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E—cadherin在白血病细胞膜表面的表达及与β-catenin细胞膜定位的关系

中华血液学杂志 2008年第9期29卷 592-594页

作者：饶青徐智芳王继英孟继虹唐克晶田征邢海燕王敏王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

目的研究E-cadherin在白血病细胞膜表面的表达并确定与其下游信号分子β-catenin细胞膜定位的关系。方法通过免疫荧光标记、激光共聚焦显微镜观察46例白血病患者和17名正常人骨髓细胞膜表面E-cadherin的表达，并分析其与β-catenin在细... 详细信息

目的研究E-cadherin在白血病细胞膜表面的表达并确定与其下游信号分子β-catenin细胞膜定位的关系。方法通过免疫荧光标记、激光共聚焦显微镜观察46例白血病患者和17名正常人骨髓细胞膜表面E-cadherin的表达，并分析其与β-catenin在细胞内分布的相关性。结果白血病患者E-cadherin表达水平（中位平均荧光强度16．78）显著低于正常人（26．03）；进一步随机选取14份标本测定细胞膜表面E—cadherin的表达及β—catenin的细胞膜分布并分析二者的相关性，结果显示E—cadherin的表达与β-catenin的细胞膜分布明显相关（r=0．74，P=0．002）；5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza—CdR）诱导白血病细胞中E—cadherin表达后，β—catenin在细胞膜的分布增加，而细胞核内的β—catenin定位减少，初步证实E-cadherin表达后可募集β-catenin到细胞膜。结论白血病细胞中E—cadherin表达降低或缺失可引起β＇-catenin从细胞膜释放并进入细胞核，最终可能会引起β—catenin靶基因的转录。

关键词：白血病细胞微环境 E—cadherin β-catenin

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β-catenin特异的RNA干扰对Jurkat和K562细胞的作用

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中国医学科学院学报 2008年第3期30卷 290-295页

作者：麦玉洁邱录贵李增军李新于珍李长虹王亚非李茜中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测... 详细信息

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测β-catenin在干扰后mRNA水平和蛋白水平的表达变化。采用台盼兰拒染法计数,MTT比色法和集落形成能力检测细胞的生长增殖,AnnexinV/PI检测细胞凋亡以及PI染色检测细胞周期。结果与对照组相比,实验组细胞β-catenin的mRNA和蛋白水平的表达均降低。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞增殖抑制率分别为(49.30±9.86)%和(15.10±6.55)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.40±7.56)%和(10.10±6.89)%(P<0.05),实验组细胞生长明显受抑。在Jurkat细胞,实验组和对照组的集落形成率分别为(25.00±5.13)/104细胞和(31.90±5.55)/104细胞(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.33±6.26)/104细胞和(47.33±8.52)/104细胞(P<0.05),实验组细胞集落形成能力明显减弱。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞凋亡率分别为(55.90±2.22)%和(23.50±2.82)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(27.90±15.30)%和(14.90±8.54)%(P>0.05),实验组细胞凋亡率有所增加。在这两种细胞系中均未发现细胞周期的改变。结论β-catenin基因有可能对Jur-kat和K562细胞具有促进细胞生长、增殖,抑制凋亡的作用。

关键词： β-catenin Jurkat细胞系 K562细胞系白血病 RNA干扰

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联合常规实验室检查指标诊断骨髓增生异常综合征的初步研究

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中华血液学杂志 2008年第9期29卷 623-628页

作者：李磷聂玲于明华郑以州张悦徐泽锋郝玉书肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者... 详细信息

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者和86例CAA患者初诊的常规实验室检查资料并进行统计学分析。结果MDS患者血红蛋白，红细胞体积分布宽度一变异系数、未成熟网织细胞比率、血小板计数（BPC）、骨髓原始细胞及早幼粒细胞之和与中性中幼粒细胞及中性晚幼粒细胞之和的比值（RatioG）、原始红细胞及早幼红细胞之和与中幼红细胞及晚幼红细胞之和的比值（RatioE）、巨核细胞计数（Meg）、有核红细胞糖原染色（PAS）阳性率和阳性指数、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（N—ALP）阳性率和阳性指数、血清间接胆红素（IBIL）、乳酸脱氢酶（LDH）、尿酸（UA）、叶酸（FA）、维生素B12（VitB12）、铁蛋白（SF）水平等常规实验室指标与CAA患者比较差异有统计学意义。MDS组患者有染色体核型异常者为74例（48．7％），CAA组患者染色体核型均正常，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。MDS组与CAA组患者均有骨髓干／祖细胞培养生长不良或不生长，均有患者出现外周血T细胞亚群比例改变，两组比较差异无统计学意义。染色体核型异常的74例MDS患者与骨髓活检结果支持CAA诊断的82例患者（CAA组-2）比较，前述差异有统计学意义的指标均仍有统计学差异。7例骨髓低增生性MDS与CAA组-2患者比较，BPC、Meg、骨髓原始粒细胞百分比（MBP）、RatioG、有核红细胞PAS阳性率和阳性指数以及血清FA水平差异有统计学意义。选取各项差异有统计学意义的常规实验室指标进行联合诊断MDS及低增生性MDS特异度〉85％，灵敏度〉70％，正确诊断指数〉0．70。结论联合BPC、RatioG、Meg、有核红PAS阳性率和阳性指数、血清IBIL水平等常规实验室检查指标有助于MDS诊断和低增生性MDS与CAA的鉴别诊断。

关键词：骨髓增生异常综合征低增生性贫血再生障碍性诊断

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免疫抑制治疗对再生障碍性贫血患者骨髓细胞遗传不稳定性的影响

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中华血液学杂志 2008年第11期29卷 728-732页

作者：张丽红王慧君张莉周康杨栋林阎璋松李洪强刘庆国齐军元刘强储榆林张凤奎中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院贫血治疗中心天津300020 中国医学科学院放射学研究所

目的研究强烈免疫抑制治疗（IST）对再生障碍性贫血（AA）患者骨髓细胞遗传不稳定性的影响。方法采用彗星试验检测患者骨髓细胞遗传不稳定性，以彗星尾部DNA（TDNA）百分比、尾长（TL）、尾矩（TM）、Olive尾矩（OTM）和彗星细胞率作为... 详细信息

目的研究强烈免疫抑制治疗（IST）对再生障碍性贫血（AA）患者骨髓细胞遗传不稳定性的影响。方法采用彗星试验检测患者骨髓细胞遗传不稳定性，以彗星尾部DNA（TDNA）百分比、尾长（TL）、尾矩（TM）、Olive尾矩（OTM）和彗星细胞率作为分析参数，分别检测IST前后AA患者骨髓细胞，并与对照组结果比较。结果91例初治AA患者TDNA百分比、TL、TM、OTM、彗星细胞率分别为（5．0±4．0）％、11．3±7．2、1．7±2．0、1．5±1．4、（16．8±13．7）％，明显高于对照组（P值均〈0．05）；58例重型AA（SAA）与33例非重型AA（NSAA）患者彗星试验各项参数比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05），二组患者各彗星试验参数与对照组比较，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。53例SAA患者治疗后3个月TDNA百分比、TL、TM、OTM、彗星细胞率分别为（4．4±3．6）％、10．4±7．5、1．4±1．6、1．3±1．4、（20．2±21．2）％，30例SAA患者治疗后6个月TDNA百分比、TL、TM、OTM、彗星细胞率分别为（3．7±3．3）％、10．0±7．2、1．2±1．8、1．1±1．3、（18．5±19．0）％，结果与58例SAA患者IST前彗星参数比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。结论AA患者骨髓细胞存在遗传不稳定性，IST本身近期并不增加SAA患者细胞遗传不稳定性。提示IST与AA患者发生晚期克隆性血液学异常可能无关。

关键词：贫血再生障碍性彗星试验电泳琼脂凝胶遗传不稳定性免疫抑制治疗

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外周T细胞淋巴瘤的治疗进展

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中华血液学杂志 2008年第10期29卷 718-720页

作者：安刚齐军元邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

外周T细胞淋巴瘤（PTCL）是一组少见的淋巴系统恶性疾病，源于胸腺后成熟T淋巴细胞，其生物学行为和临床表现具有明显的异质性。自然杀伤细胞（NK细胞）的起源与T细胞关系密切，具有某些相似的免疫表型和功能特征，因此NK细胞恶性疾病... 详细信息

外周T细胞淋巴瘤（PTCL）是一组少见的淋巴系统恶性疾病，源于胸腺后成熟T淋巴细胞，其生物学行为和临床表现具有明显的异质性。自然杀伤细胞（NK细胞）的起源与T细胞关系密切，具有某些相似的免疫表型和功能特征，因此NK细胞恶性疾病也包括在PTCL中。PTCL约占所有非霍奇金淋巴瘤（NHL）的10％，但PTCL在NHL中所占的比例存在明显的地区差异，在亚洲比例要高于欧美。

关键词：外周T细胞淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤治疗自然杀伤细胞恶性疾病 NK细胞 T淋巴细胞生物学行为

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中期因子在急性白血病中的表达及其意义

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中华血液学杂志 2008年第8期29卷 544-548页

作者：王洋林冬王东海徐智芳刘家卓刘向荣王建祥王敏中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子... 详细信息

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解（CR）患者及正常人骨髓细胞均有表达。初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者（P〈0．01及P〈0．05）。而正常人与CR患者相比差异无统计学意义。中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病（B—ALL）各亚型（包括pro—B—ALL，common—B—ALL，pre—B—ALL）及各年龄段均有显著升高（P〈0．01），且与T细胞急性淋巴细胞白血病（T—ALL）、急性杂合性白血病及急性髓系白血病（AML）各FAB亚型间差异均有统计学意义（P值均〈0.01）；与正常人相比，M2型患者中期因子表达明显升高（P〈0．01），与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义（P值均〈0．05）；M3患者中期因子表达也较正常人明显升高（P〈0．05），但与除B—ALL和AML—M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义。CD34^＋患者较CD34^-患者中期因子表达显著升高（P〈0．01），AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期因子表达显著升高（P〈0．05）。结论B—ALL、AML—M2和AML—M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高，为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向。

关键词：基因,中期因子白血病聚合酶链反应,实时定量

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骨髓增生异常综合征患者骨髓组织中单圆核巨核细胞与染色体变化的关系

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中华血液学杂志 2008年第6期29卷 416-417页

作者：孙琦陈辉树刘恩彬李占琦杨晴英方立环孙福军中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性获得性恶性疾患，主要见于老年人，其基本临床特征是骨髓组织中造血细胞形态异常和外周血中血细胞减少，其骨髓组织学改变主要包括较幼稚的粒系细胞增多及分布异常、红系细胞形态异常及成熟停滞... 详细信息

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性获得性恶性疾患，主要见于老年人，其基本临床特征是骨髓组织中造血细胞形态异常和外周血中血细胞减少，其骨髓组织学改变主要包括较幼稚的粒系细胞增多及分布异常、红系细胞形态异常及成熟停滞和单圆核巨核细胞及淋巴样小巨核细胞增多。MDS患者大部分出现染色体异常，提示存在克隆性异常。

关键词：骨髓增生异常综合征巨核细胞增多骨髓组织染色体变化血细胞形态异常血细胞减少组织学改变染色体异常

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全反式维甲酸处理NB4细胞的微小RNA表达谱分析

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中华血液学杂志 2008年第8期29卷 567-569页

作者：刘向荣田征王琳邢海燕饶青王敏王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020

微小RNA是一类高度保守的非编码小RNA，它通过抑制mRNA的翻译或直接使mRNA降解，在转录后水平使基因产生沉默，从而对细胞的增殖、分化、凋亡、个体的发育和肿瘤的发生等方面进行调控。微小RNA作为基因表达调控的一种重要方式，与白血... 详细信息

微小RNA是一类高度保守的非编码小RNA，它通过抑制mRNA的翻译或直接使mRNA降解，在转录后水平使基因产生沉默，从而对细胞的增殖、分化、凋亡、个体的发育和肿瘤的发生等方面进行调控。微小RNA作为基因表达调控的一种重要方式，与白血病的发生发展密切相关。全反式维甲（ATRA）能够诱导急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化。因此成为治疗APL的首选药物。我们选用微小RNA表达谱芯片检测人APL细胞系在ATRA处理前后微小RNA的表达差异，期望发现在细胞分化中起调控作用的微小RNA，从而为研究APL及其他肿瘤的发病机制和诊断治疗提供新的思路。

关键词：微小RNA 表达谱分析 NB4细胞全反式急性早幼粒细胞白血病酸处理基因表达调控细胞分化

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硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤疗效分析

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中华血液学杂志 2008年第6期29卷 397-400页

作者：王亚非邓书会吴瞳徐燕邹德慧王迎赵耀中邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的观察以硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植（SCT）治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者的疗效及不良反应。方法31例初治或复发（难治）MM患者接受硼替佐米为主治疗。之后有6例患者接受SCT治疗。按照EBMT... 详细信息

目的观察以硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植（SCT）治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者的疗效及不良反应。方法31例初治或复发（难治）MM患者接受硼替佐米为主治疗。之后有6例患者接受SCT治疗。按照EBMT标准评价疗效，WHO标准判断不良反应。结果①有5例患者由于急性肾功能衰竭、肿瘤溶解综合征等原因终止治疗，其中3例死亡。可以统计疗效的26例患者共完成了99个疗程的治疗，总有效率（ORR）为80．8％。15例初治患者的ORR为100．0％。11例复发（难治）患者的ORR为54．6％。②15例初治患者中有7例完成了8个疗程的治疗，动态观察发现随着疗程的延长疗效不断提高。③6例初治患者化疗达完全缓解（CR）或接近CR（mCR）后行SCT治疗，其中1例复发，5例随访至移植后6-11个月仍持续CR。未采取SCT巩固的9例初治患者中除1例持续CR外有6例在停药后1-3个月复发或进展，2例失访。④多数治疗相关不良反应为1-2级，有3例患者因为末梢神经炎、窦性心动过缓等原因降低硼替佐米的用量，5例因严重不良反应终止治疗。结论硼替佐米治疗初治及复发（难治）MM疗效肯定，但可能需要进行巩固治疗（如SCT）以维持疗效。硼替佐米不良反应多数轻微且可以耐受，但也应注意少见的严重不良反应。

关键词：硼替佐米多发性骨髓瘤造血干细胞移植

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4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第5期24卷 431-433,437页

作者：郭红星程昕苏晔范冬梅邵晓枫许元富杨纯正熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)... 详细信息

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平。CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用。结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组。结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂。

关键词： 4-1BBL 淋巴细胞 anti-CD3/anti-Pgp 双功能抗体

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