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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 539-543页

作者：袁田赵邢力张丽霞李庆华田征唐克晶王迎林冬李巍刘兵城周春林王敏王建祥秘营昌中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄... 详细信息

本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄、性别、白细胞计数、融合基因、危险分层特点,比较IK6阳性组与IK6阴性组患者总生存率、无病生存率的差异。结果表明:在ALL患者中检测到IKZF1基因表达的功能亚型为IK1、IK2/3,功能缺陷亚型主要为IK4、IK6、IK8、IK9;表达IK6亚型患者占B-ALL患者的34.4%,占T-ALL患者的22.2%;B-ALL中IK6阳性组患者BCR/ABL1阳性率及高危组患者比例均高于IK6阴性组(P=0.027,P=0.048),而两组的年龄、性别、白细胞计数无显著性差异,T-ALL中IK6阳性组与IK6阴性组的年龄、性别、白细胞计数、危险分层均无显著性差异,在Ph染色体阴性的B-ALL患者中,IK6阳性组的总生存率和无病生存率均低于IK6阴性组(P=0.009,P=0.002)。结论:在成人ALL中IKZF1基因IK6表达亚型为主要功能缺陷亚型,IK6亚型的表达可作为Ph染色体阴性的B-ALL患者预后危险因素,指导成人ALL治疗。

关键词：急性淋巴细胞白血病 IKZF1基因 IK6亚型

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沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响

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中国实验血液学杂志 2013年第4期21卷 861-865页

作者：张玉娟李华文常国强张洪菊王建蔺亚妮周家喜李庆华庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率... 详细信息

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化。结果表明:THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的表达下调抑制了细胞的增殖能力、集落形成能力并将细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:利用shRNA靶向干扰DOT1L基因的表达,可以有效抑制人急性单核细胞白血病细胞THP-1的增殖。

关键词： DOT1L基因急性单核细胞白血病 THP-1细胞

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伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病二例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2013年第10期34卷 830-833页

作者：宫本法李其辉李巍王迎魏辉王津雨赵邢力林冬李承文刘旭平秘营昌王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病（AML）的临床和实验室特征。方法结合文献分析采用细胞形态学方法诊断为AML-M，而染色体核型为t（11；12）（p15；q13）的2例患者资料。结果患者均为男性，细胞形态学、组织细胞化学... 详细信息

目的探讨伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病（AML）的临床和实验室特征。方法结合文献分析采用细胞形态学方法诊断为AML-M，而染色体核型为t（11；12）（p15；q13）的2例患者资料。结果患者均为男性，细胞形态学、组织细胞化学染色、电镜检查等支持AML-M，诊断，但染色体核型为t（11；12）（p15；q13），不具有典型的t（15；17）（q22；q12）和PML-RARer融合基因，给予维甲酸和亚砷酸治疗无效。结论AML具有高度异质性，应重视细胞、分子遗传学特征在诊断、预后分层和治疗选择中的作用。伴t（11；12）（p15；q13）的AML因临床和分子特征异质性难以归类为“伴重现性细胞遗传学异常的AML”，发病机制尚不明确。

关键词：易位遗传白血病髓样急性治疗

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人类B细胞淋巴瘤耐药细胞株BJAB/ADR的建立及其耐药机制的初步研究

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白血病．淋巴瘤 2014年第3期23卷 144-147页

作者：鲍世琦姜琳琳张晓龙李真真邵晓枫齐怀丰杨雨琪熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 鲁东大学生命科学学院肿瘤免疫研究实验室天津红日金博达生物技术有限公司天津医科大学药学院药学实验室

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多... 详细信息

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多种化疗药物的耐药性并计算耐药指数;提取耐药细胞株RNA,实时定量聚合酶链反应（PCR）法检测相关耐药基因MDR1 mRNA的表达;流式细胞术检测细胞表面P糖蛋白（Pgp）的表达;通过罗丹明外排实验,检测Pgp功能.结果成功建立B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,并在160 ng/ml多柔比星溶液中稳定生长,耐药细胞较敏感细胞生长缓慢,细胞形态无明显变化.MTT检测结果表明BJAB/ADR细胞对多柔比星的耐药指数为43倍,同时对柔红霉素、依托泊苷、高三尖杉酯碱（HHT）及米托蒽醌（MX）也具有一定的耐药性.实时定量PCR结果表明,耐药细胞BJAB/ADR MDRl mRNA明显高于药物敏感细胞BJAB（P＜ 0.01）.流式细胞术检测结果显示,耐药细胞表面Pgp高表达;罗丹明外排实验表明Pgp对多柔比星具有外排功能,使B JAB/ADR细胞获得耐药特性.结论建立了人类B细胞淋巴瘤的耐药细胞株BJAB/ADR,其对多柔比星耐药性稳定,并呈现多药耐药细胞的基本生物学特性,为进一步研究肿瘤多药耐药发生的机制及逆转耐药提供有利的模型.

关键词：细胞系,肿瘤淋巴瘤,B细胞 BJAB ADR细胞 P糖蛋白多柔比星

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先天性纯红细胞再生障碍性贫血斑马鱼模型相关microRNA的组学研究

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发育医学电子杂志 2014年第3期2卷 139-145页

作者：张倩宋斌峰万扬张昭军鲍丙浩谢尚论刘汉芝竺晓凡袁卫平贾海波方向东中国科学院北京基因组研究所中科院基因组学与信息重点实验室北京100101 华中科技大学生命科学与技术学院人类基因组研究中心分子生物物理教育部重点实验室武汉430074 中国医学科学院协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)相关microRNA的表达特征及其调控机制。方法利用morpholino技术建立核糖体蛋白基因Rps19表达不足的DBA斑马鱼模型和Rps19与p53同时表达不足的斑马鱼模型,利用新一代高通量测序(RNA-seq)技术,... 详细信息

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)相关microRNA的表达特征及其调控机制。方法利用morpholino技术建立核糖体蛋白基因Rps19表达不足的DBA斑马鱼模型和Rps19与p53同时表达不足的斑马鱼模型,利用新一代高通量测序(RNA-seq)技术,研究DBA斑马鱼模型的microRNA表达谱的特征及p53在其中的调控作用。结果 Rps19 MO的斑马鱼胚胎的循环血细胞明显减少,且尾部呈现出向腹侧弯曲的异常形态。而在p53敲低之后,斑马鱼的形态异常得到了一定程度的恢复。通过对microRNA表达谱的比较分析发现,在Rps19不足的斑马鱼胚胎中约1/4的microRNA表达量显著偏低,这些异常表达的microRNA可能影响到斑马鱼的正常发育过程。而在p53敲低之后,部分microRNA的表达恢复到正常水平。最终确定了47个在DBA发病过程中可能受p53调控的microRNA。结论 DBA斑马鱼模型的microRNA普遍低表达,其中部分microRNA受到p53的表达水平的调控。

关键词：纯红细胞再生障碍性贫血 microRNA Rps19 p53 RNA-seq 斑马鱼

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诱导性多能干细胞免疫原性的发生机制与干预对策

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中国细胞生物学学报 2013年第4期35卷 410-416页

作者：王娅婕郝莎袁卫平程涛中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

诱导性多能干细胞(iPSC)技术为再生医学开辟了一条广阔而富有前景的新途径。但近期对于自体来源的iPSC及其分化细胞免疫原性的研究结果存在争议,因此研究影响iPSC免疫原性的因素、机体对其可能的免疫排斥及相关免疫耐受机制是未来实现i... 详细信息

诱导性多能干细胞(iPSC)技术为再生医学开辟了一条广阔而富有前景的新途径。但近期对于自体来源的iPSC及其分化细胞免疫原性的研究结果存在争议,因此研究影响iPSC免疫原性的因素、机体对其可能的免疫排斥及相关免疫耐受机制是未来实现iPSC成功临床应用的重要基础课题。该文将就诱导性多能干细胞的免疫原性相关研究进展作一综述。

关键词：诱导性多能干细胞(iPSC) 免疫原性免疫耐受再生医学

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内皮细胞微环境对造血干细胞调控的研究现状

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中华血液学杂志 2013年第11期34卷 980-983页

作者：顾欣袁卫平程涛中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院干细胞医学中心天津300020

造血干细胞是造血组织具有自我更新和分化潜能的一类干细胞，它可分化为各种成熟血细胞和免疫细胞。造血干细胞生存在包括成骨细胞、间充质干细胞、神经细胞、脂肪细胞、血窦内皮细胞和血管周围网状细胞在内的被称为“龛”的骨髓微环境... 详细信息

造血干细胞是造血组织具有自我更新和分化潜能的一类干细胞，它可分化为各种成熟血细胞和免疫细胞。造血干细胞生存在包括成骨细胞、间充质干细胞、神经细胞、脂肪细胞、血窦内皮细胞和血管周围网状细胞在内的被称为“龛”的骨髓微环境中。尽管造血干细胞移植是治疗白血病等恶性疾病最有效的手段之一，但在临床患者体内单独移植造血干细胞效率低下，而与骨髓基质细胞共同移植可以使移植效率明显增加，可见骨髓微环境对造血干细胞有重要影响。我们就内皮细胞微环境这一主要骨髓微环境对干细胞功能的调控作用作一综述。

关键词：造血干细胞移植窦内皮细胞细胞微环境细胞调控骨髓微环境间充质干细胞骨髓基质细胞分化潜能

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lp21位点缺失对以沙利度胺为基础治疗的初治多发性骨髓瘤患者的预后意义

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中华血液学杂志 2013年第10期34卷 862-867页

作者：李菲徐燕安刚胡林萍章艳茹李增军袁卫平程涛邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室南昌大学第一附属医院血液科 330006

目的探讨新型遗传学指标lp21位点缺失在多发性骨髓瘤（MM）患者中的缺失率、临床相关性和预后意义。方法以接受沙利度胺为基础治疗的78例初治MM患者为研究对象，以定位于lp21位点的细胞分裂周期基因14A（cell division cycle 14A，CDC ... 详细信息

目的探讨新型遗传学指标lp21位点缺失在多发性骨髓瘤（MM）患者中的缺失率、临床相关性和预后意义。方法以接受沙利度胺为基础治疗的78例初治MM患者为研究对象，以定位于lp21位点的细胞分裂周期基因14A（cell division cycle 14A，CDC l4A）的BAC克隆制备位点特异性荧光探针，采用荧光原位杂交技术检测骨髓CDl38阳性细胞，统计lp21位点的缺失率和缺失细胞比例，并结合患者的临床资料进行预后分析。结果78例MM患者中，男51例，女27例，中位年龄59（42～81）岁。lp21位点缺失患者18例（23．1％），扩增患者4例（5．1％），扩增率明显低于缺失率（P=0.001）。临床相关性分析显示lp21位点缺失和肾损害（肌酐≥177μmol／L，P=0．014））、骨髓浆细胞比例≥0．500（P=0．000）、LDH≥220u／L（P=0．010）和B：微球蛋白≥5．5mg／L（P=-0．022）呈正相关。中位随访时间15．0（1．0～53．5）个月，lp21位点缺失患者中位无进展生存（PFS）和总生存（OS）时间分别为（12．0：62，7）个月和（14．0：63．4）个月，无lp21位点缺失患者中位PFS和OS时间分别为（30．0：68．0）个月和（38．5：61．8）个月，两组比较差异有统计学意义（P值均为0．000）。将lp21位点缺失和影响本组患者PFS和OS的复杂核型、高LDH、肾损害和17p13缺失等因素共同纳入多因素分析，结果显示lp21位点缺失仍然是PFS（HR：3．312，95％CI：1．095-10．017，P=0．034）和OS（HR：4．961，95％CI：1．487～16．552，P=0．009）的独立影响因素。结论lp21位点缺失是对MM患者预后有重要影响的遗传学指标。

关键词：多发性骨髓瘤分子诊断技术原位杂交荧光预后

来源：评论

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应重视我国多发性骨髓瘤的规范诊治及基础研究向临床的转化

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中华血液学杂志 2013年第4期34卷 283-285页

作者：邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

随着对多发性骨髓瘤（MM）发病机制和生物学行为理解的逐渐加深，多种有效的治疗药物进入临床应用，使得MM已经从一种治疗反应率低、不可治愈的肿瘤，变为治疗手段多样、可治疗、可控制的疾病。尤其是蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂的临床... 详细信息

随着对多发性骨髓瘤（MM）发病机制和生物学行为理解的逐渐加深，多种有效的治疗药物进入临床应用，使得MM已经从一种治疗反应率低、不可治愈的肿瘤，变为治疗手段多样、可治疗、可控制的疾病。尤其是蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂的临床应用彻底改变了MM的治疗格局，越来越多的患者可以获得深度缓解，明显延长了生存时间，改善了生存质量。但总体上MM仍然是一种不可治愈的恶性肿瘤，尽管绝大多数初诊和初次复发的MM患者均对化疗非常敏感，可以取得部分缓解（PR）甚至完全缓解（CR），但几乎所有的MM患者均会复发并最终对治疗无效。近年来，MM病理发病机制的研究丰富和提高了MM诊断、预后评估的手段和水平，

关键词：多发性骨髓瘤临床应用规范诊治蛋白酶体抑制剂治疗药物转化完全缓解发病机制

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多发性骨髓瘤的预后分层治疗策略

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中华血液学杂志 2013年第4期34卷 286-287页

作者：邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

多发性骨髓瘤（MM）是一种异质性很强的常见于中老年人群的淋巴系统恶性肿瘤，患者生存期从数月到10余年不等。细胞分子遗传学异常是影响MM预后的最重要因素。细胞分子遗传学的迅速发展、靶向新药和自体造血干细胞移植（ASCT）的广泛应... 详细信息

多发性骨髓瘤（MM）是一种异质性很强的常见于中老年人群的淋巴系统恶性肿瘤，患者生存期从数月到10余年不等。细胞分子遗传学异常是影响MM预后的最重要因素。细胞分子遗传学的迅速发展、靶向新药和自体造血干细胞移植（ASCT）的广泛应用使得MM的预后分层和治疗模式几经演变，基于细胞分子遗传学为基础的新的预后分层模式和治疗策略正日臻形成和完善。随着我国步入老龄化社会，MM发病率呈明显上升趋势，国内MM细胞分子遗传学的发展相对滞后，有必要加强此方面认识，更好地对MM患者实施规范化的预后分层和治疗。

关键词：多发性骨髓瘤分层治疗预后细胞分子遗传学自体造血干细胞移植淋巴系统恶性肿瘤中老年人群遗传学异常

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