检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2015年第19期19卷 2986-2992页

作者：韩丽鑫韩之波耿洁王斌严淑玲毛爱斌韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020 细胞产品国家工程研究中心天津市300457

背景:已有临床前和临床研究资料表明,间充质干细胞预防和治疗异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病、自身免疫性疾病以及糖尿病等具有显著疗效。但间充质干细胞植入后是否会促进体内肿瘤生长是其临床应用安全性的一个重要体现,目前这... 详细信息

背景:已有临床前和临床研究资料表明,间充质干细胞预防和治疗异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病、自身免疫性疾病以及糖尿病等具有显著疗效。但间充质干细胞植入后是否会促进体内肿瘤生长是其临床应用安全性的一个重要体现,目前这部分内容研究尚少。目的:观察脐带间充质干细胞对人乳腺癌细胞MCF-7荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响。方法:随机抽取BALB/c裸鼠8只作为正常对照组,随机抽取乳腺癌细胞系MCF-7裸鼠分为4组,每组8只,分别为模型对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。3个剂量组尾静脉注射脐带来源的间充质干细胞,分别为4×104、2×105和1×106个,共给予2次,间隔2周;正常对照组和模型对照组注射生理盐水。实验观察周期为6周。结果与结论:模型对照组肿瘤体积呈持续增长趋势,观察结束后各剂量组与同期模型对照组动物相比,脐带间充质干细胞有抑制肿瘤体积及质量的趋势,但差异无显著性意义,病理组织学结果显示中高剂量组各有1只动物肺脏可见转移瘤。结果表明脐带间充质干细胞不促进MCF-7裸鼠肿瘤的生长,但可促进MCF-7裸鼠转移瘤的形成。

关键词：脐带间质干细胞移植乳腺肿瘤小鼠,裸干细胞脐带脐血干细胞脐带间充质干细胞 MCF-7 裸鼠转移瘤

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新药对分子遗传学异常的多发性骨髓瘤患者预后的影响

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白血病．淋巴瘤 2015年第2期24卷 122-125页

作者：熊文婕邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院淋巴瘤诊疗中心实验血液学国家重点实验室天津300020

多发性骨髓瘤（MM）是一种异质性疾病，常伴随多种分子遗传学异常，如lq21扩增，t（4；14）、17p缺失等。这些分子遗传学异常的出现常提示预后不良。随着沙利度胺、来那度胺及硼替佐米等新药的广泛使用，MM的生存得剑硅著提高。目前许... 详细信息

多发性骨髓瘤（MM）是一种异质性疾病，常伴随多种分子遗传学异常，如lq21扩增，t（4；14）、17p缺失等。这些分子遗传学异常的出现常提示预后不良。随着沙利度胺、来那度胺及硼替佐米等新药的广泛使用，MM的生存得剑硅著提高。目前许多研究显示部分新药能克服或至少部分克服某些分子遗传学异常对预后的不良影响，但这些新药对分子遗传学异常的影响仍存在较大的争议。文章通过对近些年来新药对分子遗传学异常MM患者的预后影响作一综述，以期为临床治疗提供帮助。

关键词：多发性骨髓瘤分子遗传学异常新药

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真性红细胞增多症诱导性多能干细胞株的建立

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中国细胞生物学学报 2015年第5期37卷 648-654页

作者：汪文君邢文白洁刘淑平许静纪光臻袁卫平张孝兵程涛周圆杨逢春中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室干细胞医学中心天津300020

诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cell,i PSC)技术在疾病研究和临床应用上具有广阔的前景。JAK2V617F是骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN),如真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)患者携带的一种重要突变。该研究采用非整合型质粒重编程携带JAK2V617F突变的PV患者外周血来源的单个核细胞,诱导生成携带JAK2V617F突变的i PSC。结果表明,通过这种途径形成的i PSC系可稳定传代,多能性基因表达水平与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)类似,可稳定地在体内分化形成三胚层结构并携带不同负荷的JAK2V617F突变。这为研究JAK2V617F在PV中的发病机制、药物筛选开发及基因靶向治疗提供了一个重要的实验模型。

关键词：诱导多能干细胞重编程真性红细胞增多症 JAK2V617F

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造血干/祖细胞TET2催化活性抑制血液肿瘤生成的作用

造血干/祖细胞TET2催化活性抑制血液肿瘤生成的作用

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中华医学会第14次全国血液学学术会议

作者：王金焕刘琳李荣周园汪小敏袁卫平张翼鷟赵智刚天津医科大学肿瘤医院血液肿瘤科国家肿瘤临床医学研究中心天津市"肿瘤防治"重点实验室天津市 300060 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市 300060

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人脐带组织间充质干细胞对小鼠肿瘤的趋化作用

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山东医药 2015年第21期55卷 1-3,9页

作者：房敬超张晓龙张晴曹蕾姜爱娜李茜协和干细胞基因工程有限公司天津300384 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的观察人脐带组织间充质干细胞(MSCs)对小鼠B系恶性淋巴瘤和肝癌的趋化作用。方法通过酶切、连接等方法构建p Lenti-f Luc慢病毒表达载体,利用293T细胞包装慢病毒颗粒,并感染人脐带组织华通氏胶来源的MSCs(WJ-MSCs),使其表达萤火虫荧... 详细信息

目的观察人脐带组织间充质干细胞(MSCs)对小鼠B系恶性淋巴瘤和肝癌的趋化作用。方法通过酶切、连接等方法构建p Lenti-f Luc慢病毒表达载体,利用293T细胞包装慢病毒颗粒,并感染人脐带组织华通氏胶来源的MSCs(WJ-MSCs),使其表达萤火虫荧光素酶(f Luc)。分别于NOD/SCID小鼠中建立BJAB淋巴瘤细胞皮下移植模型及BALB/c裸鼠中建立Hep G2肝癌原位移植瘤模型,经尾静脉将MSCs-f Luc注射至荷瘤小鼠体内,采用体内生物发光成像系统观察MSCs-f Luc向肿瘤部位的迁移情况。结果成功构建慢病毒表达载体p Lenti-f Luc,且经慢病毒感染可在WJ-MSCs中稳定表达。成功建立BJAB淋巴瘤细胞皮下移植瘤模型,MSCs-f Luc经小鼠尾静脉注射24 h后选择性地定位于肿瘤部位。成功建立BALB/c裸鼠的Hep G2肝癌皮下原位移植瘤模型,MSCs-f Luc经尾静脉注射2 d后迁移并聚集于肝脏。结论 WJ-MSCs具有向小鼠淋巴瘤和肝癌归巢的能力,此为以MSCs为载体的肿瘤靶向治疗提供了实验基础。

关键词：淋巴瘤肝肿瘤间充质干细胞生物发光成像趋化作用小鼠

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慢性嗜中性粒细胞白血病:新基因突变对诊断及治疗选择的影响

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临床血液学杂志 2015年第6期28卷 930-932页

作者：张悦中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

慢性嗜中性粒细胞白血病（chronic neutrophilic leukemia,CNL）是一种少见的骨髓增殖性肿瘤（MPN）,以往确诊CNL主要依赖于临床表现和形态学,同时排除其他可以引起中性粒细胞增多的因素或疾病。对于临床疑似CNL患者,根据2008年WHO关于... 详细信息

慢性嗜中性粒细胞白血病（chronic neutrophilic leukemia,CNL）是一种少见的骨髓增殖性肿瘤（MPN）,以往确诊CNL主要依赖于临床表现和形态学,同时排除其他可以引起中性粒细胞增多的因素或疾病。对于临床疑似CNL患者,根据2008年WHO关于CNL的诊断标准,仅有51%的确诊率。随着二代测序技术的广泛开展,逐渐发现与CNL密切相关的基因突变,从而为诊断和治疗提供新的靶点。

关键词：慢性嗜中性粒细胞白血病 CSF3R突变

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利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系

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中国细胞生物学学报 2015年第4期37卷 535-541页

作者：卢利莎白杨刘鑫王洪涛高洁杨亦青苏培刘翠翠王钰张磊升熊涛周家喜长江大学生命科学学院荆州434025 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020 河北北方学院医学检验学院张家口075000

CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进... 详细信息

CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进行修复,从而实现基因的敲除、敲入等。MEIS2属于一类高度保守的同源盒转录因子MEIS家族,研究发现,MEIS2广泛参与胚胎的早期发育及肿瘤的发生发展,但其发挥作用的机制目前还不是很清楚。该研究针对MEIS2基因作用的功能域,设计两个靶向MEIS2基因Exon3和Exon8的sg RNA,通过SURVEYOR分析及Western blot检测,确认了所设计sg RNA的有效性。进一步通过细胞分选及Western blot检测筛选出稳定敲除MEIS2基因的HEK293T细胞株。最后,通过序列测定确认MEIS2发生了移码突变。综上所述,该研究利用CRISPR/Cas9技术成功建立了完全敲除MEIS2的HEK293T细胞株,为研究MEIS2的功能和作用机制提供了有效工具。

关键词： MEIS2 CRISPR/Cas9系统基因敲除

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Cas9-sgRNA共质粒系统提高在AAVS1位点的打靶效率

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生物技术通讯 2015年第4期26卷 449-453页

作者：俞珺瑶李晓兰张健萍程涛张孝兵中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:为进一步提高CRISPR/Cas9系统的打靶效率,比较共质粒或双质粒表达Cas9内切酶和小向导RNA(sg RNA)的不同载体设计对其打靶效率的影响。方法:将针对AAVS1位点的2个sg RNA序列分别插入表达Cas9的质粒p Sp Cas9上,再将其构建为Cas9-sg ... 详细信息

目的:为进一步提高CRISPR/Cas9系统的打靶效率,比较共质粒或双质粒表达Cas9内切酶和小向导RNA(sg RNA)的不同载体设计对其打靶效率的影响。方法:将针对AAVS1位点的2个sg RNA序列分别插入表达Cas9的质粒p Sp Cas9上,再将其构建为Cas9-sg RNA二合一的共质粒以及独立表达sg RNA和Cas9的双质粒系统;质粒转染293T细胞后,用T7E1酶切方法检测打靶效率。结果:不经过变性退火的PCR片段也能直接进行T7E1酶切;Cas9-sg RNA共质粒系统的打靶效率显著高于双质粒系统。结论:T7E1酶切方法可去除变性退火步骤,简化了传统的检测方法。采用Cas9-sg RNA共表达的载体设计可显著提高打靶效率。

关键词： CRISPR/Cas9 AAVS1位点 T7E1酶切方法打靶效率

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双特异性抗体在血液肿瘤治疗中的研究进展

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国际输血及血液学杂志 2015年第1期38卷 81-84页

作者：万玉玲王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

免疫治疗作为一种新的肿瘤治疗方法,其基础和临床研究已有大量文献报道.双特异性抗体（BsAb）作为含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体,可诱导效应细胞靶向杀伤肿瘤细胞,具有良好的临床应用前景,如抗CD3/抗CD19 BsAb和抗CD33/抗CD3 BsA... 详细信息

免疫治疗作为一种新的肿瘤治疗方法,其基础和临床研究已有大量文献报道.双特异性抗体（BsAb）作为含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体,可诱导效应细胞靶向杀伤肿瘤细胞,具有良好的临床应用前景,如抗CD3/抗CD19 BsAb和抗CD33/抗CD3 BsAb等,目前已成为免疫治疗血液肿瘤的研究热点之一.笔者拟就基础及临床试验2个方面介绍BsAb在血液肿瘤治疗中的研究进展,旨在进一步探讨BsAb在血液肿瘤的应用潜能.

关键词：抗体,双特异性血液肿瘤免疫疗法

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靶向肿瘤坏死因子β小分子抑制剂的筛选及其功能鉴定

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天津医药 2015年第9期43卷 961-964,I0001页

作者：孙亚薇公海艳曹善楠刘鹏朱海燕耿广锋许元富中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室300020

目的通过计算机虚拟筛选和细胞活性筛选,获得能靶向抑制肿瘤坏死因子β（TNFβ）的细胞毒活性的小分子抑制剂。方法根据TNFβ与肿瘤坏死因子Ⅰ型受体（TNFR1）结合的复合晶体结构,采用计算机虚拟筛选方法初步选择对接结果较好的105个... 详细信息

目的通过计算机虚拟筛选和细胞活性筛选,获得能靶向抑制肿瘤坏死因子β（TNFβ）的细胞毒活性的小分子抑制剂。方法根据TNFβ与肿瘤坏死因子Ⅰ型受体（TNFR1）结合的复合晶体结构,采用计算机虚拟筛选方法初步选择对接结果较好的105个小分子化合物（C1~C105）,并对其进行细胞活性筛选;MTT法检测小分子化合物抑制TNFβ对L929细胞的细胞毒性;流式细胞术测定小分子化合物对TNFβ引起的细胞凋亡的抑制作用;采用碘化丙啶（PI）单染和流式分析技术检测小分子化合物对L929细胞周期的影响;采用Western blot和双转盘激光共聚焦显微镜分析小分子化合物对TNFβ引起的下游Caspase 3活化的抑制作用。结果 C35能有效抑制TNFβ引起的细胞毒作用,且这种抑制作用呈现剂量依赖性（半数抑制浓度=8.19μmol/L）;C35具有较低的细胞毒性,且对L929细胞周期无影响;C35能阻断TNFβ与其受体结合后引起的细胞凋亡通路,显著抑制TNFβ引起的L929细胞凋亡。结论成功筛选到一个TNFβ小分子抑制剂C35,其能阻断TNFβ引起的细胞凋亡通路,高效抑制TNFβ的细胞毒活性。

关键词：淋巴毒素α 受体,肿瘤坏死因子,Ⅰ型细胞凋亡细胞周期肿瘤坏死因子β 小分子抑制剂信号通路

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