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中国细胞生物学学报 2018年第1期40卷 132-138页

作者：王永荣刘飞许元富中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

可溶性和脂质状态的磷酸肌醇在真核细胞中广泛存在,它们在细胞的发育和生物学功能中起到重要作用。其中,六磷酸肌醇激酶(inositol hexaphosphate kinases,IP6Ks)是焦磷酸肌醇合成的限速酶,它可以在肌醇环第一位、第三位或第五位已有的... 详细信息

可溶性和脂质状态的磷酸肌醇在真核细胞中广泛存在,它们在细胞的发育和生物学功能中起到重要作用。其中,六磷酸肌醇激酶(inositol hexaphosphate kinases,IP6Ks)是焦磷酸肌醇合成的限速酶,它可以在肌醇环第一位、第三位或第五位已有的磷酸基团上再加一个磷酸基团合成焦磷酸肌醇,例如5-焦磷酸–五磷酸肌醇(5-pyrophosphate inositol pentaphosphate,IP_7、PP-IP_5)和1,3-二焦磷酸肌醇–四磷酸(bis-diphosphoinositol tetrakisphosphate,IP_8、[PP]_2-IP_4)。IP6Ks通过以上过程在DNA修复、染色体重组、细胞死亡、凝血作用、造血调控、免疫调控、癌症进展等方面发挥作用,因而受到越来越多的重视。该文基于近期IP6Ks的相关研究进展,就IP6Ks在细胞功能调控以及疾病治疗中的作用作一综述。

关键词： IP6K 信号通路 IP_7 焦磷酸肌醇

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脓毒症与中性粒细胞的移行异常

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中国细胞生物学学报 2018年第8期40卷 1408-1414页

作者：张存玲刘飞许元富中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

脓毒症是危重病人死亡的主要原因,近年来发病率仍在上升。脓毒症的病理机制是免疫系统功能失调。中性粒细胞是机体重要的免疫细胞,许多研究表明,在脓毒症时中性粒细胞的功能异常会影响患者预后。该文将探讨脓毒症时中性粒细胞的移行异常。

关键词：脓毒症中性粒细胞滚动黏附迁移募集

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中国细胞生物学学报 2018年第9期40卷 1479-1485页

作者：赵慧娟王文天李园魏晓晶杨洋牛琳段永娟胡晓中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

该文旨在研究与遗传性红细胞增多症相关的低氧诱导因子HIF2α基因点突变对人造血干祖细胞红系分化的影响。通过构建人HIF2α基因编码区、携带疾病相关的两个点突变体(M535V和G537R)以及文献中报道的HIF2α基因阳性对照突变(P531A)慢病... 详细信息

该文旨在研究与遗传性红细胞增多症相关的低氧诱导因子HIF2α基因点突变对人造血干祖细胞红系分化的影响。通过构建人HIF2α基因编码区、携带疾病相关的两个点突变体(M535V和G537R)以及文献中报道的HIF2α基因阳性对照突变(P531A)慢病毒表达载体,分别包装病毒并感染人脐血来源的CD34+造血干祖细胞,并进行常氧及5%低氧条件下的红系定向诱导分化培养。利用FACS流式分析比较红系分化进程特征分子CD71和CD235a的表达变化,结合荧光定量PCR检测HIF2α调控的红系分化相关的靶基因表达水平。结果显示,构建的HIF2α及突变体的慢病毒载体经病毒包装后感染K562细胞可在RNA和蛋白水平实现过表达;与对照组相比,感染表达HIF2α基因或其突变体病毒后的脐血CD34+HSPC在常氧及5%O_2条件下诱导红系分化培养的细胞CD71和CD235a的表达动态均无明显改变,但HIF调控的红系分化相关基因EPOR和VEGFA的表达水平有一定升高。综上,在体外红系分化培养体系中,慢病毒介导的HIF2α及突变体的过表达不直接影响造血干祖细胞的红系分化进程,提示疾病相关的HIF2α基因突变造成的红系分化异常增多的细胞内外调控机制需要更进一步的深入研究。

关键词：遗传性红系增多症 HIF2α基因及突变体低氧应答通路体外红系分化 EPO/EPOR

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血小板计数检测在成人慢性原发免疫性血小板减少症利妥昔单抗疗效预测中的价值

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中华血液学杂志 2018年第7期39卷 573-578页

作者：王诗轩聂彦博鞠满凯孙婷李慧媛张冬雷张磊杨仁池中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)、实验血液学国家重点实验室天津300020 南昌大学第一附属医院血液科 330006 天津协和华美医学诊断技术有限公司

目的探讨血小板计数水平在成人慢性原发免疫性血小板减少症（ITP）患者利妥昔单抗疗效预测中的价值。方法回顾性分析2011年1月1日至2014年12月31日期间接受利妥昔单抗治疗（100mg每周1次，连用4次）慢性ITP患者的临床资料，计算利妥昔... 详细信息

目的探讨血小板计数水平在成人慢性原发免疫性血小板减少症（ITP）患者利妥昔单抗疗效预测中的价值。方法回顾性分析2011年1月1日至2014年12月31日期间接受利妥昔单抗治疗（100mg每周1次，连用4次）慢性ITP患者的临床资料，计算利妥昔单抗治疗后不同随访时间截点血小板计数预测疗效的敏感性、特异性和阳性预测值、阴性预测值，并通过ROC曲线下面积得出最佳截断点。结果103例患者纳入研究，男46例，女57例，中位年龄30（18-67）岁。首剂利妥昔单抗后第1、5、7天，成功组（治疗后PLT≥50×10^9／L且未接受其他药物治疗）与无效组（治疗后PLT〈50×10^9／L）中位血小板计数差异均无统计学意义（P〉0．05）；利妥昔单抗治疗后第14天，成功组中位血小板计数高于无效组[41（8-384）×10^9／L对23（0-106）×10^9／L，P=0．003]；在随后的各随访截点，成功组中位血小板计数进一步回升并维持于正常水平，无效组中位血小板计数均低于正常水平。以ROC曲线获得的预测治疗反应的优化界限值血小板计数50×10^9／L为基础，首剂妥昔单抗治疗后第14、30、60天血小板计数能够组成一个预后评估体系。结论利妥昔单抗治疗后第14、30、60天血小板计数能够组成一个疗效预测评估体系，有助于随访和制定治疗计划。

关键词：血小板减少利妥昔单抗血小板计数

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生物活性材料Col-Tgel对人组织干细胞的作用

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中国组织工程研究 2018年第10期22卷 1540-1546页

作者：尹秀秀胡林萍朱才英张孝兵程涛实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液病医院血液学研究所中国医学科学院干细胞医学中心北京协和医学院干细胞与再生医学系中国医学科学院暨北京协和医学院天津市300020

背景:虽然传统的人干细胞二维平面培养体系操作简便,但并不能真正模拟体内的三维生理微环境,不利于进行人干细胞生物学行为研究。目的:为构建一种可为细胞生长增殖提供类似于体内生理环境的三维培养体系,观察生物材料Col-Tgel对人造血... 详细信息

背景:虽然传统的人干细胞二维平面培养体系操作简便,但并不能真正模拟体内的三维生理微环境,不利于进行人干细胞生物学行为研究。目的:为构建一种可为细胞生长增殖提供类似于体内生理环境的三维培养体系,观察生物材料Col-Tgel对人造血干细胞和人间充质干细胞生物活性的影响。方法:(1)体外共培养实验:三维培养组,将绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞与人脐带CD34^+细胞直接接触共培养于生物材料Col-Tgel中;单独培养组,将人脐血CD34^+细胞培养于生物材料Col-Tgel中;二维培养组,将绿色萤光蛋白标记的人间充质干细胞与人脐血CD34^+细胞共培养于transwell小室;对照组,常规培养人脐血CD34^+细胞。培养3 d后,流式细胞仪检测各组CD34^+CD38-CD45RA-CD90^+细胞比例,同时对直接接触培养组进行原位免疫荧光染色;(2)体内移植实验:采用X射线照射NOD/SCID小鼠,照射后24 h分2组治疗,实验组于胫骨骨髓腔移植绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞-生物材料Col-Tgel溶液,对照组移植绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞-PBS溶液,移植3 d后进行移植侧胫骨标本双光子/共聚焦显微镜检测。结果与结论:(1)体外实验:三维培养组CD34^+CD38-CD45RA-CD90^+细胞扩增倍数为二维培养组的2.8倍,说明在生物材料Col-Tgel中培养的间充质干细胞促进了CD34^+CD38-CD45RA-CD90^+细胞的扩增;三维培养组CD34^+CD38-CD45RA-CD90^+细胞扩增倍数较单独培养组增加4.5倍,较对照组增加1.5倍;免疫荧光染色显示,人间充质干细胞与人脐血CD34^+细胞可在生物材料Col-Tgel中存活;(2)体内实验显示,两组均可见存活的人间充质干细胞;(3)结果表明,生物材料Col-Tgel可为人干细胞生长及增殖提供类似于体内微环境的三维体系。

关键词：生物材料 Col-Tgel 干细胞造血干细胞间充质干细胞体外共培养原位免疫荧光染色增殖移植国家自然科学基金水凝胶造血干细胞间质干细胞组织工程

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中国骨髓增生性肿瘤患者生活质量及其影响因素分析

中国骨髓增生性肿瘤患者生活质量及其影响因素分析

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中国病理生理学会第十八届全国实验血液学学术会议

作者：宝梅石大雨石红霞刘晓力段明辉庄俊玲杜新秦玲惠吴函梁蓉王梅芳陈烨李冬云杨威唐古生张伟华匡霞苏伟韩艳秋陈丽梅许霁虹刘卓刚黄健赵春亭佟红艳胡建达陈春燕陈协群肖志坚江倩北京大学人民医院北京大学血液病研究所国家血液系统疾病临床医学研究中心南方医科大学南方医院血液科中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血液内科深圳市第二人民医院河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院首都医科大学宣武医院血液科空军军医大学西京医院血液科山西医科大学第二医院血液科首都医科大学附属北京安贞医院血液科北京中医药大学东直门医院中国医科大学附属盛京医院血液科海军军医大学第一附属医院(上海长海医院)血液科中国人民解放军血液病研究所山西医科大学第一医院血液科开封市中心医院血液科北京中医药大学东方医院内蒙古医科大学附属医院血液内科西安交通大学第一附属医院血液内科齐齐哈尔市第一医院血液科浙江大学医学院附属第四医院血液内科青岛大学附属医院血液科浙江大学医学院附属第一医院血液科福建医科大学附属协和医院血液内科山东大学齐鲁医院血液科西北大学医学院中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心

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造血干细胞生物学及临床应用研究概况

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中国细胞生物学学报 2018年第S01期40卷 2237-2248页

作者：郝莎董芳胡林萍程涛实验血液学国家重点实验室中国医学科学院血液病医院(血液学研究所)中国医学科学院干细胞医学中心北京协和医学院实验血液学国家重点实验室天津300020

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)是一类具有自我更新(self-renewal)和多向分化潜能(multi-lineage differentiation)的造血组织干细胞,通过定向分化产生各系造血祖细胞(如淋系祖细胞和髓系祖细胞等),再大量增殖分化为各种成熟... 详细信息

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)是一类具有自我更新(self-renewal)和多向分化潜能(multi-lineage differentiation)的造血组织干细胞,通过定向分化产生各系造血祖细胞(如淋系祖细胞和髓系祖细胞等),再大量增殖分化为各种成熟的功能性血细胞,从而维持整个机体的稳态造血。HSC是发现最早、研究历史最长、临床应用最为有效且广泛的一类重要的成体组织干细胞。造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)可以治愈某些血液系统及非血液系统疾病,至今已经历了60余年的发展,是最经典和成熟的干细胞临床应用方案。因此,HSC的研究和应用奠定了干细胞生物学和再生医学的发展。近些年,随着相关基础科学和新技术的发展,一方面为HSC成为基因工程和组织工程的种子细胞提供了更为丰富的理论依据和技术支持,进而进一步拓展其临床应用;另一方面,对HSC生理功能调控及机制的研究也将继续为其他干细胞研究领域提供一个良好的范式。该文就HSC的生物学特性、HSCT的发展、临床应用现状、存在问题及发展前景作一综述。

关键词：造血干细胞自我更新多向分化造血干细胞移植

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急性B淋巴细胞白血病REH细胞对雷帕霉素敏感性与mTOR通路激活的关系

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中华实用诊断与治疗杂志 2019年第12期33卷 1145-1149页

作者：吴文齐刘超陈晓燕段永娟郑佳睿张英驰竺晓凡中国医学科学院北京协和医学院血液病医院中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心儿童血液病诊疗中心天津300020 天津医科大学基础医学院天津300070

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl... 详细信息

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl2-sg1、CRISPR-Cas9-nprl2-sg2、CRISPR-Cas9-nprl2-sg3感染REH细胞(分别为REH-nprl2-sg1、REH-nprl2-sg2和REH-nprl2-sg3细胞),感染72 h后采用1 mg/L的嘌呤霉素处理72 h,提取细胞DNA进行PCR,进行一代测序,测序结果为杂峰的是感染成功细胞(REH-nprl2-sg1)(敲除组)。REH细胞感染不含sgRNA的CRISPR-Cas9质粒空载体为对照组。采用实时定量PCR检测2组细胞nprl2 mRNA表达水平,采用CCK8法检测2组细胞培养第1~7天细胞活性,计算细胞增殖倍数;2组分别加入0.1、1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素,培养72 h后检测细胞活性,比较雷帕霉素对2组细胞的半数抑制浓度。结果敲除组细胞nprl2 mRNA相对表达量(0.0123±0.0027)低于对照组(0.8330±0.0708)(P<0.05);敲除组第5~7天细胞增殖倍数(15.134±0.312、20.589±0.436、37.595±0.917)高于对照组(13.690±0.106、17.920±0.291、18.817±0.217)(P<0.05),第1~4天与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素处理后,敲除组细胞活性(0.806±0.001、0.478±0.013、0.323±0.002、0.274±0.008、0.279±0.003)较对照组(1.000±0.011、0.711±0.045、0.538±0.034、0.432±0.019、0.403±0.025)明显降低(P<0.05),敲除组雷帕霉素对细胞半数抑制浓度(0.48 nmol/L)小于对照组(2.07 nmol/L)。结论敲除nprl2后的REH细胞对雷帕霉素的敏感性明显提高,在伴有mTOR通路突变的急性B淋巴细胞白血病患者中联合使用雷帕霉素可能有较好治疗效果。

关键词：急性淋巴细胞白血病 CRISPR-Cas9 npr 12 mTOR

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新发和完全缓解的重型再生障碍性贫血间microRNA差异表达谱（英文）

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中国实验血液学杂志 2018年第1期26卷 213-218页

作者：邵英起董红宇葛美丽张峰施均李星鑫黄金波黄振东张静聂能郑以州中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 首都医科大学教学医院北京石景山医院北京100043 中国科学院北京基因组研究所北京100101

检测miRNA在新发与完全缓解SAA患者中的表达差异及预测其靶基因。方法:用miRNA芯片方法检测初发和完全缓解(CR)SAA患者骨髓单个核细胞中miRNA表达谱。结果:完全缓解SAA患者与初发SAA患者相比,上调miRNA为35个,下调miRNA为37个。此外,通... 详细信息

检测miRNA在新发与完全缓解SAA患者中的表达差异及预测其靶基因。方法:用miRNA芯片方法检测初发和完全缓解(CR)SAA患者骨髓单个核细胞中miRNA表达谱。结果:完全缓解SAA患者与初发SAA患者相比,上调miRNA为35个,下调miRNA为37个。此外,通过预测差异表达的miRNA靶点发现,其靶点与T细胞受体信号通路和细胞黏附分子相关。结论:某些miRNA可能与SAA患者发病机制相关。

关键词：重型再生障碍性贫血微小RNA 免疫抑制治疗

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造血干细胞代谢调控机制的研究进展

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 917-921页

作者：张雅文程辉程涛中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院干细胞医学中心天津300020 北京协和医学院干细胞与再生医学系天津300020 肿瘤医学协同创新中心天津300020

造血干细胞是一类具有自我更新和多向分化为各种血细胞潜能的一类干细胞,是目前研究最为透彻、临床应用最为成熟的成体干细胞。造血干细胞的功能与其代谢调控密切相关,其代谢状态主要表现为:居住在骨髓低氧微环境中,依赖糖酵解进行能量... 详细信息

造血干细胞是一类具有自我更新和多向分化为各种血细胞潜能的一类干细胞,是目前研究最为透彻、临床应用最为成熟的成体干细胞。造血干细胞的功能与其代谢调控密切相关,其代谢状态主要表现为:居住在骨髓低氧微环境中,依赖糖酵解进行能量代谢,保持低活性氧水平;Hif-1、FoxO3、ATM、PTPMT1等蛋白维持造血干细胞处于低氧状态,并使其免受活性氧损伤;此外,糖代谢相关酶、谷氨酰胺、脂肪酸氧化、嘌呤、氨基酸代谢等也在造血干细胞代谢调控中起到了重要作用。本文就造血干细胞代谢调控机制的研究进展进行综述,重点叙述氧化代谢调控、糖代谢水平、嘌呤代谢和氨基代谢的相关机制。

关键词：造血干细胞代谢调控机制低氧微环境

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