检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2008年第6期24卷 543-545,549页

作者：刘荣姜文国刘芳张砚君范冬梅杨铭熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 滨州医学院药理教研室山东滨州256603

目的:构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法:采用PCR和ovelap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用150g/L SDS-... 详细信息

目的:构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法:采用PCR和ovelap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用150g/L SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产物;采用FACS法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。结果:DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白已构建成功,表达可溶性产物的产量达4mg/L以上,具有与Raji细胞(CD20+)和A549(4-1BB+)细胞结合的活性。结论:利用融合蛋白形式,首次成功地构建了人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白,并获得较高表达。表达产物具有与相应2个靶抗原结合的活性。

关键词： 4-1BBL CD20 融合蛋白免疫治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

间充质干细胞对脐血CD34^＋细胞扩增及其细胞特性变化的影响

引用

中国实验血液学杂志 2008年第6期16卷 1403-1407页

作者：郝牧李斯丹吴瞳孟恒星李长虹徐燕邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探讨脐带间充质干细胞(MSC)对CD34+细胞(HSPC)体外扩增的支持作用及对CD34+细胞表面标志、归巢黏附分子、集落形成能力等干细胞特征变化的影响。用免疫磁珠法从新鲜分离的脐血单个核细胞分离CD34+造血干祖细胞(HSPC);用MSC饲养层(... 详细信息

本研究探讨脐带间充质干细胞(MSC)对CD34+细胞(HSPC)体外扩增的支持作用及对CD34+细胞表面标志、归巢黏附分子、集落形成能力等干细胞特征变化的影响。用免疫磁珠法从新鲜分离的脐血单个核细胞分离CD34+造血干祖细胞(HSPC);用MSC饲养层(feeder)制备经137Cs照射的间充质干细胞饲养细胞(MSC feedercells)。将CD34+细胞接种在不同的培养体系中,实验分为3组:HSPC+CK组为培养液中加入细胞因子组合(SCF、FL和TPO),HSPC+MSC组为CD34+细胞接种在MSC feeder上,HSPC+MSC+CK组同时加入细胞因子组合及MSC饲养细胞。培养后4、7、10、14天计数有核细胞总数(MNC),计算细胞扩增情况;用流式细胞术检测不同处理组间CD34+细胞及亚群免疫表型、归巢黏附分子和集落形成能力。结果表明:在2周的培养时间里,3组MNC和CD34+细胞均明显增加,MNC扩增数依次HSPC+MSC+CK组>HSPC+CK组>HSPC+MSC组。体外扩增10天内HSPC+MSC+CK组MNC得到大量的扩增,同时CD34+细胞的扩增亦较高。培养4天3组细胞CD34+比例较0天有明显下降(p<0.01);扩增后CD34+细胞比例:HSPC+MSC组>HSPC+MSC+CK组>HSPC+CK组(p<0.01);各组CD34+细胞亚型细胞比例有所不同,HSPC+CK组4天时CD34+CD38-细胞有一过性升高(62.71%),之后迅速降低,7天时为0.05%;HSPC+MSC组7天时CD34+CD38-细胞比例为18.92%,与HSPC+CK组比较差异有统计学意义(p<0.05)。从集落形成分析结果看出:MSC、细胞因子混合组扩增后细胞集落形成能力在不同时间点均维持在较高水平。结论:脐血CD34+细胞在体外短期培养(<7天)下,MSC和细胞因子联合应用能同时使CD34+细胞得到明显的扩增并维持造血干祖细胞的生物学特征。

关键词：间充质干细胞 CD34^+细胞细胞因子体外扩增免疫表型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤相关基因chp2在白血病细胞中表达的研究

引用

中国实验血液学杂志 2008年第4期16卷 734-737页

作者：李彬李洪强马丽芦颖李庆华茹永新庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

为了探讨人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达的特点,选择24例白血病患者、4种白血病细胞系及10名正常人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测chp2基因的表达水平。结果显示,10例正常对照细胞c... 详细信息

为了探讨人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达的特点,选择24例白血病患者、4种白血病细胞系及10名正常人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测chp2基因的表达水平。结果显示,10例正常对照细胞chp2mRNA的表达检出率为80%,阳性的表达量为(0.744±0.682)×105cpsμ/。l白血病原代细胞和白血病细胞系chp2mRNA的表达量较正常对照组明显增高(p<0.05),原代细胞中的7例急性髓细胞白血病(AML)、6例慢性髓细胞白血病(CML)、7例急性淋巴细胞白血病(ALL)和4例慢性淋巴细胞白血病(CLL)的表达量分别是(11.637±5.588)、(6.122±3.785)、(4.262±2.561)和(3.434±1.974)×105cpsμ/l;白血病细胞系中K562细胞、Jurkat细胞、HL-60细胞和M07e细胞的表达量为(5.243±1.852)、(4.463±1.621)、(4.137±1.837)和(2.578±1.137)×106cpsμ/l,白血病细胞系的表达量高于原代细胞。结论:人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达水平明显增高,提示其在白血病细胞生长过程中发挥着重要的作用。

关键词： chp2 肿瘤相关基因白血病细胞实时定量PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小RNA在血液肿瘤研究中应用的新进展

引用

中国实验血液学杂志 2008年第5期16卷 1237-1241页

作者：李增军邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

小RNA包括siRNA和miRNA两种,前者是伴随着RNAi现象发现的,是对外源基因剪切加工形成的,是生物维持自身基因组稳定性的一种机制。而miRNA是基因组中固有的,是在转录后水平调节基因表达的重要机制。小RNA的作用方式有两种:介导目标RNA降... 详细信息

小RNA包括siRNA和miRNA两种,前者是伴随着RNAi现象发现的,是对外源基因剪切加工形成的,是生物维持自身基因组稳定性的一种机制。而miRNA是基因组中固有的,是在转录后水平调节基因表达的重要机制。小RNA的作用方式有两种:介导目标RNA降解和抑制蛋白质翻译。前者要求小RNA与目标RNA精确互补,而后者只要求部分互补,采取何种机制取决于互补程度而不是其来源。RNAi作为下调基因表达的手段,在功能基因组学中已有广泛的应用。对血液肿瘤发病相关基因,尤其对染色体易位造成的相关融合基因、凋亡相关基因及多药耐药基因的干扰研究表明,该技术不但是研究机制的有力手段,而且具有临床应用前景。对microRNA的研究发现,它在多种血液肿瘤如多种淋巴瘤和白血病中存在表达的变化,并与多种癌基因相关,提示它广泛参与血液肿瘤的发病机制。本文就RNA干扰和小RNA的发现和作用,以及小RNA在血液肿瘤研究中的应用作一综述。

关键词： siRNA miRNA RNA干扰血液肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

β-catenin特异的shRNA干扰对K562细胞作用的初步研究

引用

中国实验血液学杂志 2008年第4期16卷 725-729页

作者：李增军李茜王国蓉于珍李长虹王亚非李业楠邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究在探讨β-联蛋白(β-catenin)序列特异的小发夹RNA(shRNA)干扰其表达后对K562细胞生长的影响。采用脂质体介导方法,将含编码β-联蛋白特异的shRNA的质粒转入K562细胞,经G418筛选提高细胞阳性率,用实时定量PCR和Western blot分别... 详细信息

本研究在探讨β-联蛋白(β-catenin)序列特异的小发夹RNA(shRNA)干扰其表达后对K562细胞生长的影响。采用脂质体介导方法,将含编码β-联蛋白特异的shRNA的质粒转入K562细胞,经G418筛选提高细胞阳性率,用实时定量PCR和Western blot分别检测干扰后β-联蛋白转录水平及蛋白水平的表达变化,通过绘制生长曲线、MTT测定及集落培养等方法观察干扰后细胞生长能力的差别。结果发现:与对照组相比,转染后72小时干扰质粒可有效降低K562细胞β-联蛋白mRNA水平的表达(p<0.05),但短期培养对蛋白水平的表达未发现明显影响。经G418长期筛选后,对照组可见细胞阳性率逐渐提高,并可筛选到几近100%阳性的细胞克隆,而干扰组细胞则逐渐死亡。在G418存在下,干扰组与对照组K562细胞短期增殖曲线及MTT结果显示两组间无明显差异,但集落培养发现,干扰组细胞无论集落形成率(p<0.001)还是形成的集落大小均明显低于对照组,说明干扰质粒可影响细胞的集落形成能力。结论:β-联蛋白特异的shRNA干扰可以有效降低K562细胞中β-catenin基因的表达,降低细胞集落形成能力;K562细胞的生长依赖于β-联蛋白的存在,针对β-联蛋白的RNAi治疗或其它靶向治疗可能对CML治疗有效。

关键词： β-联蛋白 shRNA K562细胞 CML

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤与白血病干细胞— 一个新的研究热点

引用

中华血液学杂志 2008年第6期29卷 426-428页

作者：胡晓霞王健民程涛第二军医大学附属长海医院血液科上海200433 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院北京

传统放化疗可以缩小肿瘤体积，降低原始细胞比例，但停止治疗后容易复发。因此，人们设想肿瘤可能起源于具有“干细胞性质”的细胞群。1961年，Till等^[1]已经推测组织特异性干细胞可能是肿瘤的细胞起源。但直至近年，随着干细胞生物学... 详细信息

传统放化疗可以缩小肿瘤体积，降低原始细胞比例，但停止治疗后容易复发。因此，人们设想肿瘤可能起源于具有“干细胞性质”的细胞群。1961年，Till等^[1]已经推测组织特异性干细胞可能是肿瘤的细胞起源。但直至近年，随着干细胞生物学和异种移植动物模型的发展，肿瘤干细胞表型以及功能才得到证实^[2]。

关键词：白血病干细胞肿瘤体积干细胞生物学组织特异性原始细胞细胞性质细胞起源动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗人iASPP单克隆抗体的制备及研究应用

引用

山东医药 2008年第22期48卷 31-33页

作者：刁世勇廖晓龙佘鸣张新伟饶青王敏王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

脾脏内注射iASPP-SV真核表达质粒免疫Balb/c小鼠3 d后,取小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞(NS1)进行常规融合。应用原核表达的iASPP-SV全长及iASPP-SV片段His-tag融合蛋白进行间接酶联免疫吸附方法筛选阳性克隆,并对亚克隆后的阳性杂交瘤细胞... 详细信息

脾脏内注射iASPP-SV真核表达质粒免疫Balb/c小鼠3 d后,取小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞(NS1)进行常规融合。应用原核表达的iASPP-SV全长及iASPP-SV片段His-tag融合蛋白进行间接酶联免疫吸附方法筛选阳性克隆,并对亚克隆后的阳性杂交瘤细胞株所制备的腹水进行了初步生物学特性鉴定。结果获得了6株可稳定分泌特异性抗人癌蛋白iASPP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并可以应用于Western Blot、免疫组织化学等实验。因此,本研究成功制备了抗人癌蛋白iASPP的单克隆抗体。

关键词： iASPP p53 抗体单克隆 iASPP-SV

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脐血CD34^＋细胞体外扩增脐血巨核祖细胞的研究

引用

中国实验血液学杂志 2008年第5期16卷 1121-1125页

作者：何祎孟恒星张宇光侯士芳李茜韩俊领邱录贵韩忠朝协和干细胞基因工程有限公司天津300384 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

本研究探讨人脐血CD34+细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化,为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个核细胞,应用免疫磁珠法(MACS)再分离富集CD34+细胞,在含血小... 详细信息

本研究探讨人脐血CD34+细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化,为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个核细胞,应用免疫磁珠法(MACS)再分离富集CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO,50ng/ml)、白介素-11(IL-11,50ng/ml)和肝素(25U/ml)的无血清液体培养体系中培养14天。用流式细胞术检测扩增产物免疫表型(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+及CD34+CD61+)、巨核细胞凋亡率及其表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达,并进行巨核细胞集落形成单位(CFU-Mk)的检测。结果显示:脐血CD34+细胞能够有效地向巨核细胞分化,CD41a+和CD61+细胞比例在培养第14天达到峰值,CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例在扩增第7天达到最高峰〔分别为(3.41±2.80)%和(1.89±1.43)%〕;CFU-Mk大集落在扩增第7天达到高峰〔(20.66±32.79)倍〕,小集落在扩增第10天达到高峰〔(435.62±482.65)倍〕;在培养7、10和14天时巨核细胞的凋亡率分别为(19.48±9.64)%、(26.87±9.03)%和(52.46±11.74)%,其中培养7天和10天的凋亡率无显著性差异(p>0.05),培养14天的凋亡率显著高于7天和10天(p均<0.05);巨核细胞表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达随着扩增天数的延长逐渐降低,其中培养0到10天阶段下降明显。结论:采用TPO+IL11+肝素组合,可以有效地扩增脐血巨核祖细胞;培养7天,CFU-Mk大集落扩增倍数、CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例均达高峰,这是巨核祖细胞体外扩增的较佳培养时间。

关键词：巨核祖细胞细胞扩增脐血细胞凋亡人类白细胞抗原 CD34^+

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脐血和骨髓来源的CD34^＋细胞体外扩增巨核祖细胞差异的研究

引用

中国实验血液学杂志 2008年第6期16卷 1398-1402页

作者：何祎孟恒星张宇光侯士芳王华黄勇李茜韩俊领邱录贵韩忠朝协和干细胞基因工程有限公司天津300384 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

本研究探讨脐血(CB)和骨髓(BM)来源的CD34+细胞体外扩增巨核祖细胞的差异。采用Ficoll-Hypaque分离法分离人CB及BM单个核细胞,免疫磁珠法制备CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO)、TPO+白介素11(IL-11)或TPO+IL11+肝素的无血清液体培养体... 详细信息

本研究探讨脐血(CB)和骨髓(BM)来源的CD34+细胞体外扩增巨核祖细胞的差异。采用Ficoll-Hypaque分离法分离人CB及BM单个核细胞,免疫磁珠法制备CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO)、TPO+白介素11(IL-11)或TPO+IL11+肝素的无血清液体培养体系中培养14天。流式细胞术检测扩增产物(CD34+、CD41a+及CD34+CD41a+细胞)免疫表型、巨核细胞凋亡率及DNA含量,并以集落形成单位测定法进行粒巨-噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)及巨核细胞集落形成单位(CFU-Mk)计数。结果表明:14天培养中,CB来源细胞在总细胞数、CD41a+及CD34+CD41a+细胞扩增倍数上均高于BM(p均<0.05)。0天CB及BM来源CD34+细胞在CFU-GM、BFU-E及总的CFU-Mk的形成能力上无显著性差异(p均>0.05),但CB来源CD34+细胞形成的CFU-Mk以大集落为主,其数量高于BM(p<0.05);在培养7、10和14天,CB及BM来源细胞CFU-GM扩增倍数无显著性差异(p均>0.05),但CB来源细胞的BFU-E及总的CFU-Mk扩增倍数均高于BM(p均<0.05)。14天培养中CB和BM来源巨核细胞的凋亡率无显著性差异(p均>0.05)。DNA含量检测发现,14天培养中CB来源巨核细胞始终以2N细胞为主(比例>90%),而BM来源巨核细胞随着培养时间延长,4N、8N及以上倍体巨核细胞比例逐渐增加。结论:CB来源CD34+细胞体外扩增巨核祖细胞能力高于BM,它可能是巨核祖细胞体外扩增较好的来源。

关键词：脐血骨髓 CD34^+细胞巨核祖细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

病理学:多克隆细胞系的研究价值-J6-1人白血病细胞系30年研究评述

引用

中国学术期刊文摘 2008年第3期14卷 9-10页

作者：吴克复郑国光马小彤中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020天津300020

J6-1细胞系是我国建立的第一株人白血病细胞系,是EBV和HHV-6双重感染的多克隆细胞系.J6―1细胞系建系30年来,从J6-1细胞克隆了许多细胞因子、受体及其他基因,提供了许多有关白血病细胞性质和功能的信息,从而衍生出多项研究课题,而所有... 详细信息

J6-1细胞系是我国建立的第一株人白血病细胞系,是EBV和HHV-6双重感染的多克隆细胞系.J6―1细胞系建系30年来,从J6-1细胞克隆了许多细胞因子、受体及其他基因,提供了许多有关白血病细胞性质和功能的信息,从而衍生出多项研究课题,而所有这些显示出多克隆细胞系特有的研究价值.就30年来J6―1人白血病细胞系的研究做一评述,

关键词：白血病细胞系多克隆细胞系疱疹病毒感染白血病细胞性质

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：