检索结果-内蒙古大学图书馆

胎儿骨髓间充质干细胞对成人外周血淋巴细胞体外增殖及免疫相关因子表达的影响

中华血液学杂志 2014年第10期35卷 891-896页

作者：李芳吕军强段永娟孙仪李栋汪运山胡晓肖东杰山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心 250013 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室山东大学齐鲁医院低温医学研究室

目的观察胎儿骨髓间充质干细胞（FBM-MSC）对成人外周血淋巴细胞的免疫调控作用及机制.方法取妊娠14～ 22周龄胎儿骨髓,分离、培养FBM-MSC,通过观察细胞形态、细胞表面分子标志及成骨、成脂分化潜能等进行鉴定;将FBM-MSC与用荧光染料C... 详细信息

目的观察胎儿骨髓间充质干细胞（FBM-MSC）对成人外周血淋巴细胞的免疫调控作用及机制.方法取妊娠14～ 22周龄胎儿骨髓,分离、培养FBM-MSC,通过观察细胞形态、细胞表面分子标志及成骨、成脂分化潜能等进行鉴定;将FBM-MSC与用荧光染料CFSE标记的成人外周血单个核细胞,在PHA刺激条件下共培养5d后,用流式细胞术分析刺激活化后的淋巴细胞增殖情况;用ELISA法检测共培养上清中IFN-γ和TNF-α等炎性因子水平;用荧光实时定量RT-PCR法检测IDO、TSG-6和TGF-β等免疫抑制性因子表达水平.结果分离的FBM-MSC表面高表达CD29、CD44、CD49e、CD73、CD90、CD105;低表达CD31、CD34、CD45、HLA-DR,具有分化为脂肪和成骨细胞的能力;与单纯PHA刺激后的淋巴细胞相比较,与FBM-MSC共培养抑制淋巴细胞活化增殖,抑制率可高达96％; FBI-MSC共培养还可抑制淋巴细胞分泌炎性因子,对IFN-γ和TNF-α因子分泌的抑制率分别达90.9％和58.4％;与单独培养的FBM-MSC相比较,共培养后的FBM-MSC中重要的免疫调节因子如IDO、TSG-6和TGF-β的表达水平显著上调.结论胎儿骨髓来源的FBM-MSC对外周血淋巴细胞体外增殖具有明显抑制作用;由MSC分泌的抑制性细胞因子如IDO、TSG-6和TGF-β等在FBM-MSC介导的免疫抑制中可能起重要调节作用.

关键词：胎儿骨髓间质干细胞细胞增殖免疫调节细胞因子类

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氧化型低密度脂蛋白促动脉硬化机制

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国际检验医学杂志 2015年第3期36卷 382-385页

作者：张谦李培华岳文峰冯文利阿拉坦高勒巴彦淖尔市医院检验科内蒙古015000 内蒙古医科大学药学院内蒙古呼和浩特010110 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 内蒙古大学生命科学院内蒙古呼和浩特010021

动脉粥样硬化（As）是一种复杂的炎症性疾病,主要症状为动脉壁增厚变硬,失去弹性及管腔狭小等。其伴随的病理特征主要为动脉某些部位内膜下脂质沉积,伴有平滑肌细胞和纤维基质成分的增殖,并逐步发展形成动脉硬化斑块。研究发现低密度脂... 详细信息

动脉粥样硬化（As）是一种复杂的炎症性疾病,主要症状为动脉壁增厚变硬,失去弹性及管腔狭小等。其伴随的病理特征主要为动脉某些部位内膜下脂质沉积,伴有平滑肌细胞和纤维基质成分的增殖,并逐步发展形成动脉硬化斑块。研究发现低密度脂蛋白（LDL）,尤其是氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）在As的发病形成过程中起着重要作用。

关键词：氧化型低密度脂蛋白溶血磷脂酰胆碱溶血磷脂酸动脉粥样硬化

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真性红细胞增多症基因组学与疾病进展的关系

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天津医药 2014年第6期42卷 517-521页

作者：赵迎旭白洁张磊盛梦瑶石慧邢文杨逢春艾丽梅周圆辽宁医学院附属一院血液科 121001 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室

目的研究135例真性红细胞增多症(PV)患者ASXL1、TET2、IDH1、IDH2、SETBP1、MPL515、JAK2V617F及JAK2 exon12基因突变情况,综合评判PV后骨髓纤维化(PPMF)疾病进展与基因组学特征。方法用Sanger方法对ASXL1、TET2、IDH1、IDH2、SETBP1、MPL515和JAK2 exon12基因进行测序;用巢式等位基因特异性PCR方法检测JAK2V617F突变,对突变患者用Taqman-MGB探针检测突变负荷。分析基因突变与PPMF疾病进展的关系。应用Logis-tic多因素分析分析PV后继发PPMF的危险因素。结果 PV患者ASXL1、TET2、IDH1、IDH2的突变率分别为7.69%(8/104)、5.26%(1/19)、0.08%(1/120)、和0.08%(1/121)。未发现SETBP1、MPL515突变者。PV患者JAK2总突变率为82.22%(111/135)。其中JAK2 exon12突变率为2.96%(4/135)。PPMF患者中,ASXL1突变率高达31.82%(7/22)。ASXL1与JAK2V617F负荷(V617F%)呈正相关(rs=0.298,P=0.002),ASXL1突变组的血红蛋白低于未突变组,白细胞、V617F%≥50%比例、血栓栓塞比例及继发PPMF比例高于未突变组(P<0.05);ASXL1突变、V617F%≥50%和脾大是PPMF的危险因素。结论 ASXL1突变可能通过某种机制促进V617F%增高,参与PPMF的发生和发展。

关键词：真性红细胞增多症基因组学 ASXL1 TET2 IDH1 IDH2 SETBP1 MPL515 JAK2 exon12

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人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞模型的建立

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中国细胞生物学学报 2014年第11期36卷 1470-1477页

作者：高洁杨亦青庞素蕾刘鑫卢利莎雷晓华熊涛王洪涛马峰周家喜中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020 河北北方学院医学检验学院张家口075000 长江大学生命科学学院荆州434025 中国科学院动物研究所北京100101 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所成都610052

人胚胎干细胞具有无限增殖潜能,且能够分化为包括巨核细胞在内的大多数的成熟血细胞。因此,为解决临床治疗血小板来源不足而建立一种由人胚胎干细胞高效分化获得成熟巨核细胞的分化模型具有重要应用前景。该文利用人胚胎干细胞与m AGM-S... 详细信息

人胚胎干细胞具有无限增殖潜能,且能够分化为包括巨核细胞在内的大多数的成熟血细胞。因此,为解决临床治疗血小板来源不足而建立一种由人胚胎干细胞高效分化获得成熟巨核细胞的分化模型具有重要应用前景。该文利用人胚胎干细胞与m AGM-S3基质细胞系共培养进行早期造血前体细胞的定向分化,并在分化第14 d获得大量"卵石样"造血前体细胞(CD43+细胞、CD45+细胞)。将"卵石样"造血前体细胞分离后,用无血清培养基分阶段添加SCF、TPO、IL-6、IL-3、FLt-3、IL-11等细胞因子进行巨核细胞定向诱导分化。结果显示,在分化的第3 d,CD41a+细胞比例可高达48.5%,CD42b+细胞比例可高达30.0%。对分化第6 d的细胞进行Wright-Giemsa染色,可见形态典型的巨核细胞。综上所述,该研究初步建立了一种人胚胎干细胞高效分化为巨核细胞的模型,为体外获得大量巨核细胞奠定了基础。

关键词：人胚胎干细胞 mAGM-S3 造血分化巨核细胞

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脐带间充质干细胞移植对慢性试验性肝损伤的治疗作用

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2014年第4期4卷 20-25页

作者：赵钦军任红英池颖韩之波马凤霞陈芳卢士红韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所(血液病医院)实验血液学国家重点实验室天津300020

目的观察脐带间充质干细胞(UC-MSC)对慢性实验性肝损伤的治疗作用并探讨其分子生物学机理。方法 50只7周龄的NOD/SCID小鼠注射四氯化碳(CCL4)制备慢性肝损伤模型后,应用随机数字表的方法随机将实验小鼠随机分成2组:模型组(25只)和UC-MS... 详细信息

目的观察脐带间充质干细胞(UC-MSC)对慢性实验性肝损伤的治疗作用并探讨其分子生物学机理。方法 50只7周龄的NOD/SCID小鼠注射四氯化碳(CCL4)制备慢性肝损伤模型后,应用随机数字表的方法随机将实验小鼠随机分成2组:模型组(25只)和UC-MSC移植组(25只)。UC-MSC移植组通过尾静脉注射移植1×106 UC-MSC,模型组注射同样体积的PBS。分别于移植后1、2、3和4周收集肝组织,应用免疫组织化学,RT-PCR和Western blot的方法分析细胞移植前后肝组织的病理生理学特征的变化。采用t检验和方差分析进行统计学分析。结果 UC-MSC移植治疗后肝组织表达人肝细胞特异性AFP,Alb,和内皮细胞特异性CD31,Flk-1。细胞移植4周后v WF标记的血管密度明显增加,同时伴有部分的肝功能改善,谷丙转氨酶(ALT)水平从(55.71±11.33)U/L减至(36.75±12.80)U/L(P<0.05)。此外,本研究结果表明UC-MSC分泌几种重要的生长因子HGF,FGF-2,VEGF,和VEGF受体通过旁分泌的途径发挥肝组织修复的功能。结论在CCL4诱导的慢性肝损伤模型肝组织,人UC-MSC可以分化成肝细胞样细胞和内皮细胞样细胞,同时旁分泌多种细胞生长因子修复损伤的肝细胞,并伴有肝功能的改善。认为UCMSC移植或许成为将来肝脏损伤疾病一个重要的治疗选择。

关键词：脐带间充质干细胞肝损伤肝细胞细胞移植

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胎盘来源细胞与母血、脐血细胞的嵌合

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中国组织工程研究 2014年第45期18卷 7327-7332页

作者：莫峥盛宏霞韩忠朝徐曼田宠张斌陈虎解放军军事医学科学院附属第307医院造血干细胞移植科北京市100071 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖... 详细信息

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖腹产妇的胎盘,灌注法及组织块消化法收集胎盘中细胞;流式细胞仪检测胎盘及脐血中CD34+细胞比例;培养细胞集落,定期观察集落形态并计数;序列特异性引物PCR扩增技术及序列特异性寡核苷酸探针方法检测胎盘、脐血和母亲外周血的HLA类型;短串联重复PCR方法检测胎盘细胞、脐血细胞和母亲外周血细胞的嵌合情况。结果与结论:胎盘中CD34+细胞数量明显优于脐血,且胎盘具有体外多种集落形成能力,集落形成良好,同时胎盘提取细胞中含有母体来源成分。提示胎盘中细胞数量及其基本生物学特性使其有潜力成为临床造血干细胞移植的新来源。

关键词：干细胞培养胎盘造血干细胞细胞集落序列特异性寡核苷酸探针嵌合移植脐血 antigens,CD34

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BD FACSAriaIII流式细胞仪在血液学中的使用分析研究

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中国医学装备 2014年第4期11卷 4-7页

作者：梁昊岳程雪莲杨晚竹王金宏中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的:对BD FACSAriaIII流式细胞仪在应用中出现的故障原因进行分析、研究,为在科研工作中正确使用该仪器提供依据。方法:通过对2012-2013年实验血液学国家重点实验室技术平台BD FACSAriaIII流式细胞仪的使用情况进行统计,对使用过程中... 详细信息

目的:对BD FACSAriaIII流式细胞仪在应用中出现的故障原因进行分析、研究,为在科研工作中正确使用该仪器提供依据。方法:通过对2012-2013年实验血液学国家重点实验室技术平台BD FACSAriaIII流式细胞仪的使用情况进行统计,对使用过程中出现的常见故障和需要由厂商工程师现场解决的故障进行统计,总结出高发故障的原因及解决方法。结果:通过对BD FACSAriaIII流式细胞仪的故障进行分析,为高通量流式细胞分选仪的正确使用提供指导,提高仪器运行的稳定性。结论:正确的使用和良好的维护有助于保证BD FACSAriaIII流式细胞仪的正常运行,从而确保科研工作的顺利进行。

关键词：流式细胞仪工作原理故障分析

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多发性骨髓瘤耐药机制相关研究进展：第55届美国血液学会年会报道

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白血病．淋巴瘤 2014年第3期23卷 133-136页

作者：藏美蓉邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

多发性骨髓瘤是第二大血液系统恶性肿瘤,尽管新型药物层出不穷,但仍不可治愈.耐药是骨髓瘤复发和不可治愈的根源之一.文章就第55届美国血液学会（ASH）年会上有关多发性骨髓瘤耐药机制相关研究进展进行概述.

关键词：多发性骨髓瘤耐药美国血液学会年会

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第三代慢病毒包装系统优化及Rev表达质粒对慢病毒包装效率作用初探

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生物技术通讯 2014年第6期25卷 770-774页

作者：阮峥王文天杨洋段永娟胡晓中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:对目前最为常用的三质粒慢病毒包装系统进行优化,以期明确各质粒表达的病毒成分对提高慢病毒包装效率的重要性。方法:在限定总质粒量为10μg的情况下,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的目的质粒、表达gag/pol、Rev、VSVG的包装质粒按不同... 详细信息

目的:对目前最为常用的三质粒慢病毒包装系统进行优化,以期明确各质粒表达的病毒成分对提高慢病毒包装效率的重要性。方法:在限定总质粒量为10μg的情况下,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的目的质粒、表达gag/pol、Rev、VSVG的包装质粒按不同比例混合,转染293T细胞进行病毒包装,48 h后收集上清用于感染293T及K562细胞,72 h后经流式细胞术检测GFP+阳性细胞比例,分析所获病毒的感染效率。结果:采用不同的质粒混合比例包装的病毒感染效率具有明显差异,其中携带GFP的目的质粒量影响作用最为显著,当目的质粒量从15%(1.5μg)增至35%(3.5μg)时,GFP+293T细胞比例从14.2%升至45.1%,增加了3.2倍。当固定目的质粒量为35%,同时分别将表达gag/pol或Rev的质粒量从15%提高到25%时,改变Rev组的GFP+阳性率提升最明显,为1.5倍;而改变VSVG质粒量在已测试的混合比例中作用不显著。包装病毒感染K562细胞的结果与293T细胞类似。结论:通过对比包装病毒的感染效率,优化了慢病毒包装的混合质粒条件,并成功地应用于感染白血病细胞系;首次发现提高Rev质粒量可以更有效地提高病毒的包装效率,为利用慢病毒表达体系研究多种基因在血液系统中的功能奠定了技术基础。

关键词：慢病毒表达体系包装质粒

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BD Influx流式细胞分选仪参数调试和最佳条件的设定

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中国医学装备 2014年第2期11卷 5-9页

作者：梁昊岳杨晚竹程雪莲纪庆张岘王金宏中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探索BD Influx流式细胞仪分选细胞亚群的调试参数和最佳设定条件。方法:使用两种质控试剂Rainbow Beads和Accudrop Beads作为实验材料,对BD Influx流式细胞仪的针孔、液流、荧光通道、前向角散射光信号、液滴频率、振幅和液滴延迟... 详细信息

目的:探索BD Influx流式细胞仪分选细胞亚群的调试参数和最佳设定条件。方法:使用两种质控试剂Rainbow Beads和Accudrop Beads作为实验材料,对BD Influx流式细胞仪的针孔、液流、荧光通道、前向角散射光信号、液滴频率、振幅和液滴延迟等参数进行优化。结果:使用型号为100μm的喷嘴,在液流聚焦清楚、液柱打入废液收集管的正中央、荧光光斑进入针孔中央且最亮、前向角散射(FSC)光光斑进入针孔中央且最亮、断点最高、液流分叉呈稳定的亮点、振幅为5.20±1.00以及液滴延迟为35.20±2.00等最佳设定条件下,其细胞样本分选纯度可达99%,工作效率可达95%。结论:流式细胞仪分选参数条件的设定,可为获得高纯度、高活性的细胞提供快速调试方法。

关键词：流式细胞术细胞分选分选参数最佳条件

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