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北京中医药大学学报 2002年第4期25卷 21-24页

作者：潘明政郭赛珊梁晓春唐代屹张建伟孙仁宇中国协和医科大学北京协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室北京100730

观察仙贞片对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物受体mRNA高表达的影响。采用链脲佐菌素左下腹腔内单次注射造成糖尿病大鼠模型 ,随机分模型组、仙贞片组及氨基胍组各 10只 ,另设正常对照组 10只。应用原位杂交的方法。结果模型组大鼠主动脉... 详细信息

观察仙贞片对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物受体mRNA高表达的影响。采用链脲佐菌素左下腹腔内单次注射造成糖尿病大鼠模型 ,随机分模型组、仙贞片组及氨基胍组各 10只 ,另设正常对照组 10只。应用原位杂交的方法。结果模型组大鼠主动脉内皮细胞糖基化终产物受体mR NA表达的灰度值明显增高 ,出现过度表达。仙贞片治疗后主动脉糖基化终产物受体mRNA表达的灰度值降低 ,与氨基胍组相近似 (P >0 0 5 ) ,与模型组比较差异显著 (P <0 0 5 )。显示仙贞片与氨基胍一样 ,可显著下调糖基化终产物受体 -mRNA的过度表达 ,对糖尿病大鼠主动脉血管糖基化终产物受体高表达有明显调节作用。提示仙贞片对高血糖造成的主动脉血管损害具有保护作用。

关键词：仙贞片糖尿病大鼠主动脉 mRNA 糖基化终产物受体

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全反式维甲酸与单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对胶质瘤的协同杀伤作用

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癌症 2002年第5期21卷 473-479页

作者：张雪峰任祖渊方福德左瑾苏长保王任直马文斌中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京100730 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

背景与目的:细胞间缝隙连接通讯(gapjunctionalintercellularcommunication,GJIC)是介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplixvirusthymidinekinase,HSV-tk)基因治疗中旁观者效应的重要机制。全反式维甲酸(all-trans-retinoticacid,ATRA)可能通过上调胶质瘤细胞GJIC和抑制肿瘤细胞生长的双重作用,促进HSV-tk基因治疗的疗效。本研究的目的在于证实HSV-tk和ATRA联合应用对胶质瘤细胞的协同杀伤作用。方法:分别以1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L3种浓度的ATRA作用于培养的大鼠C6胶质瘤细胞,并研究ATRA对C6胶质瘤细胞分化、增殖、GJIC及connexin43(Cx43)基因转录等方面的影响。将C6细胞与稳定表达HSV-tk基因的C6tk细胞按不同比例混合,分别在含GCV和不同浓度ATRA或仅含GCV的培养基中培养,并于药物作用7天后用MTT法检测旁观者效应。结果:经3种浓度的ATRA作用后,C6胶质瘤细胞均显示出细胞分化的形态学特征。C6细胞的增殖也明显受到ATRA的抑制,绝大多数的活细胞都静止于G1期,100μmol/LATRA对C6细胞增殖的抑制尤其明显,并诱导细胞凋亡。经3种浓度的ATRA分别作用后,C6细胞的GJIC也明显提高,而Cx43基因的转录未受明显影响。旁观者效应实验的结果显示,3种浓度的ATRA均可以明显增强旁观者效应。

关键词：全反式维甲酸单纯疱疹病毒胸苷激酶丙氧鸟苷胶质瘤基因治疗

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小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 628-630页

作者：孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼... 详细信息

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果　阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论　小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。

关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞凋亡细胞分化 NB4细胞株急性白血病

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尖锐湿疣病变的人乳头瘤病毒6型L1序列多态性分析

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病毒学报 2002年第2期18卷 102-107页

作者：洪少林王家璧李平川周玲司静懿许雪梅郭秀婵曾毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒 (HPV) ,并通过限制性片断长度多态性分析分型发现 ,HPV6型为主要感染型别 ,其次是HPV11型。根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株 ,扩增L1晚期基因 ,构建重组测序质粒 ,... 详细信息

采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒 (HPV) ,并通过限制性片断长度多态性分析分型发现 ,HPV6型为主要感染型别 ,其次是HPV11型。根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株 ,扩增L1晚期基因 ,构建重组测序质粒 ,双脱氧法测序并分析L1区的核苷酸和氨基酸序列变异状况。结果表明 ,HPV6L1基因序列发生碱基替换的区域主要有四个区 ,包括SR1(5 911～ 6 10 4 ) ,SR2 (6 2 17～ 6 2 73) ,SR3(6 5 4 0～6 6 6 1)和SR4 (70 6 2～ 72 5 0 )。少数的碱基替换导致错义突变 ,推导的蛋白质一级结构中有 0～ 3个氨基酸发生变异。

关键词：尖锐湿疣病变人乳头瘤病毒6型 L1序列多态性聚合酶链式反应 L1开放读码框基因序列多态性

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基因治疗与影像学

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中华放射学杂志 2002年第12期36卷 1151-1153页

作者：陆菁菁金征宇卢圣栋中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院放射科 100730 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方... 详细信息

在临床医学研究领域，基因治疗代表了令人振奋的前沿，基因治疗的研究正在飞速地发展。到目前，外源基因的表达多是通过体外的实验来检测，比如聚合酶链反应、原位杂交和免疫组织化学染色等。但随着基因治疗从基础走向临床，这些体外方法显示了较大的缺陷，即在临床试验中，不能无创、动态地获知转基因表达的部位、幅度和时间。因此，如何用体外的成像方法来监测转入基因的表达，这是基因治疗大规模进入试验前必须解决的问题。新近在影像技术方面的发展和突破，有望解决如上问题。放射学家只有熟悉基因治疗的原因、策略和新进展，才能跟进并从事这方面的前沿研究工作。笔者拟对基因治疗的原理和方法作简单介绍，并对影像学技术在基因治疗中的应用和进展作一综述。

关键词：基因治疗影像学免疫组织化学

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^(125)I-神经生长因子的制备及其药代动力学研究

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核化学与放射化学 2002年第1期24卷 56-60页

作者：唐刚华唐小兰姜国辉张云王世真王树惠第一军医大学南方医院南方PET中心广东广州510515 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100730

用氯胺T法制备了12 5I 神经生长因子 (12 5I NGF) ,放化纯度大于 95 %。经静注和肌注两种途径并采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳法测定了小鼠血浆中NGF的浓度。研究结果表明 ,静注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合二... 详细信息

用氯胺T法制备了12 5I 神经生长因子 (12 5I NGF) ,放化纯度大于 95 %。经静注和肌注两种途径并采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳法测定了小鼠血浆中NGF的浓度。研究结果表明 ,静注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合二房室分布模型 ;肌注12 5I NGF后的小鼠体内代谢符合一房室分布模型。按剂量2 5 μg/kg静注12 5I NGF后 ,测得消除相半衰期 (t1/ 2 ( β) )为 3 6 5h。按剂量 75 ,2 5 ,10 ,3 3μg/kg肌注12 5I NGF ,测得消除相半衰期 (t1/g( β) )分别为 1 79,2 2 5 ,2 30 ,3 2 4h ,平均达峰时间 (tmax)为 0 5 8h ,平均血浆清除率 (CLs)为0 37L/ (h·kg) ,表观分布容积 (Vd)为 1 18L/kg ,体内平均滞留时间 ( tr)为 2 78h。

关键词：神经生长因子药代动力学 SDS-PAGE电泳法神经系统药物碘125 同位素标记物

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嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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中国实验血液学杂志 2002年第6期10卷 577-579页

作者：杨洋许彩民王健陈岚潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院血液科北京100730

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式... 详细信息

本研究建立嗜水气单胞菌 (HEC)毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)。方法为取正常人、贫血病人和PNH病人 (各 1 0例 )外周血标本 ,用HEC毒素处理外周血红细胞并于 630nm测定吸光度 ,以定量溶血程度。所测结果与流式细胞术检测CD59- 细胞进行验证。结果表明 ,PNH病人的红细胞对HEC毒素溶血试验有抗性 ,而正常人和非PNH病人的红细胞几乎全部溶解。结论 :HEC毒素溶血试验比色法对PNH是一种简便、快速。

关键词：嗜水气单胞菌毒素溶血试验比色法诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症

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石杉碱甲治疗阿尔茨海默病的有效性和安全性的多中心双盲随机对照试验

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中华医学杂志 2002年第14期82卷 941-944页

作者：张振馨王新德陈清棠舒良王纪佐单广良中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院临床流行病科和神经科 100730 北京医院神经科北京大学第一医院神经科北京大学精神卫生研究所天津医科大学第二医院神经科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所流行病室

目的　与安慰剂双盲对照评估石杉碱甲治疗轻、中度阿尔茨海默病 (AD)患者的临床疗效和安全性。方法　来自全国 15个中心 2 0 2例可能或很可能的AD患者随机接受石杉碱甲或安慰剂治疗 12周。石杉碱甲组 10 0例 ,4 0 0 μg d ,安慰剂组 10 ... 详细信息

目的　与安慰剂双盲对照评估石杉碱甲治疗轻、中度阿尔茨海默病 (AD)患者的临床疗效和安全性。方法　来自全国 15个中心 2 0 2例可能或很可能的AD患者随机接受石杉碱甲或安慰剂治疗 12周。石杉碱甲组 10 0例 ,4 0 0 μg d ,安慰剂组 10 2例 ,每 6周评估 1次。结果　 2 0 2例患者进入意向性治疗分析 ,其中 197例患者通过末次观察前推法 (LOCF)完成统计。比较石杉碱甲组和安慰剂组各种疗效评估量表的评分自基线水平至治疗 6周和 12周时评分变化的均值 ,以及治疗 12周时评分和基线相比有改善的患者的比例 :治疗 12周和基线相比 ,简易精神状态检查 (MMSE)平均改善 2 7分 ;AD评估量表的认知分量表 (ADAS Cog)得分平均改善 4 6分 ,改善至少 4分者 5 6 1% ;ADAS非认知副表 (ADAS non Cog)得分平均改善 1 5分 ,临床好转的患者为 5 9 2 % ;日常生活活动量表 (ADL)得分平均改善 2 4分 ,改善至少 10 %的患者 32 7% ;印象变化量表 (CIBICplus)获 1～ 3分的患者为 70 % ,1～ 2分者 2 7 8%。这些指标和安慰剂组比较 ,两组间的差异有显著意义。总的不良反应率石杉碱甲组为 3% ,均为轻度、一过性反应。结论　石杉碱甲可显著改善AD患者认知功能、行为和心境障碍、日常生活活动能力和总体功能 ,具有良好的安全性。

关键词：阿尔茨海默病石杉碱甲对照临床试验治疗

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北京协和医院1990～2000年副肿瘤综合征住院病例总结

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中风与神经疾病杂志 2002年第2期19卷 96-97页

作者：陈健华刘秀琴郭玉璞周严袁建刚北京协和医院神经内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　了解副肿瘤综合征 2 6例患者的临床基本特征。方法　回顾性分析 1990～ 2 0 0 0年北京协和医院副肿瘤综合征患者的临床资料并加以总结。结果　副肿瘤综合征平均发病年龄 4 8.6± 2 6岁 ,男性占 6 9.2 % ,女性占 30 .8%。 3.8... 详细信息

目的　了解副肿瘤综合征 2 6例患者的临床基本特征。方法　回顾性分析 1990～ 2 0 0 0年北京协和医院副肿瘤综合征患者的临床资料并加以总结。结果　副肿瘤综合征平均发病年龄 4 8.6± 2 6岁 ,男性占 6 9.2 % ,女性占 30 .8%。 3.8%患者在发现肿瘤后才出现神经症状 ;96 .2 %在出现副肿瘤症状后才发现肿瘤。诊断出副肿瘤综合征时 ,2 6 .9%肿瘤已出现转移。从出现神经症状至发现肿瘤平均时间为 18± 6个月 ,患者多为慢性隐袭或亚急性起病 ,症状进行性加重 ,对治疗无明显缓解。结论　副肿瘤综合征出现明显的临床症状可发生在肿瘤发现之前、之后或与之同时发生 ,它们的出现几乎均预示预后不良。

关键词：副肿瘤综合征小细胞肺癌早期诊断肺肿瘤

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糖尿病大鼠心肌及主动脉糖基化终产物受体mRNA表达及仙贞片对其影响的实验研究

糖尿病大鼠心肌及主动脉糖基化终产物受体mRNA表达及仙贞片对其影...

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第三届糖尿病（消渴病）国际学术会议

作者：潘明政郭赛珊梁晓春唐代屹张建伟孙仁宇中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室

糖尿病最重要的慢性并发症之一是心血管系统病变,而长期的高血糖环境致蛋白非酶糖基化终产物 (AGEs)的形成和累积、并通过受体的相互作用是形成的根本原因。控制高血糖,抑制AGEs的形成及其与受体的结合,将可能预防或减缓糖尿病慢性并发... 详细信息

糖尿病最重要的慢性并发症之一是心血管系统病变,而长期的高血糖环境致蛋白非酶糖基化终产物 (AGEs)的形成和累积、并通过受体的相互作用是形成的根本原因。控制高血糖,抑制AGEs的形成及其与受体的结合,将可能预防或减缓糖尿病慢性并发症包括糖尿病性心血管并发症的发生。本课题应用原位杂交的方法观察STZ糖尿病Wistar大鼠心肌和主动脉组织中RAGE-mRNA表达,与氨基胍对照观察中药仙贞片的影响。

关键词：仙贞片灰度值糖尿病大鼠大鼠心肌氨基肌糖基化终产物受体

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