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中国药学杂志 1998年第4期33卷 227-229页

作者：唐刚华姜国辉张云陈力真王树惠王世真中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室

目的：建立测定小鼠血浆中神经生长因子（ＮＧＦ）浓度的放射性核素（１２５Ｉ）示踪测定法。方法：１２５ＩＮＧＦ采用氯胺Ｔ法标记，血浆中ＮＧＦ的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀法或ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法测定... 详细信息

目的：建立测定小鼠血浆中神经生长因子（ＮＧＦ）浓度的放射性核素（１２５Ｉ）示踪测定法。方法：１２５ＩＮＧＦ采用氯胺Ｔ法标记，血浆中ＮＧＦ的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀法或ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法测定，并比较其测定结果。结果：ＴＣＡ沉淀法和ＳＤＳＰＡＧＥ电泳法同时对照测定５０份ＮＧＦ血浆样品，结果呈良好的相关性，ｒ＝０．９９４８。两种方法的最低检测浓度均为２．０ｎｇ·ｍｌ－１，日内、日间ＲＳＤ均小于１０％，血浆在１２．５ｎｇ·ｍｌ－１～４００ｎｇ·ｍｌ－１浓度范围内均呈良好的相关性，相关系数分别为ｒ＝０．９９９０和ｒ＝０．９９９７，血浆中ＮＧＦ的平均回收率分别为（９５．２１±３．７０）％和（９４．３０±４．６０）％。结论：同位素示踪法与沉淀法或电泳法结合，方法稳定、可靠、灵敏度较高，两法相辅相成，适于ＮＧＦ血药浓度的测定。

关键词：神经生长因子同位素标记示踪法血药浓度

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神经生长因子的药代动力学研究

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中国药学杂志 2000年第3期35卷 181-184页

作者：姜国辉唐刚华张云陈力真王世真王树惠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室北京100730

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓... 详细信息

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓度。结果 :静注12 5I NGF 2 5 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β为 2 .2 2 3h ,酸沉法为 2 .2 6 4h。肌注12 5I NGF75 ,2 5 ,1 0 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .1 4 0 ,2 .331 ,3.1 73h ,酸沉法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .480 ,2 .5 5 2 ,2 .6 42h ,达峰时间tmax为 0 .5 83h。电泳法和酸沉法测得12 5I NGF平均血浆清除率 (Cl)分别为 0 .32 1和 0 .332L·h-1·kg-1,表观分布容积 (Vd)为 1 .2 5 9和 1 .31 5L·kg-1,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.5 92和 3.5 39h。结论 :NGF在体内消除半衰期较短。本研究为今后的临床应用提供了必要的参考资料。

关键词：神经生长因子药代动力学小鼠 NGF

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Detailed deletion mapping on chromosome region 9p21 in human periampullary neoplasms

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Chinese Medical Journal 2001年第6期114卷 28-31,103页

作者：王纯巍陆星华刘国仰戴理徐彤陈原稼高春生温小恒钱家鸣中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学研究室北京100005

Objective　To further define the extent of chromosome 9p21 deletion in periampullary ***　The loss of heterozygosity at 5 microsatellite polymorphic markers on chromosome 9p21 was detected by polymerase chain reaction (PCR), polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and silver staining in 35 specimens of periampullary neoplasms and their matching blood ***　Fifty percent (4/8) of pancreatic cancer cases showed the loss of heterozygosity at one or more microsatellite loci, with the more frequent sites of D9S974 (37.5%) and D9S942 (28.6%), and some showing consecutive allelic loss. Sixty-two point five percent (5/8) of ampullary carcinoma cases showed loss of heterozygosity at one or more of the loci, frequent site of loss being D9S942 (42.9%) and the next most frequent being IFNA (37.5%) and D9S171 (37.5%). Loss of one locus was observed in 14.2% (1/7) of insulinoma. Conclusion　The minimal common region of chromosome deletion in periampullary neoplasms is defined between the D9S974 and D9S942 loci within a 15?kb interval in 9p21, suggesting the involvement of a novel tumor suppressor gene in their carcinogenesis.

关键词： Vater's ampulla · pancreatic neoplasms · chromosome mapping · genetic marker · chromosome deletion · polymorphism

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生长抑素及其类似物对犬奥迪括约肌运动的作用

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中华医学杂志 2000年第8期80卷 621-623页

作者：王纯巍陆星华陈元方周吕杨春敏中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理学研究室

目的　研究生长抑素及其类似物对奥迪括约肌消化间期运动的作用。方法　建立犬奥迪括约肌测压慢性实验动物模型。将 6只犬随机分为生长抑素组、思他宁组和善宁组 ,每周进入一组实验 ,于空腹、清醒状态下 ,通过高分辨多道全胃肠功能监测... 详细信息

目的　研究生长抑素及其类似物对奥迪括约肌消化间期运动的作用。方法　建立犬奥迪括约肌测压慢性实验动物模型。将 6只犬随机分为生长抑素组、思他宁组和善宁组 ,每周进入一组实验 ,于空腹、清醒状态下 ,通过高分辨多道全胃肠功能监测仪 ,记录静脉用药前后奥迪括约肌的动力指数、基础压 ,以及时相收缩幅度、时限和频率。结果　生长抑素和思他宁在 0 .5nmol·kg-1·h-1浓度时诱发奥迪括约肌时相收缩 ,并升高动力指数 ;两药浓度为 1nmol·kg-1·h-1时抑制括约肌运动并降低动力指数。善宁在 0 .5～ 1nmol·kg-1·h-1浓度时诱发奥迪括约肌时相收缩 ,其中在 0 .5nmol·kg-1·h-1浓度时升高动力指数 ,1nmol·kg-1·h-1浓度时不影响动力指数。结论　生长抑素和思他宁对奥迪括约肌运动的调节呈双相作用 ,小剂量为兴奋作用 ,大剂量为抑制作用。善宁对奥迪括约肌运动的调节 ,小剂量为兴奋作用 ,大剂量无明显影响。

关键词：生长抑素奥迪括约肌胃肠运动测压法

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幼年起病的2例晚发型糖原贮积症Ⅱ型/Pompe病临床和基因分析

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中华儿科杂志 2007年第10期45卷 760-764页

作者：仇佳晶魏珉张为民施惠平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄... 详细信息

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄糖苷酶的19个外显子,测序,进行突变检测。同时对50例健康对照100个等位基因进行15号外显子的 PCR 扩增,测序,确定突变特征。结果 1例临床表现为进行性近端肌肉无力,肌张力低下;1例表现为肌容积减少,呼吸肌受累;2例均有肌酸磷酸肌酶升高,肌电图提示肌源性损害,肌活检呈空泡性改变,皮肤成纤维细胞α-1,4-葡萄糖苷酶活性测定明显低下。突变检测:测序发现4个杂合错义突变,例1为 c796 C>T,p.266Pro>Ser;c2105 G>A,p.702Arg>His;例2为 c2132 C>G,p.711Thr>Arg;c2167 G>A,p.723Val>Met。其中后3个为新突变,50例健康对照100个等位基因测序未发现同样突变。结论幼年起病的 Pompe 病患儿临床表现存在差异,呼吸肌受累情况影响其预后;检测到3个错义新突变,可能为致病突变。

关键词：糖原贮积病,Ⅱ型葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶外显子突变

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支气管哮喘患者T细胞受体δ链多态性研究

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中华结核和呼吸杂志 2001年第4期24卷 215-218页

作者：白彦林耀广何维陈勇马毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所免疫室 100730

目的　探讨γδ链T细胞在哮喘气道慢性炎症产生及延续机制中的作用。方法　留取 7例哮喘患者与 7例对照者的外周血和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测γδ链T细胞的百分率 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT P... 详细信息

目的　探讨γδ链T细胞在哮喘气道慢性炎症产生及延续机制中的作用。方法　留取 7例哮喘患者与 7例对照者的外周血和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测γδ链T细胞的百分率 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法和基因扫描法分析T细胞受体Vδ1～Vδ3 亚族的相对取用频率及克隆增殖状态。结果　哮喘患者BALF中γδT细胞比例 [(7 8±4 7) % ]与对照组 [(3 3± 3 0 ) % ]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;且Vδ1的相对取用频率 [(4 4±13) % ]与对照组 [(19± 5 ) % ]比较 ,差异有显著性 (P =0 0 0 2 )。哮喘患者BALF中部分Vδ基因亚家族呈单或寡克隆扩增 ,以Vδ1亚族尤其显著。结论　对抗原发生特异性应答的γδT细胞可能在启动和维持哮喘慢性气道炎症中发挥了较重要的作用。

关键词：支气管哮喘 T细胞受体 δ链多态性

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苯丙酮尿症突变基因的快速检测及产前诊断

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中华妇产科杂志 1996年第7期31卷 401-403页

作者：杨涛袁丽芳黄尚志方炳良王玫孙念怙赵时敏罗会元中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所遗传室北京协和医院

目的：建立苯丙酮尿症突变基因快速检测及产前基因诊断的方法，以提高产前诊断率。方法：应用聚合酶链反应合并单链构象多态性方法及银染技术筛查苯丙氨酸羟化酶基因的四个外显子（ｅｘｏｎ，Ｅ）：７、１２、１１和１０区域，并用已知... 详细信息

目的：建立苯丙酮尿症突变基因快速检测及产前基因诊断的方法，以提高产前诊断率。方法：应用聚合酶链反应合并单链构象多态性方法及银染技术筛查苯丙氨酸羟化酶基因的四个外显子（ｅｘｏｎ，Ｅ）：７、１２、１１和１０区域，并用已知阳性和阴性样品为对照。结果：确立了３种已知位点突变：Ｒ２４３Ｑ（Ｅ７）［ＣＧＡ（Ａｒｇ２４３）→ＣＡＡ（Ｇｌｎ）］，Ｒ４１３Ｐ（Ｅ１２）［ＣＧＣ（Ａｒｇ４１３）→ＣＣＣ（Ｐｒｏ）］，Ｙ３５６Ｘ（Ｅ１１）［ＴＡＣ（Ｔｙｒ３５６）→ＴＡＡ（Ｔｅｒ）］，以及Ｅ１０区域的３种ＤＮＡ带型改变的检测条件。检测出１３个苯丙酮尿症家系的突变位点并对５例进行了产前基因诊断。结论：单链构象多态性方法可用于苯丙酮尿症家系的突变基因检测和产前诊断。

关键词：苯丙酮尿症突变基因单链构象产前诊断

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The role of sexual related Y gene detection in the diagnosis of patients with gonadal dysgenesis

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Chinese Medical Journal 2001年第2期114卷 16-19,103-104页

作者：郁琦何方方谷春霞葛秦生黄尚志叶丽珍叶珏冯玲中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所遗传室北京100730 北京友谊医院妇产科北京100050

Objective　To clarify the role of sexual related Y (SRY) gene detection in the diagnosis of gonadal ***　Sixteen cases of gonadal dysgenesis were included in this study: 5 with androgen insensitivity syndrome, 1 with 17-α-hydroxylase deficiency, 4 with true hermaphrodite, 2 with 45,X/46,XY gonadal dysgenesis, 1 with 45,X gonadal dysgenesis, 1 with XY pure gonadal dysgenesis, 1 with testicular regression, and 1 XY female who gave birth to a normal baby. SRY gene was detected by using polymerase chain reaction (PCR) in blood and gonad samples and by direct sequencing of the SRY ***　Among the 16 cases, 15 were blood SRY positive, among which 13 (86.7%) showed the presence of testicular tissue, and 2 showed ovaries without testicular tissue. One SRY negative case showed the presence of testicular tissue. In 3 cases, SRY detection in gonadal tissue correlated with pathological findings but not with blood karyotype. The correlation between peripheral blood SRY and the pathology of the gonads was 81.25% and the correlation between the presence of peripheral blood Y chromosome and pathology of the gonads was 68.75%. Sequencing of the SRY motif in an XY female who gave birth to a normal baby showed no ***　SRY detection is more sensitive and specific than blood karyotype in the prediction of the presence of testicular tissue. Peripheral blood karyotype does not necessarily reflect gonadal type. There may be testicular related factors other than the SRY gene.

关键词： gonadal dysgenesis · SRY gene · polymerase chain reaction

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夏秋季花粉症患者合并变应性鼻炎和变应性哮喘情况及其相互关系的研究

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中华医学杂志 2005年第24期85卷 1683-1687页

作者：尹佳岳凤敏王良录何海娟徐涛张宏誉李宏文利平孙劲旅顾建青韩少梅叶世泰中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院变态反应科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学统计室

目的探讨夏秋季花粉症患者中变应性鼻炎和变应性哮喘的关系。方法对2001年8月至2003年12月确诊为夏秋季花粉症的1120例患者进行吸入变应原皮内试验和血清特异性IgE检测(法玛西亚公司UinCAP100荧光酶联免疫法),同时对变应性鼻炎和变应性... 详细信息

目的探讨夏秋季花粉症患者中变应性鼻炎和变应性哮喘的关系。方法对2001年8月至2003年12月确诊为夏秋季花粉症的1120例患者进行吸入变应原皮内试验和血清特异性IgE检测(法玛西亚公司UinCAP100荧光酶联免疫法),同时对变应性鼻炎和变应性哮喘患者的发病年龄、发病时间、临床症状特点及哮喘的严重程度进行标准临床问卷调查和研究。结果夏秋季花粉诱发的变应性鼻炎的平均发病年龄27.9岁,变应性哮喘的平均发病年龄32.6岁,两者差异有统计学意义(P<0.001);在全部夏秋花粉症患者中,变应性鼻炎占97.9%(1096/1120),单纯变应性鼻炎占45.6%(511/1120);变应性哮喘占53.8%(602/1120),单纯变应性哮喘占0.9%(10/1120)。在变应性鼻炎患者中53.4%(585/1096)合并季节性变应性哮喘;在季节性变应性哮喘患者中97.2%(585/602)合并变应性鼻炎,30.8%(183/602)需要急诊治疗。结论变应性鼻炎合并哮喘的状况在夏秋季花粉症患者中不容忽视,夏秋季花粉是中国北方地区夏秋季哮喘的重要原因。

关键词：夏秋季花粉症相互关系季节性变应性哮喘荧光酶联免疫法变应性鼻炎患者法玛西亚公司发病年龄对变应性鼻炎临床问卷调查中国北方地区哮喘患者 IgE检测血清特异性吸入变应原 2003年 2001年皮内试验发病时间

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菟箭合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C活性作用的研究

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中国中药杂志 2004年第7期29卷 685-689页

作者：朴元林梁晓春杨楠尹德海左萍萍中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所药理教研室北京100005

目的 :观察菟箭合剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 :单肾切除加链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。中药菟箭合剂 (2 0g·kg-1·d-1)和阳性对照药缬沙坦 (2 0mg... 详细信息

目的 :观察菟箭合剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 :单肾切除加链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。中药菟箭合剂 (2 0g·kg-1·d-1)和阳性对照药缬沙坦 (2 0mg·kg-1·d-1)干预治疗 12周 ,用氚标记的二丁酸佛波醇酯 ([3 H]PDBu)结合法测定大鼠肾组织PKC活性 ,检测 2 4h尿蛋白排出量 (Upro) ,肾脏常规染色光镜观察病理变化。结果 :12周时单肾糖尿病大鼠肾组织出现肾小球硬化病理改变 ,Upro明显升高 ,细胞膜PKC活性 (mPKC)明显升高 ,细胞浆PKC活性 (cPKC)明显降低 ,mPKC和cPKC比值 (M/C)明显升高。菟箭合剂和缬沙坦干预治疗显著降低Upro ,降低mPKC和M/C ,升高cPKC(P <0 .0 1) ,改善肾组织病理改变。结论 :菟箭合剂对单肾切除STZ糖尿病大鼠具有肾保护作用 ,推测部分地通过抑制肾组织PKC激活途径来达到的。

关键词：菟箭合剂糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C 酶活性缬沙坦

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