检索结果-内蒙古大学图书馆

天津医药 2019年第6期47卷 561-565页

作者：祁麟齐春胜肖波中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所 300020 天津医科大学基础医学院免疫学系

目的在结肠癌细胞SW620中靶向沉默神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)基因以探讨其对肿瘤细胞的失巢凋亡水平的影响。方法构建TrkB慢病毒干扰载体,使用TrkB-shRNA慢病毒感染SW620细胞,利用实时定量PCR和Westernblot法分别检测TrkB基因在... 详细信息

目的在结肠癌细胞SW620中靶向沉默神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)基因以探讨其对肿瘤细胞的失巢凋亡水平的影响。方法构建TrkB慢病毒干扰载体,使用TrkB-shRNA慢病毒感染SW620细胞,利用实时定量PCR和Westernblot法分别检测TrkB基因在mRNA和蛋白水平表达量的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测下调TrkB基因表达后贴壁和悬浮生长状态下细胞失巢凋亡率的变化。结果成功构建TrkB-shRNA慢病毒干扰载体,获得SW620-iTrkB稳定感染细胞系。与SW620-iLuc对照组相比,转染SW620-iTrkB细胞中TrkB基因的mRNA和蛋白相对表达水平均降低(P<0.05)。不同生长状态和不同转染质粒转染均对SW620-iTrkB细胞的失巢凋亡水平有影响,存在交互效应(P<0.05)。与贴壁状态相比,悬浮状态下SW620-iLuc组和SW620-iTrkB组细胞凋亡率均明显上升(P<0.05);在悬浮状态下,SW620-iTrkB组细胞凋亡率明显高于SW620-iLuc组(P<0.05)。结论慢病毒载体介导的TrkB-shRNA能在结肠癌细胞SW620中产生特异性的基因沉默效应,显著增加细胞的失巢凋亡水平。

关键词：受体蛋白质酪氨酸激酶类失巢凋亡基因沉默肿瘤转移 shRNA

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跨膜型抗CD3单链抗体介导淋巴细胞体外特异性杀伤AFP阳性肝癌细胞活性观察

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山东医药 2020年第2期60卷 1-5页

作者：宋月雯袁向飞熊梦裳林芳珍卢杨熊冬生张砚君范冬梅张晴中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所天津300020 国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所

目的将跨膜型抗CD3单链抗体(antiCD3scfv)特异性修饰于肝癌细胞膜表面,观察其介导淋巴细胞体外特异性杀伤AFP阳性(AFP+)肝癌细胞的活性。方法培养AFP+人肝癌细胞HepG2、Huh-7和AFP阴性(AFP-)正常人肝细胞HL-7702、人乳腺癌细胞MCF-7,以... 详细信息

目的将跨膜型抗CD3单链抗体(antiCD3scfv)特异性修饰于肝癌细胞膜表面,观察其介导淋巴细胞体外特异性杀伤AFP阳性(AFP+)肝癌细胞的活性。方法培养AFP+人肝癌细胞HepG2、Huh-7和AFP阴性(AFP-)正常人肝细胞HL-7702、人乳腺癌细胞MCF-7,以正常人外周血单个核细胞(PBMC)作为效应细胞;取HepG2细胞,分别感染含人AFP启动子(hAFPp)操控CD3scfv的腺病毒(AdCD3scfv)、AdTrack对照腺病毒,加入PBMC,分别采用显微镜、活细胞工作站监测HepG2靶细胞与PBMC结合情况和相互作用;取HepG2、Huh-7、HL-7702和MCF-7细胞,分别感染AdCD3scfv、AdTrack及PBS,加入PBMC,采用CytoToX96非放射性细胞毒方法定量检测淋巴细胞对不同靶细胞的杀伤水平,流式细胞仪检测PBMC活化表面标志分子CD69、CD25,ELISA法检测免疫细胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ。结果感染AdCD3scfv的HepG2细胞表面表达antiCD3scfv分子并与PBMC表面CD3分子结合,使PBMC聚集于HepG2细胞周围,15 h后几乎所有HepG2细胞漂起或消失;感染AdTrack的HepG2细胞不与PBMC结合,形态无明显变化。与PBMC共培养12 h,与感染AdTrack、PBS的AFP+细胞比较,感染AdCD3scfv的细胞死亡率增高,细胞中CD69、CD25及上清液IL-2、IFN-γ、TNF-α表达增加(P均<0.05);感染AdTrack、PBS的各类细胞上述指标均无明显变化,且PBMC对AFP-细胞的杀伤作用有限。结论跨膜型antiCD3scfv分子可绕过抗原表达或主要组织相容性抗原的局限,直接介导淋巴细胞特异性杀伤AFP+肝癌细胞。

关键词：肝癌跨模型抗CD3单链抗体免疫治疗淋巴细胞甲胎蛋白

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猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白在替代供者移植治疗重型再生障碍性贫血患者中的疗效及安全性

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中华血液学杂志 2018年第1期39卷 22-27页

作者：陈欣魏嘉璘黄勇姜尔烈马巧玲翟卫华何祎张荣莉杨栋林姚剑峰张桂新冯四洲韩明哲中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

目的比较预处理方案含猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白(pALG)或兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rATG)替代供者异基因造血干细胞移植(***)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)患者的疗效及安全性。方法回顾性分析2006年1月至2016年11月46例接受ADallo—HSCT... 详细信息

目的比较预处理方案含猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白(pALG)或兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(rATG)替代供者异基因造血干细胞移植(***)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)患者的疗效及安全性。方法回顾性分析2006年1月至2016年11月46例接受ADallo—HSCTSAA患者的临床资料,按预处理方案包含rATG或pALG分为两组,比较两组植入率、移植相关并发症发生率及转归。结果rATG组30例患者均获得粒细胞植入,27例患者获得血小板植入。pALG组16例患者粒细胞及血小板均植入。两组患者在移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)(P=0.475)、Ⅲ~Ⅳ度aGVHD(P=0.876)、慢性移植物抗宿主病(cGVHD)(P=0.309)、广泛型cGvHD(P=0.687)、移植物排斥(GR)(P=0.928)、血流感染(P=0.443)、侵袭性真菌病(P=0.829)、巨细胞病毒血症(P=0.095)发生率方面差异均无统计学意义。rATG组中位随访14(2~102)个月,预期5年总生存率为(75.1±8.2)%;pALG组中位随访23(4~63)个月,预期5年总生存率为(53.6±13.3)%,差异无统计学意义(P=0.190)。结论SAA患者行ADallo-HSCT,预处理方案应用pALG可取得与rATG相近疗效,且并不增加GVHD、GR及感染等移植后并发症的发生率。

关键词：贫血,再生障碍性,重型造血干细胞移植替代供者猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白

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移植前血清细胞因子水平对重型再生障碍性贫血患者异基因造血干细胞移植疗效的影响研究

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中国实验血液学杂志 2018年第2期26卷 502-507页

作者：王钊施圆圆杨欣张苏东张利宁杨栋林何祎张荣莉姜尔烈魏嘉璘冯四洲韩明哲中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

目的:探讨重型再生障碍性贫血(SAA)患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α水平对预后的影响。方法:本研究共纳入117例SAA接受allo-HSCT的患者,回顾性分析患者总体生存率(OS)、移植物抗宿主病(GVHD)发生率、... 详细信息

目的:探讨重型再生障碍性贫血(SAA)患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α水平对预后的影响。方法:本研究共纳入117例SAA接受allo-HSCT的患者,回顾性分析患者总体生存率(OS)、移植物抗宿主病(GVHD)发生率、细胞因子水平与OS及主要移植并发症的关系。结果:本研究纳入的SAA患者包含同胞HLA全相合allo-HSCT 78例(66.7%),非亲缘供者allo-HSCT 12例(10.2%),单倍体相合供者alloHSCT 27例(23.1%)。所有患者5年OS率为76.0%(95%CI:64.4%-87.5%)。a GVHD累积发生率为49.6%(95%CI:40.4%-58.8%);c GVHD累积发生率为31.6%(95%CI:23.1%-40.2%)。接受同胞HLA全相合allo-HSCT的患者,其5年OS率明显优于替代供者(82.3%±6.6%vs 61.3%±11.7%)(P<0.05)。HLA匹配程度、供者年龄、移植后巨细胞病毒/EB病毒(CMV/EBV)血症是影响a GVHD发生的重要因素。移植前血清IL-6增高的患者,移植后血小板植入较快(14.6±1.8 vs 18.3±2.6 d)(P=0.05);血清TNF-α增高的患者,移植后CMV/EBV血症发生率较低(37.8%±11.1%vs 58.8%±16.8%)(P=0.029)。结论:HLA匹配同胞供者allo-HSCT是SAA患者有效治疗手段;供者选择仍然是影响预后的重要因素。移植前血清IL-6和TNF-α水平增高可能预示allo-HSCT后患者血小板植入加快,CM V/EBV血症发生率减低。

关键词：再生障碍性贫血造血干细胞移植血清细胞因子移植物抗宿主病

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异基因造血干细胞移植治疗成人FLT3-ITD阳性急性髓系白血病40例远期疗效分析

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中华血液学杂志 2018年第8期39卷 634-640页

作者：梁晨姜尔烈姚剑峰何祎张荣莉杨栋林马巧玲翟卫华黄勇魏嘉璘冯四洲韩明哲中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 天津300020

目的总结异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗成人FLT3-ITD阳性急性髓系白血病（AML）的远期疗效。方法回顾性分析2008年9月至2016年12月于中国医学科学院血液病医院行allo-HSCT的40例FLT3-ITD阳性AML（M3除外）患者临床资料，对移... 详细信息

目的总结异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗成人FLT3-ITD阳性急性髓系白血病（AML）的远期疗效。方法回顾性分析2008年9月至2016年12月于中国医学科学院血液病医院行allo-HSCT的40例FLT3-ITD阳性AML（M3除外）患者临床资料，对移植疗效及预后相关因素进行统计学分析。结果40例FLT3-ITD阳性AML患者，男16例，女24例，中位年龄为39.5（16~54）岁，初诊时WBC中位数为35.0（1.7~185.0）×109/L，移植前化疗中位疗程数为4（2~7）个。移植前第1次完全缓解（CR1）34例，未缓解（NR）6例。同胞全相合移植24例，HLA配型相合无关供者移植7例，单倍型移植9例。患者3年总生存（OS）率为74.3%（95%CI 60.4%~88.2%），无病生存（DFS）率为74.3%（95%CI 60.4%~88.2%）。3年累积复发率为7.5%（95%CI 1.9%~18.4%），累积移植相关死亡率（TRM）为18.2%（95%CI 7.9%~32.0%）。多因素分析结果显示，1个疗程未达CR（HR=4.388，95% CI 1.232~15.637，P=0.023）、发生急性GVHD（HR=5.721，95% CI 1.454~22.518，P=0.013）是影响患者OS的独立预后危险因素。CR1期行allo-HSCT[0对50.0%（95%CI 77.7%~82.9%），P〈0.001]及1个疗程达CR [0对16.7%（95%CI 3.9%~37.3%），P=0.020]患者3年累积复发率分别较NR及1个疗程未达CR患者显著下降。结论allo-HSCT可以改善FLT3-ITD突变阳性AML患者预后，诱导化疗期间1个疗程达CR及CR1期行allo-HSCT患者预后相对较好。

关键词：白血病髓样急性基因 FLT3 造血干细胞移植

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重型／极重型再生障碍性贫血患者红细胞寿命研究

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中华血液学杂志 2018年第2期39卷 137-142页

作者：叶蕾郭洁井丽萍彭广新周康李洋李园李建平樊慧慧宋琳张凤奎张莉中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 天津300020

【摘要】目的研究重型／极重型再生障碍性贫血（SAA／VSAA）患者的红细胞寿命。方法回顾性分析2016年11月至2017年4月128例SAA／VSAA患者临床资料，以同期13例健康志愿者为正常对照。采用测定内源性一氧化碳呼气试验法检测红细胞寿命，... 详细信息

【摘要】目的研究重型／极重型再生障碍性贫血（SAA／VSAA）患者的红细胞寿命。方法回顾性分析2016年11月至2017年4月128例SAA／VSAA患者临床资料，以同期13例健康志愿者为正常对照。采用测定内源性一氧化碳呼气试验法检测红细胞寿命，观察SAA／VSAA患者红细胞寿命是否改变及免疫抑制治疗（IST）对红细胞寿命的影响。结果51例初诊未治SAA／VSAA患者红细胞平均寿命为（50．69±21．43）d，较正常对照者[（111．85±3i．55）d]明显缩短（t=-6．611，P〈0．001）。77例IST组患者红细胞平均寿命为（87．14±39．28）d，其中获得完全治疗反应（CR）、获得治疗反应（HR）、未获治疗反应（NR）患者红细胞平均寿命分别为（106．15±32．12）、（92．00±38．60）、（50．44±21．56）d。获得HR患者红细胞平均寿命较初诊和NR者明显延长（t=7．430，P〈0．001；t=4．846，P=O．002），与正常健康对照者接近（t=-1．743，P=0．085）；获得CR患者红细胞平均寿命与正常对照者差异无统计学意义（t=-0．558，P=0．579）。单因素分析未发现影响初诊SAA／VSAA患者红细胞寿命的因素。获得HR的患者与NR患者相比，血清IL-2受体[4．3（1．2～9．7）×105U／L对6．5（3．7～44．1）×105U／L，Z=-2．733，P=0．006]及IL-6[2．6（2．0～17．7）ng／L对6．1（2．0～14．4）ng／L，z=-2．968，P=0．003]明显减低。初诊组51例患者中38例后续接受IST并评价3个月疗效。采ROC曲线分析治疗前患者红细胞寿命对IST疗效的预测作用，其界值为60d（敏感性和特异性分别为37．5％和86．4％）。9例治疗前红细胞寿命〉60d患者6例获得HR，29例治疗前红细胞寿命≤60d患者10例获得HR，差异无统计学意义（P=0．128）。结论SAA／VSAA患者红细胞寿命缩短，IST后可改善或恢复正常。淋巴细胞因子水平升高可能与SAA／VSAA红细胞寿命缩短有关。

关键词：贫血,再生障碍性红细胞寿命免疫抑制治疗

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降钙素原对合并细菌血流感染急性白血病患者感染转归的预测价值

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 671-677页

作者：顾闰夏魏辉王迎林冬林青松刘兵城周春林刘凯奇王建祥秘营昌中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

目的:探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)对判断合并细菌血流感染急性白血病患者的感染转归的价值。方法:回顾性分析2014年7月至2017年11月于中国医学科学院血液病医院确诊的236例合并细菌血流感染急性白血病患者的临床资料,统计并研究血... 详细信息

目的:探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)对判断合并细菌血流感染急性白血病患者的感染转归的价值。方法:回顾性分析2014年7月至2017年11月于中国医学科学院血液病医院确诊的236例合并细菌血流感染急性白血病患者的临床资料,统计并研究血清PCT浓度与患者发生感染性休克、感染相关死亡和其他严重并发症的相关性。结果:236例患者的中位年龄为40(13-73)岁。其中男性123例(52.1%),女性113例(47.9%)。PCT浓度<0.05、0.05-<0.5、0.5-<2.0、2.0-<10.0和≥10.0 ng/ml各组患者发生感染相关死亡的比例分别为0%,1.4%,13.8%,25.0%和33.3%,发生感染性休克以及其他严重并发症的比例分别为0%,2.1%,13.8%,25.0%和33.3%及6.4%,7.0%,24.1%,41.7%和50.0%,显示随着血清PCT浓度增高而增高,差异有统计学意义(u=2127,P=0.000;u=2234,P=0.000;u=4102,P=0.000)。进一步分析发现,随着PCT浓度增高,患者感染性休克、感染相关死亡及其他严重并发症的累计发生率逐渐增高,且差异有统计学意义(HR=2.887,P=0.000,95%CI:1.960-4.260;HR=3.158,P=0.000,95%CI:2.100-4.740;HR=2.158,P=0.000,95%CI:1.550-3.000),且多因素分析提示PCT浓度增高是患者发生感染性休克及感染相关死亡的独立危险因素(HR=2.517,P=0.000,95%CI:1.520-4.168;HR=2.881,P=0.000,95%CI:1.692-4.904)。结论:合并细菌血流感染的急性白血病患者发生严重感染相关不良反应的比例与血清PCT浓度成正相关,提示血清PCT浓度是预测患者发生感染性休克及感染相关死亡的独立危险因素。降钙素原可以成为合并细菌血流感染急性白血病患者感染预后判断的重要指标。

关键词：急性白血病血流感染降钙素原感染性休克感染相关死亡

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移植前白血病患者HLA区域杂合性缺失对HLA分型的影响

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中国实验血液学杂志 2018年第1期26卷 58-64页

作者：赵佳炜王继英张岩李庆华汝昆王晓静中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

目的:研究移植前白血病患者初诊时期和缓解期HLA区域杂合性缺失(LOH)对HLA分型的影响。方法:用3种HLA基因分型常用的方法(SBT、SSO和SSP方法)分别对1例急性混合细胞白血病(MPAL)患者初诊静脉血样本1(骨髓原始细胞为81.7%)、样本2(骨髓... 详细信息

目的:研究移植前白血病患者初诊时期和缓解期HLA区域杂合性缺失(LOH)对HLA分型的影响。方法:用3种HLA基因分型常用的方法(SBT、SSO和SSP方法)分别对1例急性混合细胞白血病(MPAL)患者初诊静脉血样本1(骨髓原始细胞为81.7%)、样本2(骨髓原始细胞为93.07%)和缓解期静脉血样本3(骨髓原始细胞为<0.01%)进行HLA-A、B、C、DQB1、DRB1基因分型;通过2种DNA混合实验进一步确定SBT方法检测HLA杂合峰的检出阈值和检测HLA分型时对静脉血原始细胞比例的要求。结果:样本1和样本2的HLA-A、B、C、DQB1、DRB1均为纯合位点,其中样本1有些HLA位点的测序背景峰偏高,无法确定位点的具体结果;样本3的5个HLA座位除了C座位外均为杂合位点。DNA混合实验结果表明,用SBT方法检测HLA双等位基因杂合峰的最低检出限为20%;移植前白血病患者采用SBT方法检测HLA分型的要求是静脉血原始细胞<75%,若≥75%,则可能因为原始细胞HLA区域出现LOH,从而导致HLA位点漏检。结论:对于白血病初诊患者,特别是原始细胞≥75%,如果HLA某一位点分型结果为纯合位点,应该再次采集患者缓解期静脉血或者正常体细胞,如口腔黏膜细胞,重新对该位点进行复核,排除HLA区域发生LOH造成假性纯合的可能,以免HLA配型结果发生错误,影响移植供者的选择和最终的移植效果。

关键词： HLA分型杂合性缺失白血病造血干细胞移植

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急性白血病化疗后感染初始体温峰值与粒细胞缺乏持续时间的相关性及其机制

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 665-670页

作者：张潇予翟卫华张荣莉何祎姜尔烈伊马秀夫许元富冯四洲韩明哲中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

目的:探讨急性白血病患者化疗后感染初始体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性及其潜在机制。方法:本研究纳入单中心行巩固化疗的粒缺感染的CR1期急性白血病患者111例,回顾性分析感染初期体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性... 详细信息

目的:探讨急性白血病患者化疗后感染初始体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性及其潜在机制。方法:本研究纳入单中心行巩固化疗的粒缺感染的CR1期急性白血病患者111例,回顾性分析感染初期体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性,以及不同体温峰值患者血清中IL-6水平的差异。建立单细胞体外培养体系及检测体内EdU掺入率,分析IL-6对小鼠造血干/祖细胞的作用。结果:本研究纳入的111例粒细胞缺乏感染患者中,44例患者体温低于38℃,其粒细胞缺乏持续时间9.5±3.69 d;高于38℃的患者(67例),其粒细胞缺乏时间为7.33±4.20 d,2组间具备统计学差异(P=0.006)。EdU检测显示,EdU掺入阳性的造血干/祖细胞增多同时,IL-6水平在不同初始体温峰值的患者中具有显著性差异(P<0.05)。动物实验结果显示,IL-6在体外及体内均可促进小鼠造血干/祖细胞的增殖。结论:对于粒细胞缺乏感染患者,初始体温峰值低于38℃,则化疗后粒细胞缺乏持续时间延长概率增加,其机制可能与促炎症因子促进造血干/祖细胞增殖有关。

关键词：急性白血病粒细胞缺乏感染造血干/祖细胞血清细胞因子

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三阴性血小板增多症的患者特点及靶向基因测序分析

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中国实验血液学杂志 2018年第4期26卷 1137-1145页

作者：鞠满凯付荣凤李慧媛刘晓帆薛峰陈云飞黄月婷张丽艳杨仁池张磊中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所天津300020

背景:原发性血小板增多症是骨髓增殖性肿瘤的一个亚型。以往的研究发现JAK2,CALR和MPL突变与骨髓增殖性肿瘤的发病密切相关。所有这些突变都有助于JAK2/STAT通路的超活化。然而,一小部分原发性血小板增多症患者不存在这样的突变。三阴... 详细信息

背景:原发性血小板增多症是骨髓增殖性肿瘤的一个亚型。以往的研究发现JAK2,CALR和MPL突变与骨髓增殖性肿瘤的发病密切相关。所有这些突变都有助于JAK2/STAT通路的超活化。然而,一小部分原发性血小板增多症患者不存在这样的突变。三阴性原发性血小板增多症形式的发病机制尚不清楚。目的:探讨三阳性血小板增多症的临床特点及相关的突变基因。方法:为了探究与三阴性原发性血小板增多症相关的突变,本研究用二代测序对来自68名患者的样品中的360个基因进行靶向测序。结果:所有患者和所有基因均至少检测到一个错义突变。在筛选数据后,观察到具有10个最高突变计数的基因:FLT3,SH2B3,ASXL1,ADAMTS1,TET2,TP53,EG FR,CUX1,G ATA2和MPL。当只考虑罕见基因突变(即千人基因组项目中亚洲人群频率低于5%)时,发现突变频率最高的基因有TET2(33.82%),SH2B3(29.41%)和ASXL1(23.53%)。本研究发现了一些以前没有报道的突变。虽然需要进一步进行功能验证,但突变频率较高可能表明与原发性血小板增多症发病机制的相关性较高。本研究检测到的一些突变在先前也已有报道,而且在本研究中占有很大的比例。结论:全外显子测序可以提供更准确的基因突变分析,并有助于确定导致原发性血小板增多症发病的突变。

关键词：三阴性血小板增多症基因突变靶向基因测序

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