检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2013年第2期21卷 451-454页

作者：邢文庞爱明姚剑峰李园石慧盛梦瑶周圆赵迎旭许明江杨逢春中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020 辽宁医学院附属第一医院血液科辽宁锦州121001

骨髓是间充质干细胞(MSC)的重要来源。研究显示,标准密度梯度离心法分离骨髓MSC的效率不高,骨髓小粒是造成该法低效的原因。通过组织块法分离骨髓小粒,再结合标准法,可从单份骨髓标本分离获得更多MSC,然而这种方法费时费力。本研究探求... 详细信息

骨髓是间充质干细胞(MSC)的重要来源。研究显示,标准密度梯度离心法分离骨髓MSC的效率不高,骨髓小粒是造成该法低效的原因。通过组织块法分离骨髓小粒,再结合标准法,可从单份骨髓标本分离获得更多MSC,然而这种方法费时费力。本研究探求分离骨髓MSC更简单、更有效的方法。收集7例正常人骨髓标本,低速离心沉降,用改良组织块法培养漂浮在液面上层骨髓小粒中的MSC,用直接铺种法培养沉降在底层的MSC。然后对MSC进行免疫表型和分化能力鉴定。结果表明:在7例标本中,有3例骨髓小粒漂浮在液面上层,其余骨髓细胞包括部分小粒沉降在底层;漂浮小粒中的MSC可用改良组织块法获得,沉降在底层的MSC可用直接铺种法获得。分离的MSC传代3次后不表达CD45、CD34,表达CD105、CD73、CD44、CD90、CD49e,能向软骨和脂肪细胞分化。结论:以直接铺种法为主、改良组织块培养法为辅,可简单、高效地分离人骨髓中MSC。

关键词：间充质干细胞骨髓直接铺种法改良组织块培养法

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IL-1β促进脐带间充质干细胞的造血支持作用

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中国实验血液学杂志 2013年第4期21卷 1005-1009页

作者：及月茹杨舟鑫李丽娜韩之波池颖韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 暨南大学医学院广东广州510632 中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学技术研究中心天津300457

本研究旨在探讨IL-1β对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)的造血支持的影响。将分离得到的hUC-MSC以2×106接种于75 cm2培养瓶中,贴壁2 h后,加入10 ng/ml IL-1β培养36 h后收集培养上清和细胞。观察有/无IL-1β的条件培养液对CD34+细胞... 详细信息

本研究旨在探讨IL-1β对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)的造血支持的影响。将分离得到的hUC-MSC以2×106接种于75 cm2培养瓶中,贴壁2 h后,加入10 ng/ml IL-1β培养36 h后收集培养上清和细胞。观察有/无IL-1β的条件培养液对CD34+细胞造血支持的影响;real time PCR检测加/不加IL-1βMSC的造血相关因子mRAN的变化;ELISA法检测造血相关因子的差异。结果表明,含有IL-1β的MSC条件培养液能明显增强CD34+细胞集落形成能力,且以粒系和粒-单核集落形成单位为主。IL-1β促进了MSC GM-CSF、G-CSF、IL-6的mRNA的表达,促进GM-CSF、G-CSF、IL-6蛋白自脐带MSC的分泌。结论:IL-1β能够增强MSC的造血支持能力,尤其是向髓系分化的能力。

关键词： IL-1β 人脐带间充质干细胞 CFU

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抑制钠氢交换蛋白下调IL-8表达和促进p38磷酸化

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中国实验血液学杂志 2013年第1期21卷 45-48页

作者：高伟张玉娟张海瑞金薇娜常国强张洪菊马丽蔺亚妮李庆华茹永新庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 潍坊医学院病理生理学教研室山东潍坊261053

我们前期的研究证明,抑制钠氢交换蛋白1(NHE1)可以减少VEGF表达从而抑制K562细胞诱导的血管生成。本研究探讨抑制NHE1后其他可能的血管生成因子变化及相关机制。用NHE1特异性抑制剂卡立泊来德10μmol/L处理K562细胞;蛋白芯片筛选NHE1抑... 详细信息

我们前期的研究证明,抑制钠氢交换蛋白1(NHE1)可以减少VEGF表达从而抑制K562细胞诱导的血管生成。本研究探讨抑制NHE1后其他可能的血管生成因子变化及相关机制。用NHE1特异性抑制剂卡立泊来德10μmol/L处理K562细胞;蛋白芯片筛选NHE1抑制后血管生成因子的表达变化,实时定量PCR验证卡立泊来德处理后白介素-8(IL-8)的表达水平;构建K562稳定干扰NHE1细胞株,实时定量PCR验证干扰NHE1后IL-8的表达变化,Western blot检测卡立泊来德处理后细胞内p38磷酸化水平;p38抑制剂SB203580处理K562细胞,实时定量检测IL-8表达变化。蛋白芯片筛选结果显示,卡立泊来德处理后K562细胞中IL-8表达显著下调;实时定量结果进一步验证了这种抑制效应;卡立泊来德处理后p38磷酸化水平显著上调;卡立泊来德处理后加入SB203580抑制p38,IL-8表达可以部分恢复。结论:抑制NHE1可能通过促进p38磷酸化,下调促血管生成因子IL-8的表达。

关键词：钠氢交换蛋白1 卡立泊来德 K562细胞血管生成因子白介素-8 p38 白血病

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以硼替佐米为基础方案治疗56例伴肾功能损害的多发性骨髓瘤患者疗效分析

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中华血液学杂志 2013年第4期34卷 304-308页

作者：徐燕安刚邓书会隋伟薇冯晓燕李菲郝牧王亚非邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院

目的观察以硼替佐米（Btz）为基础的化疗方案在合并。肾功能不全的多发性骨髓瘤（MM）患者中的疗效及安全性。方法回顾性分析56例伴有肾功能不全且接受以Btz为基础方案化疗的MM患者的临床资料。结果56例患者中位年龄59（30～77）岁，K... 详细信息

目的观察以硼替佐米（Btz）为基础的化疗方案在合并。肾功能不全的多发性骨髓瘤（MM）患者中的疗效及安全性。方法回顾性分析56例伴有肾功能不全且接受以Btz为基础方案化疗的MM患者的临床资料。结果56例患者中位年龄59（30～77）岁，K型22例（39．3％），入型32例（57．1％）；其中IgD型9例（16．1％），轻链型14例（25．0％）。中位内生肌酐清除率（CrCI）为25．33（7．23～59．55）ml／min，轻、中、重度肾功能损害者分别为6、35、15例。34例可判断MM疗效的患者中总体反应率为82．4％，其中完全反应（CR）率32．4％，非常好的部分反应（VGPR）率为17．6％，部分反应（PR）率为26．5％。56例患者肾功能损害的总体反应率为89．3％，其中CR率为62．5％，PR率为14．3％，微小反应（MR）率为12．5％。达最佳肾脏反应的中位时间为25．5（5—240）d。轻度、中度及重度肾功能损害患者的中位总生存及疾病进展时间组问比较差异均无统计学意义。患者的主要不良反应谱与所报道的肾功能正常患者的不良反应谱相似。末梢神经炎发生率高达55．6％，其中10例患者停止Btz使用。结论IgD型及入限制型MM患者肾损害的发生率较高。以Btz为基础的化疗方案对伴有肾功能不全的MM患者高效、安全，同时能够快速逆转其肾功能损害。末梢神经炎是影响Btz应用的主要不良反应。

关键词：多发性骨髓瘤硼替佐米肾损害

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miR-106b～25基因簇增强乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞相关耐药性

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中国药理学通报 2013年第8期29卷 1070-1075页

作者：胡蕴慧盛梦瑶张孝云李双静范冬梅熊冬生周圆中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院乳腺三科天津300060

目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利... 详细信息

目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒性实验、耐药克隆形成实验、细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色对细胞的耐药状况进行评价;通过流式细胞术和实时定量PCR测定P-gp的表达;通过微球体(mammosphere)培养实验及对乙醛脱氢酶(ALDH1)活性的检测评价MCF-7-mirC肿瘤干细胞特性的变化。结果过表达miR-106b～25基因簇能帮助细胞更快脱离由阿霉素引起的细胞衰老状态,促进耐药克隆的生长。但是,miR-106b～25基因簇对P糖蛋白(P-gp)在mRNA和蛋白水平表达均无影响。对ALDH1的检测及mammo-sphere形成实验结果显示,过表达miR-106b～25基因簇能提高MCF-7细胞中肿瘤干细胞的比例。结论 miR-106b～25基因簇对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的调控不依赖于P-gp表达,至少与促进肿瘤干细胞特性有关。

关键词： miR-106b^25 乳腺癌肿瘤干细胞肿瘤耐药细胞衰老 P糖蛋白

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人胎盘底蜕膜间充质干细胞的分离及其生物学特性研究

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 754-759页

作者：韩之波王有为王涛池颖杨舟鑫及月茹孟磊杨萍韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学研究中心天津300457 细胞产品国家工程研究中心天津300457 北京汉氏联合干细胞研究院北京100176

胎盘来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,,MSC)与骨髓间充质干细胞相比,具有来源充足、免疫原性低、病毒污染率较低,且无社会伦理争议等方面的优点,使其具有更好的临床应用前景。胎盘组织不但包括来自母体的绒毛膜组织、羊膜组织... 详细信息

胎盘来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,,MSC)与骨髓间充质干细胞相比,具有来源充足、免疫原性低、病毒污染率较低,且无社会伦理争议等方面的优点,使其具有更好的临床应用前景。胎盘组织不但包括来自母体的绒毛膜组织、羊膜组织,还包括来自母体的底蜕膜组织,但底蜕膜来源间充质干细胞生物学特性还需要进一步研究探讨。我们使用酶消化法分离底蜕膜来源间充质干细胞,通过短串联重复序列分析(STR)检测细胞是否均来源于母体组织,用MTT法检测细胞生长方式,流式细胞仪分析细胞周期和细胞表型,使用不同的诱导分化培养基检测其多向分化的能力。然后将底蜕膜间充质干细胞细胞与植物血凝素刺激的外周血单个核细胞共培养,用酶联免疫吸附试验检测上清γ-干扰素的水平。结果表明:短串联重复序列分析证明所得到的细胞均来源于母体组织,底蜕膜细胞生长呈典型的成纤维细胞形态。细胞表达常见的间充质干细胞表面标记CD90、CD73、CD105、CD44,不表达CD45,CD11b和CD34。在不同的条件培养基培养状态下,细胞均可向成骨、成脂和成软骨方向分化。结论:从胎盘底蜕膜获得的细胞,具有间充质干细胞的基本特征,是底蜕膜间充质干细胞。底蜕膜间充质干细胞能抑制植物血凝素刺激的人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素,这使得底蜕膜间充质干细胞作为一个母亲自体间充质干细胞的重要来源,能安全的用于治疗母亲的免疫系统疾病。

关键词：胎盘底蜕膜间充质干细胞生物学特性免疫抑制

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Survivin小分子抑制剂的计算机虚拟筛选及初步活性研究

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中国药理学通报 2013年第2期29卷 173-178页

作者：张孝云纪庆代晓华姜琳琳熊冬生周圆中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020 天津市口腔医院暨南开大学附属口腔医院实验研究中心天津300041

目的通过计算机虚拟筛选,寻找生存素(survivin)的小分子抑制剂,并对其活性进行初步研究。方法基于sur-vivin与其抑制性配体Smac/Diablo复合物的三维结构,用分子对接的方法对含有149,214个小分子的三维结构数据库进行筛选。通过初步活性... 详细信息

目的通过计算机虚拟筛选,寻找生存素(survivin)的小分子抑制剂,并对其活性进行初步研究。方法基于sur-vivin与其抑制性配体Smac/Diablo复合物的三维结构,用分子对接的方法对含有149,214个小分子的三维结构数据库进行筛选。通过初步活性测定确定活性较高的化合物,进一步研究其对凋亡,细胞周期及活性氧产生的影响。利用分子图像学方法分析化合物与survivin之间的作用模式。结果通过能量打分并根据结构多样性和类药性原则,最终选择了35个化合物进行初步活性测定,其中有9个化合物显示出明显的抑制活性,3个化合物的半数抑制浓度在30μmol.L-1以下。选择其中活性最高的化合物1-19进行进一步研究,结果显示小剂量的1-19能够促进细胞的早期凋亡,诱导细胞内活性氧产生,导致细胞发生S和G2/M期阻滞。分子图像学分析显示活性最高的1-19能够与survivin配体结合区的71位天门冬氨酸形成两个稳定的氢键。结论通过计算机辅助药物设计、药理活性测试以及分子图像学分析,初步确定了一个针对survivin的全新的先导化合物,为今后survivin小分子抑制剂的研究奠定了基础。

关键词：生存素小分子抑制剂虚拟筛选凋亡药物设计先导化合物

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FIP1L1-PDGFRA阳性慢性嗜酸粒细胞白血病获得伊马替尼耐药的PDGFRA基因T674I突变一例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2013年第2期34卷 159-161页

作者：曲士强王一孙秀娟张悦肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室陕西省人民医院

伊马替尼是FIPlLl-PDGFRA阳性慢性嗜酸粒细胞白血病（CEL）的首选治疗药物^[1]，CEL患者出现获得性伊马替尼耐药迄今文献报道仅有7例”^[2-8]，突变类型只有PDGFRA—T674I和PDGFRA—D842V两种。我们报道国内首例FIPlLl一PDGFRA阳性的CE... 详细信息

伊马替尼是FIPlLl-PDGFRA阳性慢性嗜酸粒细胞白血病（CEL）的首选治疗药物^[1]，CEL患者出现获得性伊马替尼耐药迄今文献报道仅有7例”^[2-8]，突变类型只有PDGFRA—T674I和PDGFRA—D842V两种。我们报道国内首例FIPlLl一PDGFRA阳性的CEL经伊马替尼治疗后PDGFRA—T674I突变致获得性耐药患者，并对相关文献进行了复习。

关键词：慢性嗜酸粒细胞白血病 PDGFRA 获得性耐药文献复习伊马替尼突变类型 FRA基因阳性

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CD151对人脐带来源间充质干细胞生物学特性的影响

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中国病理生理杂志 2013年第4期29卷 701-706页

作者：罗伟峰韩之波杨舟鑫李丽娜及月茹王有为李萡李扬秋韩忠朝暨南大学血液病研究所广东广州510632 中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学技术研究中心天津300457 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨CD151对人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)生物学性状的影响。方法:使用siRNA干扰hUC-MSCs表面CD151,实验分为实验组(siRNA-CD151组)和对照组(siRNA-NC组);流式细胞术检测干扰72 h后hUC-MSCs CD151及其它细胞表型,von Kossa和油红O染色检测体外成骨、成脂诱导分化情况;流式细胞术分析细胞周期变化;real-time PCR检测hUC-MSCs CD151、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、环氧合酶2(cy-clooxygenase 2,COX-2)和吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表达量;ELISA检测hUC-MSCs HGF分泌量。结果:(1)流式细胞术检测发现干扰72 h hUC-MSCs实验组CD151(11.97±2.63 vs95.66±1.56;P<0.01)和CD105(93.66±0.21 vs 83.37±0.71;P<0.05)较对照组显著降低;real-time PCR检测hUC-MSCs CD151 mRNA变化和流式结果一致。(2)给予siRNA-CD151后能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G1期增多,S期减少。(3)实验组hUC-MSCs HGF和TGF-β1表达量低于对照组(P<0.01),而COX-2表达量升高(P<0.05),IDO无明显改变;ELISA检测显示实验组hUC-MSCs HGF分泌量较对照组下降(P<0.01)。结论:体外干扰CD151后hUC-MSCs仍保持干细胞表型,体外成脂诱导分化能力无明显变化,但成骨诱导分化能力、增殖能力和相关免疫调节因子表达发生改变。

关键词： CD151 间充质干细胞 RNA干扰免疫调节

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继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症35例研究

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白血病．淋巴瘤 2013年第5期22卷 267-271页

作者：朱国庆王艳生邹德慧肖志坚中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院临床检测中心实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症（sMGUS）在接受不同治疗的多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率，分析其对患者的治疗反应和长期生存的影响。方法回顾性分析515例MM患者的临床资料及血清免疫固定电泳（IFE）结果，分析sMGU... 详细信息

目的研究继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症（sMGUS）在接受不同治疗的多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率，分析其对患者的治疗反应和长期生存的影响。方法回顾性分析515例MM患者的临床资料及血清免疫固定电泳（IFE）结果，分析sMGUS患者的IFE图谱特征，对sMGUS组和非sMGUS组疗效分布组成进行比较，对2组进行生存曲线分析。结果515例MM患者中含接受自体造血干细胞移植（***）治疗的患者73例，单纯联合化疗患者442例，共发现35例sMGUS，总发生率为6．8％；经***治疗和单纯联合化疗治疗后sMGUS的发生率分别为19．2％（14／73）和4．8％（21／442），二者差异有统计学意义（X。=20．587，P=0．002）；sMGUS组与非sMGUS组在初诊MM时的M蛋白类型分布差异无统计学意义（X2=6．396，P=0．380）；SMGUS组与非sMGUS组完全缓解（CR）率分别为45．7％（16／35）和14．3％（59／480），差异有统计学意义（x。22．961，P〈0．001），2组疗效分布组成经秩和检验分析，差异有统计学意义（P〈0．001）；经Kaplan—Meier法生存曲线分析，sMGUS组的中位生存时间为42个月（5～112个月），非sMGUS组的中位生存时间为14个月（1～120个月），二者差异有统计学意义（P〈0．001），对auto—SCT治疗患者单独分析，经auto—SCT治疗后出现sMGUS的患者，中位生存时间为30．8个月（5～111个月），未出现sMGUS的患者中位生存时间为39．3个月（2．120个月），二者差异有统计学意义（P=0．002）。结论sMGUS的发生可能与免疫重建或经大剂量免疫抑制治疗后的免疫失调有关，MM经auto—SCT治疗后出现sMGUS的概率大于经单纯联合化疗治疗者，同非sMGUS患者相比，sMGUS患者有着更好的疗效和预后，但对于auto—SCT治疗患者，发生sMGUS并非是一个良好的预后因素。

关键词：多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白血症免疫固定电泳非典型免疫固定电泳图谱

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