检索结果-内蒙古大学图书馆

甲异靛对JAK2/V617F杂合突变细胞系SET2细胞凋亡和增殖作用及其机制的研究

中华血液学杂志 2019年第1期40卷 29-34页

作者：吕成兰刘晋琴陈猛陈兵肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020 南京大学医学院附属鼓楼医院 210009

目的观察甲异靛对JAK2/V617F杂合突变细胞系SET2细胞凋亡及增殖的影响,并探讨JAK-STAT信号通路在其中所起的作用。方法不同浓度甲异靛(0、5、10 μmol/L)作用于SET2细胞24、48、72 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。不同浓度甲异靛(0、5... 详细信息

目的观察甲异靛对JAK2/V617F杂合突变细胞系SET2细胞凋亡及增殖的影响,并探讨JAK-STAT信号通路在其中所起的作用。方法不同浓度甲异靛(0、5、10 μmol/L)作用于SET2细胞24、48、72 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡。不同浓度甲异靛(0、5、10、20 μmol/L)作用于SET2细胞24、48、72、96 h后,CCK8法检测细胞增殖。不同浓度甲异靛(0、5、10、20 μmol/L)作用于SET2细胞12 h后,在甲基纤维素半固体培养基进行集落培养,Western blot法测定JAK-STAT信号通路相关蛋白及凋亡相关蛋白表达水平。结果在0、5、10 μmol/L甲异靛作用于SET2细胞后24、48和72 h,细胞凋亡率均随药物浓度的增大而增高(P<0.01)。0、5、10、20 μmol/L甲异靛作用SET2细胞后,随着药物浓度增加,细胞增殖受抑制(P<0.01)。不同浓度甲异靛处理SET2细胞后,其集落形成率随药物浓度增加而降低[0 μmol/L甲异靛组为(4.48±1.19)%,20 μmol/L甲异靛组为(2.55±0.36)%,Dunnett P=0.020]。不同浓度甲异靛作用于SET2细胞12 h后,JAK2、P-JAK2、P-STAT1、P-STAT3、P-STAT3和STAT5的表达水平均有随药物浓度增加而逐渐下调的趋势,抗凋亡蛋白BCL-2、BCL-XL的表达水平随药物浓度增加而下调,促凋亡蛋白BID、BIM的表达水平随药物浓度增加而上调。结论甲异靛对Ph阴性骨髓增殖性肿瘤细胞系SET2细胞具有明显的促进凋亡、抑制增殖作用,伴随着抗凋亡蛋白表达下调及促凋亡蛋白表达上调,其作用机制可能与甲异靛抑制JAK-STAT信号通路有关。

关键词：甲异靛 JAK-STAT信号通路 SET2细胞

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热灭活的大肠埃希菌促进照射后小鼠粒系造血及生存

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中国免疫学杂志 2019年第22期35卷 2736-2741页

作者：郭荣霞张潇予刘飞刘鹏王彤罗鸿博许元富中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的:本研究应用热灭活的大肠埃希菌(HI ***)模拟急性腹腔炎症,观察和分析该预处理方案对照射后小鼠造血恢复的影响,以期探索出一种促进放疗后免疫系统,尤其是粒系重建的新策略。方法:通过给小鼠腹腔注射HI ***建立急性腹腔炎症模型;运... 详细信息

目的:本研究应用热灭活的大肠埃希菌(HI ***)模拟急性腹腔炎症,观察和分析该预处理方案对照射后小鼠造血恢复的影响,以期探索出一种促进放疗后免疫系统,尤其是粒系重建的新策略。方法:通过给小鼠腹腔注射HI ***建立急性腹腔炎症模型;运用不同剂量X射线照射已诱发腹腔炎症的小鼠,并定期观察小鼠的生存质量;通过流式细胞仪检测脾脏、骨髓内各血细胞的比例,分析照射后小鼠造血和免疫系统,尤其是粒系恢复的情况。结果:HI ***预处理提高了致死剂量(7 Gy)照射后小鼠的生存率,其中对照组死亡率为100%,而HI ***预处理实验组死亡率仅为14%,即死亡率降低了86%(P=0.0003)。此外,应用非致死剂量(4 Gy)观察照射后小鼠造血系统的恢复,发现在照射后第7天,外周血、脾脏、骨髓中的各阶段粒系细胞(粒系-巨噬系祖细胞,原始粒细胞,早幼粒细胞,中幼粒细胞,晚幼粒细胞,杆状核和分叶核粒细胞)相比于对照组均有明显增多(P<0.05),其中粒系-巨噬系祖细胞最为明显(P<0.001)。结论:照射前应用HI ***预处理可促进小鼠的造血恢复,尤其促进了粒系重建。其机制为HI ***诱导的小鼠体内急性炎症微环境影响了骨髓造血干/祖细胞,尤其是粒系-巨噬系祖细胞,促进照射后小鼠粒系的恢复,提高了照射后小鼠的生存率。

关键词：照射大肠埃希菌造血干/祖细胞粒系造血

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多发性骨髓瘤研究新靶点和治疗策略——第17届国际骨髓瘤研讨会研究热点报道

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转化医学杂志 2020年第3期9卷 181-184页

作者：许杰曹洋嘉杜俊邱录贵郝牧北京协和医学院中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心天津300020

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种恶性浆细胞克隆疾病。由于肿瘤细胞本身的遗传异质性强,加之肿瘤微环境对其复杂的调控作用,使得MM的发病机制目前尚未完全阐明。虽然经过长期的努力,骨髓瘤的治疗取得了一些突破性的进展,尤其... 详细信息

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种恶性浆细胞克隆疾病。由于肿瘤细胞本身的遗传异质性强,加之肿瘤微环境对其复杂的调控作用,使得MM的发病机制目前尚未完全阐明。虽然经过长期的努力,骨髓瘤的治疗取得了一些突破性的进展,尤其是蛋白酶体抑制剂(硼替佐米)和免疫调节剂(来那度胺)批准入临床一线治疗以来,使患者的生存预后得到了显著的改善。但MM目前仍然无法治愈,并且面临的复发耐药问题愈加突出。现就2019年9月12—15日在美国波士顿举行的第17届国际骨髓瘤研讨会提出的有关MM治疗新靶点和新策略的热门话题进行概述。

关键词：多发性骨髓瘤靶向治疗免疫微环境热点报道

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利用人胚胎干细胞来源的Runx1c-mNeonGreen报告细胞系追踪成年造血过程

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生物技术进展 2020年第5期10卷 524-533页

作者：朱瑶瑶张朔王征宇中国医学科学院&北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心天津300020

Runt相关转录因子1c(Runt-related transcription factor 1c,Runx1c)与成年造血以及造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)的产生密切相关,为了动态追踪人早期造血发育过程中Runx1c的表达,利用双切质粒载体联合瞬时转入B细胞淋巴瘤-... 详细信息

Runt相关转录因子1c(Runt-related transcription factor 1c,Runx1c)与成年造血以及造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)的产生密切相关,为了动态追踪人早期造血发育过程中Runx1c的表达,利用双切质粒载体联合瞬时转入B细胞淋巴瘤-特大(B-cell lymphoma-extra large,BCL-XL)基因的CRISPR-Cas9技术高效地构建了人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)来源的Runx1c-mNeonGreen报告细胞系,并经PCR、Sanger测序验证构建成功。随后,利用免疫荧光技术、实时荧光定量PCR技术、流式细胞术、畸胎瘤实验和数字化核型分析技术进行验证,发现该报告细胞系仍具有hESC样的多能性且未发生染色体异常和变异。此外,通过hESC体外单层诱导造血分化方法,利用流式细胞术追踪人早期造血发育过程中Runx1c的表达,结果表明利用该报告细胞系可以动态追踪人早期造血发育中Runx1c的表达。研究结果为阐明成年造血过程提供了新思路,并为体外产生功能性血细胞提供了可能。

关键词：人胚胎干细胞成年造血 Runx1c 报告细胞系 CRISPR-Cas9

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中华器官移植杂志 2019年第3期40卷 133-137页

作者：施圆圆张苏东张桂新翟卫华何祎张荣莉马巧玲庞爱明杨栋林魏嘉璘黄勇姜尔烈韩明哲冯四洲中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院天津300020

目的探讨非肝炎相关性重型再生障碍性贫血(SAA)受者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前铁过载对移植疗效的影响。方法回顾性分析2012年7月至2018年7月底接受allo-HSCT的98例非肝炎相关性SAA受者的临床资料。取移植前2个月内血清标本,测... 详细信息

目的探讨非肝炎相关性重型再生障碍性贫血(SAA)受者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前铁过载对移植疗效的影响。方法回顾性分析2012年7月至2018年7月底接受allo-HSCT的98例非肝炎相关性SAA受者的临床资料。取移植前2个月内血清标本,测定血清铁蛋白(SF)。根据移植前SF水平将受者分为铁过载组和对照组,研究铁过载对allo-HSCT后总体存活(OS)率、造血重建及各种常见并发症发生率的影响。结果98例非肝炎相关性SAA受者,移植前SF中位数值为798.7 ng/ml(52.0~11 060.0 ng/ml)。根据SF水平分组,铁过载组(SF>800.0 ng/ml)、对照组(SF<800.0 ng/ml)各49例(50 %)。铁过载组受者allo-HSCT后早期CMV血症发生率增高(P=0.041),中性粒细胞、血小板重建时间延迟,差异有统计学意义(P值分别为0.001、0.005);供受者血型相合的受者中,铁过载组受者allo-HSCT后脱离输注红细胞时间延迟,差异有统计学意义(P=0.043)。铁过载组受者3年OS率(65.1±7.1)%,对照组受者3年OS率(93.3±3.7)%,两组差异有统计学意义(P=0.001)。多因素分析显示,3年OS率与移植前铁过载(P=0.022)、供受者血型(P=0.015)及allo-HSCT后早期菌血症(P=0.003)、CMV血症(P=0.003)显著相关。结论移植前铁过载受者allo-HSCT后OS率显著下降、CMV血症发生率显著增加及造血重建延迟。

关键词：异基因造血干细胞移植铁蛋白再生障碍性贫血存活率

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泌尿生殖系统孤立性纤维瘤的临床特征和治疗策略

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基础医学与临床 2020年第7期40卷 975-979页

作者：赵钊刘帆纪志刚张震宇黄钟明石冰冰中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院泌尿外科北京100730 中国医学科学院血液学研究所血液病医院天津300020

目的分析、总结并探究泌尿生殖系统孤立性纤维瘤(SFT)的诊断方法及治疗策略。方法报道1例男性泌尿生殖系统SFT病例,并总结该患者的诊治过程。回顾2008年至2018年国内外报道的总计35例患者的人口学特征、临床和病理特征、治疗及随访情况... 详细信息

目的分析、总结并探究泌尿生殖系统孤立性纤维瘤(SFT)的诊断方法及治疗策略。方法报道1例男性泌尿生殖系统SFT病例,并总结该患者的诊治过程。回顾2008年至2018年国内外报道的总计35例患者的人口学特征、临床和病理特征、治疗及随访情况。结果35例患者中有24例(68.6%)具有相关泌尿系统症状,而11例(31.4%)在确诊时无明显不适主诉。在病理结果方面,34例(97.1%)患者的手术病理标本表现为CD34^+,此外27例(77.1%)的手术病理标本表现为Bcl-2^+。结论磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)是检查SFTs的最有效影像学方法;手术病理标本的免疫组化是明确诊断的关键,尤其是CD34、Bcl-2、STAT6、ALDH2的特征性染色对明确诊断有重要价值;此外,分子病理学检测NAB2-STAT6融合蛋白的存在亦可提示SFTs的诊断。手术切除可能是SFTs最好的治疗方法。

关键词：孤立性纤维瘤泌尿生殖系统间叶组织来源肿瘤

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JAK1抑制剂SHR0302和芦可替尼对骨髓增殖性肿瘤SET2细胞系和原代细胞增殖抑制和抗炎作用机制的研究

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中华血液学杂志 2019年第12期40卷 1003-1007页

作者：杨爱莹刘晋琴蔡亚楠方美云杨琳陈猛李冰肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心天津300020 大连大学附属中山医院 116001

目的探究选择性JAK1抑制剂SHR0302和芦可替尼对骨髓增殖性肿瘤(MPN)细胞株SET2细胞和MPN患者原代细胞的影响以及分子作用机制。方法CCK8法检测不同浓度SHR0302和芦可替尼对SET2细胞增殖能力的影响;集落形成实验检测SHR0302和芦可替尼对... 详细信息

目的探究选择性JAK1抑制剂SHR0302和芦可替尼对骨髓增殖性肿瘤(MPN)细胞株SET2细胞和MPN患者原代细胞的影响以及分子作用机制。方法CCK8法检测不同浓度SHR0302和芦可替尼对SET2细胞增殖能力的影响;集落形成实验检测SHR0302和芦可替尼对MPN患者原代细胞红系爆式集落形成单位(BFU-E)的作用;多因子检测试剂盒MSD检测SHR0302和芦可替尼对SET2细胞IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8、IL-12p70蛋白表达水平的影响;以Western blot法检测SHR0302和芦可替尼对SET2细胞JAK-STAT信号通路分子磷酸化水平的影响。结果0.1、1.0、2.5、5.0μmol/L SHR0302作用SET2细胞24、48、72 h,细胞增殖抑制率随药物浓度的增大而增高(P<0.001);0.01、0.05、0.10μmol/L芦可替尼作用SET2细胞48、72 h,细胞增殖抑制率亦随药物浓度的增大而增高(P<0.001),且均在72 h抑制作用最显著。2.5μmol/L SHR0302、0.1μmol/L芦可替尼作用SET2细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为(59.94±0.60)%、(64.00±0.66)%,提示SHR0302的增殖抑制作用弱于芦可替尼。与对照组比较,0.1、1.0、5.0μmol/L SHR0302和0.1、0.2、0.4μmol/L芦可替尼均浓度依赖性地抑制MPN患者BFU-E形成,1.0µmol/L SHR0302对MPN患者BFU-E集落形成抑制程度与0.2µmol/L芦可替尼相当。除IL-12外,1.6μmol/L SHR0302作用SET2细胞24 h可明显抑制炎性介质蛋白IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8表达(P<0.01),与1.0μmol/L芦可替尼对炎性介质抑制作用相当。不同浓度SHR0302作用SET2细胞3 h后JAK-STAT信号通路显著抑制,在1.0μmol/L时可显著抑制p-STAT1(Tyr701)、p-STAT3(Tyr705)蛋白磷酸化,在5.0μmol/L时可使p-JAK1(Tyr1022/1023)、p-STAT5(Tyr694)蛋白磷酸化水平明显下调(P<0.05),而芦可替尼在0.1μmol/L即可明显抑制下游STAT蛋白磷酸化水平。结论SHR0302能有效抑制MPN细胞株和患者原代细胞的增殖以及炎性因子表达,其机制可能与下调p-JAK1及其下游p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5蛋白磷酸化水平相关,但其抗增殖、抗炎作用弱于芦可替尼。

关键词：选择性JAK1抑制剂SHR0302 芦可替尼细胞增殖炎性细胞因子 JAKSTAT信号通路

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基于小鼠白血病模型探究不同定居部位对白血病细胞干性的影响

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生物技术进展 2025年第2期15卷 349-354页

作者：王尚尚薛贞雅邢海燕杨雪王敏饶青中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)北京协和医学院血液与健康全国重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心天津市血液病细胞治疗研究重点实验室细胞生态海河实验室天津300020 天津医学健康研究院天津301600 复旦大学附属中山医院上海200032

自我更新、静息及对化疗药物的抵抗是白血病干细胞的重要特征,也是白血病化疗后复发及预后不良的重要原因之一。骨髓及脾脏是白血病干细胞的定居部位,探索不同微环境下的白血病细胞干性特征对阐明其干性维持机制具有重要意义。利用AML1-... 详细信息

自我更新、静息及对化疗药物的抵抗是白血病干细胞的重要特征,也是白血病化疗后复发及预后不良的重要原因之一。骨髓及脾脏是白血病干细胞的定居部位,探索不同微环境下的白血病细胞干性特征对阐明其干性维持机制具有重要意义。利用AML1-ETO9a(AE9a)小鼠白血病模型,探讨骨髓不同区域和脾脏中定居的白血病细胞干性特征;通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)及基因富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),阐明干性相关的基因表达特征;通过DAPI和Ki67联合标记及流式细胞仪分析测定G0期细胞比例;通过集落形成实验确定集落形成能力,逆转录实时荧光定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)验证相关分子表达。研究结果发现,与脾脏相比,定居在骨内膜的白血病细胞具有更显著的干性基因表达特征、更高的G0期比例和更强的集落形成能力。骨内膜白血病细胞高表达的基因在白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)通路显著富集,其中相关分子IL-1β的表达显著升高。结果表明骨内膜定居的白血病细胞具有最强的干性特征,IL-1β可能通过IL-1通路介导骨髓微环境对白血病干细胞干性的维持,IL-1通路有望作为急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)的治疗靶点。

关键词：白血病干细胞骨髓微环境静息自我更新

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靶向BCMA的嵌合抗原受体T细胞抗多发性骨髓瘤作用研究

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中华血液学杂志 2019年第10期40卷 804-811页

作者：钟梦君徐颖茜邢海燕唐克晶田征饶青王敏王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)/实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心天津300020

目的构建以B细胞成熟抗原(BCMA)的特异性配体APRIL为抗原结合区的BCMA-CAR,并验证该BCMA-CAR修饰的T细胞(BCMA-CAR-T)对多发性骨髓瘤的作用.方法以BCMA的特异性配体APRIL为抗原结合区、4-1BB为共刺激分子而构建BCMA-CAR,体外实验验证BCM... 详细信息

目的构建以B细胞成熟抗原(BCMA)的特异性配体APRIL为抗原结合区的BCMA-CAR,并验证该BCMA-CAR修饰的T细胞(BCMA-CAR-T)对多发性骨髓瘤的作用.方法以BCMA的特异性配体APRIL为抗原结合区、4-1BB为共刺激分子而构建BCMA-CAR,体外实验验证BCMA-CAR-T细胞对BCMA^+骨髓瘤细胞系和原代骨髓瘤细胞的特异性细胞毒作用.此外,构建BCMA^+骨髓瘤小鼠模型并评价BCMA-CAR-T细胞的体内抗肿瘤效应.结果BCMA-CAR-T细胞能特异性杀伤BCMA^+骨髓瘤细胞系(当效靶比为1:4时,BCMA-CAR-T细胞组中BCMA^+细胞几乎检测不到)和骨髓瘤患者的骨髓单个核细胞(BCMA-CAR-T和空载组T细胞的残余细胞比例分别为16.00%和66.85%,P=0.003),并伴随显著的脱颗粒效应(CAR-T和空载组T细胞与MM1.S、H929、U266共培养的脱颗粒水平分别为33.30%对5.62%、16.97%对2.95%、25.87%对2.97%,P值均<0.001)和细胞因子释放(P值均<0.01).在治疗人BCMA^+骨髓瘤小鼠移植模型中,BCMA-CAR-T细胞可显著延长小鼠的生存期(BCMA-CAR-T和空载组T细胞治疗小鼠的中位生存期分别为87.5 d、67.5 d,P<0.001).结论以APRIL为抗原识别区的BCMA-CAR-T细胞有望成为治疗BCMA^+多发性骨髓瘤的理想策略.

关键词：多发性骨髓瘤嵌合抗原受体 B细胞成熟抗原免疫治疗

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77例骨髓增生异常综合征5q-综合征患者临床特征、疗效和生存分析

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中华血液学杂志 2019年第11期40卷 895-900页

作者：刘丹徐泽锋秦铁军李承文胡耐博潘丽娟曲士强李冰肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心天津300020

目的探讨符合WHO(2016)诊断分型标准的骨髓增生异常综合征(MDS)5q-综合征患者的临床特征、来那度胺(LEN)疗效和生存情况。方法回顾性分析2008年1月至2018年4月于中国医学科学院血液病医院就诊的77例符合WHO(2016)诊断分型标准的MDS 5q-... 详细信息

目的探讨符合WHO(2016)诊断分型标准的骨髓增生异常综合征(MDS)5q-综合征患者的临床特征、来那度胺(LEN)疗效和生存情况。方法回顾性分析2008年1月至2018年4月于中国医学科学院血液病医院就诊的77例符合WHO(2016)诊断分型标准的MDS 5q-综合征患者临床资料,比较单纯5q-与5q-伴1个非-7/7q-的其他染色体异常(ACA)患者临床特征、疗效及生存情况,并比较LEN与非LEN药物治疗的疗效与生存情况。结果77例患者中,单纯5q-者64例,5q-伴ACA者13例,确诊时5q-伴ACA患者的中位年龄显著低于单纯5q-患者[58(29~64)岁对63(31~82)岁,z=2.164,P=0.030]。5q-伴ACA患者CD41免疫组化染色小巨核细胞(直径≤40μm)检出率(91.7%,11/12)显著高于单纯5q-患者(60.0%,33/55)(P=0.046)。可评估LEN疗效的29例患者中,单纯5q-患者(19例)与5q-伴ACA患者(10例)血液学总反应率(78.9%对80.0%)、血液学完全缓解(CR)率(57.9%对60.0%)、细胞遗传学反应(CyR)率[69.2%(9/13)对66.7%(4/6)]、完全细胞遗传学反应(CCyR)率[61.5%(8/13)对33.3%(2/6)]相当。单纯5q-与5q-伴ACA患者中位总生存(OS)时间差异无统计学意义(62个月对78个月,P=0.313)。29例LEN组患者的血液学总反应率(79.3%对36.0%)、CR率(58.6%对8.0%)、CyR率[68.4%(13/19)对11.1%(1/9)]、CCyR率[52.6%(10/19)对0(0/9)]均高于非LEN组患者(25例),但两组患者中位OS时间差异无统计学意义(78个月对62个月,P=0.297)。结论单纯5q-与5q-伴ACA患者临床特征大体相似,两组患者LEN疗效、中位OS时间无明显差异。LEN治疗5q-综合征患者的疗效肯定,优于非LEN药物。

关键词：骨髓增生异常综合征 5q-综合征治疗反应来那度胺生存分析

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