.023±0.142、1.016±0.134,均P<0.05)。结论nct基因可能通过调控斑马鱼黑素合成影响黑素细胞生物学功能。

关键词：色素沉着异常化脓性汗腺炎 Nicastrin基因 γ分泌酶斑马鱼模型

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皮肤影像技术在寻常痤疮诊疗中的应用进展

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中华皮肤科杂志 2024年第8期57卷 757-760页

作者：谢媛媛刘宇甄曾荣北京协和医学院中国医学科学院皮肤病医院皮肤病研究所南京210042 南京医科大学附属江宁医院皮肤科南京211100 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院激光科南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

寻常痤疮是一种临床常见的慢性炎症性皮肤疾病。目前的分级及疗效评估方法主要依靠医生的临床经验评价。近年来皮肤影像技术因其无创、实时、客观、可重复等优点在皮肤病的诊治方面得到极大的关注。本文综述多种皮肤影像技术在寻常痤疮... 详细信息

寻常痤疮是一种临床常见的慢性炎症性皮肤疾病。目前的分级及疗效评估方法主要依靠医生的临床经验评价。近年来皮肤影像技术因其无创、实时、客观、可重复等优点在皮肤病的诊治方面得到极大的关注。本文综述多种皮肤影像技术在寻常痤疮研究领域的应用进展,包括皮肤镜、反射式共聚焦显微镜、光学相干断层显像技术、高频超声影像技术等,以期为痤疮的基础研究和临床诊疗的评估方法提供新思路。

关键词：痤疮寻常诊断皮肤镜检查显微镜检查共焦光学相干断层显像技术超声疾病分级疗效评估

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