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中华医学会第十一届全国营养支持学术会议

作者：郭卫东于健春康维明刘玉琴青岛大学医学院附属医院肝胆外科中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基本外科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞培养中心

研究背景和目的:在目前以手术为主要手段的胃癌综合治疗中,化疗仍然是必不可少的手段之一,但是化疗对机体的毒副作用,比如骨髓抑制、免疫抑制、胃肠道反应等也是显而易见的。许多病人因为耐受不了而放弃治疗,更有一些身体状况不佳的病... 详细信息

研究背景和目的:在目前以手术为主要手段的胃癌综合治疗中,化疗仍然是必不可少的手段之一,但是化疗对机体的毒副作用,比如骨髓抑制、免疫抑制、胃肠道反应等也是显而易见的。许多病人因为耐受不了而放弃治疗,更有一些身体状况不佳的病人因化疗而加速死亡的报道。因此,减少化疗药的毒副作用显得尤为必要。

关键词： ?-3多不饱和脂肪酸表阿霉素药物疗法联合体内研究

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幼年起病的2例晚发型糖原贮积症Ⅱ型/Pompe病临床和基因分析

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中华儿科杂志 2007年第10期45卷 760-764页

作者：仇佳晶魏珉张为民施惠平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中心实验室 100730 中国医学科学院基础医学研究所

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄... 详细信息

目的对中国大陆地区幼年起病的晚发型糖原贮积症Ⅱ型(GSDⅡ,Pompe 病)患者进行临床和基因突变分析。方法对2例幼年起病的 Pompe 病患儿进行临床分析,提取患儿皮肤成纤维细胞及其父母的外周血 DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增α-1,4-葡萄糖苷酶的19个外显子,测序,进行突变检测。同时对50例健康对照100个等位基因进行15号外显子的 PCR 扩增,测序,确定突变特征。结果 1例临床表现为进行性近端肌肉无力,肌张力低下;1例表现为肌容积减少,呼吸肌受累;2例均有肌酸磷酸肌酶升高,肌电图提示肌源性损害,肌活检呈空泡性改变,皮肤成纤维细胞α-1,4-葡萄糖苷酶活性测定明显低下。突变检测:测序发现4个杂合错义突变,例1为 c796 C>T,p.266Pro>Ser;c2105 G>A,p.702Arg>His;例2为 c2132 C>G,p.711Thr>Arg;c2167 G>A,p.723Val>Met。其中后3个为新突变,50例健康对照100个等位基因测序未发现同样突变。结论幼年起病的 Pompe 病患儿临床表现存在差异,呼吸肌受累情况影响其预后;检测到3个错义新突变,可能为致病突变。

关键词：糖原贮积病,Ⅱ型葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶外显子突变

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伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者SLC26A4(PDS)基因突变分析

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中华医学杂志 2007年第40期87卷 2820-2824页

作者：陈东野陈晓巍金昕左瑾魏朝刚曹克利方福德中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻喉科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所国家医学分子生物学实验室 100730

目的探讨伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者 SLC26A4(PDS)基因突变发生的概率、突变类型,以及 SLC26A4(PDS)基因突变与各种内耳畸形及术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间的关系。方法选取48例伴有内耳畸形的人工耳蜗植入者及50... 详细信息

目的探讨伴内耳畸形的人工耳蜗植入患者 SLC26A4(PDS)基因突变发生的概率、突变类型,以及 SLC26A4(PDS)基因突变与各种内耳畸形及术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间的关系。方法选取48例伴有内耳畸形的人工耳蜗植入者及50例健康对照。取外周血提取基因组 DNA,经聚合酶链反应扩增 SLC26A4(PDS)基因全部编码区,包括2～21号外显子,扩增产物纯化后直接测序分析突变。48例患者在人工耳蜗植入术中通过神经反应遥测(NRT)技术,直接近场记录听神经电诱发复合动作电位(ECAP)。结果前庭水管扩大组中70.3%(26/37)、其他内耳畸形组中18.2%(2/11)的患者发现有 SLC26A4(PDS)基因突变。本研究中共发现15种突变类型,其中有8种为新发现的类型。IVS7-2A>G 是最常见的 SLC26A4(PDS)基因突变类型,45.9%(17/37)的前庭水管扩大患者发现此种突变。在伴内耳畸形的人工耳蜗植入者患者中,未发现 SLC26A4(PDS)基因突变与术中听神经电诱发复合动作电位(ECAP)检出率之间有相关性。结论 SLC26A4(PDS)基因突变是前庭水管扩大畸形的主要病因,IVST-2A>G 是其最常见的突变类型。

关键词：耳畸形获得性前庭水管突变耳蜗植入

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猪眼小梁组织眼前节灌流培养和组织块培养

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 690-692页

作者：周崎刘玉琴赵家良张华中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院眼科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞中心北京100005

目的了解猪眼小梁组织的灌流眼前节培养和组织块培养在青光眼研究中的应用。方法采用恒速眼前节灌流培养和组织块培养法培养猪眼小梁组织，用光学显微镜观察不同培养方法保存的小梁组织的状态。结果恒速（0．1mL／h）灌流猪眼前节，眼... 详细信息

目的了解猪眼小梁组织的灌流眼前节培养和组织块培养在青光眼研究中的应用。方法采用恒速眼前节灌流培养和组织块培养法培养猪眼小梁组织，用光学显微镜观察不同培养方法保存的小梁组织的状态。结果恒速（0．1mL／h）灌流猪眼前节，眼压可以稳定在正常眼压范围（10～12mmHg）；在一定范围内，随着流速增加眼压能逐步升高。灌流培养的组织大体形态保留完好，组织层次清晰，细胞状态好。组织块原位培养的小梁组织，周边组织结构保留完好，细胞状态尚可，但是小梁网间隙不如灌流培养的小梁网间隙饱满。结论灌流眼前节培养法可作为短期高眼压模型，更接近小梁网的生理状态，小梁网的正常充盈是维持其功能和结构的必要条件。

关键词：眼小梁网组织灌流眼前节组织块培养

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第11期21卷 510-512页

作者：陈志宏倪道凤高扬林嘉友中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉-头颈外科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫系

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2、bax和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在流感病毒感染后小鼠嗅上皮的表达,探讨其对嗅感觉神经元凋亡的调节作用。方法:采用半定量RT-PCR法检测流感病毒感染后小鼠嗅上皮Bcl-2、bax和iNOS的mRNA表达水平。结果:流... 详细信息

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2、bax和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在流感病毒感染后小鼠嗅上皮的表达,探讨其对嗅感觉神经元凋亡的调节作用。方法:采用半定量RT-PCR法检测流感病毒感染后小鼠嗅上皮Bcl-2、bax和iNOS的mRNA表达水平。结果:流感病毒感染后:①嗅上皮表达Bcl-2mRNA相对恒定;②嗅上皮表达baxmRNA早期显著增加,恢复期逐渐回落;③嗅上皮表达iNOSmRNA在一段较短的时期内显著增加,1周后逐渐下降至不可测水平。结论:凋亡相关基因Bcl-2、bax和iNOS可能在流感病毒感染所致的嗅感觉神经元凋亡中起重要的调节作用。

关键词：流感病毒嗅感觉神经元基因 Bcl-2 基因 bax 一氧化氮合酶

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加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层组织内差异表达基因的影响

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 652-655页

作者：陈绍辉赵晶罗爱伦黄宇光左萍萍杨楠郝文宇中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐... 详细信息

目的观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响。方法120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(最终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组)。部分坐骨神经结扎2周后开始腹腔给药,给药4周后留取大脑皮层。通过手术侧足行为学和机械痛阈的改变来确认神经病理性疼痛模型成功及观察加巴喷丁的疗效。选择S+P、M+P和M+G三组做基因表达差异检测,并用实时PCR验证部分表达有显著差异的基因。结果M+P和S+P相比较,脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因显著下调。M+G和M+P相比较,上述基因显著上调。结论加巴喷丁镇痛的脑机制可能与脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因的上调有关。

关键词：神经病理性疼痛加巴喷丁脑源性神经生长因子神经肽Y pleiotrophin

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人成纤维细胞在裸鼠体内生长和胶原分泌的观察

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基础医学与临床 2007年第10期27卷 1140-1145页

作者：赵玉明丁俊生左瑾方福德王佳琦中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院整形美容外科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院北京100041 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到... 详细信息

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到人成纤维细胞在裸鼠体内呈分裂象,随着时间的推移细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌量呈增多趋势。结论人成纤维细胞注射移植裸鼠后,能够自行分裂、增殖并分泌人Ⅰ、Ⅲ型胶原,为自体成纤维细胞作为移植材料,发挥充填功能的持久性提供了理论依据。

关键词：成纤维细胞细胞移植胶原

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酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶活性的调节

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中国医学科学院学报 2007年第2期29卷 241-245页

作者：高金明冯起平左瑾方福德蒋磊郭子健中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶(TPST)1和TPST2的调节作用。方法以人cDNA为模板,采用聚合酶链反应方法扩增人TPST1和TPST2基因野生型的全长cDNA序列,并融合入人IgG1的Fc编码区域;采用定点突变方法将TPST1和TPST2蛋白中可硫... 详细信息

目的研究酪氨酸硫化修饰对酪氨酸硫化转移酶(TPST)1和TPST2的调节作用。方法以人cDNA为模板,采用聚合酶链反应方法扩增人TPST1和TPST2基因野生型的全长cDNA序列,并融合入人IgG1的Fc编码区域;采用定点突变方法将TPST1和TPST2蛋白中可硫化的酪氨酸突变为苯丙氨酸。针对TPST1(259～275位核苷酸)和TPST2(73～94位核苷酸)基因,分别构建小干扰RNA(shRNA)1和shRNA2重组质粒。测定所有构建质粒开放读框序列。证实序列正确后,将上述质粒分别转染人肾胚胎上皮细胞(HEK)293T。24h后将细胞分成3份:1份用于35S-蛋氨酸/半胱氨酸或35S-亚硫酸钠标记,48h后再进行免疫沉淀反应;1份用于125I标记配基结合;1份用于流式细胞仪检测受体的表达水平。结果TPST1326位和TPST2325位酪氨酸在翻译后被硫化修饰,这一翻译后修饰被特异性的硫化抑制剂shRNA1和shRNA2及非特异性的硫化抑制剂NaClO3显著抑制。shRNA1和shRNA2可显著抑制补体3a和5a受体的硫化,并进一步降低这两种受体与特异性配基的结合效率。结论TPST1和TPST2翻译后受酪氨酸硫化修饰的调节,硫化抑制剂shRNA可以显著抑制TPST的活性,并进一步抑制补体3a和5a受体结合其特异性配基的作用。

关键词：硫化酪氨酸酪氨酸硫化转移酶

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25例慢性肌酸磷酸肌酶升高患儿的临床分析

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中国实用儿科杂志 2007年第9期22卷 688-690页

作者：仇佳晶邱正庆魏珉赵时敏陈琳黄尚志中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院儿科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所北京100730

目的明确慢性血清肌酸磷酸肌酶(CK)升高的儿童患者的病因诊断。方法对2005-01—2007-03,北京协和医院遗传门诊入院的CK持续升高超过3个月患儿的临床资料进行回顾性分析。结果16例获得诊断,确诊率64%,诊断分别为:7例dystrophin相关肌营... 详细信息

目的明确慢性血清肌酸磷酸肌酶(CK)升高的儿童患者的病因诊断。方法对2005-01—2007-03,北京协和医院遗传门诊入院的CK持续升高超过3个月患儿的临床资料进行回顾性分析。结果16例获得诊断,确诊率64%,诊断分别为:7例dystrophin相关肌营养不良症,1例携带者;2例Pompe病,1例糖原累积症;1例线粒体肌肉病,1例戊二酸尿症,2例炎症性肌肉病,1例脊肌萎缩症。其余9例未能明确诊断。结论血清肌酶持续增高在儿童病人多提示神经肌肉疾病或累及肌肉的代谢性疾病,病因复杂,除常规生化检查外,肌电图、肌活检、酶生化测定、基因检测等多种检查的综合应用有助于提高诊断率。

关键词：肌酸磷酸激酶升高诊断神经肌肉疾病遗传代谢病儿童

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不同造模方法的病毒性面神经麻痹动物模型比较

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第4期21卷 169-171页

作者：刘稳高志强神平全世明冯国栋查洋张彦东中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所病理学系

目的：比较不同方法建立的单纯疱疹病毒1型（HSV-1）感染性面神经麻痹（面瘫）的动物模型，以选择发病率高、较稳定的造模方法。方法：Balb／c小鼠120只，分为4组，每组30只。A组：切断右侧面神经耳后支，于神经断端接种25plHSV-1病毒液... 详细信息

目的：比较不同方法建立的单纯疱疹病毒1型（HSV-1）感染性面神经麻痹（面瘫）的动物模型，以选择发病率高、较稳定的造模方法。方法：Balb／c小鼠120只，分为4组，每组30只。A组：切断右侧面神经耳后支，于神经断端接种25plHSV-1病毒液；B组：右侧耳廓背面皮肤划痕接种25ul HSV-1病毒液；C组：右侧耳廓背面皮下注射25ul HSV-1病毒液；D组：右侧耳后皮下注射100ul HSV-1病毒液。观察小鼠双侧面部运动的对称性和全身情况，比较各组间面瘫发生率和动物死亡率。对面瘫鼠行颞骨连续切片苏木精-伊红染色。结果：A组13只出现右侧面瘫（43．33％），持续3～7d恢复，死亡0只；B组6只出现右侧面瘫（20％），持续2～9d恢复，死亡0只；C组没有动物出现面瘫或死亡；D组1只出现右侧面瘫（3．33％），持续6d恢复，死亡12只（40％）。颞骨连续切片显示面瘫鼠右侧面神经肿胀、神经周围间隙变小，面神经横截面积／面神经管横截面积的比值变大。结论：经面神经耳后支接种HSV-1可以引起小鼠暂时性面瘫，和其他接种方法相比，面瘫发生率较高，死亡少，造模可靠。

关键词：疱疹病毒1型,人面神经麻痹疾病模型,动物

来源：评论

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