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中华检验医学杂志 2005年第1期28卷 46-49页

作者：刘中娟林嘉友倪安平宋耀虹沈瑛张时民中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730 中国医学科学院基础医学研究所免疫室

目的　探讨血清γ干扰素诱导的蛋白 10 (IP 10 )水平 ,与红斑狼疮 (SLE)疾病活动的关系及其在SLE肾损伤中的可能作用。方法　收集了 112例SLE患者及 4 0名正常健康人和 30例类风湿性关节炎 (RA)患者血清。应用ELISA测定血清IP 10水平。... 详细信息

目的　探讨血清γ干扰素诱导的蛋白 10 (IP 10 )水平 ,与红斑狼疮 (SLE)疾病活动的关系及其在SLE肾损伤中的可能作用。方法　收集了 112例SLE患者及 4 0名正常健康人和 30例类风湿性关节炎 (RA)患者血清。应用ELISA测定血清IP 10水平。结果　SLE活动组血清IP 10水平 (5 0 8 7± 2 5 2 4 ) μg/L较非活动组 (32 2 2± 95 9) μg/L和对照组 (12 4 9± 4 1 3) μg/L明显升高 (P<0 0 0 1)。活动性狼疮肾炎 (LN)组IP 10水平 (5 5 0 9± 2 0 6 1) μg/L与活动性无肾损伤组 (35 4 8±10 5 3) μg/L及对照组比较其差异均具有统计学意义 (P <0 0 0 1)。特别是Ⅲ型和Ⅳ型LN患者血清IP 10水平 (6 2 9 85± 16 4 ) μg/L升高最为显著 ,与Ⅱ型和Ⅴ型LN(30 2 9± 2 0 7 1) μg/L相比其差异具有统计学意义 (P <0 0 1)。另外 ,血清IP 10水平随着SLE疾病活动水平明显升高 ,与总的SLEDAI评分密切相关 (r=0 6 312 ,P <0 0 0 1) ,与SLEDAI肾评分亦密切相关 (r =0 6 880 ,P <0 0 0 1)。结论　以上结果表明IP 10可能在SLE肾损伤中起着十分重要的作用 ,血清IP 10水平与SLE疾病活动密切相关 ,可作为SLE疾病活动、尤其是监测狼疮肾损伤的重要指标。

关键词： IP-10 血清 SLE 肾损伤患者疾病 γ干扰素活动水平结论

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冠心病患者载脂蛋白A5和载脂蛋白C3基因多态性的研究

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中华心血管病杂志 2005年第2期33卷 116-121页

作者：毕楠鄢盛恺李国平尹志农薛红吴刚陈保生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所 100005 北京协和医院检验科北京垂杨柳医院检验科

目的研究中国北方汉族人群中载脂蛋白A5基因(APOA5)-1131T/C、56C/G多态性和载脂蛋白C3基因(APOC3)-482C/T多态性与冠心病的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测了312例经... 详细信息

目的研究中国北方汉族人群中载脂蛋白A5基因(APOA5)-1131T/C、56C/G多态性和载脂蛋白C3基因(APOC3)-482C/T多态性与冠心病的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测了312例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者和317例健康对照者APOA5 -1131T/C、56C/G和 APOC3 -482C/T多态性基因型和等位基因的分布,同时采用生化方法检测了研究对象的血脂水平.结果冠心病组APOA5 -1131C等位基因频率明显高于对照组(39.9%比33.3%,P=0.02).CC纯合子患冠心病的风险是TT纯合子的1.93倍(95%CI: 1.12～3.32),且通过Logistic 回归分析发现该相关性独立于性别、年龄、体重指数、吸烟史、高血压糖尿病患病史及血清TC、HDL-C、LDL-C水平;冠心病组CC纯合子的TG水平明显高于TC杂合子,而TT纯合子TG水平最低.虽然APOA5 -1131T/C和 APOC3 -482C/T多态性存在连锁不平衡,但前者的作用与后者无关.结论 APOA5 -1131T/C基因多态性对人群血清TG水平有影响,APOA5 -1131C等位基因可能与我国北方汉族人冠心病的发生相关联.

关键词：冠心病患者载脂蛋白A TG 基因多态性纯合子血清等位基因载脂蛋白C 北方汉族生化方法

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核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体诊断原发性胆汁性肝硬化的价值初探

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中华检验医学杂志 2005年第11期28卷 1120-1125页

作者：李永哲刘镭孙庆国曾常茜赵振国佟大伟张蜀澜高扬于孟学朱立平 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科北华大学医学院免疫学教研室北华大学医学院免疫学教研室吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院中国医学科学院中国协和医大学基础医学研究所免疫学系 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达... 详细信息

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21、M15中表达;融合蛋白经NiNAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)及免疫印迹法(WB)进行免疫活性鉴定;应用表达蛋白建立间接ELISA,检测60名健康体检者、68例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、60例病毒性肝炎、60例结缔组织病患者血清中抗gp210、p62和LBR抗体。结果经重组质粒测序和酶切结果证实,gp210、p62和LBR目的基因已正确插入原核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDSPAGE检测表达产物分别在69000、62000和27000处有一明显的蛋白表达条带,WB分析表明重组蛋白具有人gp210、p62和LBR抗原反应性。ELISA检测标本血清结果显示,PBC中,抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体阳性率分别为36.8%、30.9%和5.9%;而病毒性肝炎组、结缔组织病组和健康体检组中,除抗gp210抗体在结缔组织病患者中阳性率为1.7%外,3种自身抗体检测结果均为阴性。PBC组3种自身抗体阳性率与疾病对照组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论本研究成功克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,并将其在大肠杆菌中成功表达。应用纯化融合蛋白建立的ELISA检测抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体,对PBC具有较好特异性,为PBC的特异性临床诊断提供了有效的工具。

关键词：肝硬化,胆汁性自身抗原核包膜蛋白

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鼻咽癌患者外周血γδT细胞对鼻咽癌细胞的细胞毒活性测定

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005年第6期40卷 466-468页

作者：王小路何维张素梅何洪彬张连山姜鸿武警总医院耳鼻咽喉科北京100039 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室北京协和医院耳鼻咽喉科

T细胞受体(T cell receptor,TCR)γδ表型细胞与TCRαβ细胞不同,识别抗原的方式类似于免疫球蛋白,以主要组织相容性复合体非限制性方式识别抗原分子[1,2],无需抗原呈递分子配合,直接识别广谱肿瘤抗原.我们以抗体固相法体外扩增7例鼻咽... 详细信息

T细胞受体(T cell receptor,TCR)γδ表型细胞与TCRαβ细胞不同,识别抗原的方式类似于免疫球蛋白,以主要组织相容性复合体非限制性方式识别抗原分子[1,2],无需抗原呈递分子配合,直接识别广谱肿瘤抗原.我们以抗体固相法体外扩增7例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者及6例健康人外周血的γδT细胞,经原代NPC细胞同步培养,得到高纯度的NPC细胞.流式细胞仪检测γδT细胞纯度,研究两种来源的γδT细胞对Daudi、CNE1、CNE2和新建的传代培养NPC细胞的细胞毒作用,探讨NPC患者外周血中γδT细胞的抗肿瘤作用.

关键词： γδT细胞鼻咽癌细胞鼻咽癌患者活性测定主要组织相容性复合体 carcinoma receptor 流式细胞仪检测抗原呈递分子 T细胞受体免疫球蛋白抗体固相法 Daudi 细胞毒作用抗肿瘤作用 C细胞 cell γδ表型识别抗原抗原分子

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核包膜蛋白gp210 p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发性胆汁性肝硬化中的诊断价值初探

核包膜蛋白gp210 p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发性...

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第十届全国风湿病学学术会议

作者：李永哲佟大伟张蜀澜于孟学张奉春高扬朱立平刘镭孙庆国孙庆国赵振国中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北华大学医学院北华大学医学院吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院

为研究克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得纯化重组蛋白并进行免疫学活性鉴定,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)法,初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体检测在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cir... 详细信息

为研究克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得纯化重组蛋白并进行免疫学活性鉴定,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)法,初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体检测在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)诊断中的意义。构建重组表达载体PET30a-gp210、pQE30-p62和pQE30-LBR;在大

关键词：核包膜蛋白原发性胆汁性肝硬化 LBR gp210 p62 基因克隆表达

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中国汉族人群中α-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)基因多态性与阿尔茨海默病的关联性研究

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2005年第4期12卷 199-203,232页

作者：周涌涛张振馨张俊武何小明徐涛中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科临床流行病学教研室北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100730

目的研究中国汉族人群中α抗胰凝乳蛋白酶启动子区51(ACT51)G/T多态性与阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)发病的相关性。方法通过实时定量荧光PCR和GeneAmp5700SDS软件检测544例AD患者和557例非痴呆对照者ACT51G/T的基因多态性,应用lo... 详细信息

目的研究中国汉族人群中α抗胰凝乳蛋白酶启动子区51(ACT51)G/T多态性与阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)发病的相关性。方法通过实时定量荧光PCR和GeneAmp5700SDS软件检测544例AD患者和557例非痴呆对照者ACT51G/T的基因多态性,应用logistic回归模型分析与AD发病的相关性。结果ACT的G/G、G/T和T/T在AD组和对照组中分布差异存在显著性,携带T/T基因型比携带G/G基因型个体显示出较高的AD发病危险性(OR=1.50,P<0.05);非条件Logistic回归模型分析提示ACT的T/T和G/T基因型、高龄和女性均为AD发病的危险因素,调整年龄和性别影响后T/T和G/T基因型均为AD发病的危险因素,且对AD发病存在剂量效应关系,其OR值分别为3.55和1.55,P值分别为0.000和0.015。结论在中国汉族人群中ACT51T/T和C/T基因型、高龄和女性为AD发病的危险因素,共同影响AD的发病。

关键词：基因多态性 α-抗胰凝乳蛋白酶阿尔茨海默病实时定量荧光PCR

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蛋白芯片与自身免疫性疾病

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北京医学 2005年第2期27卷 111-114页

作者：于孟学薛静朱立平中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科 100730 浙江大学医学院附属二院风湿免疫科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫室

自身免疫性疾病是以体内存在多种针对自身抗原成分的自身抗体为特征的一类疾病.对抗原抗体及其反应系统的深入研究不仅有助于揭示本类疾病的病因和病理过程,而且对于临床诊断具有非常重要的作用.同时,随着生命科学研究进入21世纪,基因... 详细信息

自身免疫性疾病是以体内存在多种针对自身抗原成分的自身抗体为特征的一类疾病.对抗原抗体及其反应系统的深入研究不仅有助于揭示本类疾病的病因和病理过程,而且对于临床诊断具有非常重要的作用.同时,随着生命科学研究进入21世纪,基因序列数据及蛋白序列数据也正以前所未有的速度增长.怎样研究和利用这些信息推进对自身免疫性疾病的认识已成为目前倍受关注的问题.……

关键词：蛋白芯片自身免疫性疾病抗原抗体基因序列数据蛋白序列数据

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核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发性胆汁性肝硬化中的诊断价值

核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体在原发...

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中国检验医学中青年论坛

作者：李永哲朱立平刘镭孙庆国曾常茜赵振国佟大伟张蜀澜高扬于孟学 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科中国医学科学院中国协和医大学基础医学研究所免疫学系北华大学医学院免疫学教研室北华大学医学院免疫学教研室吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科

原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种自身免疫介导的慢性进行性胆汁淤积性肝病,其发病机制与免疫机能异常密切相关,目前诊断依赖于临床表现、病理组织学检查和特异性自身抗体的检测。本研究应用基因工程技术在大肠杆菌中克隆表达gp2ia,p62和... 详细信息

原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种自身免疫介导的慢性进行性胆汁淤积性肝病,其发病机制与免疫机能异常密切相关,目前诊断依赖于临床表现、病理组织学检查和特异性自身抗体的检测。本研究应用基因工程技术在大肠杆菌中克隆表达gp2ia,p62和LBR重组蛋白，旨在为抗gp210,ps2和LBR抗体的检测提供特异性抗原，为PBC的特异性临床诊断提供有力工具。

关键词：基因工程核包膜蛋白原发性胆汁性肝硬化 gp210 p62 LBR

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脑源性神经营养因子基因196A／G多态性和阿尔茨海默病关联性分析

脑源性神经营养因子基因196A／G多态性和阿尔茨海默病关联性分析

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：边建涛张俊武张振馨赵华路陈等中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经内科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种涉及中枢神经系统的渐进性退行性疾病,严重威胁老年人身心健康。目前AD的病因尚未完全阐明,一般认为是遗传因素和环境因素相互作用的结果, 遗传因素可能起主要的作用。已经确定了几个与早发性... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种涉及中枢神经系统的渐进性退行性疾病,严重威胁老年人身心健康。目前AD的病因尚未完全阐明,一般认为是遗传因素和环境因素相互作用的结果, 遗传因素可能起主要的作用。已经确定了几个与早发性家族性AD相关的基因,但对于更为常见的散发性AD,载脂蛋白E(apolipoprotein E)ε4等位基因是唯一被确定的遗传风险因子,但它对于AD的发生既不是必需的也不是充分的。其他若干候选基因已被提出,脑源性神经营养因子(BDNF)基因(定位在11p13-p14)就是其中的一个候选基因。

关键词：阿尔茨海默病神经营养因子多态性位点关联性分析

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脑复聪提高脑缺血小鼠记忆能力的机理研究

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中国中西医结合杂志 2004年第2期24卷 147-149页

作者：张孟仁郭赛珊徐惠媛左萍萍中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

目的:探讨自拟中药方脑复聪颗粒对脑缺血小鼠记忆能力及大脑胆碱能系统的影响。方法:采用双颈总动脉闭塞-缺血-再灌术造成学习记忆障碍小鼠模型。小鼠记忆能力以Morris圆形水迷宫的潜伏期作为指标。结果:小鼠脑缺血后7天,其潜伏期[(82.3... 详细信息

目的:探讨自拟中药方脑复聪颗粒对脑缺血小鼠记忆能力及大脑胆碱能系统的影响。方法:采用双颈总动脉闭塞-缺血-再灌术造成学习记忆障碍小鼠模型。小鼠记忆能力以Morris圆形水迷宫的潜伏期作为指标。结果:小鼠脑缺血后7天,其潜伏期[(82.3±32.0)s]和游程[(986.7±414.5)cm]比假手术组[(35.3±37.9)s,(410.4±507.0)cm]延长(P<0.01);脑复聪治疗后[(30.6±31.3)s,(378.1±386.3)cm]恢复正常(P<0.01)。大脑皮层和海马的胆碱乙酰化转移酶活性[(35.64±4.96)pmol/(mgpro·min),(45.08±4.96)pmol/(mgpro·min)]比假手术组[(40.52±4.74)pmol/(mgpro·min),(53.96±8.53)pmol/(mgpro·min)]降低、大脑皮层胆碱能M受体活性[(44.41±10.67)nmol/mgpro]比假手术组[(57.56±6.98)nmol/mgpro]降低、大脑皮层和海马的胆碱能N受体活性[(232.41±21.99)pmol/mgpro,(303.72±28.78)pmol/mgpro]比假手术组[(276.66±32.46)pmol/mgpro,(385.56±46.8,8)pmol/mgpro]降低(P<0.05,P<0.01),脑复聪组及当归芍药散组提高到正常水平(P<0.05,P<0.01),结论:脑复聪颗粒对脑缺血所致的智能障碍有保护作用,其机理可能与提高胆碱能系统功能有关。

关键词：脑复聪脑缺血记忆能力脑胆碱乙酰化转移酶 M受体 N受体中药

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