检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2002年第1期22卷 45-46页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样... 详细信息

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。

关键词：胆红素 P38激酶凋亡人神经母细胞瘤细胞系

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胆红素诱导神经细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响——胆红素对中枢神经细胞损伤机理的研究

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中华耳鼻咽喉科杂志 2002年第4期37卷 243-246,T001页

作者：韩张胡萍倪道凤中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所药理室

目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用... 详细信息

目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用于体外培养的SH SY5Y细胞 ,在不同时间点通过倒置显微镜观察细胞形态的变化及存活情况 ;经Hoechst332 5 8染色后 ,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化 ;利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率 ;经罗丹明 12 3染色后 ,用流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果　在 0 0 2g/L胆红素作用下 ,SH SY5Y细胞 2h后即可见较多细胞皱缩、变圆 ,4h可见有少数细胞飘起 ,细胞轮廓不清 ,6h可见大部分细胞飘起 ,并已开始崩解 ;染色质在胆红素作用 6h出现典型的凋亡样改变 ;细胞凋亡率随作用时间的延长明显增加 ,3h为 19 4 % ,4h为 76 4 % ,6h达到 79 0 % ;在胆红素作用 1h后反映线粒体膜电位相对荧光强度即由 (16 6± 1 5 5 6 )U下降到 (7 11± 0 70 1)U ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,并随作用时间的延长而进一步降低。结论　胆红素作用早期即可导致SH SY5Y细胞线粒体膜电位下降 ,既而发生凋亡 ,提示通过诱导听觉中枢神经元凋亡可能在高胆红素血症所致的听力损伤和听神经病发病中起重要作?

关键词：胆红素脱噬作用线粒体膜电位 MMP 神经母细胞瘤听神经疾病细胞凋亡

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纳米粒子载反义单核细胞趋化蛋白-1基因局部定位转染抑制兔颈动脉内膜损伤后内膜增生的研究

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中华心血管病杂志 2002年第2期30卷 67-70页

作者：曾勇朱文玲王宗立刘佩毛赵三妹张华杨菁王澎延宋存先中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院心内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院病理室中国医学科学院生物工程研究所

目的　观察纳米粒子包载反义单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )基因局部腔内转染对兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的影响。方法　采用球囊导管损伤动脉内膜的方法建立兔颈动脉球囊损伤模型。用纳米粒子包载反义MCP 1基因 ,采用保留灌注的方法... 详细信息

目的　观察纳米粒子包载反义单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )基因局部腔内转染对兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的影响。方法　采用球囊导管损伤动脉内膜的方法建立兔颈动脉球囊损伤模型。用纳米粒子包载反义MCP 1基因 ,采用保留灌注的方法进行局部腔内定位转染。结果　聚合酶联反应检测发现重组基因整合 ,RNANorthern杂交观察到转基因治疗组有反义MCP 1基因表达 ,内源性MCP 1基因的表达受抑制 ,转基因治疗组内膜 /中膜面积比降低 42 %。结论　纳米粒子可以作为转基因载体 ,反义MCP

关键词：单核细胞趋化蛋白-1 反义RNA 再狭窄纳米粒子 PTCA 内膜增生基因载体

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全反式维甲酸与单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对胶质瘤的协同杀伤作用

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癌症 2002年第5期21卷 473-479页

作者：张雪峰任祖渊方福德左瑾苏长保王任直马文斌中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京100730 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

背景与目的:细胞间缝隙连接通讯(gapjunctionalintercellularcommunication,GJIC)是介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplixvirusthymidinekinase,HSV-tk)基因治疗中旁观者效应的重要机制。全反式维甲酸(all-trans-retinoticacid,ATRA)可能通过上调胶质瘤细胞GJIC和抑制肿瘤细胞生长的双重作用,促进HSV-tk基因治疗的疗效。本研究的目的在于证实HSV-tk和ATRA联合应用对胶质瘤细胞的协同杀伤作用。方法:分别以1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L3种浓度的ATRA作用于培养的大鼠C6胶质瘤细胞,并研究ATRA对C6胶质瘤细胞分化、增殖、GJIC及connexin43(Cx43)基因转录等方面的影响。将C6细胞与稳定表达HSV-tk基因的C6tk细胞按不同比例混合,分别在含GCV和不同浓度ATRA或仅含GCV的培养基中培养,并于药物作用7天后用MTT法检测旁观者效应。结果:经3种浓度的ATRA作用后,C6胶质瘤细胞均显示出细胞分化的形态学特征。C6细胞的增殖也明显受到ATRA的抑制,绝大多数的活细胞都静止于G1期,100μmol/LATRA对C6细胞增殖的抑制尤其明显,并诱导细胞凋亡。经3种浓度的ATRA分别作用后,C6细胞的GJIC也明显提高,而Cx43基因的转录未受明显影响。旁观者效应实验的结果显示,3种浓度的ATRA均可以明显增强旁观者效应。

关键词：全反式维甲酸单纯疱疹病毒胸苷激酶丙氧鸟苷胶质瘤基因治疗

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仙贞片对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物受体mRNA表达的调节

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北京中医药大学学报 2002年第4期25卷 21-24页

作者：潘明政郭赛珊梁晓春唐代屹张建伟孙仁宇中国协和医科大学北京协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室北京100730

观察仙贞片对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物受体mRNA高表达的影响。采用链脲佐菌素左下腹腔内单次注射造成糖尿病大鼠模型 ,随机分模型组、仙贞片组及氨基胍组各 10只 ,另设正常对照组 10只。应用原位杂交的方法。结果模型组大鼠主动脉... 详细信息

观察仙贞片对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物受体mRNA高表达的影响。采用链脲佐菌素左下腹腔内单次注射造成糖尿病大鼠模型 ,随机分模型组、仙贞片组及氨基胍组各 10只 ,另设正常对照组 10只。应用原位杂交的方法。结果模型组大鼠主动脉内皮细胞糖基化终产物受体mR NA表达的灰度值明显增高 ,出现过度表达。仙贞片治疗后主动脉糖基化终产物受体mRNA表达的灰度值降低 ,与氨基胍组相近似 (P >0 0 5 ) ,与模型组比较差异显著 (P <0 0 5 )。显示仙贞片与氨基胍一样 ,可显著下调糖基化终产物受体 -mRNA的过度表达 ,对糖尿病大鼠主动脉血管糖基化终产物受体高表达有明显调节作用。提示仙贞片对高血糖造成的主动脉血管损害具有保护作用。

关键词：仙贞片糖尿病大鼠主动脉 mRNA 糖基化终产物受体

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小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 628-630页

作者：孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼... 详细信息

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果　阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论　小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。

关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞凋亡细胞分化 NB4细胞株急性白血病

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尖锐湿疣病变的人乳头瘤病毒6型L1序列多态性分析

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病毒学报 2002年第2期18卷 102-107页

作者：洪少林王家璧李平川周玲司静懿许雪梅郭秀婵曾毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒 (HPV) ,并通过限制性片断长度多态性分析分型发现 ,HPV6型为主要感染型别 ,其次是HPV11型。根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株 ,扩增L1晚期基因 ,构建重组测序质粒 ,... 详细信息

采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒 (HPV) ,并通过限制性片断长度多态性分析分型发现 ,HPV6型为主要感染型别 ,其次是HPV11型。根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株 ,扩增L1晚期基因 ,构建重组测序质粒 ,双脱氧法测序并分析L1区的核苷酸和氨基酸序列变异状况。结果表明 ,HPV6L1基因序列发生碱基替换的区域主要有四个区 ,包括SR1(5 911～ 6 10 4 ) ,SR2 (6 2 17～ 6 2 73) ,SR3(6 5 4 0～6 6 6 1)和SR4 (70 6 2～ 72 5 0 )。少数的碱基替换导致错义突变 ,推导的蛋白质一级结构中有 0～ 3个氨基酸发生变异。

关键词：尖锐湿疣病变人乳头瘤病毒6型 L1序列多态性聚合酶链式反应 L1开放读码框基因序列多态性

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基因治疗与影像学

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中华放射学杂志 2002年第12期36卷 1151-1153页

作者：陆菁菁金征宇卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院放射科 100730 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方... 详细信息

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方法显示了较大的缺陷，即在临床试验中，不能无创、动态地获知转基因表达的部位、幅度和时间。因此，如何用体外的成像方法来监测转入基因的表达，这是基因治疗大规模进入试验前必须解决的问题。新近在影像技术方面的发展和突破，有望解决如上问题。放射学家只有熟悉基因治疗的原因、策略和新进展，才能跟进并从事这方面的前沿研究工作。笔者拟对基因治疗的原理和方法作简单介绍，并对影像学技术在基因治疗中的应用和进展作一综述。

关键词：基因治疗影像学免疫组织化学

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^(125)I-神经生长因子的制备及其药代动力学研究

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核化学与放射化学 2002年第1期24卷 56-60页

作者：唐刚华唐小兰姜国辉张云王世真王树惠第一军医大学南方医院南方PET中心广东广州510515 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100730

用氯胺T法制备了12 5I 神经生长因子 (12 5I NGF) ,放化纯度大于 95 %。经静注和肌注两种途径并采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳法测定了小鼠血浆中NGF的浓度。研究结果表明 ,静注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合二... 详细信息

用氯胺T法制备了12 5I 神经生长因子 (12 5I NGF) ,放化纯度大于 95 %。经静注和肌注两种途径并采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳法测定了小鼠血浆中NGF的浓度。研究结果表明 ,静注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合二房室分布模型 ;肌注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合一房室分布模型。按剂量2 5 μg/kg静注12 5I NGF后 ,测得消除相半衰期 (t1/ 2 ( β) )为 3 6 5h。按剂量 75 ,2 5 ,10 ,3 3μg/kg肌注12 5I NGF ,测得消除相半衰期 (t1/g( β) )分别为 1 79,2 2 5 ,2 30 ,3 2 4h ,平均达峰时间 (tmax)为 0 5 8h ,平均血浆清除率 (CLs)为0 37L/ (h·kg) ,表观分布容积 (Vd)为 1 18L/kg ,体内平均滞留时间 ( tr)为 2 78h。

关键词：神经生长因子药代动力学 SDS-PAGE电泳法神经系统药物碘125 同位素标记物

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嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中国实验血液学杂志 2002年第6期10卷 577-579页

作者：杨洋许彩民王健陈岚潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院血液科北京100730

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式... 详细信息

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式细胞术检测CD59- 细胞进行验证。结果表明 ,PNH病人的红细胞对HEC毒素溶血试验有抗性 ,而正常人和非PNH病人的红细胞几乎全部溶解。结论 :HEC毒素溶血试验比色法对PNH是一种简便、快速。

关键词：嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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